一種顯著提高解酒護肝活性的組合物，其制備方法及應用與流程

本發明涉及一種顯著提高解酒護肝活性的組合物。尤其涉及一種由蜂王漿提取物、葛根、枳椇子復配，采用80％乙醇熱回流對葛根、枳椇子進行混合提取，提取物與蜂王漿提取物采用固體分散技術制備的組合物。
背景技術：
：少量飲酒能活血、通絡、散寒，過量飲酒則會產生“酒精中毒”(俗稱醉酒)。醫學上將酒精中毒分為急性酒精中毒和慢性酒精中毒兩種。其中，急性酒精中毒是指過量飲酒后，在較短時間給患者帶來惡心、嘔吐、頭暈、譫語、躁動、昏迷、大小便失禁、呼吸抑制甚至死亡的臨床癥狀；慢性酒精中毒指由于長期過量飲酒，進入人體的乙醇不能被消化吸收，隨血液進入大腦，破壞神經元細胞膜，削弱中樞神經系統，并通過激活抑制性神經原和抑制激活性神經原造成大腦活動遲緩、神經細胞壞死、嚴重者造成酒精性肝硬化和某些癌癥(如口腔癌、舌癌、肝癌)。近年以來，我國酒精消費群體與日俱增，已成為社會不安定因素而備受關注。目前，市場出現的解酒產品多以化學藥品、中成藥制劑為主，在解酒的同時，會不同程度加重肝臟、腎臟代謝負擔而產生不同程度的傷害。葛根、枳椇子作為傳統藥食同源藥材，其解酒功能研究始載于我國《千金方》、《本草綱目》等醫學巨著。現代藥學、藥理學、藥效學、臨床醫學對葛根、枳椇子解酒作用的研究文獻較多，作為解酒原料開發上市的產品也屢見不鮮。另外，“葛根解酒顆粒茶及其制備方法(專利公布號：CN105767355A)”公開了一種葛根解酒顆粒茶，由葛根56～71份、小麥仁10～15份、枳椇子4～9份、桑葚葉5～8份、葛花1～3份、茯苓5～7份組成；“一種護肝、緩解酒后不適的固體飲料及其制備方法(專利公布號：CN106261447A)”公開了一種護肝、緩解酒后不適的固體飲料，由枳椇子20～40份、葛根20～40份、沙棘15～35份、甘草10～30份、烏梅30～90份、干姜1～6份組成；“一種對酒精性肝損傷具有保護作用的咀嚼片及其制備方法(專利公布號：CN106038733A)”公開了一種對酒精性肝損傷具有保護作用的咀嚼片，由大黃15～30份、枳椇子9～30份、牛樟芝3～6份、黃芪15～30份、葛根9～15份組成。蜂王漿是蜜蜂巢中培育幼蟲的青年工蜂咽頭腺的分泌物，是供給將要變成蜂王的幼蟲的食物，也是蜂王終身的食物。作為傳統藥食兩用藥材，現代研究確證的藥理作用為改善營養、提高免疫、輔助預防心腦血管疾病、抗菌消炎防癌、抗衰老等。本發明旨在以傳統藥食兩用的蜂王漿提取物、葛根、枳椇子為組合原料，通過本發明特定組成比例、抽提工藝、功能成分控制、固體分散等技術方案實施，制備高效解酒護肝組合物，為研究開發解酒護肝藥品、保健食品、功能性普通食品、特殊醫學用食品、特殊膳食食品提供組合原料或制劑。技術實現要素：：本發明的第一目的在于提供一種顯著提高解酒護肝活性的組合物及其制備方法；第二目的在于提供該組合物的應用。本發明的第一目的是采用下述技術方案實現的：首先，本發明提供一種顯著提高解酒護肝活性的組合物，所述組合物由重量份數10～19份的蜂王漿提取物、重量份數291～763份的葛根、重量份數171～763份的枳椇子組成；優選地，所述組合物由重量份數12～18份的蜂王漿提取物、重量份數350～650份的葛根、重量份數200～500份的枳椇子組成；進一步優選，所述組合物由重量份數13～17份的蜂王漿提取物、重量份數40～600份的葛根、重量份數250～450份的枳椇子組成；最優選，所述組合物由重量份數14～16份的蜂王漿提取物、重量份數450～550份的葛根、重量份數300～400份的枳椇子組成。其次，本發明所述蜂王漿提取物系采用蜂王漿為原料，采用現有技術抽提制得。其中，王漿酸含量為10％～50％；優選為20％～40％；更優選為30％～40％。再其次，本發明所述葛根、枳椇子系采用80％乙醇熱回流混合提取。具體為：將葛根、枳椇子混合粉碎成20-40目粗粉，添加80％乙醇潤濕浸泡12小時，添加料液比為1:10、濃度為80％乙醇回流提取三次，每次提取1.5小時，提取溫控在75～80℃之間，收集提取液經減壓濃縮、干燥得混合提取物。其中，總黃酮含量≥30％。最后，將本發明所述蜂王漿提取物、葛根枳椇子混合提取物混合，加入無水乙醇、乙醇、丙酮、氯仿中的一種或幾種有機溶劑溶解。添加聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、聚維酮K30、泊洛沙姆-188、木糖醇、山梨醇、枸櫞酸中的一種或幾種作為載體，融化或采用無水乙醇、乙醇、丙酮、氯仿中的一種或幾種有機溶劑溶解后加至蜂王漿提取物與葛根枳椇子混合提取物溶液中，充分混合均勻，蒸去溶劑得提取物在載體中混合而成的共沉淀固體分散體，經干燥即得本發明所述組合物。優選地，溶解蜂王漿提取物與葛根枳椇子混合提取物的有機溶劑料液比為1:1～10，優選為2～8，進一步優選為3～6，最優選為4～5。優選地，載體溶解采用加熱融化或添加有機溶劑溶解兩種方式。有機溶劑溶解方式料液比為1:1～10，優選為2～8，進一步優選為3～6，最優選為4～5。本發明的第二目的是采用下述技術方案實現的：首先，本發明所述組合物，具有解酒、保肝、護肝功能/功效，可應用于藥品、保健食品、功能性普通食品、特殊醫學食品、特殊膳食食品研究開發。其次，本發明所述組合物，根據需要可添加或不添加藥品、保健食品、功能性普通食品、特殊醫學食品、特殊膳食食品可接受的輔料，進一步制成顆粒劑、片劑、硬膠囊劑、滴丸等固體口服制劑。具體實施方式下面結合具體實施例對本發明做進一步詳細的描述，本領域技術人員能夠理解，這些實施例僅用于說明本發明，但本發明的實施方式不限于此。實施例1：葛根、枳椇子提取物制備本發明所述葛根、枳椇子系采用80％乙醇熱回流混合提取。具體方法如下：取葛根、枳椇子原藥材各100g，混合粉碎過40目篩，添加80％乙醇適量潤濕浸泡12小時，添加料液比為1:10、濃度為80％乙醇回流提取三次，每次提取1.5小時，提取溫控在75～80℃之間，收集提取液經減壓濃縮、干燥得混合提取物19.92g。采用高效液相色譜法測定總黃酮含量，測得提取物中總黃酮含量為54.23％。本發明乙醇熱回流混合提取工藝條件的篩選：取葛根、枳椇子原藥材各50g，混合粉碎過40目篩，添加80％乙醇適量潤濕浸泡12小時，添加料液比為1:10、濃度為80％乙醇回流提取三次，每次提取1.5小時，提取溫控在75～80℃之間，收集提取液經減壓濃縮、干燥得混合提取物。采用高效液相色譜法測定總黃酮含量。以下考察實驗均采用同一批次藥物按上述流程實施，用量均以原藥材各50g。A.乙醇濃度的影響考慮到乙醇濃度對總黃酮得率的影響，故采用20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％乙醇9個水平開展乙醇濃度工藝優化考察，在其他條件不變的情況下(溫度78℃，提取時間1.5h,料液比1:10),以總黃酮含量(提取物浸膏中總黃酮含量)為考察指標，結果見表1。表1不同乙醇濃度對總黃酮得率影響試驗結果將表1中的結果，乙醇濃度對總黃酮得率制作曲線圖，具體如圖1所示。從圖1可以看出：在其他條件不變的情況下，在乙醇濃度小于50％時，總黃酮得率并無明顯變化；當乙醇濃度≥50％時,隨濃度的增大，總黃酮的得率也隨之上升；當乙醇濃度大于90％時，可以看出得率開始下降。因此，最佳提取乙醇濃度為80％。B.溫度的影響考慮到提取溫度對總黃酮得率的影響，結合工業化生產安全性，采用20、30、40、50、60、70、80、90℃8個水平開展提取溫度工藝優化考察，在其他條件不變的情況下(乙醇濃度80％，提取時間1.5h,料液比1:10),以總黃酮含量(提取物浸膏中總黃酮含量)為考察指標，結果見表2。表2提取溫度對總黃酮得率影響研究結果將表2中溫度對總黃酮得率制作曲線圖，具體如圖2所示。從圖2可以看出：在其他條件不變的情況下，在溫度小于30℃時，總黃酮并沒有提取出來；溫度高于30℃時,隨溫度的增大，總黃酮的得率也隨之上升；當溫度大于80℃時，可以看出得率開始呈下降趨勢。因此，最佳提取溫度為75～80℃。C.提取時間的影響考慮到提取時間對總黃酮得率的影響，故采用30、40、50、60、70、80、90、100、110、120min10個水平開展提取時間工藝優化考察，在其他條件不變的情況下(乙醇濃度80％，溫度78℃,料液比1:10),以總黃酮含量(提取物浸膏中總黃酮含量)為考察指標，結果見表3。表3提取時間對總黃酮得率影響研究結果將表3中的提取時間對總黃酮得率制作曲線圖，具體如圖3所示。從圖3可以看出：在其他條件不變的情況下，在提取時間小于90min時，總黃酮得率隨提取時間的增大而增大；在提取時間大于90min時，總黃酮得率隨提取時間的增大而出現明顯的下降趨勢。因此，最佳提取時間為90min。D.料液比的影響考慮到料液比對總黃酮得率的影響和成本問題，故采用料液比為1:5、1:6、1:7、1:8、1:9、1:10、1:11、1:12、1:13共計9個水平開展料液比工藝優化考察，在其他條件不變的情況下(乙醇濃度80％，提取時間1.5h,溫度78℃),以總黃酮含量(提取物浸膏中總黃酮含量)為考察指標，結果見表4。表4料液比對總黃酮得率影響研究結果將表4中料液比對總黃酮得率影響制作柱形圖，具體如圖4所示。從圖4可以看出：在其他條件不變的情況下，當料液比小于1:10時，總黃酮的得率隨溶劑量的增大而增大；當料液比大于1:10時，總黃酮的得率并沒有明顯的變化，說明此時總黃酮已被轉移完全，為節約成本，選擇最佳料液比為1:10。附圖說明圖1本發明實施例1乙醇濃度對總黃酮得率影響曲線圖圖2本發明實施例1提取溫度對總黃酮得率影響曲線圖圖3本發明實施例1提取時間對總黃酮得率影響曲線圖圖4本發明實施例1提取料液比對總黃酮得率影響柱形圖實施例2：蜂王漿提取物準備直接購置王漿酸標示含量≥30％的蜂王漿提取物(備注：此蜂王漿提取物由王漿酸含量≥1.8％的蜂王漿提取制得)，采用高效液相色譜法自檢王漿酸含量為33.48％，作為本發明組合物制備使用。實施例3：組合物制備1A.取葛根600g、枳椇子450g按實施例1乙醇熱回流混合提取，得提取物105g；取實施例2準備的蜂王漿提取物18g，過80目篩備用。B.將蜂王漿提取物、葛根枳椇子混合提取物混合，加入10倍量的無水乙醇溶解，制成混合液。添加聚乙二醇4000、聚維酮K30、木糖醇作為載體，采用8倍量的丙酮溶解后加至上述混懸液中，充分混合均勻，蒸去溶劑得提取物在載體中混合而成的共沉淀固體分散體，經干燥得組合物120g。實施例4：組合物制備2A.取葛根550g、枳椇子400g按實施例1乙醇熱回流混合提取，得提取物95g；取實施例2準備的蜂王漿提取物16g，過100目篩備用。B.將蜂王漿提取物、葛根枳椇子混合提取物混合，加入8倍量的乙醇溶解，制成混懸液。添加聚乙二醇4000、聚維酮K30、木糖醇作為載體，采用8倍量的無水乙醇溶解后加至上述混懸液中，充分混合均勻，蒸去溶劑得提取物在載體中混合而成的共沉淀固體分散體，經干燥得組合物109g。實施例5:組合物制備3A.取葛根450g、枳椇子300g按實施例1乙醇熱回流混合提取，得提取物75g；取實施例2準備的蜂王漿提取物14g，過80目篩備用。B.將蜂王漿提取物、葛根枳椇子混合提取物混合，加入6倍量的丙酮溶解，制成混懸液。添加聚維酮K30、泊洛沙姆-188、山梨醇作為載體，采用5倍量的氯仿溶解后加至上述混懸液中，充分混合均勻，蒸去溶劑得提取物在載體中混合而成的共沉淀固體分散體，經干燥得組合物87g。實施例6：組合物制備4A.取葛根5000g、枳椇子3500g按照實施例1中所述的乙醇熱回流混合提取，得提取物847g；取實施例2準備的蜂王漿提取物150g，過80目篩備用。B.將蜂王漿提取物、葛根枳椇子混合提取物混合，加入5倍量的氯仿溶解制成混懸液。添加聚乙二醇4000、泊洛沙姆-188、山梨醇、枸櫞酸作為載體，采用4倍量的丙酮溶解后加至上述混懸液中，充分混合均勻，蒸去溶劑得提取物在載體中混合而成的共沉淀固體分散體，經干燥得組合物977g。實施例7：制劑制備1取實施例5制備的組合物200g，添加適量糖粉、糊精、乳糖、甘露醇，經制粒、干燥得具有解酒護肝活性的顆粒劑。實施例8：制劑制備2取實施例5制備的組合物200g，添加適量淀粉、糖粉、糊精、聚維酮、阿拉伯膠漿，經混合、制粒、壓片制成具有解酒護肝活性的片劑。實施例9：制劑制備3取實施例5制備的組合物200g，添加適量蔗糖、乳糖、微晶纖維素、二氧化硅、滑石粉、硬脂酸鎂，經混合、制粒、充填制備成具有解酒護肝活性的硬膠囊。實施例10：制劑制備4取實施例5制備的組合物200g，添加適量聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、硬脂酸鈉、甘油明膠、聚氧乙烯單硬脂酸酯，經混合、溶解、制丸制備成具有解酒護肝活性的滴丸。為了更進一步對本發明組合物技術效果進行說明，本發明選取實施例2準備的蜂王漿提取物、總黃酮含量為54.0％的葛根提取物、總黃酮含量為54.0％枳椇子提取物、實施例1制備的葛根枳椇子混合提取物(總黃酮含量為54.23％)作對照樣品，編號為①、②、③、④；選取實施例5制備的組合物作為試驗樣品，編號為⑤；選取重量比葛根：枳椇子：蜂王漿提取物＝2:2:3按實施例5制備的組合物(備注：所述組合物各組成物質與本發明組合物相同但組成比例在本發明組合物組成比例之外)作為參比樣品，編號為⑥。同時開展乙醇對小鼠睡眠潛伏期和睡眠時間的影響、大鼠血液中乙醇濃度變化的影響、小鼠肝臟保護作用試驗，結果如下：1.乙醇對小鼠睡眠潛伏期和睡眠時間的影響試驗給藥劑量：本發明所述組合物⑤60kg成年人給樣劑量確定為2.4g/天，據此折算體重為20g小鼠給樣劑量為252mg/kg。依據等劑量給樣可比原則確定對照樣品⑥、④小鼠給樣劑量為252mg/kg。依據等劑量給樣可比原則，結合國家規定的葛根、枳椇子、蜂王漿提取物日最高推薦劑量確定對照樣品①給樣量為62mg/kg；對照樣品②給樣量為252mg/kg；對照樣品③給樣量為252mg/kg。試驗方案及數據：選取健康昆明種雄性小鼠70只，體重20±2g。正常喂養一周后隨機分為7組，編號為①～⑥組及空白組。其中，①～⑥組給予對應編號的樣品，空白組不做任何處理。30min后①～⑥組及空白組均給予60％乙醇(劑量為0.32ml/20g)。詳細記錄各組小鼠翻正反射消失及恢復時間，計算睡眠潛伏期及睡眠時間，結果見表5。表5乙醇對小鼠睡眠時間和睡眠潛伏期影響試驗結果組別動物數睡眠潛伏期(min)睡眠時間(min)①10只11.3±2.3439±17.23②10只12.6±1.9423±18.32③10只11.9±2.4428±17.96④10只13.2±2.5418±18.41⑤10只17.5±2.8340±17.89⑥10只13.5±2.7416±17.86空白組10只9.8±0.1480±0.10表5看出：實驗結束時，①～⑥組相較于空白組睡眠潛伏期、睡眠時間均由不同程度改善，而⑤組相較于①、②、③、④、⑥組及空白組睡眠潛伏期、睡眠時間p＜0.01，具有高度統計學差異。試驗結論：蜂王漿提取物、葛根提取物、枳椇子提取物、葛根枳椇子混合提取物、非本發明比例制備組合物均有一定改善乙醇所致小鼠睡眠潛伏期和隨眠時間功能，但差異不顯著。本發明所述組合物⑤顯著延長乙醇所致小鼠睡眠潛伏期、縮短睡眠時間的藥理活性。2.對大鼠血液中乙醇濃度變化影響試驗試驗物品：①～⑥號樣品、白酒(北京紅星釀酒廠制造的52°紅星二鍋頭白酒)、體重200±20g健康雄性大鼠。給樣劑量：本發明所述組合物⑤60kg成年人給樣劑量確定為2.4g/天，據此折算體重為200g大鼠給樣劑量為216mg/kg。依據等劑量給樣可比原則確定對照樣品⑥、④給樣劑量為216mg/kg。依據等劑量給樣可比原則，結合國家規定的葛根、枳椇子、蜂王漿提取物日最高推薦劑量確定對照樣品①給樣量為54mg/kg；對照樣品②給樣量為216mg/kg；對照樣品③給樣量為216mg/kg。試驗方案1：本發明所述組合物降低大鼠血液中乙醇濃度活性確認選取健康雄性大鼠30只,正常喂養一周后隨機分空白對照組、先藥后酒組、先酒后藥組，每組各10只。試驗前禁食12h,按要求灌胃給樣(空白對照組給予白酒、先酒后藥組灌酒后30min后給藥、先藥后酒組給藥30min后給酒，三組給酒劑量均為0.015ml/g體重)。分別于給樣前和給樣后1h、2h、3h、4h從眼眶靜脈叢取血，測定乙醇濃度(備注：乙醇濃度采用美國柯達公司VTTROS250干化學全自動生化分析儀測定)，結果見表6、表7。表6各組各時間段乙醇濃度(單位mol/L)表7兩試驗組乙醇濃度(單位mol/L)時間(h)先藥后酒組先酒后藥組P給樣前2.0±02.0±0125.7±15.447.5±17.0＜0.01243.4±15.241.3±15.9342.0±16.044.4±16.2431.0±16.537.6±16.9＜0.05試驗結論：相較于空白對照組而言，無論是先藥后酒還是先酒后藥，本發明所述組合物均具有顯著降低大鼠血液中乙醇濃度作用。而先藥后酒對降低大鼠血液中乙醇濃度活性更強。試驗方案2：本發明組合物降低大鼠血液中乙醇濃度活性比較選取健康雄性大鼠70只，正常喂養一周后隨機分為7組，編號為①～⑥組及空白組，每組各10只。禁食12h,①～⑥組分別灌胃給予所對應試驗樣品，30min后①～⑥組及空白組按0.015ml/g體重灌胃給予白酒。分別于給樣前、給樣結束后1h、2h、3h、4h同時從眼眶靜脈叢取血，測定乙醇濃度，結果見表8。表8各組不同時間段乙醇濃度(單位mol/L)測定結果試驗結論：相較于空白組而言，樣品①～⑥組均由一定降低大鼠血液乙醇濃度作用，但①、②、③、④、⑥樣品差異并不明顯。而樣品⑤(本發明所述組合物)相較于①、②、③、④、⑥而言具有極顯著差異(P＜0.01)，表明樣品⑤具有顯著降低大鼠血液中乙醇濃度作用。3.對酒精性肝損傷的保護作用實驗樣品及器材：樣品①～⑥、電子天平、UV752N紫外可見分光光度計、Alpha-D2凍干機。給藥劑量：參照乙醇對小鼠睡眠潛伏期和睡眠時間的影響試驗。試驗方案：健康昆明種雌性小鼠80只，體重(20±2)g,在同樣的溫度、濕度下自由進食、進水喂養一周后，隨機分為空白對照、模型對照、①～⑥試驗組共計8組。其中，空白對照組和模型組每日給予0.9％生理鹽水喂養、①～⑥組每日灌胃給予對應樣品，連續喂養四周，每周末稱取小鼠體重。于四周末次給藥后，一次性給予模型組和①～⑥組50％乙醇12ml/kgBW，空白對照組給0.9％生理鹽水，禁食不禁水16h將小鼠處死，解刨取出完整肝臟，預冷生理鹽水清洗至洗液無血色后，吸干肝臟表面水分。剪取0.1g肝臟組織置于小燒杯中，準備9倍于肝臟重量的生理鹽水，轉移總量2/3的生理鹽水于燒杯中，盡快剪碎肝臟，倒入玻璃勻漿器，剩下的1/3沖洗后一起倒入進行勻漿，制成10％的組織勻漿，于離心機中以2000r/min離心15min,取上清液檢測GSH、MDA和TG、ADH等指標，測定結果見表9、表10、表11、表12、表13。表9各組小鼠體重檢測結果備注：試驗結束時，各組體重變化無明顯差異(P＞0.05)。表明各組小鼠生長正常，無因灌胃樣品導致的不良事件和不良反應。表10各組小鼠肝組織GSH含量測定結果組別GSH(mgGSH/mg)空白組26.4±1.1模型組16.2±0.6①17.5±0.8②17.8±0.7③17.6±0.9④19.0±0.9⑤24.5±0.8⑥19.1±1.1表10看出：空白組相較于模型組GSH含量顯著降低(P＜0.01)，說明酒精性肝損傷模型造模成功。⑤試驗組相較于①、②、③、④、⑥組和模型對照組比較，GSH含量變化具有顯著性差異(P＜0.01)，為陽性結果。表11各組小鼠肝組織中MDA含量測定結果組別MDA(nmol/mg)空白組5.3±0.5模型組11.5±0.6①10.8±0.5②10.5±0.7③10.7±0.6④9.5±0.6⑤7.4±0.5⑥9.6±0.4表11看出：空白組相較于模型組GSH含量顯著降低(P＜0.01)，說明酒精性肝損傷模型造模成功。⑤試驗組相較于①、②、③、④、⑥組和模型對照組比較，MDA含量變化具有顯著性差異(P＜0.01)，說明實施例5中所述組合物能夠減少乙醇引起的肝臟中脂質過氧化，發揮保護肝臟的作用。表12各組小鼠肝組織中TG含量檢測結果組別TG(mmol/L)空白組0.6±0.03模型組1.3±0.12①1.3±0.02②1.2±0.03③1.3±0.02④1.1±0.03⑤0.8±0.01⑥1.1±0.02表12看出：⑤試驗組相較于①、②、③、④、⑥組和模型對照組比較，TG含量變化具有顯著性差異(P＜0.01)，說明實施例5所制備的組合物可降低醉酒小鼠肝臟組織中TG含量，減輕肝臟脂肪堆積，起到保護肝臟的作用。表13各組小鼠肝組織中ADH活性測定結果組別ADH(U/mg)空白組1.1±0.11模型組0.9±0.12①1.0±0.20②1.1±0.30③1.0±0.40④1.2±0.20⑤1.6±0.04⑥1.2±0.03表13看出：①～⑥組相對于模型組都表現出一定提高小鼠肝臟組織中ADH活性，⑤組中ADH活性較空白組和模型組提高近60％和77.8％，說明本發明實施例5中所得的組合物不僅能保持小鼠肝臟中ADH的活性，還能激發ADH的活性，加速乙醇在體內的代謝，降低乙醇對機體的負面影響。綜上所述，本發明所述的顯著提高解酒護肝組合物具有分解酒精、預防人體酒精中毒、醒酒的作用。其次還能有效的起到保肝護肝作用。以上內容僅是本發明的具體實施方式對本發明所作的進一步詳細說明，不能認定本發明的具體實施只局限于這些方式。對于本發明所屬
技術領域：
的普通技術人員來說，在不脫離本發明構思、原理的前提下，還可以做出若干簡單推演或改進，都應當視為屬于本發明的保護范圍。當前第1頁1 2 3