專利名稱：含有作為活性成分的ena活性礦物源a活化水的用于防止肝損傷或改善肝功能的藥物組合物的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種抗氧化、抗衰老并且具有肝功能改善活性的含有ENA活性礦物源 A(ΕΝΑ actimineral resource Α)活化水的組合物。更具體地，本發明涉及含有作為活性成分ENA活性礦物源A活化水的藥物組合物、保健食品或保健補充物，由于其對血清中維生素C的減少具有抑制活性從而能夠防止衰老，或由于其對肝細胞的損傷、細胞凋亡、或壞死具有抑制活性從而能夠防止肝損傷或改善肝功能。
背景技術：
正在經歷快速發展的人類處于各種各樣的外部壓力之中。壓力是不可避免的并且對人體的一般的衰老過程產生影響。衰老不是疾病，而是一種不可避免的自然生理現象。人類對于長壽的內在需要導致對抑制衰老進行了大量研究。而且，說人們正在承受越來越大的壓力一點也不為過。隨著最近追求健康的趨勢，人們越來越關注生命質量的改善，大量的研究集中于具有抗衰老活性的抗氧化物質。衰老標記蛋白(SMP 30)是一種質量為34kDa的衰老標記蛋白，其首次發現于大鼠肝臟中，并且有報道稱其隨著衰老的發生迅速減少數量。這種減少行為被已知是與由于衰老在雄性大鼠體內的雄性激素產生減少有關(Fujita T. , Biochem Biophys Res Commun. 1999 Jan 8 ；254(1) :1_4， Mori T et al. ， Pathology International 2004 ；54 ； 167-1737)。人們發現SMP 30能夠防止細胞的細胞凋亡和壞死，并由此抑制物理性衰老。SMP 30的主要機制如下。SMP 30作為與維生素C的合成有關的葡萄糖酸內酯酶并從而在體內維生素C的生物合成中起重要作用。SMP 30維持胞內和胞外鈣離子的體內穩態，其是一種信號分子，能夠在細胞的細胞凋亡和壞死中起到重要作用。另外，SMP 30本身起到抗氧化蛋白的作用，其破壞對身體造成傷害的活性氧和自由基從而防止物理性衰老以及細胞的細胞凋亡和壞死。因此，已知與具有正常SMP 30蛋白的動物相比，SMP 30蛋白缺乏會導致維生素C缺乏并加速動物的衰老。越來越龐大的老年人群導致與長壽相關的產業迅速發展，包括健康補充品、激素制劑、抗氧化藥物、以及老年人的生活和功能輔助手段。約90%的各種現代疾病都被發現由活性氧引起。在這種情況下，由于各種活動(例如皮膚護理和抑制絕經后機能紊亂并抗衰老)而進行胎盤素注射目前引起了很多關注，并且發現胎盤素表現出除去活性氧的活性并且因此能夠有助于90%的現代疾病的治療。因此，已知胎盤素幾乎能夠治療由自發性神經控制活性、內分泌控制活性和免疫復蘇活性引起的所有疾病。然而，對胎盤素的各種成分的作用還沒有進行研究，而且與藥物不同，食品的成分和作用不標注在食品上，這是因為這種標注不是法律上強制規定的。不存在理論支持實際上表現出抗衰老效果的抗衰老激素和這些激素的應用因此不被推薦的斷言。韓國專利第10-0463825號披露了一種用于制備ENA活性礦物源A活化水的方法
3以及利用其防止和減輕骨質疏松癥的組合物。作為一種天然物質，ENA活性礦物源A對于物理性衰老的防止或抑制活性目前為止還是未知的，其能夠抑制肝細胞損傷并抑制血清維生素C的減少，從而抑制哺乳動物的衰老。
發明內容
因此，基于上述問題提出了本發明，本發明的一個目的是提供一種含有ENA活性礦物源A活化水作為活性成分的藥物組合物和保健食品或健康補充品，其中該作為活性成分的ENA活性礦物源A活化水由于對血清維生素C減少具有抑制活性而防止衰老，或由于對肝細胞的損傷、細胞凋亡或壞死具有抑制活性而防止肝臟損傷或改善肝功能。根據本發明，上述和其他目的能夠通過提供一種含有ENA活性礦物源A活化水作為有效成分的藥物組合物和保健食品或健康補充品來實現，該作為活性成分的ENA活性礦物源A活化水由于對血清維生素C減少具有抑制活性而防止衰老，或由于對肝細胞的損傷、 細胞凋亡或壞死具有抑制活性而防止肝臟損傷或改善肝功能。ENA活性礦物源A活化水抑制體內血清維生素C的減少，從而抑制衰老和防止肝細胞的損傷、細胞凋亡或壞死。ENA活性礦物源A活化水抑制肝細胞的損傷、細胞凋亡或壞死，從而防止肝損傷或改善肝功能。
具體實施例方式以下，將具體描述本發明。根據本發明，提供了一種堿性水溶液，提供通過純化天然可食用藻類制備的作為主要成分的天然礦物質，該天然可食用藻類，即紫菜(海苔)、瓊脂(石花菜)、海蘚(真江蘺(Gracilaria verrucosa))、海索面(Nemalion vermiculare)、娛蟲公藻(Grateloupia filicina)、線形杉藻(Gigartina tenella)、海水藻(或三叉仙菜，Ceramium kondoi)、紅藻淀粉、和墨魚骨(金烏賊(Si^pia esculenta)).通過韓國專利第463，825號披露的方法獲得的物質被稱為“ΕΝΑ活性礦物源A活化水”，并且其是參照以下的方法制備的。如在此所使用的，術語“天然可食用的藻類”是指100 %可食用的蔬菜紅藻，其含有藻紅蛋白以及葉綠素并且因此呈紅色或紫羅蘭色。這種藻類通常具有多細胞線形或葉子形狀，其通常在海洋中被發現并且包括紫菜、瓊脂(石花菜)、布海苔(鹿角海蘿(Gloiopeltis tenax))等。另外，墨魚骨是通過干燥由墨魚的中心收集得到的白骨而制備的。利用紅藻或可食用的墨魚制備礦物質是這樣進行的徹底清洗紅藻或可食用墨魚，對它們進行充分干燥，接著以1，000°C至2000°C煅燒一小時。在通過煅燒細菌和雜質完全燒盡并由此被除去后，只剩下礦物質、無機物質。將礦物質完全冷卻至環境溫度，然后利用研磨器將其微粉化。然后，將該含有經煅燒的墨魚骨和紅藻的微粉礦物質溶解于水中。優選地，通過在 80°C至100°C利用揚水泵以IOrpm或更高的落差破碎該礦物質溶液一小時或更長的時間來制備離子溶液。沉淀并過濾這樣獲得的離子溶液。更具體地，將該離子溶液靜置15至35 小時以使礦物質淤渣自然沉淀，而僅所得的清澈上層清液通過過濾器進行過濾，從而制得堿性礦物質活化水。
證實了 ENA活性礦物源A活化水對存活率和體重變化、動物骨骼變化和物理轉化的差異的影響。更具體地，例如，持續18周以0%、5%和10%的不同濃度向給予了維生素 C的18周齡的SMP 30敲除小鼠，以及向未給予維生素C的26周齡和46周齡的SMP 30敲除小鼠給予ENA活性礦物源A活化水，通過肉眼觀察到的變化以及測試周期上的體重以及存活率的變化被監測，在測試周期之后對所有的受試動物進行尸體剖檢。結果是，對于給予了維生素C的組，能夠觀察到在給予了 ENA活性礦物源A活化水、測試礦物質的組與未服務ENA活性礦物源A活化水的組之間沒有體重差異和存活率差異(參見圖1)。另一方面，對于未服用維生素C的組之間在體重和存活率變化上的差異，給予ENA 活性礦物源A活化水的組相應于ENA活性礦物源A活化水的水平表現出體重顯著快速下降低于平均體重，并且存活率為0%。也就是說，在相應于不同濃度的ENA活性礦物源A活化水的組之間存在明顯差異(參見圖2至圖4)。另外，作為通過X-射線輻照證實自然發生的衰老現象對動物骨骼變化和物理轉化的影響的測試結果，所有給予維生素C的組未患上壞血病性成骨病癥，而所有未給予維生素C的組患有壞血病性成骨病癥(參見圖5)。證實了不論ENA活性礦物源A活化水是否能夠抑制體內血清的維生素C的下降， 進而抑制衰老和肝細胞的損傷、細胞凋亡或壞死。首先，僅在給予了維生素C的組中觀察到作為證實ENA活性礦物源A活化水對血清維生素C的影響的實驗結果，而僅在未給予維生素C的組中未觀察到維生素C。更具體地，對于給予了維生素C的組，給予了 ENA活性礦物源A活化水的組，與僅給予賦形劑的對照組相比統計學上表現出顯著更高的血清中總維生素C水平。另外，能夠從示出減少的維生素C與氧化的維生素C之比的圖表中看出，與賦形劑對照組相比，給予了 ENA活性礦物源 A活化水的組表現出減少的維生素C與氧化的維生素C之比根據活化水的濃度增加。這種行為表明，ENA活性礦物源A活化水由于其具有抗衰老功能而抑制活體中的維生素C氧化， 從而防止衰老(參見圖6和圖7)。同時，ENA活性礦物源A活化水抑制肝細胞的損傷、細胞凋亡或壞死并由此防止肝損傷或改善肝功能。更具體地，例如，在各種幾周齡的雄性SMP-30敲除小鼠衰老模型中，對于給予維生素C的組和未給予維生素C的組，觀察到在衰老進行的18周的試驗期間相應地給予ENA活性礦物源A活化水的肝臟中的組的病理學變化。通過觀察肝細胞的細胞凋亡和損壞以及利用獲自小鼠肝臟的肝組織片段觀察抗活化蛋白的表達來研究這樣的病理學變化。結果，對于所有給予了維生素C的組而言，未觀察到病理學異常，并且未觀察到它們之間的差異。另外，能夠確認在正常肝細胞的細胞質中幾乎沒有觀察到TUNEL-陽性細胞和糖原。然而，在所有未給予維生素C的組中，多度增生的肝臟星形細胞和肝細胞表現出高于正常水平的空泡形成并且觀察到TUNEL-陽性細胞。此外，給予了 ENA活性礦物源A活化水的組在肝細胞的細胞質中表現出明顯增加的糖原水平。這種結果表明，ENA活性礦物源A活化水抑制了由于衰老引起的肝細胞的細胞凋亡和損壞并保持正常肝功能，從而保持肝臟細胞質中的正常糖原水平并由此表現出優異的濃度依賴性肝細胞保護效應(參見圖8至圖13)。ENA活性礦物源A活化水抑制過氧化物歧化酶(一種衰老指示劑)。更具體地，作為證實這種指示劑對代表性抗衰老蛋白、Cu、Zn-SOD的影響的測試結果，Cu, Zn-SOD的表達隨著小鼠年齡的增長而增加。對于46周齡組，以5%的濃度給予ENA活性礦物源A活化水的組與賦形劑對照組相比，表現出肝臟中的Cu、Zn-SOD的表達減少，并且該減少的表達取決于活化水的濃度(參見圖15)。基于藥物組合物的總重量，作為活性成分的ENA活性礦物源A活化水以0. 001至 15重量百分比的量存在，并且優選地，以0. 01至10重量百分比的量存在。藥物組合物的每日劑量可根據個體差異(例如年齡和損傷的嚴重程度、或配方、 或體型)來適當地控制。對于成人，該藥物組合物以0.01 to IOOOmg的有效量每日給予兩次，并且其可被制成膠囊、片劑、咀嚼片、粉劑、干糖漿、顆粒劑、軟膠囊、丸劑、飲料或舌下片劑。該藥物組合物可進一步含有防腐劑、穩定劑、潤濕劑、乳化促進劑、藥用佐劑(如鹽或緩沖劑以控制滲透壓)以及其他治療有效性物質。該藥物組合物可通過常規方法配制為各種口服或腸胃外給藥。用于口服給藥的制劑的示例包括片劑、丸劑、硬膠囊和軟膠囊、液體、混懸劑、乳劑、糖漿和顆粒劑等。除了活性成分之外，這些配方還可以含有稀釋劑，如乳糖、葡萄糖、 蔗糖、甘露醇、山梨醇、纖維素和甘氨酸，以及潤滑劑，例如二氧化硅、滑石粉、硬脂酸鹽、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣和聚乙二醇。如果需要，片劑可以含有粘結劑(如硅酸鎂鋁(magnesium aluminum silicate)、淀粉糊劑、明膠、黃蓍樹膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和聚乙烯吡咯烷酮)，以及藥物添加劑，包括分解劑(如淀粉、瓊脂、藻酸鹽或藻酸鈉，吸附劑，著色劑， 風味劑或甜味劑)。片劑可通過常規方法制備，例如混合、造粒或包衣。另外，優選的腸胃外配方是用于注射的配方，即，等滲水溶液或混懸液。然而，應該理解，活性成分的實際劑型可以由各種因素來確定，例如癥狀的嚴重程度、所選擇的給藥途徑、以及受治療者的年齡、性別、體重和健康狀況。本領域技術人員將容易地確定和指定藥物組合物的有益于皮膚的適當劑量。根據本發明的劑量的每日劑量可以根據不同因素而變化，例如受治療者的疾病進展、疾病發作時間、年齡、健康狀況和并發癥。按體重比組成的組合物可以以每天一次或兩次(以單獨的劑量)的1至500mg/kg，優選30至200mg/kg的劑量給予。該劑量不用于限制本發明的范圍。根據本發明，提供了一種含有ENA活性礦物源A活化水和營養學可接受的添加劑的保健功能性食品。該保健功能性食品是含有作為有效成分的ENA活性礦物源A活化水的片劑、膠囊劑、丸劑或液體。該保健食品組合物含有基于組合物的總重量0. 001至10重量百分比。該保健食品可利用常規的成分被配制成飲料、焦糖、巧克力和減肥棒、或零食，其中常規成分例如葡萄糖、檸檬酸、液態低聚糖、玉米糖漿、大豆卵磷脂、黃油、氫化植物油、脫脂乳、糖、人造黃油、食用鹽、淀粉、小麥粉、淀粉糖漿、麥芽糖、碳酸氫鈉和糖酯。如前文所述，ENA活性礦物源A活化水抑制與衰老相關的現象，例如體重減輕、死亡率、臨床癥狀、肝細胞的細胞凋亡和損傷以及使血清中維生素C減少，從而其是一種有效抑制或防止哺乳動物體內衰老的天然物質。ENA活性礦物源A活化水是一種能夠根本上保護肝細胞并因此抑制肝細胞的損傷、細胞凋亡或壞死，并且能夠防止肝損傷或改善肝功能而不會傷害其他器官的天然物質。盡管為了示例性的目的披露了本發明的優選實施方式，但本領域技術人員將理解，在不背離由所附權利要求限定的本發明的范圍和精神的情況下，可以對本發明進行各種修改、增加和替換。
通過以下結合附圖進行的詳細描述，能夠更加清楚地理解本發明的上述和其他目的、特征以及其他優點，其中圖1是比較在給予根據本發明的ENA活性礦物源A活化水之后在完整測試期間動物組之間各周平均體重變化值的圖表；圖2是示出了在給予根據本發明的ENA活性礦物源A活化水之后，18周內各組18 周齡小鼠的平均存活率的圖表；圖3是示出了在給予根據本發明的ENA活性礦物源A活化水之后，18周內各組26 周齡小鼠的平均存活率的圖表；圖4是示出了在給予根據本發明的ENA活性礦物源A活化水之后，18周內各組48 周齡小鼠的平均存活率的圖表；圖5是示出了 ENA活性礦物源A活化水對SMP 30毀壞小鼠的成骨性病癥的影響的X-射線圖像；圖6是示出了在給予根據本發明的ENA活性礦物源A活化水之后，在第18周進行尸體剖檢的小鼠體內的總維生素C比率的圖表；圖7是示出了在給予根據本發明的ENA活性礦物源A活化水之后，在第18周進行尸體剖檢的小鼠體內的減少維生素C/氧化維生素C之比；圖8示出了在給予本發明的ENA活性礦物源A活化水并進行尸體剖檢之后，相對于ENA活性礦物源A活化水的HE-陽性細胞的病理學分析結果；圖9示出了 ENA活性礦物源A活化水對HE-陽性細胞數目的影響的比較結果；圖10示出了在給予本發明的ENA活性礦物源A活化水并進行尸體剖檢之后，相對于ENA活性礦物源A活化水的PAS-陽性細胞的病理學分析結果；圖11示出了 ENA活性礦物源A活化水對PAS-陽性細胞數目的影響的比較結果；圖12示出了在給予根據本發明的ENA活性礦物源A活化水并進行尸體剖檢之后， ENA活性礦物源A活化水對染色的TUNEL-陽性細胞數目的影響的比較結果；圖13示出了 ENA活性礦物源A活化水對TUNEL-陽性細胞數目的影響的比較結果；圖14示出了證實在給予根據本發明的ENA活性礦物源A活化水之后，ENA活性礦物源A活化水對肝臟中SMP 30表達的影響的病理學分析結果；以及圖15示出了利用免疫印跡法證實的ENA活性礦物源A活化水對Cu、Zn-SOD表達的影響的比較結果。實施例[制備例1] ENA活性礦物源A活化水的制備 徹底清洗墨魚骨和紅藻，干燥并且然后進行粉碎以獲得粉狀的墨魚骨和紅藻。將這些粉狀物質于iioo°c加熱煅燒一小時。使經煅燒的墨魚骨和紅藻完全冷卻至環境溫度， 然后利用研磨器進行微粉化。本文中所使用的紅藻是等量的紫菜(甘紫菜)、瓊脂(石花
7菜)、海蘚(真江蘺)、海索面、蜈蚣藻、線性杉藻、海水藻和紅藻淀粉的混合物。邊攪拌邊將1. 5kg經煅燒的墨魚骨微粉和4kg經煅燒的紅藻微粉溶解于500L水中。得到的溶液于90°C利用揚水泵以IOrpm或更高的落差破碎該礦物質溶液兩小時來制備離子溶液。由此獲得的離子溶液靜置15至35小時以使礦物質淤渣自然沉淀，而僅對所得的清澈上層清液通過過濾器進行過濾，從而制得堿性礦物質活化水。由此獲得的礦物質活化水被稱為“ΕΝΑ活性礦物源A活化水”并且下表1中示出了礦物成分的測定結果表 1ENA活性礦物源A活化水的成分測定
權利要求
1.一種藥物組合物，其包含作為活性成分的堿性水溶液，由于對血清中維生素C減少的抑制活性，而防止衰老，或由于對肝細胞的損傷、細胞凋亡或壞死的抑制活性，而防止肝損傷或改善肝功能，其中所述堿性水溶液按照以下步驟制備將選自墨魚骨(金烏賊)、紫菜(海苔)、瓊脂(石花菜)、海蘚(真江蘺)、海索面、蜈蚣藻、線性杉藻、海水藻、和紅藻淀粉中的一種或多種碾壓粉末化；以1，000°C至2，000°C加熱煅燒粉末物質；使所述物質冷卻并微粉化，然后將微粉物質加入到80°C至100°C的水中；利用揚水泵以IOrpm或更高的落差破碎所得到的混合物以制備離子溶液；以及過濾所述離子溶液以獲得堿性水溶液。
2.根據權利要求1所述的藥物組合物，其中，所述ENA活性礦物源A活化水以基于所述藥物組合物總重量0. 001至15重量百分比的量存在。
3.根據權利要求2所述的藥物組合物，該藥物組合物由于對血清中維生素C減少的抑制活性，而防止衰老，或由于對肝細胞的損傷、細胞凋亡或壞死的抑制活性，而防止肝損傷或改善肝功能，其中，所述藥物組合物被配制成膠囊、片劑、咀嚼片、粉劑、干糖漿、顆粒劑、 軟膠囊、丸劑、飲料或舌下片劑。
4.一種保健食品或健康補充品，其包含作為活性成分的堿性水溶液，由于對血清中維生素C減少的抑制活性，而防止衰老，或由于對肝細胞的損傷、細胞凋亡或壞死的抑制活性，而防止肝損傷或改善肝功能，其中所述堿性水溶液是按照以下步驟制備的將選自墨魚骨(金烏賊)、紫菜(海苔)、瓊脂(石花菜)、海蘚(真江蘺)、海索面、蜈蚣藻、線性杉藻、海水藻、和紅藻淀粉中的一種或多種碾壓粉末化；在于1，000°C至2，000°C加熱下煅燒粉末物質；使所述物質冷卻并微粉化，然后將所述微粉物質加入到80°C至100°C的水中；利用揚水泵以IOrpm或更高的落差破碎所得到的混合物以制備離子溶液；以及過濾所述離子溶液以獲得堿性水溶液。
5.根據權利要求4所述的保健食品或健康補充品，其中，所述保健食品或所述健康補充品被配制成飲料、焦糖、巧克力、減肥棒或零食。
全文摘要
本發明披露了一種具有抗氧化、抗衰老和提高肝功能活性的組合物，其含有ENA活性礦物源A活化水。更具體地，本發明披露了一種含有作為活性成分的由墨魚骨和紅藻粉制備的堿性ENA活性礦物源A活化水的保健食品或健康補充品，由于對血清中維生素C減少的抑制活性，而防止衰老，或由于對肝細胞的損傷、細胞凋亡或壞死的抑制活性，而防止肝損傷或改善肝功能。該組合物抑制體內血清維生素C的減少，從而抑制衰老并防止肝細胞的損傷、細胞凋亡或壞死，并且從根本上保護肝細胞以抑制由肝臟中的衰老引起的肝細胞的損傷、細胞凋亡或壞死并改善肝功能。
文檔編號A61K35/60GK102170889SQ200980136798
公開日2011年8月31日 申請日期2009年9月17日 優先權日2008年9月18日
發明者化成龍, 樸真圭, 鄭圭植, 韓正倫 申請人:化成龍