絲裂霉素c和幾丁糖混合物在預防硬膜外粘連中的應用的制作方法
【專利摘要】本發明公開了絲裂霉素C和幾丁糖混合物在預防硬膜外粘連中的應用。本發明應用于局部時通過緩釋給藥方法來達到預防硬膜外粘連的目的。本發明優選將0.05mg絲裂霉素C加入到1ml幾丁糖中充分混勻，構成混合物用于預防硬膜外粘連。本發明簡單、有效減少局部應用絲裂霉素C的藥物濃度，達到減少毒副作用的目的。
【專利說明】絲裂霉素C和幾丁糖混合物在預防硬膜外粘連中的應用
【技術領域】
[0001]本發明屬于骨科臨床【技術領域】，涉及絲裂霉素C和幾丁糖混合物在預防硬膜外粘連中的應用。
【背景技術】
[0002]腰椎板切除術是脊柱外科常用的手術方式之一，但是術后椎板切除區域瘢痕組織過量增生和硬膜外粘連的形成，常會牽拉或包繞硬脊膜和神經根，引起腰腿痛癥狀復發，造成下腰椎手術失敗綜合征(FBSS)，從而導致臨床療效不佳。文獻報道5% -24%的FBSS是由于硬膜外瘢痕纖維化而引起的，因此，預防椎板切除術后硬膜外瘢痕粘連具有積極的臨床意義。本研究擬(I)通過大鼠椎板切除模型來探討絲裂霉素C和丁糖混合物預防硬膜外粘連的有效性；(2)將絲裂霉素C和丁糖混合物應用于人腰椎板切除術的硬脊膜后方，觀察其預防硬膜外瘢痕粘連的效果。
【發明內容】
[0003]本發明絲裂霉素C和幾丁糖混合物在預防硬膜外粘連中的應用。解決了術后椎板切除區域瘢痕組織過量增生和硬膜外粘連的形成，常會牽拉或包繞硬脊膜和神經根，引起腰腿痛癥狀復發，造成下腰椎手術失敗綜合征(FBSS)，從而導致臨床療效不佳的問題。
[0004]本發明提供了絲裂霉素C和幾丁糖混合物在預防硬膜外粘連中的應用，本發明的特點還在于應用于局部時通過緩釋給藥方法來達到預防硬膜外粘連的目的。本發明優選將
0.05mg絲裂霉素C加入到Iml幾丁糖中充分混勻，構成混合物用于預防硬膜外粘連。
[0005]絲裂霉素和幾丁糖混合物的制作方法，將絲裂霉素C加入到醫用幾丁糖中，在無菌條件下充分混勻，構成混合物。
[0006]第一部分，動物實驗:48只SD大鼠隨機分為3組，每組16只，分別使用絲裂霉素C-幾丁糖混合物組(A組)，絲裂霉素C組(B組)和生理鹽水對照組(C組)。各組大鼠行LI椎板切除術，局部應用不同的藥物。分別于術前及術后I天行后肢運動功能評分(BBB評分)。術后6周行大體標本觀察、羥脯氨酸含量檢測和組織病理學觀察。結果用藥前后各組BBB評分差異無統計學意義(P>0.05)，A組和B組大鼠硬膜外粘連程度明顯輕于C組，A，B兩組硬膜外瘢痕中羥脯氨酸含量較C組明顯降低，差異有統計學意義(P〈0.05) ;A，B兩組之間差異無統計學意義(P>0.05)，HE染色見A組及B組硬膜外瘢痕組織增生較少，結構疏松；C組中可見硬膜外形成致密的瘢痕粘連。結論絲裂霉素C幾丁糖混合物能夠有效減少瘢痕組織形成，預防硬膜外粘連。
[0007]第二部分，臨床應用:可將絲裂霉素C-幾丁糖混合物組局部應用于臨床上行腰椎板切除后患者的硬脊膜處。術中可行體感誘發電位檢測評估脊髓神經功能的改變情況；術后行MRI觀察硬膜外瘢痕粘連的生成情況；根據患者體格檢測評估術后的預防效果。
[0008]本發明通過局部應用絲裂霉素C-幾丁糖混合物預防腰椎板切除術后硬膜外粘連。通過緩釋給藥方法來達到預防硬膜外粘連的目的簡單、有效減少局部應用絲裂霉素C的藥物濃度，達到減少毒副作用的目的。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0009]圖1是是本發明絲裂霉素C幾丁糖混合物能夠有效減少硬膜外瘢痕粘連效果示意圖；
[0010]圖2是本發明絲裂霉素C幾丁糖混合物能夠有效抑制瘢痕組織中成纖維細胞生長效果示意圖。
【具體實施方式】
[0011]下面通過附圖和具體實施例對本發明進行說明:
[0012]實施例1:
[0013]第一部分:動物實驗:
[0014]I材料與方法:
[0015]1.1動物分組成年48只SD大鼠，清潔級，體重300_420g，由揚州大學臨床醫學院動物實驗中心提供。隨機分為A、B、C3組，每組16只。A組:絲裂霉素C0.05mg+幾丁糖Iml混合組；B組:0.5g/L絲裂霉素C組；C組:生理鹽水對照組。
[0016]1.2動物模型的制備:用大鼠I %戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉后，俯臥位固定，行LI椎板切除術，暴露硬膜囊，充分止血。A組將0.05mg絲裂霉素C與Iml幾丁糖充分混勻后局部應用于大鼠裸露的硬脊膜，分層縫合筋膜和皮膚。B組和C組分別將浸有0.5g/L絲裂霉素和生理鹽水的棉片局部應用于各組大鼠的硬脊膜，5min后取出棉片，生理鹽水沖洗創面后依次縫合筋膜和皮膚。
[0017]1.3觀察指標:
[0018]1.3.1后肢運動功能評分(BBB評分)各組大鼠在用藥前行BBB評分，觀察動物的肌力和活動情況。術后1山對各組動物再次評分，觀察實驗動物有無肌力減退和活動受限。
[0019]1.3.2大體觀察術后第6周每組隨機抽取8只大鼠，深度麻醉后對原手術區域進行局部解剖。用改良Rydell評分標準對硬膜外瘢痕粘連情況評分。O級:硬膜囊與瘢痕組織無明顯粘連；1級:硬膜外有稀疏而散在的膜性粘連，瘢痕組織易與硬膜囊鈍性分離；11級:硬膜囊與瘢痕組織粘連較廣泛和致密，鈍性分離阻力較大，分離后硬膜囊仍保持完整，III級:粘連廣泛、致密，硬膜囊與瘢痕無法鈍性分離，銳性分離后的硬膜囊有撕裂。
[0020]1.3.3羥脯氨酸含量的測定大體觀察后用戊巴比妥鈉處死大鼠，取出約5mg硬膜外瘢痕組織，按Yan et al的測定方法測定輕脯氨酸含量。方法簡要如下:用6mol/L水解樣品，分別加入檸檬酸緩沖液、氯胺T、高氯酸，再加入對二甲基氨基苯甲醛顯色劑顯色，在558nm處測定溶液的吸光度。標本中輕脯氨酸的含量表示為mg/g。
[0021]1.3.4組織學觀察術后4周將各組剩余的8只大鼠用4%多聚甲醛動脈灌注后切取手術段脊柱包括后側瘢痕組織及肌肉，制成石蠟標本，自LI上端至底部連續橫行切片6張后行HE染色，評定硬膜外瘢痕粘連的程度。
[0022]1.4統計學處理應用SPSS13.0軟件進行統計分析。計數資料采用秩和檢驗；計量資料以，? 土 S、表示，組間比較采用t檢驗。
[0023]2 結果:[0024]2.1BBB評分:每組大鼠用藥前、用藥后BBB評分均為21分，用藥前后各組實驗動物的后肢關節活動、運動幅度、步態、軀體持續穩定性等各項指標差異均無統計學意義(P>0.05)。BBB評分反映本實驗中大鼠沒有脊髓壓迫、脊髓或者神經根損傷的表現。
[0025]2.2大體觀察:A組和B組大鼠硬膜外瘢痕組織稀疏，無明顯粘連，在剝離過程中幾乎沒有出血；對照組硬膜外粘連廣泛致密，硬膜與瘢痕難以分離，剝離過程中出現大量出血，個別出現了硬膜囊撕裂現象。大體觀察根據Rydell評分結果為:A組:0級4只，I級4只；B組:0級3只，I級5只；C組:8只均為III級。
[0026]2.3羥脯氨酸的含量術后6周，各組硬膜外瘢痕中羥脯氨酸的含量見表1。A組和B組硬膜外瘢痕中羥脯氨酸的含量與對照組比較差異有統計學意義(P〈0.05)，但A組和B組比較差異無統計學意義(P>0.05)。
[0027]表1各組硬膜外瘢痕中羥脯氨酸的含量(n=8,mg/g，x±s)
[0028]
【權利要求】
1.絲裂霉素C和幾丁糖混合物在預防硬膜外粘連中的應用。
2.按照權利要求1所述絲裂霉素C和幾丁糖混合物在預防硬膜外粘連中的應用，其特征在于:應用于局部時通過緩釋給藥方法來達到預防硬膜外粘連的目的。
3.按照權利要求1所述絲裂霉素和幾丁糖混合物的應用，其特征在于:將0.05mg絲裂霉素C加入到Iml 幾丁糖中充分混勻，構成混合物應用于預防硬膜外粘連中。
【文檔編號】A61P41/00GK103989700SQ201410184328
【公開日】2014年8月20日 申請日期:2014年5月5日 優先權日:2014年5月5日
【發明者】孫鈺, 顏連啟 申請人:孫鈺