本發明涉及無菌用膠原蛋白技術領域,具體涉及甘油在保護I型膠原蛋白的三股螺旋結構中的應用方法。
背景技術:
膠原蛋白屬于生物高分子。膠原蛋白種類較多,常見類型為Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅴ型和Ⅺ型。其中,I型膠原蛋白因具有低免疫源性、與宿主細胞及組織之間協調作用、止血作用和生物可降解等優勢,因此I型膠原蛋白作為生物醫學材料在臨床應用廣泛,如手術縫合線、止血纖維、止血海綿、水凝膠、敷料、人工皮膚、人工血管、角膜及藥物載體等。I型膠原蛋白是纖維形成膠原,是多細胞生物的細胞外的主要結構大分子,能活化上皮細胞,促進上皮細胞增生,也可促進膠原酶生成,使皮膚有張力和彈性,能淡化眼紋和消除眼袋及陰影,在美容與保健方面應用廣泛,適用于輕中度炎癥痤瘡、痤瘡愈后早期色素沉著、痤瘡愈合后早期表淺性疤痕的治療;對治療皮膚過敏,減輕激光、光子治療術后疤痕的形成有輔助療效;在創面愈合期有減輕色素沉著和促進創面愈合的作用。
I型膠原蛋白的結構呈三股螺旋結構,由三條α肽鏈組成,分子量約為300KDa。從動物肌腱中提取的I型膠原蛋白含2條α1肽鏈和1條α2肽鏈,在凝膠電泳圖中分子量為100kDa處有兩條譜帶,一條譜帶是由于兩條α1肽鏈重合所得到的,另一條譜帶表示單條的α2肽鏈。圖譜中在分子量為200kDa處也有一條譜帶,對應于膠原結構中的β鏈,β鏈是α肽鏈的二聚體。當凝膠電泳圖中不顯示譜帶時,表示I型膠原蛋白的三股螺旋結構受到破壞。
現有技術中,利用I型膠原蛋白制備手術縫合線、止血纖維、止血海綿、水凝膠、敷料、人工皮膚、人工血管、角膜或藥物載體等時,為了達到無菌要求,一般進行輻照滅菌,然而,I型膠原蛋白在輻照滅菌中,其三股螺旋結構會被破壞,進而破壞了I型膠原蛋白的功效,因此嚴重限制了I型膠原蛋白的廣泛應用。
技術實現要素:
本發明的目的在于針對現有技術的不足,提供甘油在保護I型膠原蛋白的三股螺旋結構中的應用方法,以利于制備無菌I型膠原蛋白溶液。
為了實現上述目的,本發明采用如下技術方案:
提供甘油在保護I型膠原蛋白的三股螺旋結構中的應用方法,它包括以下步驟:
步驟一,將I型膠原蛋白用溶劑溶解后,得到I型膠原蛋白溶液;
步驟二,往步驟一制得的I型膠原蛋白溶液中加入甘油,充分混合均勻,得到混合溶液;
步驟三,選用包裝材料將步驟二得到的混合溶液進行包裝,然后進行輻照滅菌,即制得無菌I型膠原蛋白溶液。
上述技術方案中,所述步驟一中,所述I型膠原蛋白來源于牛跟腱、豬跟腱或羊跟腱中的一種或任意兩種以上的組合物。
上述技術方案中,所述步驟一中,所述I型膠原蛋白來源于動物提取物。
上述技術方案中,所述步驟一中,所述I型膠原蛋白為經過發酵或人工重組方法而獲得的I型膠原蛋白。
上述技術方案中,所述步驟一中,所述溶劑為水、有機酸、無機酸或緩沖對中的一種或任意兩種以上的組合物;
所述有機酸為乙酸、甲酸、蘋果酸或檸檬酸;所述無機酸為鹽酸、硫酸或磷酸;所述緩沖對為醋酸-醋酸鈉緩沖對、檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖對或磷酸鹽緩沖對。
上述技術方案中,所述步驟一中,所述I型膠原蛋白與所述溶劑之間的重量比為1~10:5000。
上述技術方案中,所述步驟二中,所述甘油占所述I型膠原蛋白溶液的重量比為0.5%~40%。
上述技術方案中,所述步驟三中,所述輻照滅菌為鈷60輻照滅菌或者電子束輻照滅菌。
上述技術方案中,所述步驟三中,所述包裝材料為玻璃容器、塑料容器或鋁塑袋。
上述技術方案中,所述步驟二中,往步驟一制得的I型膠原蛋白溶液中加入甘油的同時還加入防腐劑,所述防腐劑為山梨酸鉀、山梨酸或苯甲醇,所述防腐劑占所述I型膠原蛋白溶液的重量比為0.1%~5%。
本發明與現有技術相比較,有益效果在于:
(1)本發明提供的甘油在保護I型膠原蛋白的三股螺旋結構中的應用方法,由于在對I型膠原蛋白進行輻照滅菌前,加入甘油,進而使得I型膠原蛋白在輻照滅菌中,其三股螺旋結構不被破壞,進而很好地保護了I型膠原蛋白的功效,因此大大提高了I型膠原蛋白的廣泛應用。利用本發明的甘油在保護I型膠原蛋白的三股螺旋結構中的應用方法,利于制備無菌I型膠原蛋白溶液。I型膠原蛋白溶液在美容與保健方面應用廣泛,適用于輕中度炎癥痤瘡、痤瘡愈后早期色素沉著、痤瘡愈合后早期表淺性疤痕的治療;對治療皮膚過敏,減輕激光、光子治療術后疤痕的形成有輔助療效;在創面愈合期有減輕色素沉著和促進創面愈合的作用。
(2)本發明提供的甘油在保護I型膠原蛋白的三股螺旋結構中的應用方法,具有方法簡單,生產成本低,并能夠適用于大規模應用的特點。
附圖說明
圖1是I型膠原蛋白溶液經過不同方法處理后的SDS-PAGE凝膠電泳圖。通過對比不經滅菌處理、用鈷60滅菌處理、和用鈷60滅菌同時加入甘油處理的樣品譜帶,觀察膠原蛋白三螺旋結構是否保持完整。
具體實施方式
為了使本發明所解決的技術問題、技術方案及有益效果更加清楚明白,以下結合實施例,對本發明進行進一步詳細說明。應當理解,此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發明,并不用于限定本發明。
實施例1。
甘油在保護I型膠原蛋白的三股螺旋結構中的應用方法,它包括以下步驟:
步驟一,將I型膠原蛋白用溶劑溶解后,得到I型膠原蛋白溶液;本實施例中,I型膠原蛋白來源于牛跟腱;
本實施例中,溶劑為水;
本實施例中,I型膠原蛋白與溶劑之間的重量比為5:1000;
步驟二,往步驟一制得的I型膠原蛋白溶液中加入甘油,充分混合均勻,得到混合溶液;本實施例中,甘油占I型膠原蛋白溶液的重量比為20%;
步驟三,選用玻璃容器將步驟二得到的混合溶液進行包裝,然后進行鈷60輻照滅菌,即制得無菌I型膠原蛋白溶液。
本實施例的甘油在保護I型膠原蛋白的三股螺旋結構中的應用方法,由于在對I型膠原蛋白進行輻照滅菌前,加入甘油,進而使得I型膠原蛋白在輻照滅菌中,其三股螺旋結構不被破壞,進而很好地保護了I型膠原蛋白的功效,因此大大提高了I型膠原蛋白的廣泛應用。利用本發明的甘油在保護I型膠原蛋白的三股螺旋結構中的應用方法,利于制備無菌I型膠原蛋白溶液。I型膠原蛋白溶液在美容與保健方面應用廣泛,適用于輕中度炎癥痤瘡、痤瘡愈后早期色素沉著、痤瘡愈合后早期表淺性疤痕的治療;對治療皮膚過敏,減輕激光、光子治療術后疤痕的形成有輔助療效;在創面愈合期有減輕色素沉著和促進創面愈合的作用。
實施例2。
甘油在保護I型膠原蛋白的三股螺旋結構中的應用方法,它包括以下步驟:
步驟一,將I型膠原蛋白用溶劑溶解后,得到I型膠原蛋白溶液;本實施例中,I型膠原蛋白來源于豬跟腱;
本實施例中,溶劑為有機酸;其中,有機酸為乙酸、甲酸、蘋果酸或檸檬酸;
本實施例中,I型膠原蛋白與溶劑之間的重量比為1:5000;
步驟二,往步驟一制得的I型膠原蛋白溶液中加入甘油和山梨酸鉀,充分混合均勻,得到混合溶液;本實施例中,甘油占I型膠原蛋白溶液的重量比為0.5%;山梨酸鉀占I型膠原蛋白溶液的重量比為3%;
步驟三,選用塑料容器將步驟二得到的混合溶液進行包裝,然后進行電子束輻照滅菌,即制得無菌I型膠原蛋白溶液。
本實施例的甘油在保護I型膠原蛋白的三股螺旋結構中的應用方法,由于在對I型膠原蛋白進行輻照滅菌前,加入甘油,進而使得I型膠原蛋白在輻照滅菌中,其三股螺旋結構不被破壞,進而很好地保護了I型膠原蛋白的功效,因此大大提高了I型膠原蛋白的廣泛應用。利用本發明的甘油在保護I型膠原蛋白的三股螺旋結構中的應用方法,利于制備無菌I型膠原蛋白溶液。I型膠原蛋白溶液在美容與保健方面應用廣泛,適用于輕中度炎癥痤瘡、痤瘡愈后早期色素沉著、痤瘡愈合后早期表淺性疤痕的治療;對治療皮膚過敏,減輕激光、光子治療術后疤痕的形成有輔助療效;在創面愈合期有減輕色素沉著和促進創面愈合的作用。
實施例3。
甘油在保護I型膠原蛋白的三股螺旋結構中的應用方法,它包括以下步驟:
步驟一,將I型膠原蛋白用溶劑溶解后,得到I型膠原蛋白溶液;本實施例中,I型膠原蛋白來源于羊跟腱;
本實施例中,溶劑為無機酸,其中,無機酸為鹽酸、硫酸或磷酸;
本實施例中,I型膠原蛋白與溶劑之間的重量比為10:5000;
步驟二,往步驟一制得的I型膠原蛋白溶液中加入甘油和山梨酸,充分混合均勻,得到混合溶液;本實施例中,甘油占I型膠原蛋白溶液的重量比為40%;山梨酸占I型膠原蛋白溶液的重量比為0.1%;
步驟三,選用鋁塑袋將步驟二得到的混合溶液進行包裝,然后進行鈷60輻照滅菌,即制得無菌I型膠原蛋白溶液。
本實施例的甘油在保護I型膠原蛋白的三股螺旋結構中的應用方法,由于在對I型膠原蛋白進行輻照滅菌前,加入甘油,進而使得I型膠原蛋白在輻照滅菌中,其三股螺旋結構不被破壞,進而很好地保護了I型膠原蛋白的功效,因此大大提高了I型膠原蛋白的廣泛應用。利用本發明的甘油在保護I型膠原蛋白的三股螺旋結構中的應用方法,利于制備無菌I型膠原蛋白溶液。I型膠原蛋白溶液在美容與保健方面應用廣泛,適用于輕中度炎癥痤瘡、痤瘡愈后早期色素沉著、痤瘡愈合后早期表淺性疤痕的治療;對治療皮膚過敏,減輕激光、光子治療術后疤痕的形成有輔助療效;在創面愈合期有減輕色素沉著和促進創面愈合的作用。
實施例4。
甘油在保護I型膠原蛋白的三股螺旋結構中的應用方法,它包括以下步驟:
步驟一,將I型膠原蛋白用溶劑溶解后,得到I型膠原蛋白溶液;本實施例中,I型膠原蛋白來源于牛跟腱和豬跟腱的組合物;
本實施例中,溶劑為緩沖對;其中,緩沖對為醋酸-醋酸鈉緩沖對、檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖對或磷酸鹽緩沖對;
本實施例中,I型膠原蛋白與溶劑之間的重量比為3:5000;
步驟二,往步驟一制得的I型膠原蛋白溶液中加入甘油和苯甲醇,充分混合均勻,得到混合溶液;本實施例中,甘油占I型膠原蛋白溶液的重量比為10%;苯甲醇占I型膠原蛋白溶液的重量比為5%;
步驟三,選用玻璃容器將步驟二得到的混合溶液進行包裝,然后進行電子束輻照滅菌,即制得無菌I型膠原蛋白溶液。
本實施例的甘油在保護I型膠原蛋白的三股螺旋結構中的應用方法,由于在對I型膠原蛋白進行輻照滅菌前,加入甘油,進而使得I型膠原蛋白在輻照滅菌中,其三股螺旋結構不被破壞,進而很好地保護了I型膠原蛋白的功效,因此大大提高了I型膠原蛋白的廣泛應用。利用本發明的甘油在保護I型膠原蛋白的三股螺旋結構中的應用方法,利于制備無菌I型膠原蛋白溶液。I型膠原蛋白溶液在美容與保健方面應用廣泛,適用于輕中度炎癥痤瘡、痤瘡愈后早期色素沉著、痤瘡愈合后早期表淺性疤痕的治療;對治療皮膚過敏,減輕激光、光子治療術后疤痕的形成有輔助療效;在創面愈合期有減輕色素沉著和促進創面愈合的作用。
實施例5。
甘油在保護I型膠原蛋白的三股螺旋結構中的應用方法,它包括以下步驟:
步驟一,將I型膠原蛋白用溶劑溶解后,得到I型膠原蛋白溶液;本實施例中,I型膠原蛋白來源于牛跟腱、豬跟腱和羊跟腱中的組合物;
本實施例中,溶劑為水和有機酸的組合物;其中,有機酸為乙酸、甲酸、蘋果酸或檸檬酸;
本實施例中,I型膠原蛋白與溶劑之間的重量比為8:5000;
步驟二,往步驟一制得的I型膠原蛋白溶液中加入甘油,充分混合均勻,得到混合溶液;本實施例中,甘油占I型膠原蛋白溶液的重量比為30%;
步驟三,選用鋁塑袋將步驟二得到的混合溶液進行包裝,然后進行鈷60輻照滅菌,即制得無菌I型膠原蛋白溶液。
本實施例的甘油在保護I型膠原蛋白的三股螺旋結構中的應用方法,由于在對I型膠原蛋白進行輻照滅菌前,加入甘油,進而使得I型膠原蛋白在輻照滅菌中,其三股螺旋結構不被破壞,進而很好地保護了I型膠原蛋白的功效,因此大大提高了I型膠原蛋白的廣泛應用。利用本發明的甘油在保護I型膠原蛋白的三股螺旋結構中的應用方法,利于制備無菌I型膠原蛋白溶液。I型膠原蛋白溶液在美容與保健方面應用廣泛,適用于輕中度炎癥痤瘡、痤瘡愈后早期色素沉著、痤瘡愈合后早期表淺性疤痕的治療;對治療皮膚過敏,減輕激光、光子治療術后疤痕的形成有輔助療效;在創面愈合期有減輕色素沉著和促進創面愈合的作用。
實施例6。
甘油在保護I型膠原蛋白的三股螺旋結構中的應用方法,它包括以下步驟:
步驟一,將I型膠原蛋白用溶劑溶解后,得到I型膠原蛋白溶液;本實施例中,I型膠原蛋白來源于動物提取物;
本實施例中,溶劑為有機酸、無機酸和緩沖對的組合物;其中,有機酸為乙酸、甲酸、蘋果酸或檸檬酸;無機酸為鹽酸、硫酸或磷酸;緩沖對為醋酸-醋酸鈉緩沖對、檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖對或磷酸鹽緩沖對;
本實施例中,I型膠原蛋白與溶劑之間的重量比為2:5000;
步驟二,往步驟一制得的I型膠原蛋白溶液中加入甘油,充分混合均勻,得到混合溶液;本實施例中,甘油占I型膠原蛋白溶液的重量比為5%;
步驟三,選用玻璃容器將步驟二得到的混合溶液進行包裝,然后進行鈷60輻照滅菌,即制得無菌I型膠原蛋白溶液。
本實施例的甘油在保護I型膠原蛋白的三股螺旋結構中的應用方法,由于在對I型膠原蛋白進行輻照滅菌前,加入甘油,進而使得I型膠原蛋白在輻照滅菌中,其三股螺旋結構不被破壞,進而很好地保護了I型膠原蛋白的功效,因此大大提高了I型膠原蛋白的廣泛應用。利用本發明的甘油在保護I型膠原蛋白的三股螺旋結構中的應用方法,利于制備無菌I型膠原蛋白溶液。I型膠原蛋白溶液在美容與保健方面應用廣泛,適用于輕中度炎癥痤瘡、痤瘡愈后早期色素沉著、痤瘡愈合后早期表淺性疤痕的治療;對治療皮膚過敏,減輕激光、光子治療術后疤痕的形成有輔助療效;在創面愈合期有減輕色素沉著和促進創面愈合的作用。
實施例7。
甘油在保護I型膠原蛋白的三股螺旋結構中的應用方法,它包括以下步驟:
步驟一,將I型膠原蛋白用溶劑溶解后,得到I型膠原蛋白溶液;本實施例中, I型膠原蛋白為經過發酵方法而獲得的I型膠原蛋白;
本實施例中,溶劑為水、有機酸、無機酸和緩沖對的組合物;其中,有機酸為乙酸、甲酸、蘋果酸或檸檬酸;無機酸為鹽酸、硫酸或磷酸;緩沖對為醋酸-醋酸鈉緩沖對、檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖對或磷酸鹽緩沖對;
本實施例中,I型膠原蛋白與溶劑之間的重量比為7:5000;
步驟二,往步驟一制得的I型膠原蛋白溶液中加入甘油,充分混合均勻,得到混合溶液;本實施例中,甘油占I型膠原蛋白溶液的重量比為15%;
步驟三,選用玻璃容器將步驟二得到的混合溶液進行包裝,然后進行鈷60輻照滅菌,即制得無菌I型膠原蛋白溶液。
本實施例的甘油在保護I型膠原蛋白的三股螺旋結構中的應用方法,由于在對I型膠原蛋白進行輻照滅菌前,加入甘油,進而使得I型膠原蛋白在輻照滅菌中,其三股螺旋結構不被破壞,進而很好地保護了I型膠原蛋白的功效,因此大大提高了I型膠原蛋白的廣泛應用。利用本發明的甘油在保護I型膠原蛋白的三股螺旋結構中的應用方法,利于制備無菌I型膠原蛋白溶液。I型膠原蛋白溶液在美容與保健方面應用廣泛,適用于輕中度炎癥痤瘡、痤瘡愈后早期色素沉著、痤瘡愈合后早期表淺性疤痕的治療;對治療皮膚過敏,減輕激光、光子治療術后疤痕的形成有輔助療效;在創面愈合期有減輕色素沉著和促進創面愈合的作用。
實施例8。
甘油在保護I型膠原蛋白的三股螺旋結構中的應用方法,它包括以下步驟:
步驟一,將I型膠原蛋白用溶劑溶解后,得到I型膠原蛋白溶液;本實施例中, I型膠原蛋白為經過人工重組方法而獲得的I型膠原蛋白;
本實施例中,溶劑為緩沖對,其中,緩沖對為醋酸-醋酸鈉緩沖對;
本實施例中,I型膠原蛋白與溶劑之間的重量比為6:5000;
步驟二,往步驟一制得的I型膠原蛋白溶液中加入甘油,充分混合均勻,得到混合溶液;本實施例中,甘油占I型膠原蛋白溶液的重量比為25%;
步驟三,選用塑料容器將步驟二得到的混合溶液進行包裝,然后進行電子束輻照滅菌,即制得無菌I型膠原蛋白溶液。
本實施例的甘油在保護I型膠原蛋白的三股螺旋結構中的應用方法,由于在對I型膠原蛋白進行輻照滅菌前,加入甘油,進而使得I型膠原蛋白在輻照滅菌中,其三股螺旋結構不被破壞,進而很好地保護了I型膠原蛋白的功效,因此大大提高了I型膠原蛋白的廣泛應用。利用本發明的甘油在保護I型膠原蛋白的三股螺旋結構中的應用方法,利于制備無菌I型膠原蛋白溶液。I型膠原蛋白溶液在美容與保健方面應用廣泛,適用于輕中度炎癥痤瘡、痤瘡愈后早期色素沉著、痤瘡愈合后早期表淺性疤痕的治療;對治療皮膚過敏,減輕激光、光子治療術后疤痕的形成有輔助療效;在創面愈合期有減輕色素沉著和促進創面愈合的作用。
最后應當說明的是,以上實施例僅用以說明本發明的技術方案,而非對本發明保護范圍的限制,盡管參照較佳實施例對本發明作了詳細地說明,本領域的普通技術人員應當理解,可以對本發明的技術方案進行修改或者等同替換,而不脫離本發明技術方案的實質和范圍。