專利名稱：豬用黃芪多糖鐵原料藥及其制備方法
技術領域：
本發明屬于豬用補鐵劑領域，尤其是一種豬用黃芪多糖鐵原料藥及其制備方法。
背景技術：
缺鐵性貧血是新生2-4周齡仔豬的一種常見疾病。新生仔豬體內鐵的貯量早在 3-4日齡即被消耗完，通常需要人工補鐵，這是因為新生仔豬生長發育迅速，對鐵的需要量急劇增加，在最初數周，新生仔豬體內的鐵儲存量極少，僅為5%ig，而母豬乳中含鐵量約為 1. :3mg/L，每天僅能為每頭仔豬提供約Img鐵，因此遠遠滿足不了仔豬對鐵的15mg日需量。 而且仔豬生長越快，鐵貯量消耗的越快，貧血的發病率也就越高。若不及時補鐵，會給仔豬帶來許多的危害1.不能形成血紅蛋白、肌紅蛋白、細胞色素酶及多種過氧化物酶，從而影響體內營養物質的輸送；2.血紅蛋白含量低，血液稀薄，攜氧供氧能力低，造成機體器官衰竭；3.生長受阻，下痢、水腫、白肌病等發病率升高，被毛粗亂，皮膚及粘膜蒼白，食欲不振; 4生理防衛機能下降，免疫力低下，易發生藍耳病、圓環病毒病、偽狂犬病等病毒性疾病，也使得大腸桿菌、副豬嗜血桿菌、巴氏桿菌、葡萄球菌等條件性致病菌的發病率升高，造成巨大的經濟損失，嚴重地制約了我國養豬業的發展。目前應用于臨床的仔豬補鐵產品主要為硫酸亞鐵和右旋糖酐鐵等。硫酸亞鐵的吸收率較低，補鐵效果較差；右旋糖酐鐵對仔豬缺鐵性貧血的治療效果相對較好，為提高豬生產水平起到非常重要的作用，但是右旋糖酐鐵的合成是一個非常復雜的過程，是初生態的三價鐵氫氧化物與微分子葡聚糖分子的絡合反應，該絡合反應非常不穩定，受反應體系的PH值和!^eCl3溶液濃度的影響較大，產品收率和質量均不夠理想，加之，右旋糖酐價格較昂貴，導致生產成本較高，而且右旋糖酐鐵往往需要深部肌肉注射，造成嚴重的應激反應，在一定程度上影響了其臨床應用。
發明內容
本發明的目的在于克服現有技術的不足，提供一種豬用黃芪多糖鐵原料藥，該原料藥質量穩定、生產成本較低，能夠有效增強機體免疫力，提高仔豬存活率、使其營養成分更加均衡全面，制作工藝簡單。本發明的另一個目的在于提供一種豬用黃芪多糖鐵原料藥的制備方法。本發明是通過以下技術方案實現的一種豬用黃芪多糖鐵原料藥，其原料藥的組分及其重量份數比為黃芪多糖 15-50份；鐵鹽10-45份。而且，所述的鐵鹽為三氯化鐵、硝酸鐵、檸檬酸鐵、醋酸鐵、高氯酸鐵，檸檬酸鐵銨、 硝酸鐵銨或者甘油磷酸鐵的其中一種。一種豬用黃芪多糖鐵原料藥的制備方法，其制備方法的步驟為(1)黃芪多糖的提取取黃芪用重量比1 1. 5 3的蒸餾水對黃芪進行預浸過夜得到預浸液，向預浸液中加入等重量的濃度為35% 70%乙醇溶液，然后用微波處理3 次，20 60s/次，得到微波輔助提取液；向微波輔助提取液中按重量比1 5 10加入濃度為35% 70%乙醇溶液，調pH值至3 5后，再用超聲儀提取兩次，15 40min/次，溫度控制為20°C，得到超聲儀提取液；將超聲儀提取液過濾后，濾液備用，濾過的殘渣用蒸餾水反復洗滌至無色，洗液與濾液合并，濃縮得到濃縮液，濃縮液過濾后采用大孔吸附樹脂柱分離，得分離液；并用蒸餾水洗脫樹脂柱至洗脫液無色，收集洗脫液，合并分離液和洗脫液進行濃縮，然后加3倍量濃度為75%乙醇溶液進行醇沉，室溫靜置8 1 后抽濾，真空干燥，得黃芪多糖；(2)豬用黃芪多糖鐵原料藥的制備按照重量配比稱取鐵鹽，并將鐵鹽配制成濃度為0. 05mol/L 8mol/L的鐵鹽溶液按重量配比稱取黃芪多糖用蒸餾水溶解，得到溶液A，加入溶液A重量1/5的檸檬酸三鈉，繼續攪拌溶解，得到溶液B，然后加入溶液B重量1 3倍的濃度為10% 25%的堿液，攪拌均勻，緩慢滴加完0. 05mol/L 8mol/L的鐵鹽溶液后得到混合液C，將混合液C 的PH值調至9 13后，在70 80°C熱水浴中攪拌1. 5 3h，再在40 60°C溫度下進行離心處理3 lOmin，轉速為4000r/min ；取離心后的上層深紅棕色液體，加入乙醇，至溶液紅棕色沉淀物質沉淀完全，過濾后，將沉淀物微波處理2 5min后，靜置過夜，對靜置過夜后的沉淀物進行離心3 5min，轉速為4000r/min，真空干燥后，得紅褐色粉末，將紅褐色粉末溶于水，再用濃度為75% 95%乙醇沉淀，至無!^3+檢出，在50 70°C條件下烘干，即得到豬用黃芪多糖鐵原料藥成品。而且，所述的微波處理采用的參數為微波功率340 510W，壓力0. lOMPa，恒壓時間1 5min。而且，所述的超聲儀的頻率為20Hz 50Hz。而且，所述的鐵鹽為三氯化鐵、硝酸鐵、檸檬酸鐵、醋酸鐵、高氯酸鐵，檸檬酸鐵銨、 硝酸鐵銨或者甘油磷酸鐵的其中一種。而且，所述的堿液為氫氧化鈉溶液、碳酸鈉溶液、氫氧化鉀溶液、氫氧化銨溶液或者碳酸鉀溶液的其中一種。本發明的優點及有益效果是1.本豬用黃芪多糖鐵原料藥采用成本十分低廉的黃芪多糖為原料，生產中穩定性較好，水溶性較高，能以分子形式吸收，毒副作用小于傳統的右旋糖酐鐵，是符合國際標準的理想補鐵劑。2.本豬用黃芪多糖鐵原料藥的制備方法能夠提高原料藥中鐵離子的含量，增強鐵離子在原料藥中的穩定性，反應過程易控制、產品質量好、收率高，生產成本較低。3.本發明原料藥質量穩定、生產成本較低，能夠有效增強機體免疫力，提高仔豬存活率、使其營養成分更加均衡全面，制作工藝簡單。
具體實施例方式本發明通過以下實施例進一步詳述。需要說明的是下述實施例是說明性的，不是限定性的，不能以下述實施例來限定本發明的保護范圍。本發明中的黃芪以及鐵鹽均可以在市場上購買得到。實施例1
一種豬用黃芪多糖鐵原料藥，其原料藥的組分及其重量分別為黃芪多糖15Kg ； 鐵鹽lOKg，該鐵鹽為三氯化鐵、硝酸鐵、檸檬酸鐵、醋酸鐵、高氯酸鐵，檸檬酸鐵銨、硝酸鐵銨或者甘油磷酸鐵的其中一種，本實施例鐵鹽采用三氯化鐵。一種豬用黃芪多糖鐵原料藥的制備方法，其制備方法的步驟為(1)黃芪多糖的提取取黃芪用重量比1 1. 5的蒸餾水對黃芪進行預浸過夜得到預浸液，向預浸液中加入等重量的濃度為35%乙醇溶液，然后用微波處理3次，20s/次， 微波處理采用的參數為微波功率340W，壓力0. lOMPa，恒壓時間lmin，得到微波輔助提取液；向微波輔助提取液中按重量比1 5加入濃度為35%乙醇溶液，調pH值至3后，再用超聲儀提取兩次，15min/次，溫度控制為20°C，超聲儀的頻率為20Hz，得到超聲儀提取液；將超聲儀提取液過濾后，濾液備用，濾過的殘渣用蒸餾水反復洗滌至無色，洗液與濾液合并， 濃縮得到濃縮液，濃縮液過濾后采用大孔吸附樹脂柱分離，得分離液；并用蒸餾水洗脫樹脂柱至洗脫液無色，收集洗脫液，合并分離液和洗脫液進行濃縮，然后加3倍量濃度為75%乙醇溶液進行醇沉，室溫靜置他后抽濾，真空干燥，得黃芪多糖；(2)豬用黃芪多糖鐵原料藥的制備按照重量配比稱取鐵鹽，并將鐵鹽配制成濃度為0. 05mol/L的鐵鹽溶液備用；該鐵鹽為三氯化鐵、硝酸鐵、檸檬酸鐵、醋酸鐵、高氯酸鐵，檸檬酸鐵銨、硝酸鐵銨或者甘油磷酸鐵的其中一種，本實施例采用三氯化鐵；按重量配比稱取黃芪多糖用蒸餾水溶解，得到溶液A，加入溶液A重量1/5的檸檬酸三鈉，繼續攪拌溶解，得到溶液B，然后加入溶液B重量1倍的濃度為10 %的堿液，該堿液為氫氧化鈉溶液、碳酸鈉溶液、氫氧化鉀溶液、氫氧化銨溶液或者碳酸鉀溶液的其中一種，本實施例采用氫氧化鈉溶液，攪拌均勻，緩慢滴加完0. 05mol/L的鐵鹽溶液后得到混合液C，將混合液C的pH值調至9后，在70°C熱水浴中攪拌1.證，再在40°C溫度下進行離心處理3min，轉速為4000r/min ；取離心后的上層深紅棕色液體，加入乙醇，至溶液紅棕色沉淀物質沉淀完全，過濾后，將沉淀物微波處理aiiin后，靜置過夜，微波處理采用的參數為微波功率340W，壓力0. lOMPa，恒壓時間lmin，對靜置過夜后的沉淀物進行離心;3min，轉速為 4000r/min,真空干燥后，得紅褐色粉末，將紅褐色粉末溶于水，再用濃度為75 %乙醇沉淀， 至無1 3+檢出，在50°C條件下烘干，即得到豬用黃芪多糖鐵原料藥成品。實施例2一種豬用黃芪多糖鐵原料藥，其原料藥的組分及其重量分別為黃芪多糖50Kg ； 鐵鹽45Kg，該鐵鹽為三氯化鐵、硝酸鐵、檸檬酸鐵、醋酸鐵、高氯酸鐵，檸檬酸鐵銨、硝酸鐵銨或者甘油磷酸鐵的其中一種，本實施例鐵鹽采用硝酸鐵。一種豬用黃芪多糖鐵原料藥的制備方法，其制備方法的步驟為(1)黃芪多糖的提取取黃芪用重量比1 3的蒸餾水對黃芪進行預浸過夜得到預浸液，向預浸液中加入等重量的濃度為70%乙醇溶液，然后用微波處理3次，60s/次，微波處理采用的參數為微波功率510W，壓力0. lOMPa，恒壓時間5min，得到微波輔助提取液； 向微波輔助提取液中按重量比1 5加入濃度為70%乙醇溶液，調pH值至5后，再用超聲儀提取兩次，40min/次，溫度控制為20°C，超聲儀的頻率為20Hz，得到超聲儀提取液；將超聲儀提取液過濾后，濾液備用，濾過的殘渣用蒸餾水反復洗滌至無色，洗液與濾液合并，濃縮得到濃縮液，濃縮液過濾后采用大孔吸附樹脂柱分離，得分離液；并用蒸餾水洗脫樹脂柱至洗脫液無色，收集洗脫液，合并分離液和洗脫液進行濃縮，然后加3倍量濃度為75%乙醇溶液進行醇沉，室溫靜置1 后抽濾，真空干燥，得黃芪多糖；(2)豬用黃芪多糖鐵原料藥的制備按照重量配比稱取鐵鹽，并將鐵鹽配制成濃度為8mol/L的鐵鹽溶液備用；該鐵鹽為三氯化鐵、硝酸鐵、檸檬酸鐵、醋酸鐵、高氯酸鐵，檸檬酸鐵銨、硝酸鐵銨或者甘油磷酸鐵的其中一種，本實施例采用硝酸鐵；按重量配比稱取黃芪多糖用蒸餾水溶解，得到溶液A，加入溶液A重量1/5的檸檬酸三鈉，繼續攪拌溶解，得到溶液B，然后加入溶液B重量3倍的濃度為25 %的堿液，該堿液為氫氧化鈉溶液、碳酸鈉溶液、氫氧化鉀溶液、氫氧化銨溶液或者碳酸鉀溶液的其中一種，本實施例采用碳酸鈉溶液，攪拌均勻，緩慢滴加完8mol/L的鐵鹽溶液后得到混合液 C，將混合液C的pH值調至13后，在80°C熱水浴中攪拌3h，再在60°C溫度下進行離心處理lOmin，轉速為4000r/min ；取離心后的上層深紅棕色液體，加入乙醇，至溶液紅棕色沉淀物質沉淀完全，過濾后，將沉淀物微波處理5min后，靜置過夜，微波處理采用的參數為微波功率510W，壓力0. lOMPa，恒壓時間5min，對靜置過夜后的沉淀物進行離心5min，轉速為 4000r/min,真空干燥后，得紅褐色粉末，將紅褐色粉末溶于水，再用濃度為95 %乙醇沉淀， 至無1 3+檢出，在70°C條件下烘干，即得到豬用黃芪多糖鐵原料藥成品。實施例3一種豬用黃芪多糖鐵原料藥，其原料藥的組分及其重量分別為黃芪多糖32Kg ； 鐵鹽22Kg，該鐵鹽為三氯化鐵、硝酸鐵、檸檬酸鐵、醋酸鐵、高氯酸鐵，檸檬酸鐵銨、硝酸鐵銨或者甘油磷酸鐵的其中一種，本實施例鐵鹽采用檸檬酸鐵。一種豬用黃芪多糖鐵原料藥的制備方法，其制備方法的步驟為(1)黃芪多糖的提取取黃芪用重量比1 2的蒸餾水對黃芪進行預浸過夜得到預浸液，向預浸液中加入等重量的濃度為50%乙醇溶液，然后用微波處理3次，40s/次，微波處理采用的參數為微波功率420W，壓力0. lOMPa，恒壓時間3min，得到微波輔助提取液； 向微波輔助提取液中按重量比1 5加入濃度為50%乙醇溶液，調pH值至3后，再用超聲儀提取兩次，25min/次，溫度控制為20°C，超聲儀的頻率為35Hz，得到超聲儀提取液；將超聲儀提取液過濾后，濾液備用，濾過的殘渣用蒸餾水反復洗滌至無色，洗液與濾液合并，濃縮得到濃縮液，濃縮液過濾后采用大孔吸附樹脂柱分離，得分離液；并用蒸餾水洗脫樹脂柱至洗脫液無色，收集洗脫液，合并分離液和洗脫液進行濃縮，然后加3倍量濃度為75%乙醇溶液進行醇沉，室溫靜置1 后抽濾，真空干燥，得黃芪多糖；(2)豬用黃芪多糖鐵原料藥的制備按照重量配比稱取鐵鹽，并將鐵鹽配制成濃度為3mol/L的鐵鹽溶液備用；該鐵鹽為三氯化鐵、硝酸鐵、檸檬酸鐵、醋酸鐵、高氯酸鐵，檸檬酸鐵銨、硝酸鐵銨或者甘油磷酸鐵的其中一種，本實施例采用檸檬酸鐵；按重量配比稱取黃芪多糖用蒸餾水溶解，得到溶液A，加入溶液A重量1/5的檸檬酸三鈉，繼續攪拌溶解，得到溶液B，然后加入溶液B重量2倍的濃度為18%的堿液，該堿液為氫氧化鈉溶液、碳酸鈉溶液、氫氧化鉀溶液、氫氧化銨溶液或者碳酸鉀溶液的其中一種， 本實施例采用碳酸鉀溶液，攪拌均勻，緩慢滴加完3mol/L的鐵鹽溶液后得到混合液C，將混合液C的pH值調至11后，在75°C熱水浴中攪拌池，再在50°C溫度下進行離心處理7min，轉
6速為4000r/min ；取離心后的上層深紅棕色液體，加入乙醇，至溶液紅棕色沉淀物質沉淀完全，過濾后，將沉淀物微波處理:3min后，靜置過夜，微波處理采用的參數為微波功率400W， 壓力0. lOMPa，恒壓時間3min，對靜置過夜后的沉淀物進行離心％iin，轉速為4000r/min，真空干燥后，得紅褐色粉末，將紅褐色粉末溶于水，再用濃度為85%乙醇沉淀，至無!^3+檢出， 在60°C條件下烘干，即得到豬用黃芪多糖鐵原料藥成品。本發明豬用黃芪多糖鐵原料藥的相對分子質量檢測利用凝膠滲透色譜法(gel permeation chromatography, GPC)檢測，用7個標準相對分子質量右旋糖酐作出標準曲線，重均相對分子質量從4，000 430，000，色譜分析流動相為純水，樣品質量濃度lg/L，流速0. 16mL/min，檢測器溫度40°C，凝膠色譜柱溫度60°C。根據美國藥典要求，黃芪多糖鐵的表觀分子量要求為34，OOODa 60，OOODa，重均分子量與數均分子量的比值小于1. 7。本發明豬用黃芪多糖鐵原料藥中鐵元素含量測定采用ICP方法儀器為美國 Perkin Elmer公司產Optima 3300DV,也可以按照2005年獸藥典的檢測方法，采用氧化 還原滴定法通過比較，這兩種方法檢測，鐵元素含量為5. 0-6.0%鐵元素含量基本一致。同樣，氯離子檢測方法也可按藥典標準，檢測均得到標準要求。下面通過具體實驗說明使用本發明的優點通過把本發明制成注射液進行實驗說明，把本發明豬用黃芪多糖鐵原料藥加入到注射用水中配制成含鐵元素350mg/mL的溶液，加入40%的堿液調PH值至11，對堿化后的溶液進行加熱，加熱溫度控制在50 80°C，然后向加熱后的溶液中加入3%。活性炭，吸附不溶性顆粒，至無肉眼可見的不溶性顆粒，再攪拌20 60min后過濾，收集濾液并對濾液進行滅菌，得到黃芪多糖鐵注射液成品。1臨床應用試驗將出生2 3天后的仔豬，隨機每窩仔豬分為三組。一組為本發明試驗組，二組為右旋糖酐鐵實驗組，三組為空白對照組，其中本發明組每頭注射黃芪多糖鐵注射液lml，右旋糖酐鐵實驗組和對照組分別注射等量的右旋糖酐鐵注射液和生理鹽水。各組均于試驗后兩周采血測定其血液血紅蛋白含量(g/dl)；各組仔豬均于試驗當天和21日齡斷奶時分別稱重，并統計其增重和有活情況。其結果如下表所示表1仔豬注射黃芪多糖鐵注射液后血液血紅蛋白含量表
從上表可以看出，注射本發明所研制的黃芪多糖鐵注射液后右旋糖酐鐵組、生理鹽水對照組進行比較，血紅蛋白分別增加了 80. 9%和60. 8%。表2仔豬注射黃芪多糖鐵注射液后增重情況表
權利要求
1.一種豬用黃芪多糖鐵原料藥，其特征在于該原料藥的組分及其重量份數比為黃芪多糖15-50份；鐵鹽10-45份。
2.根據權利要求1所述的豬用黃芪多糖鐵原料藥，其特征在于所述的鐵鹽為三氯化鐵、硝酸鐵、檸檬酸鐵、醋酸鐵、高氯酸鐵，檸檬酸鐵銨、硝酸鐵銨或者甘油磷酸鐵的其中一種。
3.—種如權利要求1所述的豬用黃芪多糖鐵原料藥的制備方法，其特征在于該制備方法的步驟為(1)黃芪多糖的提取取黃芪用重量比1 1. 5 3的蒸餾水對黃芪進行預浸過夜得到預浸液，向預浸液中加入等重量的濃度為35% 70%乙醇溶液，然后用微波處理3次， 20 60s/次，得到微波輔助提取液；向微波輔助提取液中按重量比1 5 10加入濃度為35% 70%乙醇溶液，調pH值至3 5后，再用超聲儀提取兩次，15 40min/次，溫度控制為20°C，得到超聲儀提取液；將超聲儀提取液過濾后，濾液備用，濾過的殘渣用蒸餾水反復洗滌至無色，洗液與濾液合并，濃縮得到濃縮液，濃縮液過濾后采用大孔吸附樹脂柱分離，得分離液；并用蒸餾水洗脫樹脂柱至洗脫液無色，收集洗脫液，合并分離液和洗脫液進行濃縮，然后加3倍量濃度為75%乙醇溶液進行醇沉，室溫靜置8 1 后抽濾，真空干燥， 得黃芪多糖；(2)豬用黃芪多糖鐵原料藥的制備按照重量配比稱取鐵鹽，并將鐵鹽配制成濃度為0. 05mol/L 8mol/L的鐵鹽溶液備用；按重量配比稱取黃芪多糖用蒸餾水溶解，得到溶液A，加入溶液A重量1/5的檸檬酸三鈉，繼續攪拌溶解，得到溶液B，然后加入溶液B重量1 3倍的濃度為10 % 25 %的堿液， 攪拌均勻，緩慢滴加完0. 05mol/L 8mol/L的鐵鹽溶液后得到混合液C，將混合液C的pH 值調至9 13后，在70 80°C熱水浴中攪拌1. 5 3h，再在40 60°C溫度下進行離心處理3 lOmin，轉速為4000r/min ；取離心后的上層深紅棕色液體，加入乙醇，至溶液紅棕色沉淀物質沉淀完全，過濾后，將沉淀物微波處理2 5min后，靜置過夜，對靜置過夜后的沉淀物進行離心3 5min，轉速為4000r/min，真空干燥后，得紅褐色粉末，將紅褐色粉末溶于水，再用濃度為75% 95%乙醇沉淀，至無!^3+檢出，在50 70°C條件下烘干，即得到豬用黃芪多糖鐵原料藥成品。
4.根據權利要求3所述的豬用黃芪多糖鐵原料藥的制備方法，其特征在于所述的微波處理采用的參數為微波功率340 510W，壓力0. lOMPa，恒壓時間1 5min。
5.根據權利要求3所述的豬用黃芪多糖鐵原料藥的制備方法，其特征在于所述的超聲儀的頻率為20Hz 50Hz。
6.根據權利要求3所述的豬用黃芪多糖鐵原料藥的制備方法，其特征在于所述的鐵鹽為三氯化鐵、硝酸鐵、檸檬酸鐵、醋酸鐵、高氯酸鐵，檸檬酸鐵銨、硝酸鐵銨或者甘油磷酸鐵的其中一種。
7.根據權利要求3所述的豬用黃芪多糖鐵原料藥的制備方法，其特征在于所述的堿液為氫氧化鈉溶液、碳酸鈉溶液、氫氧化鉀溶液、氫氧化銨溶液或者碳酸鉀溶液的其中一種。
全文摘要
本發明涉及一種豬用黃芪多糖鐵原料藥，其原料藥的組分及其重量份數比為黃芪多糖15-50份；鐵鹽10-45份，本發明還涉及豬用黃芪多糖鐵原料藥的制備方法，包括黃芪多糖的提取以及豬用黃芪多糖鐵原料藥的合成。本發明原料藥質量穩定、生產成本較低，能夠有效增強機體免疫力，提高仔豬存活率、使其營養成分更加均衡全面，制作工藝簡單。
文檔編號A61K31/194GK102198151SQ20111012868
公開日2011年9月28日 申請日期2011年5月18日 優先權日2011年5月18日
發明者安同偉, 李迎梅, 陳慶忠 申請人:天津中敖生物科技有限公司