美白祛斑組合物的制作方法

專利名稱：：美白祛斑組合物的制作方法
技術領域：
：本發明涉及化妝品及保健食品
技術領域：
，特別涉及一種美白祛斑組合物。
背景技術：
：人類皮膚的顏色取決于黑色素的含量與分布，當黑色素過速增長和分布不均時，就會造成局部皮膚過黑及色素沉著，從而產生雀斑、褐斑等黑色素過度沉積等疾病。黑素的形成過程，存在于黑素細胞組織中的酪氨酸在酪氨酸酶等酶的作用下經多巴、多巴醌、多巴色素、二羥基巧l哚等中間體逐步轉化為黑色素。黑色素顆粒通過黑色素細胞樹枝狀突起向角朊細胞轉移；轉移至角朊細胞的黑色素顆粒隨表皮細胞上行至角質層，并隨角質層脫落而排泄。但是由于受紫外線、遺傳、內分泌、炎癥介質、飲食不當等因素的影響，黑素代謝異常，皮膚黑素過快增長和分布不均，就會造成局部皮膚過黑及色素沉著，表現為黃褐斑、雀斑和炎癥后色素沉著等。美白護膚作用機理概括起來包括三方面一、抑制酪氨酸酶活性及黑素細胞的增殖及合成皮膚黑素抑制機理是美白機理的核心內容，可通過抑制酪氨酸酶活性或者阻斷酪氨酸生成黑素的氧化途徑，從而減少黑素的生成達到美白祛斑的效果。二、抗氧化作用機制黑素的生成過程是一個較為復雜的過程，該過程除與酪氨酸酶有關外，還與自由基等因素密切相關。研究表明，酪氨酸酶的催化作用和多巴醌及其以后的自動氧化反應均需自由基的參與，自由基數目減少可減少黑素的生成。有關研究實驗顯示黃褐斑患者治療后血清中SOD含量明顯降低、丙二酮(MDA)含量升高。從而提出OFR與皮膚黑素的形成及色素沉著有關。抗氧化劑SOD能有效清除多余超氧自由基，使LPO、MDA形成減少，從而阻止黃褐斑的產生。三、氣血調補改善異常的血液流變學黃褐斑是一種常見的色素沉著性皮膚病，《醫宗金鑒》認為本病"源于憂思抑郁，血弱不華，火燥結滯而生于3面上，婦女多有之"。《外科正宗.黧黑斑》曰"黧黑斑者，水虧不能制火，血弱不能華肉，以致火燥結成斑黑，色枯不澤"。本病的產生與肝、脾、腎三臟關系甚密，而"氣血瘀滯，經絡不通氣血不能上榮于面"是黃褐斑的主要病機。選用藥物時，眾醫家多以活血化瘀為先導。活血化癡法可疏通痂阻，使氣機得以流暢，促進面部血液循環，改善面部皮膚代謝，使面部色素逐漸消散。臨床上采用活血化瘀法治療黃褐斑取得了較好的療效。近年來，酪氨酸酶抑制劑、抗氧化劑的研究非常活躍，隨著氫醌、熊果苷及曲酸的相繼發現、研究及在化妝品行業的廣泛應用，大量化學合成及植物來源的天然美白劑得到開發應用。比如水楊酸類、壬二酸類、熊果苷、果酸、維c、曲酸或者由它們合成的衍生物等。隨著化妝品行業的飛速發展，"組份天然化，，及"回歸大自然"的呼聲已成為化妝品工業的潮流，化妝品的原料天然化倍受重^L。"純天然"美白成分正日益成為化妝品中的一個主要組成部分。因此，尋找有效且對人體無不良反應的天然酪氨酸酶抑制劑、強抗氧化劑已成為藥學和化妝品行業研究的趨勢；提供一種組方更加合理、效果更加顯著的減少色素沉著美白護膚的組合物，是該
技術領域：
科研人員急需開發的新課題之一。
發明內容本發明所要解決的技術問題是提供一種美白祛斑組合物，以便更加合理、效果更加顯著地美白護膚。為此，本發明所采用的實施方式如下一種美白祛斑組合物，其特征在于該組合物包含酪氨酸酶抑制和抗氧化雙效劑。本發明所述酪氨酸酶抑制和抗氧化雙效劑是指同時具有酪氨酸酶抑制活性和抗氧化活性的物質，優選酪氨酸酶抑制活性ICso《0.541mg/ml，羥基自由基的清除活性IC50《0.78mg/ml，超氧陰離子自由基的清除活性IC50《19.5mg/ml。在一些實施方式中，所述酪氨酸酶抑制和抗氧化雙效劑可為綠茶提取物、巴西大櫻桃提取物、葡萄籽提取物中之一或它們的任意組合。在一些實施方式中，所述美白祛斑組合物還包括輔料，其中以組合物總重量為基準，酪氨酸酶抑制和抗氧化雙效劑含量為0.1~99%，輔料含量為余量。另一方面，本發明還提供一種美白祛斑的保健食品或化妝品，其特征在于包含上述美白祛斑組合物。本發明的化妝品可以用作基礎皮膚護理的原材料，如軟性洗劑、營養洗劑、營養乳膏劑、香精、面膜或浴粉，或者可以用作皮膚的外用制劑。本發明所述美白祛斑組合物可以制成多種化妝品制劑，例如溶液、無水制劑、氣溶膠、乳液、油包水型微乳液或水包油型的多重乳液、凝膠、固體條狀物、軟膏等。此外，還可以含有其他化妝品制劑的輔料，如防腐劑、殺菌劑、香料、防泡劑、染料、色素、增稠劑、表面活性劑、乳化劑、軟化劑、增水劑、濕潤劑、脂肪、油、蠟或其他化妝品中的常規成分，如醇、多元醇、聚合物、泡沫穩定劑、電解質、有機溶劑或硅氧烷^f汙生物等。制備化妝品時，在考慮乳化作用和經濟效率之后就要確定油成分的含量。作為油成分，可以使用從由植物油、礦物油、硅油和合成油組成的組中選擇的一種或多種油。此外，為了提高乳化作用，可以加入0.1~5重量％的表面活性劑和高級醇。可利用普通的表面活性劑如非離子表面活性劑，而至于高級醇，可以單獨使用具有12~20個碳數的醇，或者將該醇與其它種類的醇混合使用。為制備化妝品；可以以0.001~5重量％將諸如卡波姆(carbomer)、膨潤土、黃原膠等之類的增稠劑中的至少一種添加到水性組分中以調節粘度或凝固。為制備化本發明的妝品，也可以增添諸如高級脂肪酸、維生素等之類的藥物性質以及諸如UV保護劑、抗氧化劑、防腐劑、香料、著色劑、pH值調節劑等之類的用于化妝品的其它常用添加劑。在本發明的優選實施方案中，通過使用本發明所述美白祛斑組合物，可以制備軟性洗劑、粘稠溶液、乳狀洗劑和乳膏劑。為了制備含有本發明所述美白祛斑組合物的化妝品，向普通組合物中，另外加入1~10重量％的美白祛斑組合物，更優選加入2~5重量％。5在使用本發明所述美白祛斑組合物制備化妝品時，還可以與選自下組的一種或多種抗氧化劑聯用維生素A、維生素E、半胱氨酸、抗壞血酸、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)、金屬硫蛋白、木瓜巰基酶、輔酶QIO。本發明中所說的"保健食品，，是指具有特定保健功能的食品，即適用于特定人群食用、具有調節機體功能、不直接以治療為目的的食品。該保健食品通常含有1-50%(重量)的本發明所述美白祛斑組合物。本發明所述的功能性食品，指含有本發明所述美白祛斑組合物的食品、飲料或乳制品等類似食品，有效部位可以以加入、混合、包衣、結合或其它途徑加到食品中去，或以溶解、懸浮或混懸于飲料、乳制品中。含有本發明所述提取物的食品、飲料或乳制品，能依據標準方法容易地制備得到。本發明的有益效果是本發明從多種天然植物提取物中篩選出具有活性較高的酪氨酸酶抑步J和抗氧化雙效劑，酪氨酸酶活性的抑制作用對減少和抑制皮膚中黑色素的生成起著關鍵的作用，抗氧化劑保護細胞內容物免受自由基的破壞，可以使皮膚保水性更好，有效改善皮膚毛孔狀況等；因此，能更加合理、效果更加顯著地美白護膚。圖l是綠茶提取物酪氨酸酶抑制活性實驗曲線示意圖；圖2是葡萄籽提取物酪氨酸酶抑制活性實驗曲線示意圖；圖3是巴西大櫻桃粉Vc25。/。酪氨酸酶抑制活性實-瞼曲線示意圖；圖4是脫水巴西大櫻桃粉酪氨酸酶抑制活性實驗曲線示意圖；圖5是甘草提取物酪氨酸酶抑制活性實驗曲線示意圖；圖6是八白散合劑酪氨酸酶抑制活性實驗曲線示意圖；圖7是美白酵母多肽酪氨酸酶抑制活性實-瞼曲線示意圖；圖8是綠茶提取物抗羥自由基能力實驗曲線示意圖；圖9是巴西大櫻桃粉Vc25。/。抗羥自由基能力實驗曲線示意圖；圖IO是葡萄籽提取物抗羥自由基能力實驗曲線示意圖；圖ll是脫水巴西大櫻桃粉抗雍自由基能力實驗曲線示意圖；圖12是丹參提取物抗羥自由基能力實驗曲線示意6圖13是美白酵母多肽抗羥自由基能力實驗曲線示意圖；圖14是巴西大櫻桃粉Vc25。/。抗超氧陰離子能力實驗曲線示意圖；圖15是脫水巴西大櫻桃粉抗超氧陰離子能力實^^曲線示意圖。具體實施例方式下面結合具體實施例，來進一步闡述本發明。這些實施例僅用于說明本發明而不用于限制本發明的范圍。實施例1酪氨酸抑制和抗氧化雙效劑的篩選本發明進行研究分析成分功效及組方原理的實驗依據實驗具體方法可分為原料的選擇和相關特性指標的測定兩大部分。其中，原料的選擇著重從多肽類、多糖類、強抗氧化劑類、有機多酚類、植物提取物幾個方面選取了肌肽、GHK、紅藻多糖、龍眼多糖、八白散合劑、珍珠粉、葡萄籽、巴西大櫻桃、苦參、蘆薈、桑樹、茶多酚、鳳梨酵素、八白散合劑、美白酵母多肽等43余種作為美白原料測試樣品。對于美白原料相關特性指標的測定包括酪氨酸酶抑制活性的測定、抗氧化能力的測定(包括對羥自由基和超氧陰離子自由基的清除率的測定兩項)兩部分。(一)酪氨酸酶抑制活性的測定實驗原理酪氨酸酶(EC.1.14.18.l)又稱多酚氧化酶，它廣泛存在于動植物體和人體內，是生物體合成黑色素的關鍵酶。酪氨酸酶是一種含銅的金屬酶，每一個亞基含兩個金屬銅離子，兩個銅離子分別與蛋白質分子中組氨酸結合，另有一個內源橋基將兩個銅離子聯系在一起，構成酪氨酸酶催化氧化反應活性中心，能夠催化單酚羥化成二酚(單酚酶活性)，并把二酚氧化成醌(二酚酶活性)，醌在非i^tl條件下形成最終的反應產物黑色素。可見酪氨酸酶是皮膚黑素生物合成的主要限速酶，其表達和活性決定著黑素生成的速度和產量。酪氨酸酶是一種銅結合金屬酶，兼有加氧酶和氧化酶雙重功能。因此，對酪氨酸酶活性的抑制作用對減少和抑制皮膚中黑色素的生成起著關鍵的作用。實驗結果1、酪氨酸酶抑制劑研究(1)原料初篩通過對肌肽、GHK、紅藻多糖、龍眼多糖、八白散合劑、珍珠粉、葡萄籽、巴西大櫻桃、苦參、蘆薈、桑樹、茶多酚、鳳梨酵素等(全部樣品共50多種)進行初步測定。其中43余種樣品結果如下表1。表143種美白樣品對酪氨酸酶抑制活性的測定<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>名稱(規格)測定濃度抑制率％沙棘提取物lmg/ml0根皮提取物Jmg/ml13.4珍珠繡線菊提取物lmg/ml0瓜拉那提取物.lmg/ml30.0傅明酸lmg/ml0葡萄籽提取物lmg/ml51.9蝦青素lmg/ml0GHKlmg/ml0肌肽lmg/ml0巴西大櫻桃粉Vc250/0lmg/ml32.0脫水巴西大櫻桃粉lmg/ml61.0Vc(98%)lmg/ml2.9超細珍珠粉lmg/ml14.6名稱(液體樣品)測定濃度抑制率％珍珠水解液(水提)lmg/ml35,9靈芝提取液(水提)lmg/ml23.1甘草提取液(水提)lmg/ml63.1丹M取液(水提)lmg/ml10.0中性酵素美白液(50%)原液46.6鳳梨酵素甘醇萃取液(50%)原液66.9法國鮭魚卵提取物(3%)原液48.0檸檬皮提取液(92-96%)原液73.7海洋植物美白劑(1-4.99%)原液86.2美白酵母多肽(99%)原液100.0八白散合劑原液81.2由表1可知，所列出的43種美白原料樣品中，在濃度為lmg/ml時測定樣J對酪氨酸酶的抑制率Y，其中葡萄籽提取物為51.9%、脫水巴西大櫻桃粉61%甘草提取液為63.1%、綠茶提取物為85%，表現出顯著的抑制酪氨酸酶活性(Y>50%);蟬衣提取物為20.2%、蒼耳子提取物為20.6%、蘆薈提取物為22.8%、靈芝提取物為23.1%、苦參提取物為26.5%、瓜拉納提取物為30%、巴西大櫻桃粉為32%、珍珠水解液為35.9%、桑樹提取物為38.8%,表現出較強的酪氨酸酶抑制活性(20%<Y<50%);其余樣品對酪氨酸酶的有不同程度的抑制活性。(其中，白藜蘆醇、番茄紅素、香豆素、五倍子提取物只溶于有機溶劑，實驗采用20%乙醇'溶解，并測得20%的乙醇溶液對酪氨酸酶的抑制率達到35.7%,由于樣品乙醇溶液對于酪氨酸酶的作用機制尚不明確，故這4種樣品不予考慮)。(2)原料復篩由初步篩選實驗，可以從以上樣品中選取對酪氨酸酶抑制活性較顯著的，同時顏色相對較淺、溶解性較好的樣品。如綠茶提取物、葡萄籽提取物、巴西大櫻桃粉Vc25。/。、脫水巴西大櫻桃粉、聲薈提取物、苦參提取物、蒼耳子提取物、桑樹提取物、蟬衣提取物、瓜那拉提取物、靈芝提取液、甘草提取液、珍珠水解液13種；此外，添加了丹參提取液、Vc、超細珍珠粉、八白散合劑、鳳梨酵素甘醇萃取液、美白酵母多肽、海洋植物美白劑，這7種美白標準原料和較為新穎的美白樣品進行進一步的酶活性實驗。結果如下表2。表221種美白樣品對酪氨酸酶抑制活性的測定名稱IC50(mg/ml)名稱IC50(mg/ml)蘆薈提取物5.405超細珍珠粉83.8苦參提取物2.281蒼耳子提取物13.91桑樹提取物2.959葡萄籽提取物0豫2蟬衣提取物9.24靈芝提取液6.791巴西大櫻桃Vc25%0.544珍珠水解液5.163脫水巴西大櫻桃0.36122.68瓜拉納提取物17.31甘草提取液0.0996Vc(98%)316.5綠茶提取物0.101<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>注IC。/。指的是對原液的稀釋濃度從上表可知，與前述報道的熊果苷的酪氨酸酶抑制率的IC5o值1.44mg/ml相比，綠茶提取物的IC5o值為0.101mg/ml、巴西大櫻桃粉的ICso值為0.544mg/ml、脫水巴西大櫻桃的IC5。值為0.361mg/ml、葡萄籽提取物的ICso值為0.0022mg/ml、甘草提取液的IC5o值為0.0996mg/ml;美白酵母多肽的ICso值為0.022%。以上6種樣品表現出極為顯著的酪氨酸酶抑制活性，酶活性抑制的濃度曲線參見圖l-圖5及圖8。(二)抗氧化能力的測定生物體內的自由基有許多種，其中最為典型二種為羥自由基(OH，)和超氧陰離子自由基((V)，因此我們測定的抗氧化活性分為對羥自由基(OH-)和超氧陰離子自由基(02.)的清除活性。(1)抗羥自由基能力的測定實驗原理Fenton^應是最常見的產生羥自由基的化學反應，^1202的量和Fenton^應產生的OH.量成正比，當給與電子受體后，用griess試劑顯色，形成紅色物質，其呈色與OH.的多少成正比關系。(2)抗超氧陰離子自由基能力的測定實驗原理模擬機體中黃噤呤與黃噤呤氧化酶反應系統，產生超氧陰離子自由基02.，加入電子傳遞物質及griess氏顯色劑，使反應體系呈現紫紅色，可用分光光度計測其吸光度，當被測樣品中含有02抑制劑時，則比色時測定管的吸光度低于對照管的吸光度，而如果被測樣品中含有產生02.物質時，則比色時測定管的吸光度高于對照管的吸光度。選取酪氨酸酶抑制實驗中抑制活性較為顯著的樣品，包括綠茶提取物、葡萄籽提取物、巴西大櫻桃粉Vc25。/。、脫水巴西大櫻桃粉、蘆薈提取物、苦參提取物、蒼耳子提取物、桑樹提取物、蟬衣提取物、瓜那拉提取物、靈芝提取液、甘草提取液、珍珠水解液13種；此外，添加了丹參提取液、Vc、超細珍珠粉、八白散合劑、鳳梨酵素甘醇萃取液、美白酵母多肽、海洋植物美白劑7種美白樣品進^f亍抗氧化能力的測定。結果如下表3。表321種美白樣品的抗氧化能力測定名稱抗羥自由碁能力抗超氧陰離子自由基能IC50(mg/ml)力IC50(mg/ml)VC(980/0)1.4567.2苦參提取物5.26507.2桑樹提取物1.779.0蜂衣提取物8.373110.3超細珍珠粉--瓜阿拉提取物48.9-名稱抗羥自由基能力抗超氧陰離子自由基能IC50(mg/ml)力IC50(mg/ml)，薈提取物11.7卯.7綠茶(茶多酚95%)0.1519.5巴西大櫻桃VC250/0,0.551.6脫水巴西大櫻桃0.781.3葡萄籽提取物0.128.1蒼耳子提取物2.0204.8靈芝提取液4.3835.9甘草提取液2.5218.36珍珠水解液-858.1丹M取液0.48159.112名稱抗羥自由基能力抗超氧陰離子自由基能IC50(0/o)力IC50(%)美白酵母多肽(99%)03325.9海洋植物提取物4.92228.9(1-4.99%)鳳梨酵素甘醇萃取液18.3137.56(50%)八白散合劑'70.979.9注IC。/。指的是對原液的稀釋濃度參見圖8-圖15，由實驗可知，以Vc(98。/。)樣品為對照，其羥基自由基、超氧陰離子自由基的清除率IC5o值分別為1.45mg/ml和67.2mg/ml;眾多樣品中綠茶提取物、巴西大櫻桃粉、脫水巴西大櫻桃、葡萄籽提取物表現出顯著的清除羥自由基能力和超氧陰離子自由基能力，其中綠茶提取物的ICs()值分別為0.15mg/ml和19.5mg/ml、巴西大櫻桃粉的ICso值分別為0.55mg/ml和1.6mg/ml、脫水巴西大櫻桃ICso值分別為0.78mg/ml和1.3mg/ml、葡萄籽提取物的ICs。值分別為0.12mg/ml和8.1mg/ml;而丹^取液的清除羥自由基能力較強，ICso值達到0.48mg/ml;靈芝提取液的清除超氧陰離子自由基活性較顯著，ICso值達到35.9mg/ml。其余美白樣品表現出不同程度的清除自由基能力。(三)研究分析由酪氨酸酶抑制活性實驗和抗氧化實驗可知，綠茶提取物、巴西大櫻桃粉Vc250/。、脫水巴西大櫻桃粉、葡萄籽提取物、美白酵母多肽具有明顯的酪氨醉酶抑制活性和明顯的抗氧化能力。資料表明，綠茶提取物中的主要成分為茶多酚。茶多酚是一類存在于茶樹中的多羥基酚類的化合物，其主要成分為兒茶素類(黃烷醇類)、黃銅及黃酮醇類、花青素類和酚酸及縮酚酸類多化合物的復合物。茶多酚屬多酚結構，可以螯合鈣、銅、鐵等10種金屬離子，通過對銅離子螯合作用，而抑制銅催化的低密度脂蛋白的氧化，從而保證一定范圍內不會影響以銅為中心的SOD活性，進而抑制酪氨酸酶活性減少黑色素的生成。另外，人在生命代謝過程中會產生有害自由基，自由基極強的氧化能力會氧化不飽和脂肪酸形成13LPO(過氧化脂質)，累積的LPO會消弱生物膜的正常功能，影響活性物質的代謝，而茶多酚具有多個鄰位酚羥基結構，因多酚羥基極易被氧化為醌類而提供質子PT,故有較強的抗氧化性。同時，茶多酚自身生成穩定的自由基中間體，抑制原來的自由基連鎖反應，從而保護細胞成分不受損傷，與其他抗氧化劑相比，茶多酚清除氧自由基具有高效性，與自由基清除劑相比，lmg茶多酚清除02.的效能相當于9嗎的Cu，Zn-SOD。與Vc、Ve相比其清除02.、.OH的效能要高幾倍。再者，茶多酚與Vc、Ve有極好的協同效應。它可以產生和保護體內Vc、Ve,提高體內Vc、Ve的含量，而且茶多酚可能同時以水溶性和脂溶性兩種方式清除自由基，比單一的還原劑更有效的保護a-Vite。茶多酚還具有抗輻射作用和抗過敏作用，可吸收放射性物質，被稱為天然的紫外線過濾器。還可通過抑制炎病過程中過量分泌的炎性細胞因子發揮抗炎作用。實為不可多得的具有巨大的潛力的皮膚美白劑。葡萄籽提取物(原花青素95%,白藜聲醇5%，多酚80%),該化合物中包含了黃烷醇類、花色素苷類、黃酮醇類和縮聚鞣質等50多種物質。其中酪氨酸酶抑制活性和抗氧化能力最強的是原花青素(多酚類化合物為花青素前體物質花青素原)。有關研究表明，原花青素對酪氨酸酶有較強的抑制作用，且該抑制作用屬于竟爭性抑制。其原因可能是由于原花青素與L-多巴竟爭酶的結合部位，或是原花青素能與酪氨酸酶中的金屬離子螯合，從而抑制酶的活力。隨著原花青素濃度的提高抑制率也不斷提高，并存在劑量依賴性關系，這與本實驗中對葡萄籽提取物的測定結果一致。另外，葡萄籽提取物是迄今為止發現的植物來源最有效的抗氧化劑之一。通過體內體外實驗表明葡萄籽提取物的抗氧化效果，是Vc和Ve的幾倍到幾十倍，眾多所含成分中也數原花青素的抗氧化能力最強。值得注意的是，同一地區不同品種或不同年份的葡萄，其籽中原花青素的聚合度和總含量有很大差別。巴西大櫻桃，又稱西印度櫻桃。屬于金虎尾科植物，富含各種維生素、鈣、果糖、糠醛、鐵、蛋白質和蔗糖，其中新鮮果實中維生素C的含量特別高約1700-2200mg/100g，是番石榴、芒果、木瓜、獼猴桃等水果的7-170倍之多，大大超過了我國目前的主要水果。巴西大櫻桃粉Vcl7。/。的維生素含量每100g超過17000mgVc和Ve是主要的抗氧化物，抵抗自由基破壞的組織保護系統，同樣保護細胞內容物免受自由基的破壞。Vc也是細胞外液中最重要的抗氧化劑，通過降低過氧自由基在水相中的過氧化，保護生物膜免受脂質過氧化的破壞。巴西大櫻桃除了含有維生素以外，還含有無機鹽類，可以為緊繃的皮膚補充礦物質。此外，其粘液和蛋白質可以使皮膚保水性更好，更可以改善皮膚毛孔狀況。巴西大櫻桃對酪氨酸酶的抑制作用目前還鮮有報道，我們的研究數據顯示巴西大櫻桃表現出明顯的酪氨酸酶抑制活性。對于巴西大櫻桃提取物而言，其中的什么活性成分或組合組分既有強的抗氧化活性，又有強的酪氨酸酶抑制活性，這正是本發明研究的重點問題。甘草提取液具有較強的酪氨酸酶抑制活性，其主要成分為黃酮類物質，根據黃酮類的結構可以推測它們是以螯合酶活性中心的銅來抑制酶活力，從而抑制酪氨酸的活性減少黑色素生成。甘草還具有抗氧化作用、消炎作用、抗癌和抗基因誘變作用。丹參提取液和靈芝提取液都表現出較強的抗氧化性能力。丹參的化學成分主要為兩類脂溶性二辟醌類化合物和水溶性酚性酸類成分。丹參具有較強的還原力，其還原力與較強的抑制羥自由基產生有關，也與一定的消除過氧化氫有關。此外，丹參還具有消除包括DPPH自由基和超氧陰離子等活性氧的能力。靈芝中含有10多種M酸、肽類和多糖，已經從靈芝中分離得到160多種化合物，其中靈芝多糖和靈芝三薛是靈芝中主要的生物活性物質。靈芝多糖肽(GLPP)具有體內抗氧化作用，且其抗氧化作用與清除氧自由基有關。靈芝菌絲體含氮多糖能顯著的提高紅細胞中的SOD的活性，從而'對機體起到保護作用。靈芝能通過脂質過氧化物的形成和提高抗氧化酶的活性，改善D-半乳糖導致腦超微結構變化，具有顯著的抗氧化作用。對于八白散合劑、鳳梨酵素甘醇萃取液(50%)、美白酵母多肽(99.9%)、海洋植物美白劑(1-4.99%)這4種新型皮膚美白劑，八白散合劑和美白酵母多肽的酪氨酸酶抑制活性抑制活性較為顯著，其IQo(。/。)值分別達到3.955。/o和0.022%(注IC。/。指的是對原液的稀釋濃度)。在稀釋濃度為10%的條件下，八白散合劑和海洋植物提取物的酪氨酸酶抑制率分別達到67.2%和50%,而鳳梨酵素甘醇萃取液的酪氨酸酶抑制率僅為1.6%;在稀釋濃度為0.2%的條件下，美白酵母多肽的酪氨酸酶抑制率達到76.3°/。。15值得我們關注的是，八白散合劑這種中藥復合組方的皮膚美白劑，它的主要成分為白丁香、白僵蠶、白牽牛、白蒺藜、白芨、白芷、白附子、白苻薈，皂角、綠豆10種中藥成分。萊博公司的數據顯示，八白散合劑通過抑制酪氨酸酶的活性和黑色素細胞的代謝，能夠有效抑制黑色素的產生。我們的數據也證明八白散合劑有不錯的抑制酪氨酸酶的活性，同時發現這些提取物大部分屬于氣血調和的中藥，如白芷、白蒺藜屬于散風行血的中藥，從中醫氣血調和的角度應該有美白功效。然而中醫理論又是非常微妙的可逆，如所有的疾病包括美白相反的白瘋風，也是相同的調和原理，不同在于劑量、組合及其效果。鄧燕的研究結果表明:白芷在中低濃(0.019g/L、0.19g/L)時對黑素細胞增殖和黑素合成具有抑制作用(PO.05);白蒺藜對黑素細胞增殖和黑素合成具有低濃度抑制、高濃度激活作用，當抑制濃度為0.0019g/L時與對照組比較差異顯著(PO.Ol)，當激活濃度為0.19g/L、19g/L時與對照組比較差異顯著(P<0.01)。美白酵母多肽，是乳酸桿菌的發酵物，又稱刺鼠信號蛋白(ASIP)。國內外眾多文獻已有報道，a-黑素細胞刺激素(a-MSH)及其受體黑皮素1受體(MC-1R)的表達，可以刺激皮膚黑素細胞中酪氨酸酶活性增加、合成黑素的功能增強，在皮膚過度色素沉著過程中起重要調控作用。可見皮膚表皮細胞中a-MSH的表達上調使表皮黑素細胞合成黑素增多是皮膚呈過度色素沉著的重要原因。ASIP作用于皮膚表皮細胞后，ASIP與a-MSH竟爭結合黑素細胞表面MC-1R，使黑素細胞內TYR的表達下調、活性抑制，從而拮抗a-MSH合成優黑素等作用，使表皮細胞著色能力降低，從而達到美白的目的。美白酵母多肽(刺鼠信號蛋白ASIP)的來源是發酵產物,是一種m^"潛力的天然美白劑。綜上所述，篩選天然的酪氨酸抑制和抗氧化雙效劑，為美白化妝品或以酪氨酸酶為作用靶點藥物的開發提^^l據。更為重要的是，綠茶提取物、巴西大櫻桃粉Vc25。/。、脫水巴西大櫻桃粉、葡萄籽提取物，不僅具有顯著的酪氨酸酶抑制活性，還同時具有顯著的抗氧化性，這也是本發明的創新點之一。此外，美白酵母多肽、八白散合劑、,薈提取物、苦^取物、蒼耳子提取物、桑樹提取物、蟬衣提取物、瓜那拉提取物、靈芝提取液、甘草提取液等(參照數據)也都是效果不錯、很有潛力的皮膚美白劑。相信這些美白原料具有巨大的潛在利用價值，必將在美白化妝品領域中擁有一席之地。(我們的選擇一般是根據美白作用機理，在酶抑制活性、抗氧化性和氣血調和考慮的結果。然而對產品原料的選擇，針對不同目的和介質，對原料的顏色、pH、離子強度、物理防曬美白作用等，需要綜合考慮。制備含酪氨酸抑制和抗氧化雙效劑的美白祛斑組合物所述酪氨酸酶抑制和抗氧化雙效劑的酪氨酸酶抑制活性ICs()《0.541mg/ml，羥基自由基的清除活性IC5o《0.78mg/ml，超氧陰離子自由基的清除活性ICsQ《19.5mg/ml。分別取含上述量酪氨酸酶抑制和抗氧化雙效劑的綠茶提取物10g、巴西大櫻桃提取物10g、'葡萄籽提取物10g混合均勻，或取其中之一，或它們的任意組合。按常規加入輔料，其中以組合物總重量為基準，酪氨酸酶抑制和抗氧化雙效劑含量為0.1~99%，輔料含量為余量。實施例2制備含酪氨酸抑制和抗氧化雙效劑的功能性食品1.制備含綠茶提取物的食品將綠茶提取物加入到小麥粉中，制得每100g含綠茶提取物約5g的小麥粉混合物。采用該小麥粉混合物制備面包、蛋糕、曲奇餅干、薄脆餅干、面條、方便面等，從而獲得含綠茶提取物活性成分的功能性食品。2.制備含巴西大櫻桃粉的奶制品將脫水巴西大櫻桃粉加入到牛奶中，制得每100g牛奶中含脫水巴西大櫻桃粉約2-5g的混合奶，然后由其制備各種奶制品，如酸奶、水琪琳、奶酪等。3.制備含葡萄籽提取物的飲料將葡萄籽提取物加入到蔬菜汁、果汁或碳酸飲料中，獲得每100ml飲料中包含O.l-lOg的葡萄籽提取物，從而得到含葡萄籽提取物活性成分的功能性食品。實施例3制備含酪氨酸抑制和抗氧化雙效劑的化妝品乳劑將5g的脫水巴西大櫻桃粉，與lg硬脂酸、2g鯨蠟醇、lg的PEG-2017失水山梨糖醇單硬脂酸酯、lg失水山梨糖醇單硬脂酸酯、10g礦物油、5g三辛酸酯、0.5g三乙醇胺、5g甘油、3g丙二醇、適量防腐劑、適量香料和余量純水，混合，制成100g的美白祛斑的化妝品乳劑。同樣，還可按常規制成軟性洗劑、營養洗劑、營養乳膏劑、香精、面膜、浴粉等各種用作皮|夫的外用制劑。上述參照實施例對該美白祛斑組合物進行的詳細描述，是說明性的而不是限定性的，可按照所限定范圍列舉出若干個實施例，因此在不脫離本發明總體構思下的變化和修改，應屬本發明的保護范圍之內。權利要求1、一種美白祛斑組合物，其特征在于該組合物包含酪氨酸酶抑制和抗氧化雙效劑；所述酪氨酸酶抑制和抗氧化雙效劑的酪氨酸酶抑制活性IC50≤0.541mg/ml，羥基自由基的清除活性IC50≤0.78mg/ml，超氧陰離子自由基的清除活性IC50≤19.5mg/ml；所述酪氨酸酶抑制和抗氧化雙效劑為綠茶提取物、巴西大櫻桃提取物、葡萄籽提取物中之一或它們的任意組合。2、如權利要求1所述的美白祛斑組合物，其特征在于所述美白祛斑組合物還包括輔料，其中以組合物總重量為基準，酪氨酸酶抑制和抗氧化雙效劑含量為0.1~99%，輔料含量為余量。3、一種如權利要求l所述的美白祛斑的保健食品，其特征在于包含權利要求l、2中任一項所述美白祛斑組合物。4、如權利要求3所述的美白祛斑的保健食品，其特征在于所述美白祛斑組合物含量為保健食品總重量的1~50%。5、如權利要求3所述的美白祛斑的保健食品，其特征在于所述保健食品，食品、飲料或乳制品。6、一種如權利要求1所述的美白祛斑的化妝品，其特征在于包含權利要求l、2中任一項所述美白祛斑組合物。7、如權利要求6所述的美白祛斑的化妝品，其特征在于所述美白祛斑組合物含量為化妝品總重量的1~10%。8、如權利要求6所述的美白祛斑的化妝品，其特征在于所述化妝品為軟性洗劑、營養洗劑、營養乳膏劑、、面膜、浴粉用作皮膚的外用制劑。全文摘要本發明涉及一種美白祛斑組合物，該組合物包含酪氨酸酶抑制和抗氧化雙效劑；所述酪氨酸酶抑制和抗氧化雙效劑的酪氨酸酶抑制活性IC₅₀≤0.541mg/ml，羥基自由基的清除活性IC₅₀≤0.78mg/ml，超氧陰離子自由基的清除活性IC₅₀≤19.5mg/ml；所述酪氨酸酶抑制和抗氧化雙效劑為綠茶提取物、巴西大櫻桃提取物、葡萄籽提取物中之一或它們的任意組合。美白祛斑組合物還包括輔料，其中以組合物總重量為基準，酪氨酸酶抑制和抗氧化雙效劑含量為0.1～99％。本發明從多種天然植物提取物中篩選出具有活性較高的酪氨酸酶抑制和抗氧化雙效劑，酪氨酸酶活性的抑制作用對減少和抑制皮膚中黑色素的生成起著關鍵的作用，抗氧化劑保護細胞內容物免受自由基的破壞；因此，能更加合理、效果更加顯著地美白護膚。文檔編號A61K8/96GK101491490SQ20091006789公開日2009年7月29日申請日期2009年2月20日優先權日2009年2月20日發明者吳巧玲,李素霞,鵬王,王勇剛,王素英,胡彥學,韓福森申請人:天津天獅生物工程有限公司;天津天獅生物發展有限公司;天津天獅生命源有限公司