專利名稱：一種中藥組合物在制備治療臟器纖維化的藥物中的應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及ー種中藥組合物的新用途，具體地，涉及ー種中藥組合物在制備治療臟器纖維化的藥物中的應用。
背景技術：
統計資料顯示，近幾年中老年人死亡病例中，有47%與器官組織纖維化有關，纖維化性疾病已成為導致中老年人死亡和殘疾的首要因素。纖維化對許多人來說還比較陌生，其實纖維化通俗地說就是器官的硬化，它會直接導致肺、肝、腎、心血管、腦等重要臟器功能衰竭而致人死亡。專家認為，纖維化性疾病早期無明顯癥狀，極易被疏忽，近年來發病率大幅上升，僅我國就有I. 6億人因高血壓導致器官纖維化，中老年人特別是慢性病患者應引起高度警惕。常見的臟器纖維化有肺纖維化、肝纖維化、腎纖維化和心肌纖維化。
肺纖維化(pulmonary fibrosis, PF)是ー種早期以肺泡炎癥,后期以大量成纖維細胞(fibroblast, FB)異常增埴轉型和細胞外基質(extracellular matrix, ECM)大量沉積為主要表現特點的肺間質疾病GEISER T. Idiopathic pulmonary fibrosis-a disorderof alveola wound repair [J]. Swiss Med ffkly,2003,133(29 — 30):405 — 11.。肺纖維化病理特征是肺泡上皮損傷、成纖維細胞灶的形成以及細胞外基質的過度沉積，最終導致了肺組織結構的異常重塑。涉及到細胞、細胞因子、細胞外基質(ECM)等因素間的相互作用，是多種因素、多個環節參與的過程。近年來，隨著分子生物學技術的發展和改進，人們發現許多細胞因子，炎癥介質以及多種細胞都與肺纖維化的發生有關，如轉化生長因子(TGF-β)、Y-干擾素(IFN-γ)、腫瘤壞死因子(TNF-α)、血小板源生長因子(I3DGF)、胰島素樣生長因子(IGF-I)、白介素-1 (IL-I)和白介素-8(IL_8)等。目前，細胞因子在介導炎癥及其后的纖維化過程中所起的作用日益受到重視，這些細胞因子之間相互作用，相互協調，形成一個復雜而多變的細胞因子網絡，在肺纖維化形成中起著重要的調控作用。治療肺纖維化的藥物有I)抑制炎癥反應，如糖皮質激素類；2)抑制ECM合成促進ECM降解，如Y干擾素(IFN-Y );3)細胞因子抑制劑，目前尚在動物實驗階段，未應用于臨床；4)復方中藥治療，如復方鱉甲軟肝片等。此外還有報道采用基因治療與移植治療。各種原因導致的急、慢性肝損傷進程中由于肝內纖維生成與降解失衡，導致肝臟細胞外基質(ECM)中過多的膠原纖維在肝內沉積而誘發肝纖維化漆德芳.肝硬化[M].北京科學技術出版社，2007 107.。肝纖維化是各種疾病引起的慢性肝損傷后的ー種損傷修復反應，是肝硬化的早期可逆階段，如不及時治療則會進展成代償期肝硬化并出現各種終末期肝病并發癥，肝硬化及其并發癥已經成為全球發病與死亡的主要因素之一，肝纖維化是許多肝病終末期復雜病癥的發病基礎，肝纖維化是多種慢性肝病發展至肝硬化的必經階段。其發病機制從現代生物化學角度來看，肝纖維化是肝臟細胞外基質(ECM)合成増加和(或)降解減少所導致的ECM過度沉積；從細胞生物學角度來看，肝纖維化是產生膠原的肝臟間質細胞(主要是肝星狀細胞，HSC)被激活從而發生增生并合成、分泌大量ECM的結果；從分子生物學角度來看，肝纖維化是各種細胞因子所導致的基因表達調節異常，即ECM基因表達增強，降解ECM的酶類基因表達下降。其中，HSC是肝纖維化形成過程中的關鍵細胞。HSC位于肝竇間隙，生理條件下處于靜息狀態，可分泌一些細胞因子如肝細胞生長因子(HGF)、內皮細胞生長因子(EGF)，它們在維持肝臟結構及通過深入肝竇的偽足調節肝竇血流方面發揮重要作用。當肝竇受到各種病因刺激吋，HSC表型和功能均可發生變化。研究發現HSC増殖抑制和凋亡增加會實現肝臟炎癥反應減輕和肝纖維化消退。治療肝纖維化的藥物有1)抑制肝臟炎癥，如糖皮質激素類、TNF-α抗體、內皮素受體A拮抗劑、前列腺素等；2)抑制ECM合成促進ECM降解，如Y干擾素(IFN-Y );3)抑制HSC活化和増殖促進HSC凋亡，抗氧化劑如維生素Ε、多烯磷脂酰膽堿、水飛薊素和S2腺苷蛋氨酸(SAM);4)中藥治療，如扶正化瘀膠囊(片)、復方鱉甲軟肝片、安絡化纖丸和強肝膠囊等。此外還有報道采用基因治療與干細胞治療。腎纖維化是腎臟對慢性損傷的病理修復反應，是多種慢性腎病的共同病理基礎與 慢性腎病向終末期腎衰竭進展的重要過程王海燕.腎臟病學.北京人民衛生出版社，2001 :597。腎纖維化包括腎小球硬化和腎小管間質纖維化，而腎小管間質的纖維化與慢性腎臟病的預后更密切相關。防止和延緩腎纖維化也就成為防治慢性腎臟病進展的關鍵。腎纖維化的發生機制是ー個非常復雜的慢性病理過程，很多細胞介質和生長因子都直接或間接參與了這ー過程，主要有I)細胞生長因子的作用，包括促纖維化的轉化生長因子β (TGF-β)、成纖維細胞生長因子(FGF)、血管緊張素II (Ang- II )和起保護作用的肝細胞生長因子(HGF) ;2)腎小管上皮細胞ー肌成纖維細胞轉分化過程的作用，包括表達α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)的肌成纖維細胞、細胞外基質成分如膠原(I、III、IV)、纖維連接蛋白(FN)等；3)信號轉導通路的作用，包括Smad依賴性信號轉導通路(主要是Smad2、Smad3和起負調節作用的Smad7)和非TGF-β依賴的Smad信號轉導通路(如ERK/P38MAPK)。 腎纖維化的西藥治療有I)吡非尼酮，是ー種新型抗瘢痕藥物，其可阻止甚至逆轉細胞外基質(ECM)沉積，在肺間質纖維化、腹膜硬化、心臟纖維化及腎纖維化中已被證實；
2)松弛素，是胰島素生長因子家族的成員；3)肝細胞生長因子；4)骨形態發生蛋白；5)戊ニ酸單酰輔酶A還原酶抑制劑；6)血管緊張素轉化酶抑制劑和血管緊張素受體拮抗劑。復方中藥治療有1)血府逐瘀膠囊；2)腎炎康復片；3)腎炎康復片；4)腎炎康復片。心肌纖維化是指在心肌的組織結構中膠原纖維過量積聚、其膠原濃度顯著升高或膠原容積分數顯著增加姜秀春，姜秀麗，李樹青。心肌纖維化發病機制和防治的研究進展。醫學綜述，2006年8月第12卷第15期931。近年來大量研究表明，心肌纖維化可發生于高血壓、心肌梗死及心カ衰竭等許多心血管疾病。它是多種心臟疾病發展到一定階段的共同病理改變，是心肌重構的主要表現之一，可致心肌僵硬度増加、心室舒張功能減退、冠狀動脈儲備下降，甚至引起猝死。心肌纖維化是膠原合成代謝和降解代謝失衡的結果，其形成機制非常復雜，主要有1)腎素-血管緊張素-醛固酮系統(RAAS):血管緊張素II (Ang )和醛固酮(ALD)是RAAS的主要效應分子，通過不同作用機制參與心肌纖維化的發生；2)內皮素(ET):是ー種作用極強的縮血管活性多肽，以自分泌、旁分泌方式調節局部血管緊張度，其作用和Ang II有多方面的相似性；3) —氧化氮(NO) ；4)轉化生長因子-β I (TGF2 β I ) TGF2^ I是ー種多功能的蛋白肽，它能增加以膠原為主的間質蛋白質的合成，是諸多因素導致心肌纖維化最后的共同中介之一 ；5)結締組織生長因子(CTGF) ；6)細胞內Ca2+。治療心肌纖維化的藥物有I)血管緊張素轉換酶抑制劑(ACEI) =ACEI是目前治療心肌纖維化的藥物中研究最多，結果也較為肯定的一類藥物；2)AT1受體阻斷劑；3) Ca通道阻滯劑；4)醛固酮拮抗劑；5)中藥強心沖劑、心衰顆粒、天麻鉤藤飲、益氣活血合剤、參附注射液。本發明是在中國專利ZL 02146573. 8的基礎上進行的改進發明，在此全文引用該專利文件記載的內容。中國專利ZL 02146573. 8未記載該中藥組合物在制備治療臟器纖維化的藥物中的應用。
發明內容
本發明目的是提供一種中藥組合物在制備治療臟器纖維化的藥物中的應用。 本發明藥物是運用絡病理論研制而成的中成藥，由黃芪、人參、丹參等11味中藥組成，以益氣溫陽藥為治絡強心之本，輔以活血通絡藥，使氣旺血行絡通，阻斷血瘀絡阻，可以有效治療臟器纖維化。本發明中藥組合物中，作為活性組分的原料藥的拉丁名及其加工方法來自《中藥大辭典》(1977年7月，第一版，上海科學技術出版社)和《中國藥典》(2010年版，中國醫藥科技出版社)。本發明中藥組合物由如下重量份的原料藥制成
黃芪150-450份、附子40-120份、人參或黨參75-225份、丹參75-225份、葶藶子50-150份、香加皮或南五加皮60-180份、澤瀉75-225份、玉竹25-75份、桂枝30-90份、紅花30-90份、陳皮25-75份；
優選地，所述中藥組合物由如下重量份的原料藥制成黃芪450份、附子112. 5份、人參或黨參225份、丹參225份、葶藶子150份、香加皮或南五加皮180份、澤瀉225份、玉竹75份、桂枝90份、紅花90份、陳皮75份；
或
黃芪250份、附子112. 5份、人參或黨參200份、丹參120份、葶藶子135份、香加皮或南五加皮150份、澤瀉200份、玉竹60份、桂枝75份、紅花75份、陳皮60份。本發明還提供了所述中藥組合物的活性成分由下列步驟制成
(1)將黃芪、葶藶子、澤瀉、人參或黨參、香加皮或南五加皮用70%こ醇提取，濾過，濃縮至在60°C熱測時相對密度為I. 25-1. 30的清膏；
(2)提取桂枝、陳皮的揮發油；提油后的水溶液濾過，收集水溶液濾液，再加水煎煮殘渣I小時，濾過，合并水溶液，得提油后水提液；
(3)附子、丹參、玉竹、紅花加水煎煮2次，合并提取液，濾過；與步驟(2)所得水提液合并，濃縮至在60°C熱測時相對密度為I. 25-1. 30清膏，放冷，攪拌中加入こ醇，至醇濃度70%，靜置，濾過，濾液濃縮至在60°C熱測時相對密度為I. 25-1. 30的清膏；
(4)將步驟(I)所得清膏與將步驟(3)所得清膏混合，烘干，粉碎，加入步驟(2)所得揮發油，即得。
本發明中藥組合物還可以按常規的制劑エ藝，例如，范碧亭《中藥藥劑學》(上海科學出版社1997年12月第I版)記載的制備エ藝，制成藥劑學可接受的任意常規劑型，例如膠囊劑、片劑、顆粒劑、散剤、ロ服液或丸劑等。為使上述劑型能夠實現，需在制備這些劑型時加入藥學可接受的輔料，如范碧亭《中藥藥劑學》(上海科學出版社1997年12月第I版)中各劑型記載的輔料，例如填充劑、崩解劑、潤滑剤、助懸劑、粘合剤、甜味劑、矯味劑、防腐剤、基質等。填充劑包括淀粉、預膠化淀粉、乳糖、甘露醇、甲殼素、微晶纖維素、蔗糖等；崩解劑包括淀粉、預膠化淀粉、微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉、交聯聚こ烯吡咯烷酮、低取代羥丙纖維素、交聯羧甲基纖維素鈉等；潤滑劑包括硬脂酸鎂、十二烷基硫酸鈉、滑石粉、ニ氧化硅等；助懸劑包括聚こ烯吡咯烷酮、微晶纖維素、蔗糖、瓊脂、羥丙基甲基纖維素等；粘合劑包括，淀粉漿、聚こ烯吡咯烷酮、羥丙基甲基纖維素等；甜味劑包括糖精鈉、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矯味劑包括甜味劑及各種香精；防腐剤包括尼泊金類、苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸及其鹽類、苯扎溴銨、醋酸氯こ定、桉葉油等；基質包括PEG6000，PEG4000，蟲蠟等。本發明還提供了該中藥組合物膠囊劑的制備方法
(1)按比例稱取黃芪、葶藶子、澤瀉、人參或黨參、香加皮或南五加皮，加入8倍量70%乙醇回流提取2次，第一次3小時，第二次2小時，合并提取液，濾過，濾液減壓回收こ醇，濃縮至在60°C熱測時相對密度為I. 25-1. 30的清膏，備用；
(2)按比例稱取桂枝、陳皮，提取揮發油；提油后的水溶液濾過，備用，殘渣再加8倍量水煎煮I小時，濾過，合并水溶液，得提油后水提液，備用；
(3)按比例稱取附子、丹參、玉竹、紅花，加水9倍量，煎煮2次，毎次2小時，合并提取液，濾過，與步驟(2)所得水提液合并，濃縮至在60°C熱測時相對密度為I. 25-1. 30的清膏，放冷，攪拌中加入こ醇，至醇濃度70%，4°C以下靜置24小時，濾過，濾液減壓回收こ醇，濃縮至在60°C熱測時相對密度為I. 25-1. 30的清膏，備用；
(4)將步驟(I)所得清膏與將步驟(3)所得清膏混合，65-70°C烘干，粉碎成100目粉，加70%こ醇適量制粒，加入步驟(2)所得揮發油，混勻，裝膠囊，即得。本發明中藥組合物的用量，按活性組分原料藥總重量計，為4-20克/日，可毎日服用一次，優選為分2-4次服用；還優選為6-12克/日，分2-4次服用；更優選為7. 59克/日，分3次服用。本發明中藥組合物治療的臟器纖維化優選為肺纖維化、肝纖維化、腎纖維化或者心肌纖維化。實驗例I :
為闡明本發明中藥組合物治療肺纖維化的療效，用按實施例I方法所制得的藥物(以下稱本發明藥物)進行了下列試驗。材料與方法
I.I造模SD大鼠，雄，200-220g，48只，購自北京維通利華實驗動物技術有限公司。45mg/kg無巴比妥鈉麻醉后氣管內注射博來霉素(5mg/kg)進行造摸。I. 2分組大鼠隨機分為模型組、本發明藥物組、陽性藥組，每組12只，另設假手術組。本發明藥物由石家莊以嶺藥業股份有限公司提供，按本發明藥物臨床用量的10倍，即O. 6g/kg/d溶于蒸餾水，于造模后次日灌胃給藥連續4周。陽性藥組給醋酸潑尼松，江蘇徐州平光制藥有限責任公司生產，給藥劑量為6mg/kg，為臨床劑量的10倍。模型組和假手術組大鼠在相同時間點給予等量蒸餾水灌胃。I. 3指標檢測
1.3. I 4周后，將大鼠用10%水合氯醛麻酔，分離血清，檢測血清中白介素4 (IL-4)、Y干擾素(IFN- Y )。I. 3. 2肺臟組織羥脯氨酸(Hyp)、轉化生長因子β I (TGF-β I)、透明質酸(HA)測定分別稱取取肺組織100 mg在冰浴下制成5%組織勻衆,4 V 4 000 r /min離心15min,取上清液按試劑盒說明書操作。1.3.3 病理形態學檢測肺組織，10%中性福爾馬林固定，石蠟包埋，進行HE染色，光鏡下觀察肺臟形態學變化。
I. 4統計方法
所有數據用均數土標準差(i
±■5)表示。采用SPSS統計軟件包，進行T檢驗。2 結果
2. I 血清及肺組織指標的變化與假手術組比較，模型組血清IL-4、及肺組織Hyp、丁6 -01、撤含量明顯升高び〈0.01);陽性藥組與模型組比較，上述指標均明顯降低(P〈0. 01或P〈0. 05);本發明藥物組與模型組比較上述指標均明顯降低(P〈0. 01或P〈0. 05)；模型組血清IFN-Y含量明顯降低(P〈0. 01)，本發明藥物、陽性藥組與模型組比較IFN-Y含量明顯升高(P〈0. 05);且本發明藥物組與陽性藥組比較未見明顯差異。見表I。表I各實驗組血清及肺組織指標的比較
權利要求
1.一種中藥組合物在制備治療臟器纖維化的藥物中的應用，其特征在于所述中藥組合物由如下重量份的原料藥制成 黃芪150-450份、附子40-120份、人參或黨參75-225份、丹參75-225份、葶藶子50-150份、香加皮或南五加皮60-180份、澤瀉75-225份、玉竹25-75份、桂枝30-90份、紅花30-90份、陳皮25-75份。
2.如權利要求I所述的應用，其特征在于所述中藥組合物由如下重量份的原料藥制成 黃芪450份、附子112. 5份、人參或黨參225份、丹參225份、葶藶子150份、香加皮或南五加皮180份、澤瀉225份、玉竹75份、桂枝90份、紅花90份、陳皮75份。
3.如權利要求I所述的應用，其特征在于所述中藥組合物由如下重量份的原料藥制成 黃芪150份、附子40份、人參或黨參225份、丹參225份、葶藶子50份、香加皮或南五加皮180份、澤瀉75份、玉竹75份、桂枝30份、紅花90份、陳皮25份。
4.如權利要求I所述的應用，其特征在于所述中藥組合物由如下重量份的原料藥制成 黃芪250份、附子112. 5份、人參或黨參200份、丹參120份、葶藶子135份、香加皮或南五加皮150份、澤瀉200份、玉竹60份、桂枝75份、紅花75份、陳皮60份。
5.如權利要求1-4任一所述的應用，其中所述中藥組合物的活性成分由如下步驟制成 (1)將黃芪、葶藶子、澤瀉、人參或黨參、香加皮或南五加皮用70%乙醇提取，濾過，濃縮至在60°C熱測時相對密度為I. 25-1. 30的清膏； (2)提取桂枝、陳皮的揮發油；提油后的水溶液濾過，收集水溶液濾液，再加水煎煮殘渣I小時，濾過，合并水溶液，得提油后水提液； (3)附子、丹參、玉竹、紅花加水煎煮2次，合并提取液，濾過；與步驟(2)所得水提液合并，濃縮至在60°C熱測時相對密度為I. 25-1. 30清膏，放冷，攪拌中加入乙醇，至醇濃度70%，靜置，濾過，濾液濃縮至在60°C熱測時相對密度為I. 25-1. 30的清膏； (4)將步驟(I)所得清膏與將步驟(3)所得清膏混合，烘干，粉碎，加入步驟(2)所得揮發油，即得。
6.如權利要求5所述的應用，其特征在于所述的活性成分的藥物制劑為膠囊劑、片劑、顆粒劑、散劑、口服液或丸劑。
7.如權利要求1-4中任一項所述的應用，其特征在于所述中藥組合物的藥物制劑為膠囊劑、片劑、顆粒劑、散劑、口服液或丸劑。
8.如權利要求6所述的應用，其特征在于所述中藥組合物膠囊劑是由以下步驟制成 (1)按比例稱取黃芪、葶藶子、澤瀉、人參或黨參、香加皮或南五加皮，加入8倍量70%乙醇回流提取2次，第一次3小時，第二次2小時，合并提取液，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至在60°C熱測時相對密度為I. 25-1. 30的清膏，備用； (2)按比例稱取桂枝、陳皮，提取揮發油；提油后的水溶液濾過，備用，殘渣再加8倍量水煎煮I小時，濾過，合并水溶液，得提油后水提液，備用； (3)按比例稱取附子、丹參、玉竹、紅花，加水9倍量，煎煮2次，每次2小時，合并提取液，濾過，與步驟(2)所得水提液合并，濃縮至在60°C熱測時相對密度為I. 25-1. 30的清膏，放冷，攪拌中加入乙醇，至醇濃度70%，4°C以下靜置24小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至在60°C熱測時相對密度為I. 25-1. 30的清膏，備用； (4)將步驟(I)所得清膏與將步驟(3)所得清膏混合，65-70°C烘干，粉碎成100目粉，加70%乙醇適量制粒，加入步驟(2)所得揮發油，混勻，裝膠囊，即得。
9.如權利要求1-4中任一所述的應用，其特征在于所述臟器纖維化為肺纖維化、肝纖維化、腎纖維化或者心肌纖維化。
全文摘要
本發明公開了一種中藥組合物在制備治療臟器纖維化的藥物中的應用。本發明中藥組合物由黃芪、人參、丹參等11味中藥組成，具有益氣溫陽，活血通絡，利水消腫的功效。實驗研究證實，本發明中藥組合物可以有效治療臟器纖維化。
文檔編號A61P1/16GK102861230SQ201110186089
公開日2013年1月9日 申請日期2011年7月5日 優先權日2011年7月5日
發明者王永, 馬靜, 楊超, 魏聰 申請人:河北以嶺醫藥研究院有限公司