本發明屬于醫藥和/或保健品技術領域，具體涉及琥珀酸曲格列汀的新應用，即其在制備促進葡萄糖由脂肪細胞外轉運到脂肪細胞內藥物和/或保健品方面的應用。
背景技術：
葡萄糖從細胞外液順濃度梯度進入細胞需要糖轉運蛋白（GLUT）協助運輸。根據葡萄糖轉運蛋白序列同源性和相似性可以分為三類：第一類，GLUTs 1-4轉運葡萄糖；第二類，GLUTs 5,7,9,11轉運果糖；第三類，GLUTs 6,8,10,12機制尚不清楚。脂肪細胞內膜上存在的葡萄糖轉運蛋白4（GLUT4）在脂肪細胞外液葡萄糖濃度升高時，葡萄糖轉運蛋白4（GLUT4）會轉移到脂肪細胞外膜，從而將脂肪細胞外液中的葡萄糖轉運到脂肪細胞內。
技術實現要素：
本發明目的是為了提供一種琥珀酸曲格列汀的新應用，即其在制備促進葡萄糖由脂肪細胞外轉運到脂肪細胞內藥物和/或保健品方面的應用。
為實現上述目的，本發明采用如下技術方案：
琥珀酸曲格列汀，結構式：
分子式：C22H26FN5O6
分子量：475.45
性狀：白色固體。
琥珀酸曲格列汀在制備促進葡萄糖由脂肪細胞外轉運到脂肪細胞內藥物和/或保健品方面的應用。也就是說琥珀酸曲格列汀能夠提高脂肪細胞外液葡萄糖向脂肪細胞內部的轉移度。
具體的，所述的應用為：琥珀酸曲格列汀通過增加脂肪細胞外膜葡萄糖轉運蛋白GLUT4的含量來促進葡萄糖由脂肪細胞外轉運到脂肪細胞內。
琥珀酸曲格列汀還可以與本領域常規輔料復配制成具有促進葡萄糖由脂肪細胞外轉運到脂肪細胞內的復方制劑。所述復方制劑的劑型為片劑、顆粒劑、膠囊劑、丸劑或注射劑等。
本發明通過試驗發現了琥珀酸曲格列汀的新用途，其能夠促進對脂肪細胞外液葡萄糖的轉運作用，其通過增加脂肪細胞外膜葡萄糖轉運蛋白GLUT4的含量來促進葡萄糖由脂肪細胞外轉運到脂肪細胞內。因此，被用作制備促進葡萄糖由脂肪細胞外轉運到脂肪細胞內藥物和/或保健品。
具體實施方式
以下結合實施例對本發明的技術方案作進一步地詳細介紹，但本發明的保護范圍并不局限于此。
實施例1促進葡萄糖由脂肪細胞外液轉運到脂肪細胞內
以大鼠附睪和腎周脂肪細胞為細胞模型，培養液中加入琥珀酸曲格列汀培養，考察琥珀酸曲格列汀對脂肪細胞外液上清中葡萄糖的影響。
儀器材料：LRH-150恒溫培養箱（上海一恒科技有限公司）；電熱恒溫震蕩水槽（上海一恒科技有限公司，DKZ-2系列）；超凈工作臺（吳江市凈化設備總廠）；TGL-16gR型高速冷凍離心機（上海安亭科學儀器廠）；Power Gen125 組織勻漿機（Fisher Scientific）；Multiskan Go全波長酶標儀（Thermo fisher scientificoy Ratastie2,F1-01620 vantaa,Finland）；CS-H1型混合器（北京博勵陽科技公司）；葡萄糖測定試劑盒（上海榮盛生物藥業有限公司，20150804147）；GLu標準品（南京建成生物工程研究所）；Hanks平衡鹽溶液（MACCGENE,E11R1090）；Ⅰ型膠原蛋白酶（CSAnumer：9007-34-5）；胰島素（CAS NO 11070-73-8）；胎牛血清（浙江天航科技股份有限公司，20150514）；D-葡萄糖（北京希凱創新科技有限公司，2265C297）；琥珀酸曲格列汀、腎上腺素、青霉素鏈霉素混合液（solarbio，20151029）、TES緩沖液（上海華藍化學科技有限公司）；Rat FFA ELISA kit（南京森貝伽生物科技有限公司，201616）；Rat GluT4 ELISA kit（南京森貝伽生物科技有限公司，201616）。
實驗動物：SPF級的SD大鼠，雄性，體重：180 g±20 g，由河南省動物中心提供，許可證號：SCXK（豫）2015-0004。
實驗方法：大鼠脫頸處死，乙醇浴5 min，無菌開腹取附睪及腎周脂肪組織。于含有青鏈霉素（青霉素100U/mL、鏈霉素100μg/mL，下同）的Hanks平衡鹽溶液中剔除附帶血管，并用Hanks平衡鹽溶液漂洗脂肪組織2次。剪碎，8000r/min研磨組織3min，加入1.5倍體積的0.1%Ⅰ型膠原酶于37℃電熱恒溫震蕩水槽中水浴消化1.5 h。然后加入2—3倍體積的胎牛血清終止消化，1200g離心10 min，棄下層，留上層。上層脂肪細胞用Hanks平衡鹽溶液洗滌2次（轉速1200g，時間10min）。加入3mL Hanks平衡鹽溶液，過0.075mm細胞篩，調細胞濃度：2×107。脂肪細胞分為三組：空白組、胰島素陽性對照組、給藥組。其中，以8U胰島素作為陽性對照，Hanks平衡鹽溶液作為空白對照，Hanks平衡鹽溶液作為溶劑。
6孔培養板中，加入400μL樣品溶液、1000μL細胞懸液、300μL 1mg/mL D-葡萄糖溶液和300μL胎牛血清建成2000μL反應體系，每組設3個復孔。37℃恒溫培養箱中培養30min，加入10-5 mol/L腎上腺素500μL繼續培養3 h，冰浴終止反應。取上清2μL用葡萄糖測定試劑盒測定葡萄糖含量。結果見表1。
葡萄糖轉移度=空白組葡萄糖濃度—給藥組/陽性對照組葡萄糖濃度。
數據處理：結果采用均值±SD值表示，數據統計采用SPSS19.0軟件單因素方差分析法（One-Way ANOVA）比較其顯著性差異。
表1、琥珀酸曲格列汀對脂肪細胞外液葡萄糖的影響：
注：與空白組相比，***P<0.001 or, 0.001<**P<0.01
由表1可知，8U胰島素組能夠降低脂肪細胞外液葡萄糖的含量，差異具有統計學意義（P<0.001）。低劑量琥珀酸曲格列汀組能夠降低脂肪細胞外液葡萄糖的含量，差異具有統計學意義（P<0.01）。說明低劑量琥珀酸曲格列汀能夠降低脂肪細胞外液葡萄糖的含量。由葡萄糖轉移度可知，低、中劑量琥珀酸曲格列汀能夠促進脂肪細胞外液葡萄糖轉運到脂肪細胞內。
實施例2 提高脂肪細胞外膜GLUT4的含量
實驗方法：脂肪細胞制備和給藥方法同實施例1，脂肪細胞外膜蛋白制備方法如下：
冰浴終止反應后，每孔棄去1800μL上清，剩余200μL下層細胞混懸液，合并于1.5mL EP管。每孔加入200μL TES緩沖液，洗滌下六孔板上貼附的細胞合并到另一個1.5mL EP管。1200g離心10min，棄下層。合并上層脂肪細胞于1.5ml EP管，TES緩沖液洗滌細胞3次，細胞凍存于-40℃冰箱。15 h后取出立即放入37℃恒溫培養箱解凍。組織勻漿機30000r/min冰上破碎細胞，1000g離心20min，棄沉淀，留上清。上清10000g 4℃離心20min，收集沉淀，即為脂肪細胞外膜蛋白。
于每組得到的脂肪細胞外膜蛋白中，加入30μL TES緩沖液溶解，用GLUT4酶聯免疫測定試劑盒測定脂肪細胞外膜GLUT4的含量。結果見表2。
表2、琥珀酸曲格列汀對脂肪細胞外膜GLUT4的影響
注：與空白組相比，***P<0.001 or, 0.001<**P<0.01 or,*P<0.05
由表2可知，8U胰島素組能夠提高脂肪細胞外膜GLUT4的含量，差異具有統計學意義（P<0.001）。低劑量琥珀酸曲格列汀組能夠升高脂肪細胞外膜GLUT4的含量，差異具有統計學意義（P<0.001）。說明低劑量琥珀酸曲格列汀能夠升高脂肪細胞外膜GLUT4的含量。
由表1、表2可知，低劑量時，琥珀酸曲格列汀能夠降低脂肪細胞外液葡萄糖含量，升高脂肪細胞外膜GLUT4含量，差異均具有統計學意義。可以推測，曲格列汀是通過提高脂肪細胞外膜GLUT4的含量而促進脂肪細胞對脂肪細胞外液葡萄糖的轉運。