專利名稱：：一種肉蓯蓉乙醇提取物及其制備方法和應用的制作方法
技術領域：
：本發明涉及一種以肉蓯蓉提取物，尤其涉及一種肉蓯蓉乙醇提取物，同時還涉及該肉蓯蓉乙醇提取物的制備方法和應用。
背景技術：
：肝臟是全身代謝和營養的中心器官，碳水化合物、蛋白質(氨基酸)、脂肪的合成和分解主要通過肝臟完成。同時，有多種維生素通過肝臟進行合成、活化和儲存。此外，肝臟還具有生物轉化功能，大部分內源性和外源性代謝終末產物需要通過肝臟轉化后方能以安全的形式排出體外。而肝臟疾病是影響人類健康的最為常見的疾病之一。各種有害因素導致的肝損傷主要有病毒性肝炎、酒精性肝炎和藥物性肝炎等類型，其臨床表現為肝壞死、脂肪肝、膽汁淤積、肝纖維化、肝硬化以及肝癌等。目前，對肝損傷的治療仍是全球性的嚴峻課題。肉灰蓉又名灰蓉、大蕓、金筍和地精，為列當科植物肉蓯蓉(Cistanchedeset-icolaY.C.Ma)的帶鱗片的干燥肉質莖。始載于《神農本草經》，列為上品，《本草經疏》、《本草匯言》和《本草求真》等也多有記載。李時珍曰"此物補而不峻，故有從容之兮。"肉蓯蓉味甘、咸，性溫，具有補腎陽、益精血、潤腸通便的功能，用于陽痿、不孕、腰膝酸軟、筋骨無力和腸燥便秘。在我國已有1000多年的使用歷史，有"沙漠人參"的美稱。肉蓯蓉在全世界約有22種，我國有6種，包括荒漠肉蓯蓉、鹽生肉蓯蓉、白花鹽蓯蓉、沙蓯蓉和管花肉蓯蓉。研究表明，肉蓯蓉主要含苯乙醇苷類、環烯醚萜類、木脂素類、多糖、生物堿等多種成分。現代藥理學表明，肉蓯蓉除作為傳統的補腎壯陽中藥，還具有增強免疫力、抗衰老、增強記憶和抗氧化等多種藥理活性。但對于肉蓯蓉在治療肝病方面應用尚未有任何報道。
發明內容本發明的目的在于提供一種中藥肉蓯蓉的乙醇提取物。同時，本發明的目的還在于提供一種肉蓯蓉乙醇提取物的制備方法。本發明的目的還在于提供一種肉蓯蓉乙醇提取物在制備治療肝臟疾病方面的應用；以及在制備防治肝損傷的藥物中應用。為了實現上述目的，本發明的技術方案采用了一種肉蓯蓉乙醇提取物，該提取物由以下方法制備而得，將肉蓯蓉干品，粉碎，用食用酒精按體積比為食用酒精肉蓯蓉=(2—4):1冷浸2—4次，經過濾，合并濾液并減壓回收溶劑即得肉蓯蓉乙醇提取物。所述的冷浸為3次，其中第一次6—8，后兩次2—4天。本發明的技術方案還采用了一種肉蓯蓉乙醇提取物的制備方法，包括以下步驟肉蓯蓉干品，粉碎，用食用酒精按體積比為食用酒精肉蓯蓉=(2—4):1冷浸2—4次，經過濾，合并濾液并減壓回收溶劑即得肉蓯蓉乙醇提取物。所述的冷浸為3次，其中第一次6—8，后兩次2—4天。本發明的技術方案采用了一種肉蓯蓉乙醇提取物在制備治療肝臟疾病方面的應用。同時還采用了一種肉灰蓉乙醇提取物在制備防治肝損傷的藥物中應用。以肉蓯蓉的乙醇提取物灌胃，以四氯化碳誘導肝損傷，檢測小鼠血清中的ALT和AST值，以及肝組織勻漿中的SOD和MDA值，實驗表明肉蓯蓉乙醇提取物能有效降低四氯化碳肝損傷小鼠的ALT值，AST值和MDA值，且能顯著的升高小鼠肝細胞的SOD活力值。證明肉蓯蓉乙醇提取物具有很好的保護肝臟和防治肝損傷的作用。通過采用本發明的方法處理所得的肉蓯蓉乙醇提取物，可以制成各種制劑，包括栓劑、片劑、丸劑、顆粒劑、膜劑、微囊劑、滴丸劑、氣霧劑、酒劑、糖漿劑、口服液和注射劑。本發明所提供的肉蓯蓉提取物對于治療肝臟疾病、改善和恢復肝功能方面療效顯著，并可作為用于保護肝臟的保健品使用。具體實施例方式實施例1本實施例為肉蓯蓉提取物——乙醇部位的提取方法，具體包括以下步驟:取肉蓯蓉干品，粉碎，用食用酒精按體積比為3:l冷浸3次，第一次7天，后兩次均為3天，過濾，合并濾液并減壓回收溶劑即得肉蓯蓉乙醇提取物。實施例2本實施例為肉蓯蓉乙醇提取物的肝臟保護作用實驗。方法體內法-四氯化碳急性肝損傷模型原理CCU是使用最早、最廣泛的肝纖維化誘導劑，在急性肝損傷實驗中也是常用藥品，關于ccu的肝毒作用機制，研究較多，存在多種意見，但都一致公認，自由基的形成及引發的鏈式過氧化反應是其主要機制。對于CC14小鼠肝損傷模型的穩定性研究中，主要是通過不同劑量的ccu花生油，在注射后所致肝損傷，一定時間內檢測小鼠血清中谷丙轉氨酶(ALT/GPT)、谷草轉氨酶(AST/GOT)和肝組織中的超氧化物歧化酶SOD)、丙二醛(MDA)的含量來判定小鼠的肝損情況。ALT與AST主要分布在肝臟的肝細胞內，如果肝細胞壞死ALT和AST就會升高。但這兩種酶在肝細胞內的分布是不同的。ALT分布在肝細胞漿，AST分布在肝細胞漿和線粒體中。急性肝炎和輕癥的慢性肝炎，主要表現為ALT的升高。因此，AST/ALT<1;慢性肝炎的后期，肝硬化和肝癌患者，肝細胞的破壞程度是嚴重的，線粒體也受到了嚴重的破壞，因此，AST升高明顯，AST/ALT>1甚至>2。ALT與AST主要分布在肝臟的肝細胞內，正常值均為040國際單位。如果肝細胞壞死，ALT和AST就會升高，是目前最常用的肝功能指標。儀器UV-2000型紫外可見分光光度計(尤尼可上海儀器有限公司)，CS-H1型混合器(北京博勵陽科技公司)，LRH-150生化培養箱(上海一恒科技有限公司)，MultiskanMK3酶標儀(熱電上海儀器有限公司)，TGL-16高速離心機(江蘇金壇市中大儀器廠)，985370-395型組織勻漿機(BIOSREC，Mexico),各種規格移液器等。試劑聯苯雙酯滴丸(浙江萬邦藥業有限公司，批號080210)，ALT、AST、SOD、MDA檢測試劑盒(均為南京建成生物工程研究所)，當飛利肝寧膠囊(四川美大康藥業股份有限公司，生產批號080302)，考馬斯亮藍G250(上海化學試劑公司分裝廠，批號20050115)，其他試劑均為分析純。方法小鼠(20土2g)隨機分為7組，每組10只，空白對照組、模型組每天灌胃(ig)給予0.5。/。的CMC-Na溶液20mL/kg;聯苯雙酯滴丸陽性對照組每天灌胃100mg/kg，當飛利肝寧膠囊陽性對照組每天灌胃1400mg/kg，肉蓯蓉乙醇提取物高、中、低劑量組分別灌胃1000mg/kg、500mg/kg、250mg/kg給藥8d，以末次給藥2h后，除空白組外均按照O.lmL/10g腹腔注射0.5y。四氯化碳油溶液，禁食不禁水16h后，摘眼球取血并分離出血清，檢測ALT和AST，分離出肝臟稱重，并稱量約300mg和約30mg的肝臟用0-3"C生理鹽水勻漿成10n/。(測MDA)和P/。(測SOD)的肝臟勻漿液，測定MDA和SOD，考馬斯亮藍除蛋白。ALT、AST、SOD和MDA的測定均按照試劑盒的要求進行，實驗數據x±s表示，實驗統計采用spss10.O統計軟件進行單因素方差分析。結果(1)肉歡蓉乙醇提取物對四氯化碳急性肝損傷小鼠ALT和AST的影響結果見表l，表中顯示，肉蓯蓉乙醇提取物劑量組的ALT和AST活力值均明顯低于模型組，數據差異具有顯著性意義。且隨劑量的降低其降低的程度減小，說明存在劑量依賴性。(2)肉灰蓉乙醇提取物對四氯化碳急性肝損傷小鼠抗氧化能力的影響由表l數據可知，模型組的SOD水平明顯低于空白對照組，且肉蓯蓉劑量組的SOD水平明顯高于模型組；甚至高于空白對照組，MDA水平明顯低于模型組。表明肉蓯蓉乙醇提取物可能通過氧化途徑(升高SOD、降低MDA)來保護肝臟組織。表l肉灰蓉乙醇提取物對四氯化碳急性肝損傷的保護作用(x士s)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>各組(除樣品空白組夕卜)和模型對照比較*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001;模型組和空白對照組比較#PO.05,##P<0.01，絲弁PO.OOl實驗結果表明，四氯化碳模型組與空白組對照組比較，血清中ALT、AST值和肝細胞中MDA值均明顯升高，SOD值降低，說明造模成功，肉蓯蓉乙醇提取物各劑量組均具有降低四氯化碳急性肝損傷小鼠的ALT、AST和MDA的值，同時提升小鼠的SOD活力水平。可見肉蓯蓉乙醇提取物具有很好的保肝作用。實施例3肉灰蓉乙醇提取物片劑的制備制備方法取上述肉蓯蓉提取物100g，加入淀粉250g、阿拉伯膠15g后加入80%的乙醇作潤濕劑混勻制成軟材，于6(TC的溫度下干燥至含水量3%以下，然后將烘干的物料粉碎過14目篩，最后加入硬脂酸鎂5g及滑石粉20g混勻后，過12目篩整粒，壓片，質檢、包衣，制成1000片。最后所應說明的是以上實施例僅用以說明，而非限制本發明的技術方案，盡管參照上述實施例對本發明進行了詳細說明，本領域的普通技術人員應當理解依然可以對本發明進行修改或者等同替換，而不脫離本發明的精神和范圍的任何修改或局部替換，其均應涵蓋在本發明的權利要求范圍當中。權利要求1、一種肉蓯蓉乙醇提取物，其特征在于該提取物由以下方法制備而得，將肉蓯蓉干品，粉碎，用食用酒精按體積比為食用酒精肉蓯蓉＝(2—4):1冷浸2—4次，經過濾，合并濾液并減壓回收溶劑即得肉蓯蓉乙醇提取物。2、根據權利要求l所述的肉蓯蓉乙醇提取物，其特征在于所述的冷浸為3次，其中第一次為6—8天，后兩次為2—4天。3、一種如權利要求1所述的肉蓯蓉乙醇提取物的制備方法，其特征在于包括以下步驟肉蓯蓉干品，粉碎，用食用酒精按體積比為食用酒精肉蓯蓉=(2—4):1冷浸2—4次，經過濾，合并濾液并減壓回收溶劑即得肉蓯蓉乙醇提取物。4、根據權利要求3所述的肉蓯蓉乙醇提取物，其特征在于所述的冷浸為3次，其中第一次6—8天，后兩次2—4天。5、一種肉蓯蓉乙醇提取物在制備治療肝臟疾病方面的應用。6、一種肉蓯蓉乙醇提取物在制備防治肝損傷的藥物中的應用。全文摘要本發明公開了一種肉蓯蓉乙醇提取物及其制備方法和應用，該提取物由以下方法制備而得，將肉蓯蓉干品，粉碎，用食用酒精按體積比為食用酒精∶肉蓯蓉＝(2-4)∶1冷浸2-4次，經過濾，合并濾液并減壓回收溶劑即得肉蓯蓉乙醇提取物。以肉蓯蓉的乙醇提取物灌胃，以四氯化碳誘導肝損傷，檢測小鼠血清中的ALT和AST值，以及肝組織勻漿中的SOD和MDA值，實驗表明肉蓯蓉乙醇提取物能有效降低四氯化碳肝損傷小鼠的ALT值，AST值和MDA值，且能顯著的升高小鼠肝細胞的SOD活力值。證明肉蓯蓉乙醇提取物具有很好的保護肝臟和防治肝損傷的作用。文檔編號A61P1/16GK101433595SQ20081023129公開日2009年5月20日申請日期2008年12月10日優先權日2008年12月10日發明者劉瑜新,宋艷麗,康文藝申請人:河南大學