關白附總生物堿及關附壬素的新用途
【專利摘要】本發明提供了一種關白附總生物堿的制備方法，以及其在制備慢鈉離子通道阻斷劑和制備抗心率失常藥物中的應用。研究表明，關白附總生物堿和鹽酸關附甲素均對豚鼠心室肌慢鈉電流具有抑制作用。特別是關附壬素在制備藥物代謝酶抑制劑中的應用。本發明還提供了關附甲素在制備慢鈉離子通道阻斷劑中的應用。
【專利說明】關白附總生物堿及關附壬素的新用途
[0001]本發明申請為分案申請，原案申請號為201210203325.0，原案申請日為2012年6月19日，原案發明名稱為:關白附總生物堿及關附壬素的新用途。
【技術領域】
[0002]本發明涉及關白附總生物堿及關附壬素的新用途。具體涉及關白附總生物堿在制備慢鈉離子通道阻斷劑及抗心律失常藥物中的應用。
【背景技術】
[0003]關白附為中藥毛莨科黃花烏頭Aconitum coreanum(Levi,)Rapaics的塊根,為常見中藥之一，主治心痛血痹，具有祛風，燥濕，化痰，止痛作用，民間用藥療效好。其化學成份主要有關附庚素(Guanfu base G, GFG),關附甲素(Guanfu base A, GFA),關附壬素(Guanfubase I, GFI)等，三者均為二萜類生物堿。現代藥理學研究表明關附甲素、關附庚素、關附壬素等具有抗心律失常、抗炎和鎮痛作用。但由于關附甲素提取得率為0.1%左右，提取工藝周期較長，原料藥損耗大，未能充分利用關白附資源。
[0004]近年來研究長QT綜合癥(L-QT，易誘發室性心律失常，暈厥和猝死的一系列綜合癥)及其他心律失常發生機制的新靶點，有實驗表明，心臟鈉離子通道基因SCN5A的突變，造成慢鈉電流反復開發，延緩電流衰減，使動作電位平臺期延長，引起L-QT。這種變化在慢頻率下尤其明顯，是LQT3發生的重要原因，也是誘發其他心律失常的重要原因。
【發明內容】
[0005]本發明目的之一在于提供關白附總生物堿的制備方法。
[0006]本發明目的之二在于提供關白附總生物堿在制備慢鈉離子通道阻斷劑中的應用。
[0007]本發明目的之三在于提供關附甲素在制備慢鈉離子通道阻斷劑中的應用。
[0008]本發明目的之四在于提供關附壬素在抑制藥物代謝酶活性新用途。
[0009]本發明的目的是通過如下技術方案實現的。
[0010]一種關白附總生物堿的制備方法，該方法包括如下步驟:
[0011]步驟1:取關白附藥材，有機溶劑提取，回收溶劑，得提取物浸膏；
[0012]步驟2:取步驟I得到的浸膏，以酸溶液捏溶，將酸溶液低溫冷藏，取酸水層；
[0013]步驟3:取步驟2得到的酸水液，以有機溶劑萃取，酸水母液加堿液調節pH至堿性；
[0014]步驟4:將步驟3中堿化的溶液用有機溶劑萃取，取有機溶劑層，回收溶劑，得關白附總生物堿。
[0015]優選的，所述步驟I中有機溶劑為正丁醇、異丙醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、石油醚、乙醚中的任意一種；
[0016]所述提取方法為冷浸提取；
[0017] 所述步驟2中的酸溶液為鹽酸、硝酸、硫酸、磷酸、甲酸、醋酸、丁酸中的一種或幾種；
[0018]所述步驟3和4中的有機溶劑為正丁醇、乙酸乙酯、甲酸乙酯、甲酸乙酯、氯仿、丙酮、石油醚、乙醚中的任意一種；
[0019]所述步驟3中的堿液為氨水、碳酸鈉、碳酸氫鈉中的一種或幾種。
[0020]優選的，關白附總生物堿的制備方法包括如下步驟:
[0021]步驟1:取關白附藥材，在10_30°C下用50-95%乙醇冷浸提取，回收溶劑，得浸膏；
[0022]步驟2:取步驟I得到的浸膏，以鹽酸水溶液捏溶，將酸溶液低溫冷藏，除去上層的脂溶性雜質，取酸水液；
[0023]步驟3:取步驟2得到的酸水液，用乙酸乙酯萃取，酸水母液加氨水調節pH =8-11 ；
[0024]步驟4:將步驟3中經氨水堿化的溶液迅速用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯層，回收溶劑，真空干燥，得關白附總生物堿。
[0025]更有選的參數為:步驟2中鹽酸水溶液為0.5-1.5mol/l ;和/或步驟3中:酸水母液加氨水調節pH = 9。
[0026]更優選的，關白附總生物堿的制備方法包括如下步驟:
[0027]步驟1:取關白附藥材，粉碎，在10_30°C下用2-8倍量50-95%乙醇冷浸提取2_4次，每次12-36小時，合并提取液，回收溶劑，得浸膏；
[0028]步驟2:取步驟I得到的浸膏，以1-3倍量0.5-1.5mol/l的鹽酸水溶液捏溶，將酸溶液低溫冷藏12-24小時，除去上層的脂溶性雜質，取酸水液；
[0029]步驟3:取步驟2得到的酸水液，用乙酸乙酯萃取2-4次，酸水母液加氨水調節pH=8-11 ；
[0030]步驟4:將步驟3中經氨水堿化的溶液迅速用乙酸乙酯萃取2-4次，取乙酸乙酯層，回收溶劑，真空干燥，得關白附總生物堿。
[0031]進一步優選的，關白附總生物堿的制備方法包括如下步驟:
[0032]步驟1:取關白附藥材，粉碎成10-20目粗粉，在25°C下用5倍量85%乙醇冷浸提取4次，每次24小時，合并提取液，回收溶劑，得浸膏；
[0033]步驟2:取步驟I得到的浸膏，以I倍量lmol/1的鹽酸水溶液捏溶，將酸溶液于2°C低溫冷藏12-24小時，除去上層的脂溶性雜質，取酸水液；
[0034]步驟3:取步驟2得到的酸水液,用乙酸乙酯萃取2次，酸水母液加氨水調節pH =9 ；
[0035]步驟4:將步驟3中經氨水堿化的溶液迅速用乙酸乙酯萃取4次，取乙酸乙酯層，回收溶劑，真空干燥，得關白附總生物堿。
[0036]或，步驟1:取關白附藥材，粉碎成10-20目粗粉，在10°C下用3倍量95%乙醇冷浸提取2次，每次36小時，合并提取液，回收溶劑，得浸膏；
[0037]步驟2:取步驟I得到的浸膏，以3倍量0.5mol/l的鹽酸水溶液捏溶，將酸溶液于2°C低溫冷藏12-24小時，除去上層的脂溶性雜質，取酸水液；
[0038] 步驟3:取步驟2得到的酸水液，用乙酸乙酯萃取4次，酸水母液加氨水調節pH =
8；[0039]步驟4:將步驟3中經氨水堿化的溶液迅速用乙酸乙酯萃取2次，取乙酸乙酯層，回收溶劑，真空干燥，得關白附總生物堿。
[0040]或，步驟1:取關白附藥材，粉碎成10-20目粗粉，在30°C下用8倍量75%乙醇冷浸提取3次，每次12小時，合并提取液，回收溶劑，得浸膏；
[0041]步驟2:取步驟I得到的浸膏，以2倍量1.5mol/l的鹽酸水溶液捏溶，將酸溶液于2°C低溫冷藏12-24小時，除去上層的脂溶性雜質，取酸水液；
[0042]步驟3:取步驟2得到的酸水液,用乙酸乙酯萃取2次，酸水母液加氨水調節pH =11 ;
[0043]步驟4:將步驟3中經氨水堿化的溶液迅速用乙酸乙酯萃取4次，取乙酸乙酯層，回收溶劑，真空干燥，得關白附總生物堿。
[0044]上述關白附總生物堿還可以按常規工藝制成關白附總堿鹽。
[0045]本發明關白附總生物堿和總堿鹽可以按常規的制劑工藝制成藥劑學可接受的任意常規劑型，例如肌肉注射劑，靜脈注射劑、粉針劑、膠囊劑、顆粒劑或片劑。
[0046]本發明關白附總生物堿在制備慢鈉離子通道阻斷劑中的應用；所述關白附總生物堿可以是游離堿或無機酸鹽的形式。
[0047]一種關附甲素在制備慢鈉離子通道阻斷劑中的應用；所述關附甲素可以是游離堿或無機酸鹽的形式。
[0048]一種關附壬素在制備抑制藥物代謝酶藥物中的應用。
[0049]所述藥物代謝酶優選為細胞色素P450酶系中的一種或幾種；進一步優選為CYP2D6。
[0050]本發明所述藥物代謝酶CYP2D6所代謝的藥物化合物及其鹽的分子結構特征為:在化合物分子結構中距離氧化位點5~7A處有一個氮原子。包括抗抑郁藥如阿米替林、丙咪嗪、氯米帕明、地昔帕明、去甲替林、氟西汀、帕羅西汀、頑發克星等；β受體阻滯劑如卡維地洛、普萘洛爾、美托洛爾、阿普洛爾、丁呋洛爾、噻嗎洛爾、布尼洛爾等；抗精神病藥如氯丙嗪、奮乃靜、瑞斯哌東、托哌酮等；抗高血壓藥如胍喹啶、吲哚拉明、烏拉地爾等；抗心絞痛藥如派克昔林、特羅地林等；鎮痛藥如曲馬多；止咳平喘藥如可待因、右美沙芬等；抗心律失常藥如恩卡尼、司巴丁、氟卡尼、普羅帕酮、美西律、茚丙胺。所述關附壬素可以是游離堿或無機酸鹽的形式；優選為鹽酸鹽或硫酸鹽。
[0051] 本發明所述關附甲素和關附壬素可以從市場購買，也可以從關白附中提取分離或通過化學合成的方法得到，其結構式如下:
[0052]
【權利要求】
1.關附壬素或其鹽在制備藥物代謝酶抑制劑中的應用。
2.如權利要求1所述的應用，其特征在于所述藥物代謝酶為細胞色素P450酶系中的一種或幾種。
3.如權利要求2所述的應用，其特征在于所述藥物代謝酶為CYP2D6。
4.一種關白附總生物堿，其特征在于所述總生物堿由如下方法制備: 步驟1:取關白附藥材，在10-30°C下用50-95%乙醇冷浸提取，回收溶劑，得浸膏；步驟2:取步驟I得到的浸膏，以鹽酸水溶液捏溶，將酸溶液低溫冷藏，除去上層的脂溶性雜質，取酸水液； 步驟3:取步驟2得到的酸水液，用乙酸乙酯萃取，酸水母液加氨水調節pH = 8-11 ；步驟4:將步驟3中經氨水堿化的溶液迅速用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯層，回收溶劑，真空干燥，得關白附總生物堿。
5.如權利要求4所述的關白附總生物堿，其特征在于: 步驟2中鹽酸水溶液為0.5-1.5mol/l ;和/或 步驟3中:酸水母液加氨水調節pH = 9。
6.如權利要求4或5所述的關白附總生物堿，其特征在于所述關白附總生物堿還可以按常規工藝制成關白附總堿鹽。
7.如權利要求4-6任一所述的關白附總生物堿在制備慢鈉離子通道阻斷劑中的應用。
8.一種關白附總生物堿的制備方法，其特征在于該方法包括如下步驟: 步驟1:取關白附藥材，在10-30°C下用50-95%乙醇冷浸提取，回收溶劑，得浸膏；步驟2:取步驟I得到的浸膏，以鹽酸水溶液捏溶，將酸溶液低溫冷藏，除去上層的脂溶性雜質，取酸水液； 步驟3:取步驟2得到的酸水液，用乙酸乙酯萃取，酸水母液加氨水調節pH = 8-11 ；步驟4:將步驟3中經氨水堿化的溶液迅速用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯層，回收溶劑，真空干燥，得關白附總生物堿。
9.如權利要求8所述的制備方法，其特征在于: 步驟2中鹽酸水溶液為0.5-1.5mol/l ;和/或 步驟3中:酸水母液加氨水調節pH = 9。
10.一種關附甲素在制備慢鈉離子通道阻斷劑中的應用。
【文檔編號】A61P9/06GK103989672SQ201410240329
【公開日】2014年8月20日 申請日期:2012年6月19日 優先權日:2012年6月19日
【發明者】王廣基, 柳祥, 湯依群, 董秀華, 孫建國, 劉靜涵, 于鵬, 曾艷, 劉建平, 楊春華, 孫申國, 朱天全, 程志國, 汪旻暉 申請人:中國藥科大學, 吉林敖東洮南藥業股份有限公司