一種包裹阿霉素的聚乙烯亞胺-聚乙二醇-肌酸共聚物膠束及其制備方法
【專利摘要】本發明公開了一種包裹阿霉素的聚乙烯亞胺-聚乙二醇-肌酸共聚物膠束及其制備方法，其制備方法包括：在吡啶的作用下合成雙羧基聚乙二醇共聚物；再用乙二胺端氨基化合成氨基-聚乙二醇-羧基共聚物；后肌酸和氨基連接，合成肌酸-聚乙二醇-羧基共聚物；將活化的肌酸-聚乙二醇-羧基和聚乙烯亞胺反應得到肌酸-聚乙二醇-聚乙烯亞胺共聚物。透析后得到肌酸-聚乙二醇-聚乙烯亞胺膠束。在聚乙二醇的兩端連接上聚乙烯亞胺和肌酸，以共聚物作為藥物載體形成泡囊包裹阿霉素。阿霉素在臨床上用于治療惡性腫瘤，但對機體正常組織器官有較大的損傷；本發明將肌酸同時連接到聚乙二醇的一端，且阿霉素包埋在藥物載體里面，而且在聚乙二醇一端連接上聚乙烯亞胺可增加穩定性。
【專利說明】一種包裹阿霉素的聚乙烯亞胺-聚乙二醇-肌酸共聚物膠束及其制備方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種新型的抗癌藥物的載體，特別涉及一種包裹阿霉素的聚乙烯亞胺-聚乙二醇-肌酸共聚物膠束及其制備方法。
【背景技術】
[0002]肌酸（creatine)學名為N-甲基胍乙酸，由精氨酸、甘氨酸及甲硫氨酸在體內合成，為肌肉等組織中貯存高能磷酸鍵的物質。而且肌酸是自然界中存在于人體內的一種氨基酸衍生物。由于肌酸不是激素，對人體的內分泌系統不會造成干擾和破壞，不會使人產生賴藥性或生理性副反應，所以近些年來肌酸大受歡迎。
[0003]但是由于肌酸的水溶性和滲透性都很低，不利于直接服用，所以對它進行修飾，使其轉化成更利于吸收的物質。于是通過將肌酸和聚乙二醇通過酰化反應連接在一起。
[0004]聚乙二醇（PEG)安全、無毒，具有油水二親性且具有良好的生物相容性的高分子化合物，是經FDA批準的極少數能作為體內注射藥用的合成聚合物之一。PEG與肌酸相連后，在機體內的滲透性大大的提高，有利于提高肌酸在胃與腸等消化系統的吸收，從而增強肌酸的生物活性，能夠夠增大肌酸的水溶性。
[0005]聚乙烯亞胺（polyethylenimine, PEI), PEI是目前應用較有效的聚陽離子型基因載體，它富含氨基可以與DNA鏈上負電性的磷酸根通過靜電作用締合成復合物，但由于PEI強的滲透作用，又表現出一定的細胞毒性。采用陽離子聚合物與非離子聚乙二醇的共聚物PEG-PEI作為載體，PEG在復合物的納米粒子表面形成中性的水溶性殼層避免粒子在血液中聚集，減少粒子在傳輸過程溶解性差、細胞毒性大和傳遞過程中沉積等不足，大大減少血液循環中血漿蛋白的調理作用和網狀內皮系統（REs)的吞噬，延長基因在血液循環中的半衰期。
[0006]抗癌藥物阿霉素（Doxoeubicin，DOX), DOX為葸環類抗腫瘤抗生素，因其抗瘤譜廣，對乏氧細胞有效，又為放射增敏劑，其在腫瘤治療中占有重要地位。但是DOX的毒性比較大，除了骨髓抑制、腸道的毒副作用外，長期使用的話可能引起藥物依賴的不可逆的心肌病變，引起嚴重的心臟毒性和肝臟損害。
[0007]中國專利201210290731. 5公開了一種聚乙烯亞胺-聚賴氨酸共聚物及其制備方法；中國專利201010188716. O公開了聚乙烯亞胺-殼聚糖-硬脂酸嫁接物及制備與應用；張璇等[張璇，潘仕榮，呂澍.聚乙二醇-聚乙烯亞胺共聚物的制備及其表征中山大學學報（自然科學版）2006 (06)]研究了聚乙二醇-聚乙烯亞胺共聚物的制備和表征；鄒芬等[鄒芬，潘一峰，張紅.聚乙二醇-聚乙烯亞胺/四氧化三鐵納米磁流體的毒性及其生物相容性，中國組織工程研究與臨床康復.2010 (3)]評價了聚乙二醇-聚乙烯亞胺/四氧化三鐵納米磁流體的毒性和生物相容性。可見聚乙二醇-聚乙烯亞胺共聚物是很好的嵌段共聚物載體。
【發明內容】
[0008]本發明的目的在于提供一種具有載藥量高、減少毒副作用、具備體內長循環的具有緩釋藥物的藥物載體，通過物理化學方法將藥物包埋進載體中，提供了該化合物膠束的制備方法。
[0009]兩組分形成的嵌段共聚物聚乙二醇-聚乙烯亞胺（PEG-PEI)具有親水性和疏水性，將疏水性抗癌藥物裹在聚乙二醇-聚乙烯亞胺嵌段共聚物的疏水端（PEI)中，在親水端聚乙二醇端連接上肌酸，可減少阿霉素對心肌的損壞作用。其中，PEG通過連接羧基后，再通過羧基端與PEI通過N端氨基的酰化修飾形成PEI-PEG。PEG與肌酸的連接是通過PEG與氨基連接后，再與肌酸通過N端氨基的酰化修飾形成聚乙二醇-肌酸（PEG-Cr)。
[0010]本發明的技術方案為：
包裹阿霉素的聚乙烯亞胺-聚乙二醇-肌酸共聚物的制備方法，包括以下步驟：
(1)雙羧基聚乙二醇（C00H-PEG-C00H)共聚物的合成：
將聚乙二醇-4000和丁二酸酐混合，加入吡啶作為催化劑，通入氮氣作保護氣體，在回流裝置中反應，得到淺黃色的C00H-PEG-C00H，備用；
(2)氨基-聚乙二醇-羧基（NH2-PEg-COOH)共聚物的合成：
稱取步驟（I)制得的C00H-PEG-C00H溶于四氫呋喃（THF)中，移至兩口瓶中，冰浴攪拌15~30min后，取乙二胺溶于3(T50mL的四氫呋喃（THF)中，然后逐滴的加入到兩口瓶中，冰浴攪拌f4h，將得到的溶液放到真空干燥箱中干燥，得到NH2-PEg-COOH的油狀固體；
(3)肌酸-聚乙二醇-羧基（Cr-PEG-COOH)共聚物的合成：
取肌酸溶于3(T50mL的二甲基亞砜（DMSO)中加入到兩口瓶中，得到活化了的肌酸，然后取活化了的肌酸和步驟（2 )制得的NH2-PEg-COOH加入CH2Cl2溶液中，混合均勻，往混合溶液中加入8~IOmL的三乙胺，于室溫攪拌12~20h，真空干燥濃縮溶液，得到Cr-PEG-COOH，備用；
(4)肌酸-聚乙二醇-聚乙烯亞胺（Cr-PEG-PEI)共聚物的合成：
取步驟（3 )制得的Cr-PEG-COOH溶于二甲基亞砜（DMSO )中，加入到兩口瓶里，反應12~24h，得到活化了的Cr-PEG-COOH，后把I~2g的聚乙烯亞胺溶解在PH=7. 4的PBS中，后把Cr-PEG-COOH移置聚乙烯亞胺溶液中，室溫下攪拌反應12~24h，冷凍干燥即得到Cr-PEG-PEI 產物；
(5)將得到的Cr-PEG-PEI共聚物和疏水藥物阿霉素溶于攪拌的二甲基甲酰胺（DMF)中，攪拌溶解；
(6)將溶液移至透析袋，其中透析袋的截留分子量為8000-12000，在IL蒸餾水中透析24~36h，每隔3~4h換一次蒸餾水；
(7)將透析袋中的膠束溶液高速離心，抽濾除雜，冷凍干燥得包裹阿霉素的聚乙烯亞胺-聚乙二醇-肌酸共聚物膠束，將產品置于干燥器中保存。
[0011]上述制備方法中，步驟（I)所述聚乙二醇-4000和丁二酸酐的投料摩爾比為1:3飛；所述吡啶占聚乙二醇-4000和丁二酸酐總量的lwt9T2wt% ;所述反應的反應溫度為8(Tl00°C，反應時間為6h~12h。
[0012]上述制備方法中，步 驟（2)所述C00H-PEG-C00H在四氫呋喃（THF)中的質量濃度為0.005~0. 00625g/mL ;所述乙二胺加入的質量滿足乙二胺和C00H-PEG-C00H質量比為I :20~25。
[0013]上述制備方法中，步驟（3)所述肌酸加入量為I. 2^1. 5g ;所述活化了的肌酸和步驟（2)制得的NH2-PEg-COOH在CH2Cl2溶液中的總濃度為O. 12^0. 22g/mL，其中活化了的肌酸和NH2-PEg-COOH的質量比為1:5~10。
[0014]上述制備方法中，步驟（4)所述Cr-PEG-COOH在二甲基亞砜（DMSO)中的質量濃度為0.05、. lg/mL ;所述聚乙烯亞胺在PBS中的濃度為0.025^0. 05g/mL。
[0015]上述制備方法中，步驟（5)所述Cr-PEG-PEI共聚物和疏水藥物阿霉素的質量比為5~10:1 ;所述Cr-PEG-PEI共聚物和疏水藥物阿霉素在二甲基酰胺中的總濃度為
O.12~O. 22g/mL。
[0016]與現有技術相比，本發明的優點在于：采用肌酸與PEG連接，使本來不易被人體吸收的肌酸的滲透性和水溶性大幅度的增大，更利于人體吸收，而且肌酸與PEG連接查閱文獻沒發現；在PEG的另一端接上陽離子聚合物PEI，陽離子聚合物與非離子聚乙二醇的共聚物結合作為藥物載體是當代常使用的藥物載體基質，接上PEI后提高穩定性，而且PEI經過PEG的修飾后可降低其細胞毒性；該基質包裹的藥物為阿霉素，DOX在臨床上一般用于惡性腫瘤的治療，但是它的毒副作用比較大，尤其是心肌損傷，將它包裹于藥物載體內可減少毒副作用，另外，肌酸在人體內會形成磷酸肌酸，磷酸肌酸對DOX引起的心肌毒性有預防保護的作用。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0017]圖I為本發明實施例I制備的包裹阿霉素的聚乙烯亞胺-聚乙二醇-肌酸共聚物膠束的體外釋藥曲線。
【具體實施方式】
[0018]以下實施例將進一步舉例說明屬于本發明范圍內的優選的實施方案。這些實施例只出于舉例說明的目的而給出并且不解釋為對本發明的限制，因為在不背離本發明的實質或范圍的前提下本發明可以有許多的變化方案。
[0019]實施案例I:
(I)雙羧基聚乙二醇（C00H-PEG-C00H)共聚物的合成：
將IOg聚乙二醇-4000和O. 75g 丁二酸酐混合(摩爾比為1:3)，加入O. Ilg的吡啶作為催化劑，通入氮氣保護，在回流裝置中80°C反應6h，得到淺黃色的C00H-PEG-C00H，備用。
[0020](2)氨基-聚乙二醇-羧基（NH2-PEg-COOH)共聚物的合成：
稱取Ig步驟（I)制得的C00H-PEG-C00H溶于160mL的四氫呋喃（THF)中，移至兩口瓶中，冰浴攪拌15min后，取0.04g乙二胺溶于30mL的THF中，然后逐滴的加入到兩口瓶中，冰浴攪拌2h。將得到的溶液放到真空干燥箱中干燥，得到NH2-PEg-COOH的油狀固體。
[0021](3)肌酸-聚乙二醇-羧基（Cr-PEG-COOH)共聚物的合成：
取I. 2g肌酸溶于30mL的二甲基亞砜（DMSO)中加入到兩口瓶中，得到活化了的肌酸。取Ig活化了的肌酸和5gNH2-PEG-C00H溶于50mL的CH2Cl2溶液中，混合均勻，往混合溶液中加入8mL的三乙胺于室溫攪拌12h，真空干燥濃縮溶液，得到Cr-PEG-COOH，備用。
[0022](4)肌酸-聚乙二醇-聚乙烯亞胺（Cr-PEG-PEI)共聚物的合成：取I. 5gCr-PEG-C00H溶于30mL的DMSO中，加入到兩口瓶里，反應12h，得到活化了的Cr-PEG-COOH。然后把Ig的聚乙烯亞胺溶解在40mL PBS (PH=7. 4)中，然后把Cr-PEG-COOH移置聚乙烯亞胺溶液中，室溫下攪拌反應12h，冷凍干燥即得到Cr-PEG-PEI產物。
(5)取Ig得到的Cr-PEG-PEI共聚物和O. 2g阿霉素溶于攪拌的IOmL 二甲基甲酰胺中，攪拌溶解。
[0023](6)將溶液移至透析袋(透析袋的截留分子量為8000)，在IL蒸餾水中透析24h，每隔3h換一次蒸餾水。
[0024](7)透析袋中的膠束溶液高速離心，抽濾除雜，冷凍干燥得包裹阿霉素的聚乙烯亞胺-聚乙二醇-肌酸共聚物膠束，干燥器中保存。
[0025]包裹阿霉素的聚乙烯亞胺-聚乙二醇-肌酸共聚物膠束體外釋放的測定：精密稱取200mg凍干樣品溶于5mLPBS緩沖液（pH=7. 4)中，然后置于透析袋中，將透析袋放入試管中，加入PBS緩沖液至總體積為10 mL，密封后，保持溫度在37±1°C，60 rpm下置于Forma481 型搖床(Forma 公司，美國）中振搖，分別于 12h、24h、48h、72h、96h、120h、144h、168h 取樣，利用紫外分光光度法測定上清液中的藥物濃度，每次取透析液10mL，并補充PBS緩沖溶液10mL。釋放度=釋放介質中藥物的量/含藥膠束中的藥物含量X 100%。釋放總時間為7天，根據時間和累積釋放百分比得到藥物釋放曲線。結果如圖I所示，可以看出24h前釋藥速度快，釋藥量約占總藥量的25. 6 %。168h后釋藥量約占總藥量的49. 2%。突釋效應小，表現出良好的緩釋性能。
[0026]實施案例2:
(I)雙羧基聚乙二醇（C00H-PEG-C00H)共聚物的合成：
將IOg聚乙二醇-4000和Ig 丁二酸酐混合(摩爾比為1:4)，加入O. 165g吡啶作為催化劑，通入氮氣保護，在回流裝置中90°C反應9h，得到淺黃色的C00H-PEG-C00H，備用。
[0027](2)氨基-聚乙二醇-羧基（NH2-PEg-COOH)共聚物的合成：
稱取Ig步驟（I)制得的C00H-PEG-C00H溶于180mL的四氫呋喃（THF)中，移至兩口瓶中，冰浴攪拌20min后，取0.045g乙二胺溶于40mL的THF中，然后逐滴的加入到兩口瓶中，冰浴攪拌3h。將得到的溶液放到真空干燥箱中干燥，得到NH2-PEg-COOH的油狀固體。
[0028](3)肌酸-聚乙二醇-羧基（Cr-PEG-COOH)共聚物的合成：
取1.35g肌酸溶于30mL的二甲基亞砜（DMSO)中加入到兩口瓶中，取Ig活化了的肌酸和7gNH2-PEG-C00H溶于50mL的CH2Cl2溶液中，混合均勻，往混合溶液中加入9mL的三乙胺于室溫攪拌16h，真空干燥濃縮溶液，得到Cr-PEG-COOH，備用。
[0029](4)肌酸-聚乙二醇-聚乙烯亞胺（Cr-PEG-PEI)共聚物的合成：
取2. 25gCr-PEG-C00H溶于30mL的DMSO中，加入到兩口瓶里，反應18h，得到活化了的Cr-PEG-C00H。然后把I. 5g的聚乙烯亞胺溶解在40mL PBS(PH=7. 4)中，然后把Cr-PEG-COOH移置聚乙烯亞胺溶液中，室溫下攪拌反應18h，冷凍干燥即得到Cr-PEG-PEI產物。
(5)取I. 5g得到的Cr-PEG-PEI共聚物和0. 2g阿霉素溶于攪拌的IOmL 二甲基甲酰胺中，攪拌溶解。
[0030](6)將溶液移至透析袋(透析袋的截留分子量為10000)，在IL蒸餾水中透析30h，每隔3h換一次蒸餾水。
[0031](7)透析袋中的膠束溶液高速離心，抽濾除雜，冷凍干燥得包裹阿霉素的聚乙烯亞胺-聚乙二醇-肌酸共聚物膠束，干燥器中保存。
[0032]對該實施例2制得的包裹阿霉素的聚乙烯亞胺-聚乙二醇-肌酸共聚物膠束進行藥物釋放檢測，24h前釋藥速度快，釋藥量約占總藥量的23. 7%。168h后釋藥量約占總藥量的48. 6%。突釋效應小，表現出良好的緩釋性能。
[0033]實施案例3:
(I)雙羧基聚乙二醇（C00H-PEG-C00H)共聚物的合成：
將IOg聚乙二醇-4000和I. 25g 丁二酸酐混合(摩爾比為1:5)，加入O. 225g吡啶作為催化劑，通入氮氣保護，在回流裝置中100°C反應12h，得到淺黃色的C00H-PEG-C00H，備用。
[0034](2)氨基-聚乙二醇-羧基（NH2-PEg-COOH)共聚物的合成：
稱取Ig步驟（I)制得的C00H-PEG-C00H溶于200mL的四氫呋喃（THF)中，移至兩口瓶中，冰浴攪拌15min后，取0.05g乙二胺溶于50mL的THF中，然后逐滴的加入到兩口瓶中，冰浴攪拌4h。將得到的溶液放到真空干燥箱中干燥，得到NH2-PEg-COOH的油狀固體。
[0035](3)肌酸-聚乙二醇-羧基（Cr-PEG-COOH)共聚物的合成：
取I. 5g肌酸溶于30mL的二甲基亞砜（DMSO)中加入到兩口瓶中，取Ig活化了的肌酸和IOgNH2-PEG-COOH溶于50mL的CH2Cl2溶液中，混合均勻，往混合溶液中加入IOmL的三乙胺于室溫攪拌20h，真空干燥濃縮溶液，得到Cr-PEG-COOH，備用。
[0036](4)肌酸-聚乙二醇-聚乙烯亞胺（Cr-PEG-PEI)共聚物的合成：
取3gCr-PEG-C00H溶于30ml 的DMSO中，加入到兩口瓶里，反應24h，得到活化了的Cr-PEG-COOH。然后把2g的聚乙烯亞胺溶解在40mL PBS (PH=7. 4)中，然后把Cr-PEG-COOH移置聚乙烯亞胺溶液中，室溫下攪拌反應24h，冷凍干燥即得到Cr-PEG-PEI產物。
(5)取2g得到的Cr-PEG-PEI共聚物和O. 2g阿霉素溶于攪拌的IOmL 二甲基甲酰胺中，攪拌溶解。
[0037](6)將溶液移至透析袋(透析袋的截留分子量為12000)，在IL蒸餾水中透析36h，每隔4h換一次水。
[0038](7)透析袋中的膠束溶液高速離心，抽濾除雜，冷凍干燥得包裹阿霉素的聚乙烯亞胺-聚乙二醇-肌酸共聚物膠束，干燥器中保存。
[0039]對該實施例3制得的包裹阿霉素的聚乙烯亞胺-聚乙二醇-肌酸共聚物膠束進行藥物釋放檢測，24h前釋藥速度快，釋藥量約占總藥量的26. 2 %，168h后釋藥量約占總藥量的50. 7%。突釋效應小，表現出良好的緩釋性能。
【權利要求】
1.一種包裹阿霉素的聚乙烯亞胺-聚乙二醇-肌酸共聚物膠束，其特征在于，由疏水性抗癌藥物阿霉素裹在聚乙二醇-聚乙烯亞胺嵌段共聚物的疏水端聚乙烯亞胺（PEI)中，且在親水端聚乙二醇（PEG)端連接上肌酸而得到。
2.根據權利要求1所述的一種包裹阿霉素的聚乙烯亞胺-聚乙二醇-肌酸共聚物膠束，其特征在于，PEG通過與羧基連接后，羧基端與PEI通過N端氨基的酰化修飾形成PEI-PEG。
3.根據權利要求1所述的一種包裹阿霉素的聚乙烯亞胺-聚乙二醇-肌酸共聚物膠束，其特征在于，聚乙二醇（PEG)與肌酸的連接是通過聚乙二醇（PEG)與氨基連接后再與肌酸通過N端氨基的酰化修飾形成聚乙二醇-肌酸（PEG-Cr)。
4.一種包裹阿霉素的聚乙烯亞胺-聚乙二醇-肌酸共聚物膠束的制備方法，其特征在于，包括以下步驟： (1)雙羧基聚乙二醇（COOH-PEG-COOH)共聚物的合成： 將聚乙二醇-4000和丁二酸酐混合，加入吡啶作為催化劑，通入氮氣作保護氣體，在回流裝置中反應，得到淺黃色的COOH-PEG-COOH，備用； (2)氨基-聚乙二醇-羧基（NH2-PEg-COOH)共聚物的合成： 稱取步驟（I)制得的C00H-PEG-C00H溶于四氫呋喃（THF)中，移至兩口瓶中，冰浴攪拌15~30min后，取乙二胺溶于3(T50mL的四氫呋喃（THF)中，然后逐滴的加入到兩口瓶中，冰浴攪拌f4h，將得到的溶液放到真空干燥箱中干燥，得到NH2-PEg-COOH的油狀固體； (3)肌酸-聚乙二醇-羧基（Cr-PEG-COOH)共聚物的合成： 取肌酸溶于3(T50mL的二甲基亞砜（DMSO)中加入到兩口瓶中，得到活化了的肌酸，然后取活化了的肌酸和步驟（2 )制得的NH2-PEg-COOH加入CH2Cl2溶液中，混合均勻，往混合溶液中加入8~IOmL的三乙胺，于室溫攪拌12~20h，真空干燥濃縮溶液，得到Cr-PEG-COOH，備用； (4)肌酸-聚乙二醇-聚乙烯亞胺（Cr-PEG-PEI)共聚物的合成： 取步驟（3 )制得的Cr-PEG-COOH溶于二甲基亞砜（DMSO )中，加入到兩口瓶里，反應12~24h，得到活化了的Cr-PEG-COOH，后把I~2g的聚乙烯亞胺溶解在PH=7. 4的PBS中，后把Cr-PEG-COOH移置聚乙烯亞胺溶液中，室溫下攪拌反應12~24h，冷凍干燥即得到Cr-PEG-PEI 產物； (5)將得到的Cr-PEG-PEI共聚物和疏水藥物阿霉素溶于攪拌的二甲基甲酰胺（DMF)中，攪拌溶解； (6)將溶液移至透析袋，其中透析袋的截留分子量為8000-12000，在IL蒸餾水中透析24~36h，每隔3~4h換一次蒸餾水； (7)將透析袋中的膠束溶液高速離心，抽濾除雜，冷凍干燥得包裹阿霉素`的聚乙烯亞胺-聚乙二醇-肌酸共聚物膠束，將產品置于干燥器中保存。
5.根據權利要求4所述的一種包裹阿霉素的聚乙烯亞胺-聚乙二醇-肌酸共聚物膠束的制備方法，其特征在于，步驟（I)所述聚乙二醇-4000和丁二酸酐的投料摩爾比為1:3飛；所述吡啶占聚乙二醇-4000和丁二酸酐總量的lwt9T2wt% ;所述反應的反應溫度為8(Tl00°C，反應時間為6h~12h。
6.根據權利要求4所述的一種包裹阿霉素的聚乙烯亞胺-聚乙二醇-肌酸共聚物膠束的制備方法，其特征在于，步驟（2)所述COOH-PEG-COOH在四氫呋喃（THF)中的質量濃度為0.005~0. 00625g/mL ;所述乙二胺加入的質量滿足乙二胺和COOH-PEG-COOH質量比為I :20~25。
7.根據權利要求4所述的一種包裹阿霉素的聚乙烯亞胺-聚乙二醇-肌酸共聚物膠束的制備方法，其特征在于，步驟（3)所述肌酸加入量為I. 2^1. 5g ;所述活化了的肌酸和步驟（2)制得的NH2-PEg-COOH在CH2Cl2溶液中的總濃度為O. 12^0. 22g/mL，其中活化了的肌酸和NH2-PEg-COOH的質量比為1:5~10。
8.根據權利要求4所述的一種包裹阿霉素的聚乙烯亞胺-聚乙二醇-肌酸共聚物膠束的制備方法，其特征在于，步驟（4)所述Cr-PEG-COOH在二甲基亞砜（DMSO)中的質量濃度為0. 05、. lg/mL ;所述聚乙烯亞胺在PBS中的濃度為0. 025^0. 05g/mL。
9.根據權利要求4所述的一種包裹阿霉素的聚乙烯亞胺-聚乙二醇-肌酸共聚物膠束的制備方法，其特征在于，步驟（5)所述Cr-PEG-PEI共聚物和疏水藥物阿霉素的質量比為5~10:1 ;所述Cr-PEG-PEI共聚物和疏水藥物阿霉素在二甲基酰胺中的總濃度為`0.12~0. 22g/mL。
【文檔編號】A61K47/34GK103479576SQ201310448512
【公開日】2014年1月1日 申請日期:2013年9月27日 優先權日:2013年9月27日
【發明者】魏坤, 魏詩琪, 鄒芬 申請人:華南理工大學