專利名稱：一種含有表皮細胞生長因子(egf)及透皮短肽融合蛋白的用于防治糖尿病足壞疽的脂質 ...的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種含有表皮細胞生長因子(EGF)及透皮短肽融合蛋白的，用于防治糖尿病足壞疽的防治的脂質體的制備方法，屬生物醫藥領域。
背景技術：
糖尿病足壞疽是糖尿病患者并發癥的一種，嚴重的需要截肢。我國的糖尿病患者約6000萬，其中有近1000萬會產生壞疽，而其中的200萬嚴重患者需要截肢，給廣大患者帶來極大地痛苦和不幸。糖尿病足壞疽是一種難以治愈的頑疾，其主要原因是微血管病變，繼而引起局部組織潰瘍。中西醫在防治糖尿病足壞疽方面做出了不懈的努力，但都沒有取得理想的效果。 或曠日持久，反復發作；或疼痛難忍，不治而終。本發明是將表皮細胞生長因子(EGF)及透皮短肽融合蛋白制備成脂質體，直接施加于糖尿病足壞疽表面，在透皮肽的作用下，迅速滲透，直達病患深處。由于脂質體的包合作用，EGF避免了酶促降解，較長時間保持了活性，形成了較高的生物利用度，有效地抑制了潰瘍的惡化，并使其在較短的時間內向好轉化，最終使之完全愈合，擺脫截肢的厄運。
發明內容
本發明旨在提供一種方法簡單、治療周期短、見效快的治療糖尿病足壞疽的方法。為達到上述目的，本發明采取下列措施采用有機溶劑逆向蒸發法。以卵磷脂為脂質體的乳化劑，膽固醇為脂質體的脂質材料。工藝流程為配有機相稱取蛋黃卵磷脂、膽固醇、加乙醚加熱并超聲使之溶解；加水相EGF原液，超聲或高壓均質使水相和有機相變成均質的油水為一定比例的油包水型乳液狀，接著回收乙醚控制溫度減壓回收，至變成凝膠狀再震蕩混合用漩渦混合器震蕩或高壓均質機乳化凝膠，打碎凝膠結構，使凝膠轉變成水包油型的流動液體；然后再回收乙醚減壓回收剩余的乙醚。經過幾個震蕩乳化、回收乙醚的過程，最終得到均質的乳狀液，即為含有表皮生長因子(EGF)及透皮短肽融合蛋白的脂質體。經測定用此種工藝制備的含有表皮生長因子(EGF)及透皮短肽融合蛋白的脂質體1、包封率達到 80% -90% ；2、粒徑達到 100-150um ；3、穩定性耐熱(41 士 1°C )、耐寒(5士 1°C )各24小時，恢復至室溫后，外觀性狀、 氣味無顯著差異，未出現分層現象；室溫放置(10 16°C )45天，外觀性狀、氣味無顯著差異，未出現分層現象；耐熱性追加(40士 1°C )繼續放置7天，仍無顯著差異。經動物實驗， 在每克物質包含25 75微克EGF脂質體局部治療下
1,24小時內，深入活組織中的EGF濃度最高達到0.如g/ml，與皮下注射所得結果相似；2、10天內，患處肉芽形成面積的百分比最高達到70% ；經患者臨床實驗，結果也令人滿意，明顯有截肢危險的糖尿病足壞疽患者，在潰瘍清創后每周三次施用，第四周肉芽組織就被上皮覆蓋，新表皮形成，壞疽痊愈且無復發。實施例一1、配有機相稱取蛋黃卵磷脂IOOmg ；膽固醇 50mg ；加乙醚9ml，加熱并超聲使之溶解；2、水相0. 1 5ml的EGF原液，余量為純水；3、超聲或高壓均質使水相和有機相變成均質的油水比例為3 1的油包水型乳液狀；4、回收乙醚控制溫度在20°C，減壓回收乙醚，至變成凝膠狀；5、震蕩混合用漩渦混合器震蕩或高壓均質機乳化凝膠，打碎凝膠結構，使凝膠轉變成水包油型的流動液體；6、回收乙醚再減壓回收剩余的乙醚。經過幾個震蕩乳化、回收乙醚的過程，最終得到均質的乳狀液，即為含有表皮生長因子(EGF)及透皮短肽融合蛋白的脂質體。實施例二 1、配有機相稱取蛋黃卵磷脂50 200mg ；膽固醇 25 IOOmg ；加乙醚4. 5 15ml，加熱并超聲使之溶解；2、水相3ml的EGF原液，余量為純水；3、超聲或高壓均質使水相和有機相變成均質的油水比例為3 1的油包水型乳液狀；4、回收乙醚控制溫度在20°C，減壓回收乙醚，至變成凝膠狀；5、震蕩混合用漩渦混合器震蕩或高壓均質機乳化凝膠，打碎凝膠結構，使凝膠轉變成水包油型的流動液體；6、回收乙醚再減壓回收剩余的乙醚。經過幾個震蕩乳化、回收乙醚的過程，最終得到均質的乳狀液，即為含有表皮生長因子(EGF)及透皮短肽融合蛋白的脂質體。
權利要求
1.一種含有表皮細胞生長因子(EGF)及透皮短肽融合蛋白的防治糖尿病足壞疽的脂質體的制備方法，以5ml脂質體制劑計，其組成配方為①卵磷脂50 200mg；②膽固醇25 IOOmg；③乙醚4.5 15ml ；④EGF原液0.1 5ml ；⑤余量為純水。
2.根據權利要求1所述的一種含有表皮細胞生長因子(EGF)及透皮短肽融合蛋白的防治糖尿病足壞疽的脂質體的制備方法，以5ml脂質體制劑計，其組成配方為①卵磷脂IOOmg；②膽固醇50mg；③乙醚9ml；④EGF原液3ml；⑤余量為純水。
3.根據權利要求1或2所述的一種含有表皮細胞生長因子(EGF)及透皮短肽融合蛋白的防治糖尿病足壞疽的脂質體的制備方法，其特征是，所述的表皮生長因子選用人表皮生長因子。
4.根據權利要求1或2所述的一種含有表皮細胞生長因子(EGF)及透皮短肽融合蛋白的防治糖尿病足壞疽的脂質體的制備方法，其特征是，所述的透皮短肽是在EGF基礎上通過改構使其具有透皮功能。
5.根據權利要求1 3所述的一種含有表皮細胞生長因子(EGF)及透皮短肽融合蛋白的防治糖尿病足壞疽的脂質體的制備方法是配有機相稱取蛋黃卵磷脂、膽固醇、加乙醚加熱并超聲使之溶解；加水相EGF及透皮短肽融合蛋白原液，超聲或高壓均質使水相和有機相變成均質的油水為一定比例的油包水型乳液狀，接著回收乙醚控制溫度減壓回收，至變成凝膠狀再震蕩混合用漩渦混合器震蕩或高壓均質機乳化凝膠，打碎凝膠結構，使凝膠轉變成水包油型的流動液體；然后再回收乙醚減壓回收剩余的乙醚。經過幾個震蕩乳化、回收乙醚的過程，最終得到均質的乳狀液，即為表皮生長因子 (EGF)及透皮短肽融合蛋白的脂質體。
6.根據權利要求1 3所述的一種含有表皮細胞生長因子(EGF)及透皮短肽融合蛋白的防治糖尿病足壞疽的脂質體的制備方法，其特征是，它在采用低劑量的EGF及透皮短肽融合蛋白時，可用于面部和皮膚美容。
7.根據權利要求1或2所述的一種含有表皮細胞生長因子(EGF)及透皮短肽融合蛋白的防治糖尿病足壞疽的脂質體的制備方法，其特征是，它在采用低劑量的EGF及透皮短肽融合蛋白時，可用于醫治皮膚的燒燙傷。
全文摘要
本發明公開了一種含有表皮細胞生長因子(EGF)及透皮短肽融合蛋白的用于防治糖尿病足壞疽的脂質體的制備方法，它是采用有機溶劑逆向蒸發法將表皮生長因子(EGF)及透皮短肽融合蛋白包合起來，使其能很好的保護活性，又強化了對患者皮膚的滲透力，對糖尿病足壞疽有著顯著地防治作用。另外，選擇較低的EGF及透皮短肽融合蛋白的含量配方，該脂質體還可以用于美容和治療燒燙傷。
文檔編號A61P17/02GK102210853SQ20101013743
公開日2011年10月12日 申請日期2010年4月1日 優先權日2010年4月1日
發明者孫民富 申請人:孫民富