一種葡聚糖的應用的制作方法
【專利摘要】本發明涉及到一類來源于海星的葡聚糖在制備帕金森病藥物的應用。該葡聚糖主要為β（1→3）糖苷鍵連接，是從海洋海星等無脊椎類動物中提取并經過陰離子交換層析分離得到。該葡聚糖對神經毒素損傷兩種細胞系具有明顯的修復作用，表明它可以用于神經系統疾病如帕金森病和老年性癡呆的治療藥物和保健品的制備。
【專利說明】一種葡聚糖的應用
【技術領域】
[0001]本發明涉及葡聚糖在制備治療或預防帕金森病和老年性癡呆藥物或保健品中的應用。
【背景技術】
[0002]隨著人類平均壽命的逐年增加，世界正步入全球老齡化時代。與年齡有關的神經退化性疾病也隨之增加，在中樞神經系統方面，主要表現為興奮與抑制過程減弱，大腦功能降低，記憶力減退和喪失，隨后出現識別功能的進行性減退和情緒紊亂的加重等。老年性癡呆已成為心腦血管疾病和腫瘤之后的第四位疾病。目前，全世界65歲以上人群中老年性癡呆患病率約為5%。而老年性癡呆因其復雜的發病機理，近期在防治上不可能取得突破性進展，故西方有專家預言，老年性癡呆將是21世紀人類第一殺手。帕金森病又稱震顫麻痹，是中老年人常見的中樞神經系統變性疾病，帕金森病的主要病理特征是是因位于中腦部位"黑質"中的細胞發生病理性改變后，多巴胺的合成減少，抑制乙酰膽堿的功能降低，則乙酰膽堿的興奮作用相對增強。兩者失衡的結果便出現了“震顫麻痹”。最新資料表明，中國有I 7 O萬帕金森病患者，其中5 5歲以上的人群中每I O O人就有I個帕金森病人，估計每年新增帕金森病人約I Q萬人。老年性癡呆和帕金森病對患者、家庭和社會都帶來巨大的壓力，使得全世界對其給予眾多的關注，老年癡呆和帕金森病等神經退行性疾病的治療藥物研究成為老年醫學領域中的一個重要課題。
[0003]海洋是地球上所占面積最大的區域，因此開發海洋藥物越來越受到重視，而海洋物質提取在制備和開發抗帕金森藥物及在神經保護方面有著不可估計的社會和經濟效益。
[0004]海盤車，屬于棘皮動物門，海星綱，生活在潮間帶和近岸的平靜海域，以吞食各種貝類、軟體動物、海膽等為 食。海盤車作為中藥已有幾千年的歷史，具有鎮驚安神、和胃止痛、厚腸止瀉，清熱解毒等功效，主治胃酸過多、胃潰瘍、腹瀉、癲癇等癥。近年來，海盤車體內的活性成分相繼被發現，如留類糖苷，留醇，蛋白酶，氨基酸，多肽，蛋白多糖，脂類，生物堿等。但是以往的研究傾向于海盤車提取物中留類糖苷化合物的藥理學活性及其作用機理。而對海盤車多糖的研究卻不多。少量的文獻報道了海盤車酸性粘多糖具有抗凝血，抑制紅細胞凝聚及血栓形成等作用，但海盤車中其他多糖及生物活性卻鮮有報道。
【發明內容】
[0005]為解決上述問題，本發明提供一種葡聚糖在制備治療或預防帕金森病和老年性癡呆藥物或保健品中的應用。
[0006]為實現上述目的，本發明提供的技術方案是:
一種葡聚糖的應用，所述葡聚糖可在制備治療或預防帕金森病和老年性癡呆藥物或保健品中應用。
[0007]進一步的，所述的葡聚糖按照以下方法制備:采用熱水或稀酸提取海盤車中的水溶性多糖；然后所述水溶性多糖通過陰離子交換色譜進行分級，最后采用水洗脫并將得到的組分經過脫鹽、濃縮、干燥后即得。
[0008]進一步的，所述的陰離子交換色譜用介質包括二乙氨乙基型弱陰離子凝膠或強陰離子凝膠。
[0009]進一步的，所述二乙氨乙基型弱陰離子凝膠為二乙氨乙基交聯葡聚糖(DEAE-Sephadex), 二乙氨乙基纖維素(DEAE-纖維素)、二乙氨乙基交聯瓊脂糖凝膠(DEAE-瓊脂糖)中一種。
[0010]進一步的，所述強陰離子凝膠為Q-sepharose凝膠或Q-sephadex。
[0011]進一步的，所述的葡聚糖從羅氏海盤車或多棘海盤車中提取。
[0012]進一步的，所述的葡聚糖分子量為IKD~1000KD。
[0013]進一步的，所述的葡聚糖具有如下結構特征:
(1)組成糖為葡萄糖，所述葡萄糖包括β-葡萄糖和α-葡萄糖(以β-葡萄糖為主，并含有部分α-葡萄糖);
(2)葡萄糖以(1— 3)糖苷鍵連接。
[0014]與現有技術相比，本發明的有益效果在于:首次發現海盤車來源的葡聚糖具有顯著的神經保護作用，對帕金森病和老年性癡呆具有神經保護作用，可以用于制備治療帕金森病的藥物。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0015]圖1海盤車葡聚糖的紅外光譜圖；
圖2海盤車葡聚糖的1H-NMR譜圖；
圖3海盤車葡聚糖的DEPT-Q譜圖；
圖4海盤車葡聚糖的HMBC譜圖；
圖5海盤車葡聚糖的HSQC譜圖；
圖6海盤車葡聚糖的1H, 1H-COSY譜圖；
圖7海盤車葡聚糖的TOCSY譜圖。
【具體實施方式】
[0016]下面結合具體實施例，進一步闡述本發明。應理解，這些實施例僅用于說明本發明而不用于限制本發明的范圍。此外應理解，在閱讀了本發明的內容之后，本領域技術人員可以對本發明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附后權利要求書限定的范圍。
[0017]本發明指出一種葡聚糖，可在制備治療或預防帕金森病和老年性癡呆藥物或保健品中應用。所述葡聚糖的制備方法如下:
實施例1，
羅氏海盤車中葡聚糖的制備:
(I)將100g干羅氏海盤車，分別用3倍體積的異丙醇和乙醇浸泡脫脂處理，棄去有機溶劑，將海盤車干燥，得率為80%。
[0018](2)將脫脂的海盤車80g，用15倍體積的蒸餾水100°C提取3小時，過濾，提取液用用截留分子量為3000 Da超濾膜超濾脫鹽，超濾截留液減壓濃縮，凍干得海盤車多糖7.2g。
[0019](3)取上述凍干得到的海盤車多糖溶于水，配成質量濃度為2.5% (質量濃度)的水溶液，上樣到以DEAE-Sepharose-Fast Flow為載體的柱層析,依次用水和0.75 mol/L NaCl洗脫，收集各洗脫液，將水洗脫液和NaCl洗脫液分別用截留分子量為3000 Da的超濾膜超濾脫鹽，將超濾截留液凍干，其中水洗多糖組分為2.4g。
[0020]對水洗多糖組分進行單糖組成分析，結果如表1所示。結果表明水洗多糖組分全部由葡萄糖組成，不含硫酸基，表明其為葡聚糖。
[0021]
實施例2，
多棘海盤車中葡聚糖的制備:
(I)取100g干的多棘海盤車，分別用3倍體積的異丙醇和乙醇浸泡處理，棄去有機溶劑，將海盤車干燥，得率為82%。
[0022](2)將脫脂的海盤車82g，用3倍體積的0.01 M HCl提取3小時，過濾，提取液用堿中和至PH 6，用截留分子量為3500Da透析袋透析2天，濃縮透析袋內透析截留液，凍干得海盤車多糖8.lg。
[0023](3)取上述凍干得到的海盤車多糖溶于水，配成質量濃度為2.5% (質量濃度)的水溶液，上樣到以DEAE-Sepharose-Fast Flow為載體的柱層析,依次用水和0.75 mol/L NaCl洗脫，收集各洗脫液，將水洗脫液和NaCl洗脫液分別裝入截留分子量為3500 Da的透析袋以自來水流水透析2天，蒸餾水透析I天、分別凍干，其中水洗多糖組分為2.4g。
[0024]對水洗多糖組分進行單糖組成分析，結果如表1所示。結果表明水洗多糖組分全部由葡萄糖組成，不含硫酸基，表明其為葡聚糖。
[0025]表1海盤車中葡聚糖的化學分析
【權利要求】
1.一種葡聚糖的應用，其特征在于，所述葡聚糖可在制備治療或預防帕金森病和老年性癡呆藥物或保健品中應用。
2.根據權利要求1所述的葡聚糖的應用，其特征在于，所述的葡聚糖按照以下方法制備:采用熱水或稀酸提取海盤車中的水溶性多糖；然后所述水溶性多糖通過陰離子交換色譜進行分級，最后采用水洗脫并將得到的組分經過脫鹽、濃縮、干燥后即得。
3.根據權利要求2所述的葡聚糖的應用，其特征在于，所述的陰離子交換色譜用介質包括二乙氨乙基型弱陰離子凝膠或強陰離子凝膠。
4.根據權利要求3所述的葡聚糖的應用，其特征在于，所述二乙氨乙基型弱陰離子凝膠為二乙氨乙基交聯葡聚糖(DEAE-S印hadex)、二乙氨乙基纖維素(DEAE-纖維素)、二乙氨乙基交聯瓊脂糖凝膠(DEAE-瓊脂糖)中一種。
5.根據權利要求3所述的葡聚糖的應用，其特征在于，所述強陰離子凝膠為Q-sepharose 凝膠或 Q-sephadex。
6.根據權利要求2所述的葡聚糖的應用，其特征在于，所述的葡聚糖從羅氏海盤車或多棘海盤車中提取。
7.根據權利要求2所述的葡聚糖的應用，其特征在于，所述的葡聚糖分子量為IKD~1000KDo
8.根據權利要求2所述的葡聚糖的應用，其特征在于，所述的葡聚糖具有如下結構特征: (1)組成糖為葡萄糖，所述葡萄糖包括葡萄糖和α-葡萄糖； (2)葡萄糖以(1— 3)糖苷鍵連接。
【文檔編號】A61K31/716GK103919800SQ201310010388
【公開日】2014年7月16日 申請日期:2013年1月11日 優先權日:2013年1月11日
【發明者】張全斌, 張文靜, 金維華, 王晶 申請人:南通中國科學院海洋研究所海洋科學與技術研究發展中心, 中國科學院海洋研究所