水丁香萃取物用于制備增強記憶功能及延緩神經退化的組合物的用途
【專利摘要】本發明公開了一種水丁香萃取物用于制備增強記憶功能及延緩神經退化的組合物中的用途及一種水丁香萃取物用于制備治療阿茲海默癥的組合物的應用。利用水丁香萃取物作為活性成分，可以制備得增強記憶功能及延緩神經退化的醫藥組合物或食品組合物供阿茲海默癥患者使用。
【專利說明】水丁香萃取物用于制備增強記憶功能及延緩神經退化的組合物的用途
【技術領域】
[0001]本發明涉及水丁香(Ludwigia octovalvis)萃取物,具體而言,本發明涉及一種水丁香萃取物用于制備增強記憶功能及延緩神經退化的組合物的用途。
【背景技術】
[0002]隨著全球人口邁向高齡化,阿茲海默癥(Alzheimer, s disease)也成為許多國家面臨的問題，據研究估計，全世界約有超過2，400萬人罹患此疾病。而當阿茲海默癥的病情越來越嚴重時，病患在生活各方面都需要他人的協助，如盥洗、進食及如廁等。由于阿茲海默癥患者需要人日夜看護，因此病患親友的生活往往也受到很大的影響。
[0003]阿茲海默癥在目前仍沒有準確診斷和有效治療的方法，也因此全球的科學家無不致力于研究開發新的藥物或療程。
[0004]因此，仍需要增強記憶功能及延緩神經退化的醫藥組合物或食品組合物。
【發明內容】
[0005]本發明提供一種水丁香萃取物于制備增強記憶功能及延緩神經退化的組合物的新穎用途。
[0006]本發明提出一種水丁香萃取物用于制備增強記憶功能及延緩神經退化的組合物的用途。`
[0007]本發明還提出一種水丁香萃取物用于制備治療阿茲海默癥的組合物的應用。
[0008]在一方面，本發明提供一種增強記憶功能及延緩神經退化的組合物，其包含有效量的水丁香(Ludwigia octovalvis)萃取物。
[0009]本發明提供一種治療阿茲海默癥的組合物，包含有效量的水丁香萃取物。
[0010]根據本發明，該水丁香萃取物可為水丁香水萃取物或水丁香醇類萃取物。
[0011]本發明的增強記憶功能及延緩神經退化的組合物可為醫藥組合物或食品組合物。
[0012]并且，該組合物為醫藥組合物，且包含有效量的水丁香萃取物及一醫藥可接受的載體。
[0013]在本發明的一具體實施例中，該水丁香萃取物是以包含下列步驟的方法制備:(a)以一工作液體萃取水丁香，得水丁香萃取液及殘余物；(b)分離該殘余物 '及(C)以一干燥制程干燥該水丁香萃取液得到該水丁香萃取物。
[0014]其中，在步驟(C)的后更包含一步驟(d)，以該工作液體回溶該水丁香萃取物，且該水丁香萃取物的濃度介于0.005%至0.5%。
[0015]其中，在步驟(a)中以該工作液體萃取水丁香4~12小時。
[0016]其中，該工作液體的溫度為2~10°C。
[0017]其中，在步驟(a)中以該工作液體萃取水丁香4~12小時后，更加熱10~60分鐘。[0018]其中，在步驟(b)之后更包含一步驟(bl)，其將分離出的該水丁香殘渣浸置于另一萃取工作液體中，并對該萃取工作液體進行加熱與過濾，以產生一水丁香二次萃取液，然后再將該水丁香二次萃取液溶入該水丁香萃取液中。
[0019]其中，該加熱的溫度為50~100°C。
[0020]其中，該水丁香萃取物為水丁香乙醇萃取物。
[0021]采用本發明，可以利用水丁香萃取物作為活性成分，配合本領域的公知技術，制備得增強記憶功能及延緩神經退化的醫藥組合物或食品組合物供阿茲海默癥患者使用。
[0022]無須進一步的闡述， 申請人:相信本領域技術人員基于前述說明即可利用本發明至最廣的程度。因此，可以理解以下的說明僅僅是作為示例說明之用，而非以任何方式限制其余的公開內容。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0023]圖1顯示了水丁香萃取物的濃度與果蠅學習記憶之間的關系；
[0024]圖2顯示了水丁香萃取物的濃度與小鼠記憶功能之間的關系(對象認知實驗)'及
[0025]圖3顯示了水丁香萃取物的濃度與小鼠記憶功能之間的關系(架高式T字迷宮測試)。
【具體實施方式】
[0026]除非另有指明，所有在此處使用的技術性和科學性術語具有如同本發明所屬【技術領域】的技術人員一般所了解的意義。
[0027]本文所使用的“一”一詞，如未特別指明，是指至少一個(一個或一個以上)的數量。
[0028]本發明公開了水丁香萃取物于制備增強記憶功能及延緩神經退化的組合物的新穎用途及水丁香萃取物用于制備治療阿茲海默癥的組合物的應用。本領域技術人員可以利用水丁香(Ludwigia octovalvis)萃取物的增強記憶功能及延緩神經退化的活性,利用水丁香萃取物作為活性成分，配合本領域的公知技術，制備得增強記憶功能及延緩神經退化的醫藥組合物或食品組合物供阿茲海默癥患者使用。
[0029]根據本發明，水丁香萃取物可為水丁香水萃取物或水丁香醇類萃取物，其可借由本領域中公知的天然物或草藥萃取方法萃取而得。例如，可將水丁香浸置于一工作液體進行萃取，該工作液體較佳為無毒且安定性佳的溶劑。在本發明特定具體實施例中，該水丁香水萃取物是為乙醇萃取物。
[0030]在本發明的一具體實施例中，該水丁香萃取物是以包含下列步驟的方法制備:(a)以一工作液體萃取水丁香(Ludwigia octovalvis),得水丁香萃取液及殘余物；(b)分離該殘余物 '及(C)以一干燥制程干燥該水丁香萃取液得到該水丁香萃取物。在另一具體實施例中，該方法更包含:(d)以該工作液體溶解該水丁香萃取物，使該水丁香萃取物的濃度介于0.005%至0.5%。根據本發明的特定具體實施例，在步驟(a)以該工作液體萃取水丁香.4~12小時，其中該工作液體的溫度為2~10°C。在另一具體實施例中，在步驟(a)以該工作液體萃取水丁香4~12小時后，更加熱10~60分鐘。此外，在步驟(a)中，可將水丁香磨碎后再進行萃取。在本發明的部分具體實施例中，在步驟(a)將水丁香浸置于工作液體萃取一段時間后后，更將該萃取工作液體加熱至50~100°C進一步萃取。當工作液體為醇類時，可使用隔水加熱。在本發明的一具體實施例中，步驟(b)是利用離心過濾分離該殘余物。根據本發明，步驟(C)中的干燥制程可使用本領域所公知的方法，例如，冷凍干燥或減壓濃縮。根據本發明的特定具體實施例，在步驟(b)的后更包含:(bl)以一工作液體萃取該殘余物，加熱及過濾后得一水丁香二次萃取液，然后將該水丁香二次萃取液溶入該水丁香萃取液中。
[0031]本發明提供一種增強記憶功能及延緩神經退化的組合物，其包含有效量的水丁香(Ludwigia octovalvis)萃取物。本發明還提供一種治療阿茲海默癥的組合物,包含有效量的水丁香萃取物。
[0032]在本文中所使用的“有效量”一詞是指對于受試者具有增強記憶功能及延緩神經退化效果的水丁香萃取物的量，不論是單一投予或是與其它活性物質共同投予。如同本領域技術人員所知，治療有效量會隨著投予途徑、賦形劑使用量以及與其它活性物質的共同給予的變化而改變。
[0033]在本文中所使用的“治療”一詞是指治愈、舒緩、減輕、改變、改善疾病、疾病癥狀或阻止疾病的進程。
[0034]在本文中所使用的“延緩神經退化” 一詞是指緩解、減輕或改善神經退化的癥狀，包括但不限于記憶功能降低或衰退，例如，緩解阿茲海默癥所造成的記憶功能降低或衰退。
[0035]本發明的組合物可為醫藥組合物或食品組合。本發明的醫藥組合物或食品組合物可借由本發明所屬【技術領域】中所普遍知悉的操作方法，將水丁萃取物與現有的載劑、稀釋齊?、溶劑、著色劑、抗氧化劑、惰性物質及/或其它添加劑調配成錠劑、膠囊、粉劑、粒劑、沖劑、飲料、健康食品或食品添加劑。
[0036]用于口服的組合物 可為任何適于口服的形式，例如但不限于，溶液、懸浮液、錠劑、丸劑、膠囊或粉末。若為錠劑，則可包含已知的賦形劑，例如乳糖或玉米淀粉。潤滑劑，例如硬脂酸鎂，也可通常性添加。若為膠囊型式，可使用的稀釋劑包括乳糖或玉米淀粉。若為水溶液或乳化劑型式，有效成分可懸浮、乳化或溶于油層中。可進一步選擇性地添加甜味劑、風味劑或著色劑。
[0037]在一方面，本發明提供一種增強記憶功能及延緩神經退化的醫藥組合物，其包含有效量的水丁香(Ludwigia octovalvis)萃取物。
[0038]醫藥組合物中可另外含有醫藥可接受的載體。本文所使用的“醫藥可接受的載體”一詞是指是指任何公知類型的無毒固體、半固體或液體的填充劑、稀釋劑、包膠囊材料、調配物輔助劑或賦形劑。醫藥可接受的載體是在所用的劑量及濃度下，對接受者無毒性，且可與該調配物的其它成分相容。醫藥可接受的載體一般均可由公眾輕易取得。此外，醫藥可接受的輔助物質，諸如，PH調節及緩沖劑、滲透壓調節劑、安定劑、濕潤劑及類似物，亦皆可由公眾取得。
[0039]適當的載體包括但不限于水、葡萄糖、甘油、鹽水、乙醇及其組合。載體可含有額外的試劑，諸如，濕潤及乳化劑、PH緩沖劑或佐劑，其可增強該調配物的有效性。局部性載體包括液體石油、棕櫚酸異丙酯、聚乙二醇、乙醇(95%)、溶于水中的聚氧乙烯單月桂酸酯(5%)或是溶于水中的十二烷基硫酸鈉(5%)。可視需要加入其它材料，諸如，抗氧化劑、保濕劑、粘度穩定劑及類似試劑。
[0040]另一方面，根據本發明的組合物較佳為食品組合物，其可為保健食品或機能性食品O
[0041]本發明的組合物可經由任何現有的方法施用。例如，可將呈注射液劑的本發明醫藥組合物施用于動物體。
[0042]此外，本發明的組合物較佳是經由口服投遞，借由消化是統與循環是統的傳遞，而將根據本發明的組合物運送至欲作用的位置。
[0043]本發明的其它特征將會經由以下各個實例中及權利要求書清楚呈現。所屬【技術領域】的技術人員可了解本發明具有各種實施方法，下述實例僅用以說明而非作為本發明的限制。
[0044]實例1:水丁香萃取物的制備
[0045]首先，將水丁香磨碎后以2~10°C的低溫于萃取工作液體中浸置4~12小時，然后將以50~100°C的溫度加熱10~60分鐘，得水丁香萃取液及殘余物。工作液體是為水或乙醇溶液。然后，利用離心過濾分離出殘余物。接著，將分離出的殘余物浸置于另一萃取工作液體中，并將此萃取工作液體以50~100°C的溫度加熱10~60分鐘后進行離心過濾，以產生一水丁香二次萃取液，然后再將水丁香二次萃取液溶入水丁香萃取液中。的后，利用一干燥制程將水丁香萃取液干燥為一水丁香萃取物；其中，當萃取工作液體為水時，可使用冷凍干燥法，而當萃取工作液體為乙醇溶液時，可使用減壓濃縮法。最后，以萃取工作液體回溶水丁香萃取物，使水丁香萃取物的濃度為0.005至0.5%。
[0046]實例2:水丁香萃取物增進記憶功能
[0047]以果妮學習記憶實驗(Pavlovianolfactory associative learning & memory)進行水丁香萃取物對記憶功能的影響，主要是利用果蠅嗅覺厭惡學習的方式，教導果蠅記憶氣味與輕微電擊刺激之間的關聯性:在果蠅聞到一個氣味的同時給予電擊，的后這只果蠅聞到這個味道時就會逃跑，這樣就得到一個選擇正確的分數，藉以依據此檢測來判斷學習記憶功能。將果蠅飼養在25°C的環境下，并將果蠅分成四組，對照組的喂食食物所含水丁香萃取物濃度為0%，實驗組的喂食食物所含水丁香萃取物濃度分別為0.005%、
0.01%及0.1%，于第20天時對果蠅進行學習記憶功能的實驗。每次實驗前先將各組果蠅放置于未含食物的空管，每組的果蠅約為100只(雄雌混合)，并在實驗前30分鐘預先放置于暗房內。本實驗所使用的氣味分別為3-辛醇(3-Octanol ；3-0ct)和4-甲基環己醇(4-Methylcyclohexanol ;4_MCH),分別以比例1.5:1000及1:1000溶于礦物油中，其皆屬果蠅厭惡的氣味。為了避免果蠅的趨旋光性影響實驗結果，實驗在暗房進行。首先，使果蠅暴露在第一種氣味3-0CT中60秒，在暴露于3-0CT的期間內是以1.5秒的電擊(強度為70伏特)與3.5秒的休息交替循環，緊接著休息45秒后再將果蠅暴露在另一個氣味4-MCH中60秒，并在暴露于4-MCH的其間內不給予電擊。休息30秒后，讓果蠅進行兩分鐘T字迷宮(Τ-maze)實驗，測試其對兩種氣味的選擇:在T字迷宮的兩端分別設有3-0CT與4-MCH的氣味，然后使果蠅進入T字迷宮，測試果蠅對3-0CT與4-MCH兩種氣味的選擇，據以判斷出果蠅的記憶功能。記憶指數的計算方式是將選擇味道4-MCH的果蠅數量減掉選擇味道3-0CT的果蠅數量，除以果蠅總數并乘100%。以上述第一步的方式將兩種氣味條件(電擊)交換再進行一次實驗，然后將兩次的實驗結果平均得平均的記憶指數。結果如圖1所示，對照組的記憶指數低于40%，水丁香萃取物濃度為0.005%的組別的記憶指數較高但低于60%，而水丁香萃取物濃度為0.01%的組別與0.1%的組別記憶指數更高(超過60%)，且以水丁香萃取物濃度0.01%的組別的記憶指數最高。
[0048]實例3:水丁香萃取物延緩神經退化
[0049]以3個月大的早衰小鼠(senescence-accelerated mouse prone-8，SAMP8,以下簡稱小鼠)進行實驗，在小鼠的飲水中加入水丁香萃取物，于3~4個月后進行記憶力測試；實驗所使用的小鼠壽命短且會有記憶力缺失，為合適的阿茲海默癥(神經退化)的實驗動物模式。小鼠記憶實驗首先是在三天的訓練期間內將飲用0%與0.01%水丁香萃取物的小鼠個別放置于開放空間盒(20x20x10英吋)內，使小鼠習慣開放空間盒；然后，于訓練期間內將兩個不同的訓練對象放置于開放空間盒內，允許小鼠在5分鐘內探索兩個不同的訓練物件。于一段時間后再進行記憶力測試時，小鼠被放置到相同的開放空間盒內，并將訓練期間所使用的其中一個訓練對象替換為新對象，允許小鼠自由探索5分鐘，并記錄小鼠探索訓練對象及新對象所花費的時間。而物件認知指數是由小鼠探索訓練對象或新對象的時間除以探索訓練對象及新對象的時間總和并乘100%。如圖2所示，在訓練期間結束后一小時進行記憶力測試時，飲用0%與0.01%水丁香萃取物的小鼠，其對新對象的對象認知指數皆明顯遠多于訓練對象的對象認知指數，即新物件的探索時間大于訓練物件的探索時間，顯示訓練后一小時內，兩組小鼠(0%與0.01%)都可區分訓練對象及新對象。而訓練后兩小時進行記憶力測試時，僅飲用0.01%水丁香萃取物的小鼠可區分訓練對象及新對象，意即小鼠記得訓練物件，花在訓練物件上的探索時間較少，進而得到較低的對象認知指數，而對于未見過的新物件較為好奇，花在新物件上的探索時間較多，進而得到較高的對象認知指數。相對的，飲用0%水丁香萃取物的小鼠則無法辨別訓練對象與新對象之間的差異，訓練對象與新對象的對象認知指數相近。上述實驗顯示水丁香萃取物確實可有效增強早衰小鼠的記憶能力。
[0050]此外，利用架高的T字迷宮進行小鼠的記憶能力測試，此T字迷宮相對稱的二端是開放的空間(無側壁)，而另一端則為封閉空間(周圍三側有側壁)。將小鼠分為飲用含有
0.01%水丁香萃取物的實驗組，以及飲用未含有水丁香萃取物濃度的對照組。然后將兩組小鼠放置于T字迷宮的封閉端，讓小鼠自由探索5分鐘，小鼠若于5分鐘內離開封閉端即終止訓練，30秒后再次將小鼠置于T字迷宮的封閉端，讓小鼠自由探索5分鐘，如此重復數次訓練直到小鼠5分鐘的時間都未離開T字迷宮的封閉端，小鼠因此習得封閉端相對于開放端為更安全的區域。在訓練結束24小時后，對小鼠進行記憶力測試，如圖3所示，實驗組的小鼠停留在封閉端的時間平均約230秒，而對照組的小鼠停留在封閉端的時間平均約120秒。由上述結果可知，由于實驗組的小鼠在經過24小時后仍記得T字迷宮的封閉端較安全，因此停留在封閉端的時間較長，而對照組的小鼠記憶則較差，因此不會刻意停留在封閉端，而對T字迷宮展開重新探索。
[0051]當然，本發明還可有其它多種實施例，在不背離本發明精神及其實質的情況下，熟悉本領域的技術人員可根據 本發明作出各種相應的改變和變形，但這些相應的改變和變形都應屬于本發明權利要求的保護范圍。
【權利要求】
1.一種水丁香萃取物用于制備增強記憶功能及延緩神經退化的組合物的用途。
2. 根據權利要求1所述的用途，其特征在于，該水丁香萃取物為水丁香水萃取物或水丁香醇類萃取物。
3.根據權利要求2所述的用途，其特征在于，該組合物為醫藥組合物，且包含有效量的水丁香萃取物及一醫藥可接受的載體。
4.根據權利要求1所述的用途，其特征在于，該水丁香萃取物的制備包括以下步驟: (a)以一工作液體萃取水丁香，得水丁香萃取液與殘余物； (b)分離該殘余物；以及 (c)利用一干燥工藝干燥該水丁香萃取液得到該水丁香萃取物。
5.根據權利要求4所述的用途，其特征在于，在步驟(c)的后更包含一步驟(d)，以該工作液體回溶該水丁香萃取物，且該水丁香萃取物的濃度介于0.005%至0.5%。
6.根據權利要求4所述的用途，其特征在于，在步驟(a)中以該工作液體萃取水丁香4~12小時。
7.根據權利要求6所述的用途，其特征在于，該工作液體的溫度為2~10°C。
8.根據權利要求6所述的用途，其特征在于，在步驟(a)中以該工作液體萃取水丁香4~12小時后，更加熱10~60分鐘。
9.根據權利要求4所述的用途，其特征在于，在步驟(b)之后更包含一步驟(bl)，其將分離出的該水丁香殘渣浸置于另一萃取工作液體中，并對該萃取工作液體進行加熱與過濾，以產生一水丁香二次萃取液，然后再將該水丁香二次萃取液溶入該水丁香萃取液中。
10.根據權利要求8所述的用途，其特征在于，該加熱的溫度為50~100°C。
11.根據權利要求2所述的用途，其特征在于，該水丁香萃取物為水丁香乙醇萃取物。
12.—種水丁香萃取物用于制備治療阿茲海默癥的組合物的應用。
13.根據權利要求12所述的用途，其特征在于，該水丁香萃取物為水丁香水萃取物或水丁香醇類萃取物。
14.根據權利要求13所述的用途，其特征在于，該組合物為醫藥組合物，且包含有效量的水丁香萃取物及一醫藥可接受的載體。
15.根據權利要求12所述的用途，其特征在于，該水丁香萃取物的制備包括以下步驟: (a)以一工作液體萃取水丁香，得水丁香萃取液與殘余物； (b)分離該殘余物；以及 (c)利用一干燥工藝干燥該水丁香萃取液得到該水丁香萃取物。
16.根據權利要求15所述的用途，其特征在于，在步驟(c)的后更包含一步驟(d)，以該工作液體回溶該水丁香萃取物，且該水丁香萃取物的濃度介于0.005%至0.5%。
17.根據權利要求15所述的用途，其特征在于，在步驟(a)中以該工作液體萃取水丁香4~12小時。
18.根據權利要求17所述的用途，其特征在于，該工作液體的溫度為2~10°C。
19.根據權利要求17所述的用途，其特征在于，在步驟(a)中以該工作液體萃取水丁香4~12小時后，更加熱10~60分鐘。
20.根據權利要求15所述的用途，其特征在于，在步驟(b)之后更包含一步驟(bl)，其將分離出的該水丁香殘渣浸置于另一萃取工作液體中，并對該萃取工作液體進行加熱與過濾，以產生一水丁香二次萃取液，然后再將該水丁香二次萃取液溶入該水丁香萃取液中。
21.根據權利要求19所述的用途，其特征在于，該加熱的溫度為50~100°C。
22.根據權利要求13所述的用途，其特征在于，該水丁香萃取物為水丁香乙醇萃取物。
23.一種增強記憶功能及延緩神經退化的組合物，其特征在于，包含水丁香萃取物。
24.一種治療阿茲海默癥的組合物，其特征在于，包含水丁香萃取物。
【文檔編號】A61P25/28GK103565857SQ201210545122
【公開日】2014年2月12日 申請日期:2012年12月14日 優先權日:2012年7月20日
【發明者】林哲豪 申請人:日觀實業股份有限公司