專利名稱：表皮生長因子與褪黑素合成的美白抗皺修復液的制作方法
技術領域：
本發明屬于生物基因化妝品及其制備的技術領域，涉及一種含有表皮生長因子 (EGF)的皮膚修復液，特別涉及一種表皮生長因子(EGF)與褪黑素合成的美白抗皺修復液。
背景技術：
人表皮生長因子(Epidermal Growth Factor，下文中簡稱“EGF”)，是人體內分泌 的一種重要的生長因子，是由53個氨基酸殘基組成并包括3個二硫腱的短鏈多肽；具有很 強的生物學效應，極微量的EGF即能強烈促進皮膚細胞的分裂和生長，具有促進表皮生長 代謝的作用，如治療燒傷、燙傷、促進傷口愈合、修復腸胃道、肝臟和眼結膜的損傷等。EGF的作用包括增強細胞的抑制凋亡基因BCL-2的功能，抵御導致細胞內DNA斷 裂、變異的外來因素(如紫外線、低溫、藥物、激素等)的刺激，防止細胞凋亡，增加皮膚的抗 干擾能力，促進皮下膠原蛋白、細胞外透明質酸、粘多糖等合成和分泌，使表皮內角質層水 分保持能力增強，促進皮膚細胞的增殖、分化，加速新陳代謝，具有極強的促進表皮生長代 謝的作用，提高新細胞在皮膚中所占的比例，同時降低皮膚中黑色素和有色細胞含量，使面 部的色斑逐漸淡化、消失，則皮膚顯得飽滿、有彈性，毛孔收縮，皺紋減少，從根本上阻止皮 膚的衰老，使得肌膚細嫩光滑，始終處于年輕狀態。褪黑激素(Melatonin)是從哺乳動物大腦部深處像松果般大小的“松果體”分泌 的一種天然吲哚類激素，人稱“松果體素”。褪黑素通過清除機體內酶促反應和非酶促反應時可能產生自由基，抗氧化和抑制 脂質的過氧化反應保護細胞結構、防止DNA損傷、降低體內過氧化物的含量，對外源性毒物 (如百草枯)引起的過氧化以及產生的自由基所造成的組織損傷有明顯的拮抗作用；具有 活化人體單核細胞，誘導其細胞毒性及IL-I分泌的功能，對人體外周淋巴細胞染色體造成 的損傷有明顯的保護作用，對自由基產生的物理和化學致突變性和致癌性有拮抗作用；能 夠控制協調人體免疫系統、神經系統、內分泌系統、生殖系統與個體生長發育，具有抗緊張 壓迫、抗脂質過氧化作用，有廣泛的生理活性；參與鎮靜、催眠、鎮痛和免疫效應等活動。褪黑素分泌的晝夜節律，有著較強的調節時差功能，隨著年齡的增長，夜間自身分 泌的褪黑素水平的降低，直接影響到睡眠的質量；從體外補充褪黑素，可使體內的褪黑素水 平維持在年輕狀態，調整和恢復晝夜節律，具有助睡安眠、提高生活質量，延緩衰老的進程， 增強免疫力，改善整個身體的機能狀態，預防心血管疾病、癌癥和各種老年疾病功能，并對 其人體因輻射引起的各系統、各組織及細胞分子的損傷，有著防護和修復作用。由于EGF是一種生物活性蛋白，是一種對環境溫度敏感的活性物質，其神奇的功 效完全依賴于它的生物活性，一般采用真空凍干技術保存，使用前需要用溶媒溶解；EGF暴 露在空氣中或溶解后，決定其活性的“二硫鍵”會氧化斷裂，分子結構發生改變，在空氣中其 活性最多只能保存7 10天，否則EGF就會失去活性，失去活性的EGF跟淀粉一樣，無任 何藥理作用；因此，如果將其添加到美容護膚品中，生產和使用周期都將超過它的活性保存 期，使EGF失去作用，因此，如果無法對EGF的活性保持，則EGF加入護膚品中就是無意義的，因為當消費者拿到手的時候，EGF的活性可能已經喪失了，無法起到去皺、收縮毛孔、促進皮膚新生、延緩衰老的作用，所以目前有些化妝品雖然添加了EGF，但效果并不明顯，甚至根本沒有效果，還存有安全問題。
真正優質的EGF護膚品，必須應用EGF的生物活性保持技術，否則EGF只能作為一個概念存在。發明內容[ooog] 本發明的目的為了保持EGF的物理化學穩定性和抑制EGF活性的下降，提供一種對EGF的活性成分添加褪黑素，通過褪黑素對EGF活性成分起到穩定修飾作用，并促進EGF用于皮膚護膚過程中的細胞分化與增殖，可以使得EGF活性能夠得到穩定，并褪黑素能夠刺激EGF作用后的神經前體細胞增殖，能夠部分替代EGF的功能，達到更有效的滲透，及恒溫下活性的保持時間增強，使用方式更加便捷與靈活的美白抗皺修復液；運用于解決皮膚的修復，抗衰老，美白去斑等系列皮膚的綜合治療護膚功效。
本發明的表皮生長因子與褪黑素合成的美白抗皺修復液，包含生物活性表皮生長因子“EGF”和褪黑素，EGF活性成分為已有技術中的從天然來源分離或者使用重組I)NA技術生產；EGF在修復液中的含量以總重計在l×lo —l×lo“％范圍內；已有技術中的褪黑素在修復液中的含量以總重計在o．ol—1％范圍內，其中營養液含有絲肽、透明角酸、海藻糖、復方維生素、甘露醇、融合蛋白以及酸度調節劑；其特征在于所述的生物活性EGF和褪黑素為修復液主體；所述其組成配置(重量份數)為Ioo]]] EGFl
褪黑素8一12；
絲肽80—120
海藻糖400一600；
復方維生素150一250；
甘露醇150一250；
透明角酸800一1200；
融合蛋白5000—8000；
制備過程中分散和稀釋所用去離子水、生理鹽水或o．1N的檸檬酸溶液。
所述其最佳配置(重量份數)為
EGFl
褪黑素lo；
絲肽lOO
海藻糖200；
復方維生素200；
甘露醇200；
透明角酸1000；
融合蛋白6000；
所述的生產工藝包括以下步驟
(1)EGF—S溶液的配希0
將1份的EGF凍干粉，80 120份的絲肽，400 600份的透明角質，溶解于生理 鹽水(或0. IN的檸檬酸溶液)，5 10°C水浴中，均勻攪拌，稀釋成100000份的EGF-S溶 液；(2) EGF-M 的配制將8 12份的褪黑素，溶解于90000份離子水，85 90°C水浴中，均勻攪拌30min， 保溫Ih后，冷至室溫，攪拌，加入酸度調節劑，調節PH值至4 5，在0 20°C時分批、逐量 的加入配制好的EGF-S溶液后，加入5000 8000份的融合蛋白，低速均勻攪拌24h，調節 PH值，過濾，冷凍干燥后，制成干粉，真空包裝；(3)營養液的配制將400 600份的海藻糖、150 250份的復方維生素、150 250份的甘露醇 和400 800份的透明角酸，溶解于90000份85 90°C的離子水中，均勻攪拌Ih后，冷至 室溫，調節PH值，制成營養液，備用；所述的營養液對EGF的生物活性起保護作用，參與對皮 膚的營養和護理作用。所述EGF-M的配制或生產工藝將1份EGF的凍干粉，8 12份的褪黑素，80 120份的絲肽，400 600份的透明 角質，溶解于100000份去離子水，85 90°C水浴中，均勻攪拌Ih后，冷至室溫，加入5000 8000份的融合蛋白，低速均勻攪拌24h，調節PH值，過濾，冷凍干燥后，制成干粉，真空包裝。其特征在于，所述的EGF-M和營養液的PH值為6 7，適合皮膚吸收，避免了酸、堿 物質引起的對EGF的失活作用。其特征在于所述的美白抗皺修復液，將營養液注入EGF-M干粉包裝中，完全溶解 后使用。因褪黑素是較強的抗氧化劑，研究發現它可以抗氧化作用，抑制外界因素導致的 細胞核DNA斷裂，褪黑素的較高脂溶性易聚集在細胞核內，褪黑素進入細胞后，可直接清除 (.0H)和誘導GSH-PX活性增強，作用于EGF，在細胞漿和核內進行抗氧化作用，使EGF及恒 溫下活性保持時間更長；通過褪黑素與EGF合成，刺激EGF作用后的細胞增殖，大大提高 EGF對皮膚的細胞的修復功能，由于褪黑素滲透性極強，兩者的合成物將更容易進入皮膚， 使皮膚深層得到修復。具體實施方法因此本發明人對EGF添加褪黑素進行了很多研究以及實驗機理的證明，通過a)培 養基加上褪黑素(MT)，b)培養基加上表皮生長因子(EGF)，c)培養基加上EGF和MT三組實 驗培養觀察，長程作用一個月；觀察發現c組，即EGF和MT培養組，不但對EGF起到穩定作 用，保持了 EGF的活性，還能夠刺激EGF作用后的神經前體細胞增殖，使EGF更快的細胞分 化，及被皮膚吸收，添加褪黑素后不但具有EGF的功效而且具有褪黑素美白，抗過敏，清除 自由基等多重美容更效。為更加清楚的了解本發明特征，下面對本發明作進一步的闡述實施例1本發明中的生物活性表皮生長因子(EGF)，為已有的有關基因重組技術生產的生 物凍干粉狀EGF以及已有技術中的褪黑素，絲肽、透明角酸、海藻糖、復方維生素、甘露醇、 融合蛋白以及酸度調節劑；其特征在于所述的生物活性EGF和褪黑素為修復液主體；所述其組成配置(重量份數)為EGF1 ；
褪黑素8 12 ；
絲肽80 120 ；
海藻糖400 ‘ 600 ；
復方維生素150 ‘ 250 ；
甘露醇150 ‘ 250 ；
透明角酸800 ‘ 1200 ；
融合蛋白5000 8000制備過程中分散和稀釋所用去離子水、生理鹽水或0. IN的檸檬酸溶液。本發明的表皮生長因子與褪黑素合成的美白抗皺修復液，所述的最佳配置(重量 份數)為EGF1 ；
褪黑素10 ；
絲肽100 ；
海藻糖200 ；
復方維生素200 ；
甘露醇200 ；
透明角酸1000
融合蛋白6000。
實施例1本發明的表皮生長因子與褪黑素合成的美白抗皺修復液，所述的生產工藝包括以 下步驟(I)EGF-S溶液的配制將1份的EGF凍干粉，80 120份的絲肽，400 600份的透明角質，溶解于檸檬 酸(或0. IN的醋酸溶液)，5 10°C水浴中，均勻攪拌，稀釋成100000份的EGF-S溶液；(2) EGF-M 的配制將8 12份的褪黑素，溶解于90000份離子水，85 90°C水浴中，均勻攪拌30min， 保溫Ih后，冷至室溫，攪拌，用檸檬酸調節PH值至4 5，在0 20°C時分批、逐量的加入配 制好的EGF-S溶液后，加入5000 8000份的融合蛋白，低速均勻攪拌24h，調節PH值6 7，過濾，冷凍干燥后，制成干粉，真空包裝；(3)營養液的配制將400 600份的海藻糖、150 250份的復方維生素、150 250份的甘露醇和 400 800份的透明角酸，溶解于90000份85 90°C的離子水中，均勻攪拌Ih后，冷至室 溫，加入檸檬酸，調節PH值6 7，制成營養液，備用；所述的營養液對EGF的生物活性起保 護作用，參與對皮膚的營養和護理作用。實施例2本發明的表皮生長因子與褪黑素合成的美白抗皺修復液，所述的生產工藝包括以 下步驟
將1份EGF的凍干粉，8 12份的褪黑素，80 120份的絲肽，400 600份的透明 角質，溶解于100000份去離子水，85 90°C水浴中，均勻攪拌Ih后，冷至室溫，加入5000 8000份的融合蛋白，低速均勻攪拌24h，加入檸檬酸，調節PH值6 7，過濾，冷凍干燥后，制
成干粉，真空包裝。營養液的配制及生產工藝與實施例1相同。為了清除皮膚代謝過程中產生的一些氧自由基，在自身活性水平低下的情況下， 定期為皮膚細胞補充EGF，就可持續促進細胞的合成，極微量的EGF就能促進皮膚組織細胞 的增殖與生長，使新生年輕的細胞迅速代替衰老和死亡的細胞，保持表皮新陳代謝。本發明的使用方法所述的美白抗皺修復液，在使用前將營養液注入EGF-M干粉包裝中，完全溶解后 使用。早晨，先用溫水或洗面奶清潔皮膚，擦干，將本營養液溶解的美白抗皺修復液，用 刷子均勻地涂在皮膚上，用手指輕輕按摩5 10分鐘后，再進行其他化妝或修飾；可以清新 皮膚，防曬、去除氧自由基。臨睡前，先用溫水或洗面奶清潔皮膚，擦干，將本營養液溶解的美白抗皺修復液， 用刷子均勻地涂摸在皮膚上，用手指輕輕按摩10 20分鐘后，使皮膚得以吸收，再用濕毛 巾擦干皮膚即可；即促進皮膚細胞的新陳代謝和細胞的再生。本發明的表皮生長因子與褪黑素合成的美白抗皺修復液，通過褪黑素對EGF活性 成分的穩定修飾技術，促進EGF用于護膚過程中的細胞分化，達到更有效的滲透，修復及恒 溫下活性的保持時間增強，可以使得EGF使用方法更加便捷與靈活；可廣泛應用于對皮膚 的修復，抗衰老、美白去斑等系列護膚用品，目前來說是一種EGF活性能夠得到穩定及持久 保存的理想方案之一。以上所述，僅為本發明的具體實施方式
，但本發明的保護范圍并不局限于此，任何 熟悉本技術領域的人員在本發明揭示的技術范圍內，等同的變化或替換，都應涵蓋在本發 明的保護范圍之內；因此，本發明的保護范圍應以權利要求的保護范圍為準。
權利要求
一種表皮生長因子與褪黑素合成的美白抗皺修復液，具有一定配比已有技術中的生物活性表皮生長因子(下文中稱作“EGF”)，已有技術中的褪黑素，絲肽、透明角酸、海藻糖、復方維生素、甘露醇、融合蛋白以及酸度調節劑；其特征在于所述的生物活性EGF和褪黑素為修復液主體；所述其組成配置(重量份數)為EGF 1；褪黑素8～12；絲肽 80～120；海藻糖400～600；復方維生素150～250；甘露醇150～250；透明角酸 800～1200；融合蛋白 5000～8000；制備過程中分散和稀釋所用去離子水、生理鹽水或0.1N的檸檬酸溶液。
2.根據權利1所述的表皮生長因子與褪黑素合成的美白抗皺修復液，其特征在于 所述其最佳配置(重量份數)為EGF1 ；褪黑素10 ；絲肽100 ；海藻糖200 ；復方維生素 200 ； 甘露醇200 ；透明角酸 1000 ； 融合蛋白 6000。
3.根據權利1、2所述的表皮生長因子與褪黑素合成的美白抗皺修復液的生產工藝， 包括以下步驟(1)EGF-S溶液的配制將1份的EGF凍干粉，80 120份的絲肽，400 600份的透明角質，溶解于生理鹽水 (或0. IN的檸檬酸溶液)，5 10°C水浴中，均勻攪拌，稀釋成100000份的EGF-S溶液；(2)EGF-M的配制將8 12份的褪黑素，溶解于90000份離子水中，均勻攪拌lh，用酸度調節劑調節PH 值至4 5，在0 20°C時分批、逐量的加入配制好的10000份EGF-S溶液后，加入5000 8000份的融合蛋白，低速均勻攪拌24h，調節PH值，冷凍干燥后，制成干粉，真空包裝；(3)營養液的配制將400 600份的海藻糖、150 250份的復方維生素、150 250份的甘露醇和400 800份的透明角酸，溶解于90000份85 90°C的離子水中，均勻攪拌Ih后，冷至室溫，調節 PH值，制成營養液，備用。
4.根據權利1、2所述的表皮生長因子與褪黑素合成的美白抗皺修復液的生產工藝，其 特征在于EGF-M的配制將1份EGF的凍干粉，8 12份的褪黑素，80 120份的絲肽，400 600份的透明角 質，溶解于100000份去離子水，85 90°C水浴中，均勻攪拌Ih后，冷至室溫，加入5000 8000份的融合蛋白，低速均勻攪拌24h，調節PH值，過濾，冷凍干燥后，制成干粉，真空包裝。
5.根據權利3、4所述的表皮生長因子與褪黑素合成的美白抗皺修復液，其特征在于， 所述的EGF-M和營養液的PH值為6 7。
6.根據權利1所述的表皮生長因子與褪黑素合成的美白抗皺修復液，所述的酸度調節 劑為檸檬酸。
7.根據權利1、2、3所述的表皮生長因子與褪黑素合成的美白抗皺修復液，其特征在 于所述的美白抗皺修復液，將營養液注入EGF-M干粉包裝中，完全溶解后使用。
全文摘要
本發明屬于生物基因化妝品及其制備的技術領域，涉及一種表皮生長因子(EGF)與褪黑素合成的美白抗皺修復液。為了保持EGF的物理化學穩定性和抑制EGF活性的下降，本發明為達目的通過褪黑素對EGF活性成分的穩定修飾技術，促進EGF用于護膚過程中的細胞分化，達到更有效的滲透，修復及恒溫下活性的保持時間增強；本發明的表皮生長因子與褪黑素合成的美白抗皺修復液，含有一定配比已有技術中的生物活性表皮生長因子，已有技術中的褪黑素，絲肽、透明角酸、海藻糖、復方維生素、甘露醇以及融合蛋白；可廣泛應用于對皮膚的修復，抗衰老、美白去斑等系列護膚用品，是目前EGF活性能夠得到穩定及持久保存的理想方案之一。
文檔編號A61K8/34GK101919789SQ20101021905
公開日2010年12月22日 申請日期2010年7月5日 優先權日2010年7月5日
發明者張玲, 李強, 魏強 申請人:上海嬌貝雅精細化工有限公司