復方鴉膽子油軟膠囊的制作方法
【專利摘要】復方鴉膽子油軟膠囊，屬于中藥制劑【技術領域】。其特征在于采用以下方法制備：1）稱取鴉膽子油6-10%、冷凍干燥蟾皮超微粉65-75%、蜂蠟12-20%、大豆磷脂3-6%、對羥基苯甲酸乙酯0.2-0.6%，備用；2）將蜂蠟和大豆磷脂熔融于聚乙二醇-400中；再加入鴉膽子油、冷凍干燥蟾皮超微粉、對羥基苯甲酸乙酯充分研磨混勻，制成粘稠度適中、流動性好的藥液；3）按重量比2-4:2-4:1的比例稱取水、明膠、甘油倒入膠罐中制備囊材；4）采用壓制法制作復方鴉膽子油軟膠囊。上述復方鴉膽子油軟膠囊，將鴉膽子油、冷凍干燥蟾皮超微粉采用壓制法制備軟膠囊，制得的軟膠囊能掩蓋蟾皮的臭味，克服鴉膽子油味苦，提高藥物穩定性，服用方便，抗腫瘤效果好，毒副作用小。
【專利說明】復方鴉膽子油軟膠囊
【技術領域】
[0001]本發明屬于中藥制劑【技術領域】，具體為復方鴉膽子油軟膠囊。
【背景技術】
[0002]中藥鴉膽子為苦木科植物鴉膽子(Brucea javanica L.Merr.)的卵形或灰黑色長圓形的干燥成熟果實，具有清熱解毒、抗瘧、抗炎和抗腫瘤的作用。鴉膽子油為鴉膽子果實中提取得到的脂肪油 ，在我國臨床已有多種劑型廣泛應用。其具體機制為:為細胞周期非特異性抗癌藥，對腫瘤細胞G0、G1、G2、M期具有抑制和殺傷作用，能明顯抑制腫瘤細胞的DNA、RNA及蛋白質的合成，干擾肽腱的形成；能誘導癌細胞的凋亡；可以作用于細胞膜上的P糖蛋白而產生逆轉耐藥的作用，使其它抗癌藥物的活性增強。這些現象提示TOPO II是鴉膽子油細胞內作用靶點之一。鴉膽子油與其他化療藥合用可提高療效，毒副反應少，很少出現惡心，嘔吐、脫發等常規化療藥的毒副反應。
[0003]蟾皮為蟾餘科(Bufonidae)動物中華大蟾餘(Bufobufo gargarizans Cantor)的干燥皮，最早記載于《本經逢原》，具有抗腫瘤、抗乙肝病毒等藥理作用，用于治療乙型肝炎、慢性氣管炎、咽喉腫痛、癰腫疔毒等病癥。具體作用機制:蟾皮的提取物中含有多種蟾蜍二烯羥酸內酯類化合物，其中蟾蜍毒素類化合物只存在于新鮮的蟾皮內。可以誘導肝癌細胞H印G2細胞阻滯于G2/M期；提高機體免疫功能以及誘導腫瘤細胞凋亡抑制移植性肝腫瘤的生長。多年來用于多種癌癥和配合化療，不僅能提高療效，還能減輕副作用，改善血常規。
[0004]軟膠囊是繼片劑、針劑后發展起來的一種劑型，能將油狀藥物、藥物溶液或藥物混懸液、糊狀物甚至藥物粉末定量壓注并包封于膠膜內，形成大小、形狀各異的密封膠囊。軟膠囊作為臨床上常用劑型，其具有能掩蓋藥物的不良嗅味，提高藥物穩定性作用，能使液體藥物固體化，同時其內容物為粉末或顆粒狀態，在胃腸道中能迅速分散、溶出和吸收，從而提高藥物的生物利用度。
【發明內容】
[0005]針對現有技術中存在的上述問題，本發明的目的在于設計提供一種復方鴉膽子油軟膠囊的技術方案，能掩蓋蟾皮的臭味，克服鴉膽子油味苦，提高藥物穩定性，服用方便，抗腫瘤效果好，毒副作用小。
[0006]所述的復方鴉膽子油軟膠囊，其特征在于包括以下步驟:
O按重量百分含量比例稱取鴉膽子油6-10%、冷凍干燥蟾皮超微粉65-75%、蜂蠟12-20%、大豆磷脂3-6%、對羥基苯甲酸乙酯0.2-0.6%，備用；
所述的鴉膽子油采用以下方法制備:將鴉膽子藥材粉碎過18目篩，加石油醚冷浸提取2-3次，每次提取6-10h，石油醚的用量為鴉膽子藥材重量的10-14倍，粗提的鴉膽子油通入氮氣，100-110°C加熱2-3h，除去殘留石油醚，再加鴉膽子藥材重量4-6%的活性炭在100-110°C條件下加熱1-1.5h，進行脫色處理，即得鴉膽子油；
所述的冷凍干燥蟾皮超微粉采用以下方法制備:將干燥蟾皮超微粉碎，其粒徑為10-7 μ m ；
2)按照蜂蠟重量為Ig則聚乙二醇-400的用量為25-35ml的比例，將蜂蠟和大豆磷脂熔融于聚乙二醇-400中；再加入鴉膽子油、冷凍干燥蟾皮超微粉、對羥基苯甲酸乙酯充分研磨混勻，制成粘稠度適中、流動性好的藥液；
3)囊材的制備:按重量比2-4:2-4:1的比例稱取水、明膠、甘油倒入膠罐中，溶膠時溫度先設置成70-80°C，在溫度到達55-60°C的時候開始加水，加水10-15分鐘，用手觸有微燙的感覺，開始加入甘油，攪拌2-3分鐘，從膠罐底部取2次，倒回膠罐中，迅速加明膠，攪拌時間為1.5-2小時，攪拌后溫度設定為55-65°C，靜置回氣泡7-8小時；
4)采用壓制法制作軟膠囊，室溫20-24°C制膠囊，膠皮厚度為0.6-0.8_，制得的軟膠囊在轉籠里冷卻7-9小時，出籠，干燥即得復方鴉膽子油軟膠囊。
[0007]所述的復方鴉膽子油軟膠囊，其特征在于將制得的復方鴉膽子油軟膠囊用乙醇洗去膠囊表面油質，選擇30-40°C，烘干8-10小時。
[0008]所述的復方鴉膽子油軟膠囊，其特征在于步驟I)中:鴉膽子油的含量為7-8%、冷凍干燥蟾皮超微粉68-72%、蜂蠟15-18%、大豆磷脂4_5%、對羥基苯甲酸乙酯0.3-0.5%。
[0009]所述的復方鴉膽子油軟膠囊，其特征在于步驟I)鴉膽子油制備方法中:鴉膽子藥材加石油醚冷浸提取時間為7-8h，石油醚的用量為鴉膽子藥材重量的11-13倍，粗提的鴉膽子油通入氮氣后加熱時間為2.5h，脫色處理時間為1.2-1.3h。
[0010]所述的復方鴉膽子油軟膠囊，其特征在于步驟3)中水:明膠:甘油的重量比為3:3:10
[0011]所述的復方鴉膽子油軟膠囊，其特征在于步驟3)中:溶膠時溫度先設置成75-78°C，在溫度到達58°C的時候開始加水，加水11_13分鐘，加明膠后攪拌時間為1.6-1.8小時，攪拌后溫度設定為60°C。
[0012]所述的復方鴉膽子油軟膠囊，其特征在步驟4)中:室溫22_23°C制膠囊，膠皮厚度為 0.7mm η
[0013]所述的鴉膽子油、蟾皮可從市場上直接購得。
[0014]上述復方鴉膽子油軟膠囊，將鴉膽子油、冷凍干燥蟾皮超微粉采用壓制法制備軟膠囊，制得的軟膠囊能掩蓋蟾皮的臭味，克服鴉膽子油味苦，提高藥物穩定性，服用方便，抗腫瘤效果好，毒副作用小。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0015]圖1為鴉膽子油體外分析方法中對照品色譜圖，圖2為鴉膽子油體外分析方法中溶劑色譜圖，圖3為鴉膽子油體外分析方法中空白色譜圖，圖4為鴉膽子油體外分析方法中樣品色譜圖，圖5為鴉膽子油體外分析方法中油酸標準曲線圖；圖6為冷凍干燥蟾皮超微粉體外分析方法中對照品色譜圖，圖7為冷凍干燥蟾皮超微粉體外分析方法中溶劑色譜圖，圖8為冷凍干燥蟾皮超微粉體外分析方法中空白色譜圖，圖9為冷凍干燥蟾皮超微粉體外分析方法中樣品色譜圖，圖10為華蟾酥毒基標準曲線圖；圖11脂蟾毒配基標準曲線圖。
【具體實施方式】
[0016]以下結合具體實施例對本發明作進一步說明。[0017]實施例1:
復方鴉膽子油軟膠囊采用以下方法制備:
O按重量百分含量比例稱取鴉膽子油22g、冷凍干燥蟾皮超微粉176g、蜂蠟40g、大豆磷脂10g、對羥基苯甲酸乙酯lg，備用；
所述的鴉膽子油采用以下方法制備:將鴉膽子藥材粉碎過18目篩，加石油醚冷浸提取2次，每次提取8h，石油醚的用量為鴉膽子藥材重量的12倍，粗提的鴉膽子油通入氮氣，110°C加熱2h，除去殘留石油醚，再加鴉膽子藥材重量4-6%的活性炭在110°C條件下加熱lh，進行脫色處理，即得鴉膽子油；
所述的冷凍干燥蟾皮超微粉采用以下方法制備:將干燥蟾皮超微粉碎，其粒徑為
9μ m ；
2)將蜂蠟和大豆磷脂熔融于500ml聚乙二醇-400中；再加入鴉膽子油、冷凍干燥蟾皮超微粉、對羥基苯甲酸乙酯充分研磨混勻，制成粘稠度適中、流動性好的藥液；
3)囊材的制備:按重量比3:3:1的比例稱取水、明膠、甘油倒入膠罐中，溶膠時溫度先設置成75°C，在溫度到達60°C的時候開始加水，加水10分鐘，用手觸有微燙的感覺，開始加入甘油，攪拌2分鐘，從膠罐底部取2次，倒回膠罐中，迅速加明膠，攪拌時間為1.5-2小時，攪拌后溫度設定為60°C，靜置回氣泡7-8小時；
4)采用壓制法制作軟膠囊，室溫22°C制膠囊，膠皮厚度為0.7mm，制得的軟膠囊在轉籠里冷卻8小時，出籠，干燥即得復方鴉膽子油軟膠囊；
5)將制得的復方鴉膽子油軟膠囊用乙醇洗去膠囊表面油質，選擇30-40°C，烘干8-10小時。
[0018]上述步驟I)中鴉膽子油的重量含量為6-10%、冷凍干燥蟾皮超微粉65-75%、蜂蠟12-20%、大豆磷脂3-6%、對羥基苯甲酸乙酯0.2-0.6% ;鴉膽子藥材加石油醚冷浸提取時間為6 h、7 h、9 h或10h，石油醚的用量為鴉膽子藥材重量的11或13倍，粗提的鴉膽子油通入氮氣后加熱時間為2h或3h，脫色處理時間為1.2h或1.5h。步驟2)中水:明膠:甘油的重量比為2:2:1、4:4:1、2:4:1或4:2:1。步驟3)中:溶膠時溫度先設置成70°C或80°C，在溫度到達55°C或60°C的時候開始加水，加水12或15分鐘，用手觸有微燙的感覺，開始加入甘油，攪拌3分鐘。步驟4)中室溫20或24°C制膠囊，膠皮厚度為0.6或0.8mm。其它同實施例1，也能達到本發明所述的有益效果。
[0019]以下結合相應的試驗數據進一步說明本發明的有益效果。
[0020]試驗一、復方鴉膽子油軟膠囊處方前研究
處方前研究(Preformulation Studies)是設計和制備一個安全、有效、穩定的藥物制劑的重要部分。制劑的處方前研究，為劑型的選擇、處方的篩選和制備工藝提供依據，其目的就是使藥物穩定、有效并適合工業化生產中制劑處方和制劑工藝要求。本發明對鴉膽子油和蟾皮微粉的有關理化性質進行了初步研究，建立其體外分析方法，為復方鴉膽子油軟膠囊工藝和質量標準研究等提供參考依據。
[0021]一、實驗材料
(一)實驗藥品與試劑
正己烷(江蘇永華精細化學品有限公司20120507，色譜純)
石油醚(60-90°C，江蘇永華精細化學品有限公司20120714)油酸對照品(中國食品藥品檢定研究院提供111621-201004 )
華蟾酥毒基對照品(中國食品藥品檢定研究院提供10803-200605)
脂膽毒配基對照品(中國食品藥品檢定研究院提供110718-200507)
鴉膽子油(實驗室自制，批號20120920)
氫氧化鉀(杭州蕭山化學試劑廠20081206)
無水硫酸鈉(國藥集團化學試劑有限公司20090811) 三氟化硼乙醚(瑞鼎化學技術上海有限公司20110213，化學純)
乙腈、甲醇為色譜純，其他所用試劑，如未注明規格，均指分析純。
[0022](二)實驗器材 GC-14A氣相色譜儀(島津)
KQ5200DE超聲波清洗器(昆山超聲儀器有限公司)
CP225D準微量電子分析天平(德國賽多利斯公司)
METTLER TOLEDO電子天平(梅特勒-托利多儀器上海有限公司)
HH-S型水浴鍋(鞏義市英峪予華儀器廠)
高效液相(天美公司LC2000梯度系統)
LC2130輸液泵(日本原裝進口)，配梯度洗脫和在線洗脫裝置 LC2030紫外檢測器手動進樣器775i色譜工作站T2000P 二、方法和結果
(一)鴉膽子油體外分析方法的建立
1.色譜條件
儀器:島津氣相色譜儀GC-14A，FID檢測器
色譜柱=DM-1nertWax 毛細柱(30 mX0.25 mmX0.25 μ m)
條件:柱溫:150°C ;進樣口溫度:250°C ;檢測器溫度:250°C ;載氣為高純氮，流速:1.0mL.min-Ι ;恒流，分流比30:1柱前壓IOpsi,柱溫采用程序升溫方式，150 °C (停留Imin) — 200°C (10°C.min-l,停留 2 min) — 220°C (10°C.min-l,停留 IOmin)。在本色譜條件下，樣品中油酸與其他成分能夠達到基線分離，且分離度大于1.5，理論塔板數按油酸峰面積計算，不低于40000。對照品、溶劑、空白、樣品色譜圖見圖1-4。
[0023]2.油酸對照品溶液的制備
精密稱取油酸對照品33.8mg，至25mL容量瓶中，加正己烷溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成1.352mg/mL對照品溶液。精密吸取1.352mg/mL油酸對照品溶液2.0mL至試管中，氮氣吹干溶劑，加入0.5moL/L氫氧化鉀甲醇溶液2mL，在60°C恒溫水浴中皂化25min，待油珠完全溶解后，放冷，加入15%三氟化硼乙醚溶液2mL，搖勻。在60°C恒溫水浴中甲酯化2min，放冷，精密加入正己烷2.0mL，充分振搖2min。加入過飽和氯化鈉溶液適量，使正己烷溶液上浮至瓶頸，立即吸取上層有機液，用0.5g無水硫酸鈉脫水，即得1.352mg/mL的對照品溶液。
[0024]3.供試品溶液的制備
取復方鴉膽子油軟膠囊內容物適量，置IOmL容量瓶中，加正己烷定容，取ImL按照對照品溶液的制備項下自“氮氣吹干溶劑”起依法操作，即得供試品溶液。
[0025]4.方法學考察
4.1標準曲線繪制精密吸取1.352mg/mL濃油酸對照品溶液0.4,0.8、1.2、1.6,2.0,2.4至15 mL具塞試管中加入0.5moL/L氫氧化鉀甲醇溶液2mL，在60°C恒溫水浴中皂化25min，待油珠完全溶解后，放冷，加入15%三氟化硼乙醚溶液2mL，搖勻。在60°C恒溫水浴中甲酯化2min，放冷，精密加入正己烷2.0mL,充分振搖2min。加入過飽和氯化鈉溶液適量，使正己烷溶液上浮至瓶頸，立即吸取上層有機液，用0.5g無水硫酸鈉脫水，制得系列對照品溶液。分別精密吸取對照品溶液進樣，測定峰面積，以峰面積Y為縱坐標，以對照品溶液的濃度X為橫坐標，繪制標準曲線。油酸在0.2704~1.6224mg/mL范圍內線性關系良好。回歸方程:Y=433993X+4816，相關系數R2=0.9996。結果見圖5。
[0026]4.2精密度試驗
精密吸取1.352mg/mL油酸對照品溶液1.2mL至15mL具塞試管中，按照對照品溶液的
制備項下自“氮氣吹干溶劑”起依法操作制備對照品溶液，精密吸取對照品溶液5 μ L，連續
進樣6次，測定峰面積。計算精密度RSD為2.05%，表明儀器精密度良好。結果見表1。
【權利要求】
1.復方鴉膽子油軟膠囊，其特征在于采用以下方法制備: O按重量百分含量比例稱取鴉膽子油6-10%、冷凍干燥蟾皮超微粉65-75%、蜂蠟12-20%、大豆磷脂3-6%、對羥基苯甲酸乙酯0.2-0.6%，備用； 所述的鴉膽子油采用以下方法制備:將鴉膽子藥材粉碎過18目篩，加石油醚冷浸提取2-3次，每次提取6-10h，石油醚的用量為鴉膽子藥材重量的10-14倍，粗提的鴉膽子油通入氮氣，100-110°C加熱2-3h，除去殘留石油醚，再加鴉膽子藥材重量4-6%的活性炭在100-110°C條件下加熱1-1.5h，進行脫色處理，即得鴉膽子油； 所述的冷凍干燥蟾皮超微粉采用以下方法制備:將干燥蟾皮超微粉碎，其粒徑為10-7 μm ； 2)按照蜂蠟重量為Ig則聚乙二醇-400的用量為25-35ml的比例，將蜂蠟和大豆磷脂熔融于聚乙二醇-400中；再加入鴉膽子油、冷凍干燥蟾皮超微粉、對羥基苯甲酸乙酯充分研磨混勻，制成粘稠度適中、流動性好的藥液； 3)囊材的制備:按重量比2-4:2-4:1的比例稱取水、明膠、甘油倒入膠罐中，溶膠時溫度先設置成70-80°C，在溫度到達55-60°C的時候開始加水，加水10-15分鐘，用手觸有微燙的感覺，開始加入甘油，攪拌2-3分鐘，從膠罐底部取2次，倒回膠罐中，迅速加明膠，攪拌時間為1.5-2小時，攪拌后溫度設定為55-65°C，靜置回氣泡7-8小時； 4)采用壓制法制作軟膠囊，室溫20-24°C制膠囊，膠皮厚度為0.6-0.8_，制得的軟膠囊在轉籠里冷卻7-9小時，出籠，干燥即得復方鴉膽子油軟膠囊。
2.如權利要求1所述的復方鴉膽子油軟膠囊，其特征在于將制得的復方鴉膽子油軟膠囊用乙醇洗去膠囊表面油質，選擇30-40°C，烘干8-10小時。
3.如權利要求1所述的復方鴉膽子油軟膠囊，其特征在于步驟I)中:鴉膽子油的含量為7-8%、冷凍干燥蟾皮超微粉68-72%、蜂蠟15-18%、大豆磷脂4_5%、對羥基苯甲酸乙酯0.3_0.5%ο
4.如權利要求1所述的復方鴉膽子油軟膠囊，其特征在于步驟I)鴉膽子油制備方法中:鴉膽子藥材加石油醚冷浸提取時間為7-8h，石油醚的用量為鴉膽子藥材重量的11-13倍，粗提的鴉膽子油通入氮氣后加熱時間為2.5h，脫色處理時間為1.2-1.3h。
5.如權利要求1所述的復方鴉膽子油軟膠囊，其特征在于步驟3)中水:明膠:甘油的重量比為3:3:1。
6.如權利要求1所述的復方鴉膽子油軟膠囊，其特征在于步驟3)中:溶膠時溫度先設置成75-78°C，在溫度到達58°C的時候開始加水，加水11-13分鐘，加明膠后攪拌時間為1.6-1.8小時，攪拌后溫度設定為60°C。
7.如權利要求1所述的復方鴉膽子油軟膠囊，其特征在步驟4)中:室溫22-23°C制膠囊，膠皮厚度為0.7mm。
【文檔編號】A61K35/56GK103919822SQ201310523246
【公開日】2014年7月16日 申請日期:2013年10月30日 優先權日:2013年10月30日
【發明者】黃繩武, 蔣杉杉, 王俊俊, 李雅雅, 趙丹丹, 王堅 申請人:浙江中醫藥大學