含天然丹參多糖復方抑菌型洗手液及其制備方法與流程

本發明屬于日化領域，具體涉及一種復方抑菌型洗手液。

背景技術：

洗手液是新興的一種手部清潔產品，由于使用方便越來越受到廣大消費者的厚愛。早期，國內在洗手液的研制與開發方面不太關注護膚功效，洗手液產品大都只注重去污殺菌功效，同時也忽略了洗手液對人體健康的所帶來的危害。例如，市場上所售部分洗手液使用氯鹽來作為增稠劑，將會直接影響洗手液的滑膩潤膚功效及使用者使用時的手感，如長期使用，將會對人體健康會帶來一定的隱患。還有部分洗手液使用甲醛作為殺菌防腐劑以達到殺菌、抑菌的效果，雖然達到了清潔去污的目的，但對人體也造成一定的傷害。近年來，一些天然提取物以其溫和、無刺激、無毒副作用，具有殺菌、抑菌功效且易降解的特點，深受廣大消費者的青睞。同時，由于新興的綠色洗護產品在市場中備受歡迎，因此，開發一種清潔效果好，同時又對皮膚和環境都友好的洗手液是非常有意義的。

目前市場上比較青睞的大多為添加植物活性成分，天然無刺激的新型綠色洗手液，類似蘆薈類洗手液中所含活性酶類物質可分解皮膚表層的死亡細胞，從而去除“污垢”，并對皮膚的新陳代謝具有一定的保護作用。還有些洗手液中含有的過氧化氫酶、sod等酶類能起到防止細胞老化，去除硬化皮膚(或傷痕)，從而達到保護皮膚的作用。另外制備的金桔洗手液，由于金桔含有類黃酮、萜類化合物、苷類、糖類、維生素等物質，有一定的保濕、消炎、殺菌和抑菌功效，而且容易在環境中被生物降解，不會對環境造成污染，因此制成的抑菌抗炎型洗手液受到廣大消費者的厚愛。例如從白蘞、白芷、白茯苓、積雪草、玉竹等植物中提取多糖、多酚、黃酮、植物激酶等物質，作為活性添加成分，提高了洗手液美白洗護性能。由此可見，由中草藥提取物所組成的洗手液，能夠滋潤增白皮膚，減輕色素沉著，改善微循環，促進新陳代謝，延緩皮膚衰老，同時又具有去污，抑菌抗炎等功效，而且對人體健康也不會造成危害。

然而，洗手液的除菌效果是所有功能活性中最重要的一個衡量指標，目前市售的各式洗手液所含的除菌物質不盡相同，除菌效果亦有區別。隨著洗手液市場的不斷壯大，洗手液產品也在不斷推陳出新，例如，新型艾葉洗手液抑菌效果研究，采用水蒸氣蒸餾法提取出艾葉揮發油，制作成乳化液，藥敏片法測定抑菌效果，并與其它洗手液進行對照。結果表明新型艾葉洗手液對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌均有一定的抑制效果，但是，由于艾葉揮發油提取產率不高，所以成為影響艾葉洗手液產量提高的主要瓶頸；除此之外，用菊花提取物做原料制成的抑菌型洗手液，雖然具有一定的抑菌功效，但是由于菊花的特殊氣味限制了洗手液品質的提升；然而用迎春花制備的洗手液具有一定的抑菌殺菌功效，如對大腸桿菌、綠膿桿菌、金黃色葡糖球菌、傷寒桿菌、腸炎桿菌等都有一定的抑菌活性，但是原料來源大多是以野生為主，所以基體成分含量不穩定，難以保證洗手液的品質及可持續研發。

技術實現要素：

本發明的目的是提供一種含天然丹參多糖的復方抑菌型洗手液，以解決現有洗手液抑菌活性不高的問題。

本發明的另一個目的是提供一種含天然丹參多糖復方抑菌型洗手液的制備方法。

本發明技術方案如下：一種含天然丹參多糖復方抑菌型洗手液，由下列重量份的原料組成：十二烷基二甲基甜菜堿0.1％-8％、脂肪醇聚氧乙醚0.3％-5％、椰子油脂肪醇二乙醇酰胺1％-12％、烷基糖苷1％-10％、丙二醇5％-10％、維生素e0.1％-0.5％、丹參多糖提取物10％-20％，余量為蒸餾水；用檸檬酸－檸檬酸鈉緩沖液調節溶液的ph在6.0-7.0之間。

作為本發明的進一步改進，所述丹參多糖提取物由以下方法制得：

a、制備乙醇/硫酸銨雙水相體系

配置40％-60％的無水乙醇，按照硫酸銨與乙醇溶液1.3—2:5的質量體積比加入無水乙醇，攪拌溶解，待溶液由渾濁變澄清后，自然冷卻至室溫，溶液分層，上相為乙醇和水，下相為硫酸銨飽和溶液；

b、制備制備丹參粗多糖

丹參粉碎過篩,稱取丹參粉末,加入乙醇/硫酸銨雙水相溶液，浸泡24h-48h；置于水浴鍋中,溫度控制在30℃-60℃之間，控制浸提時間為60min-150min，減壓抽濾,將溶液真空濃縮，然后在濃縮液中加入乙醇硫酸銨雙水相溶液溶解濃縮液，分離的固體和液體，取液體，加入雙水相溶液，離心30min,取上清液用乙醇/硫酸銨雙水相溶液定容，得到丹參多糖；

c、丹參多糖的純化

取上述丹參多糖粗提取液100-200ml，加入sevag試劑，振搖，離心，收集上清液，重復操作，去除蛋白1—3次，得到最終純化的多糖。

作為本發明的進一步改進，所述步驟b中的分離固體和液體的方式為離心，轉速為5000r/min，

作為本發明的進一步改進，所述步驟c中的丹參多糖粗提取液與sevag試劑的體積比為1:5，振搖5-10min，在8000r/min轉速下離心10-15min，收集上清液去除蛋白。

上述含天然丹參多糖復方抑菌型洗手液的制備方法，包括如下步驟：

取蒸餾水加熱至70-80℃，在不斷攪拌的條件下，逐滴加入十二烷基二甲基甜菜堿使其充分溶解后，降溫至30—50℃，加入檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液，調節溶液的ph在6.0-7.0之間；加入脂肪醇聚氧乙醚、椰子油脂肪醇二乙醇酰胺、烷基糖苷、丹參多糖提取物、丙二醇,勻速攪拌使其充分溶解后，恒溫50-60℃條件下，攪拌,冷卻至30—40℃，再次用檸檬酸－檸檬酸鈉緩沖溶液調節ph至中性或弱酸性；加入水調節粘度，最后加入維生素e，陳化30-50h后，即得成品。

作為本發明的進一步改進，所述攪拌轉速為1000r/min，攪拌時間為30min。

本發明以提取物中的黃酮類化合物作為添加成分，以提取的丹參粗多糖作為功能因子，在多次純化的基礎上，將其作為抑菌功能成分，提供一種兼具去污能力強、抑菌、無毒、無刺激等功效的含天然丹參多糖復方抑菌型洗手液。

本發明產品以植物多糖丹參多糖作為天然綠色的抑菌活性成分，用十二烷基二甲基甜菜堿(bs-12)、脂肪醇聚氧乙醚(aeo)、椰子油脂肪醇二乙醇酰胺(尼諾爾6501)、烷基糖苷作為表面活性劑，丙二醇作為助溶劑，維生素e作為補水抗氧化成分，丹參多糖提取物作為抑菌、補水、美白的活性功能因子，用檸檬酸－檸檬酸鈉緩沖液作為ph調節劑，復方抑菌型洗手液，同時采用濾紙片擴散、微孔板二倍稀釋法研究制備的洗手液的抑菌性能進行檢測與評估，通過對泡沫高度及抑菌效能進行測試，結果表明丹參多糖復方抑菌型洗手液能夠滿足家質量標準中理化性能指標指出，洗手液泡沫高度≥100mm的要求，同時抑菌實驗表明，該洗手液具有一定的的抑菌特性。本發明產品天然、綠色、無毒無害、無刺激性。

本發明方法以乙醇/硫酸銨雙水相作為提取天然產物功能活性成分的保護試劑，提取丹參多糖，能夠避免提取溶劑對多糖原始生物活性的影響，減少溶劑殘留，防止多糖提取物二次污染等問題，為丹參多糖作為功能活性因子添加至洗手液中產生特定功效提供可靠保證。開發成本低廉、提取效率高，來源穩定可靠。

附圖說明

圖1是本發明實施例制得的洗手液對金黃色葡萄球菌的抑制作用結果圖；

圖2是對照組洗手液對對金黃色葡萄球菌的抑制作用結果圖；

圖3是對照實驗結果圖。

具體實施方式

下面的實施例可以進一步說明本發明，但不以任何方式限制本發明。

實施例中原料丹參來源為甘肅隴西地區種植的丹參。sevag試劑為商購。

實施例1.含天然丹參多糖復方抑菌型洗手液的原料組成：

實施例2.含天然丹參多糖復方抑菌型洗手液的原料組成：

實施例3.含天然丹參多糖復方抑菌型洗手液的原料組成：

上述實施例1-3制備洗手液的方法如下：

取20ml的蒸餾水加熱至70℃，在不斷攪拌的條件下，逐滴加入十二烷基二甲基甜菜堿(bs-12)使其充分溶解后，降溫至50℃，測其溶液的ph，加入已配置好的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液(ph＝5)，調節溶液的ph值至在6.0-7.0之間；加入脂肪醇聚氧乙醚(aeo)，椰子油脂肪醇二乙醇酰胺(尼諾爾6501)，烷基糖苷，加入丹參多糖(1),丙二醇,勻速攪拌使其充分溶解后，恒溫50℃條件下，以1000r/min的轉速攪拌30min,冷卻至40℃，再次用檸檬酸－檸檬酸鈉緩沖溶液調節ph至5.0；加入少量的水調節粘度，最后加入維生素e，陳化30h后，即得成品。

實施例4-制備洗手液的方法如下：

配方同實施例1，取20ml的蒸餾水加熱至80℃，在不斷攪拌的條件下，逐滴加入十二烷基二甲基甜菜堿(bs-12)使其充分溶解后，降溫至30℃，測其溶液的ph，加入已配置好的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液(ph＝5)，調節溶液的ph值至在6.0-7.0之間；加入脂肪醇聚氧乙醚(aeo)，椰子油脂肪醇二乙醇酰胺(尼諾爾6501)，烷基糖苷，加入丹參多糖(1),丙二醇,勻速攪拌使其充分溶解后，恒溫60℃條件下，以1000r/min的轉速攪拌30min,冷卻至30℃，再次用檸檬酸－檸檬酸鈉緩沖溶液調節ph至5.0；加入少量的水調節粘度，最后加入維生素e，陳化50h后，即得成品。

上述實施例1-4中丹參多糖(1)的制備方法如下：

操作步驟1：制備乙醇/硫酸銨雙水相體系

配置40％的無水乙醇1000ml，按照硫酸銨與乙醇溶液的質量體積比2:5加入40％的無水乙醇，在電磁攪拌器攪拌作用下，快速溶解硫酸銨，等溶液由渾濁變澄清后，自然冷卻至室溫，可觀察到明顯的分層現象，上相為乙醇和水，下相為硫酸銨飽和溶液。

操作步驟:2：制備丹參粗多糖

丹參粉碎過篩,稱取5g丹參粉末，加入不同料液比(1:40g/ml)的乙醇/硫酸銨雙水相溶液，浸泡24h；置于水浴鍋中,溫度控制在45℃，控制浸提時間為90min，減壓抽濾，將溶液真空濃縮；然后在濃縮液中加入乙醇硫酸銨雙水相溶液溶解濃縮液，離心(5000r/min)，取上清液，加1倍體積的雙水相溶液；再以5000r/min離心30min,取上清液用乙醇/硫酸銨雙水相溶液定容至一定體積，得到丹參多糖，標記為丹參多糖1號，貯存備用。

操作步驟3：丹參粗多糖的純化與含量測定

取上述丹參多糖粗提取液100ml，按照體積比1:5加入sevag試劑，劇烈振搖5min，在8000r/min轉速下離心10min，收集上清液，即為sevag法去除蛋白1次；按照同樣方法重復以上操作，得sevag法去除蛋白2次、3次，得到最終純化的多糖，采用苯酚硫酸顯色法測定其多糖含量為67.8％。

實施例5-制備丹參多糖(按照實施例1的配方)，制備工藝不同。

操作步驟1：制備乙醇/硫酸銨雙水相體系

配置60％的無水乙醇1000ml備用，按照硫酸銨與乙醇溶液的質量體積比1.3:5)加入40％的無水乙醇，在電磁攪拌器攪拌作用下，快速溶解硫酸銨，等溶液由渾濁變澄清后，自然冷卻至室溫，可觀察到明顯的分層現象，上相為乙醇和水，下相為硫酸銨飽和溶液。

操作步驟:2：制備丹參粗多糖

丹參粉碎過篩,稱取10g丹參粉末，加入不同料液比(1:50g/ml)的乙醇/硫酸銨雙水相溶液，浸泡48h；置于水浴鍋中,溫度控制在60℃，控制浸提時間為60min，減壓抽濾，將溶液真空濃縮；然后在濃縮液中加入乙醇硫酸銨雙水相溶液溶解濃縮液，過濾，取濾液，加1倍體積的雙水相溶液；再以5000r/min離心30min,取上清液用乙醇/硫酸銨雙水相溶液定容至一定體積，得到丹參多糖，標記為丹參多糖1號，貯存備用。

操作步驟3：丹參粗多糖的純化與含量測定

取上述丹參多糖粗提取液200ml，按照體積比1:5加入sevag試劑，劇烈振搖10min，在8000r/min轉速下離心15min，收集上清液，去除蛋白1次；按照同樣方法重復以上操作，去除蛋白2-3次，得到最終純化的多糖。

《對比試驗》

一、測試制備洗手液的起泡性能：

(1)取配置好的洗手液，用去離子水稀釋100倍以后保存備用；

(2)取(1)中稀釋好的洗手液加入9支具塞試管中，每3支試管作為一組，分別加入洗手液的體積為50ml、60ml、80ml，塞住試管口上下搖動三次，記下泡沫高度；

(3)重復步驟(2)，測量3次，記錄數據每個樣平行做三次，以加入的蒸餾水作為試劑空白。實驗結果如下表1所示：

表1

國家質量標準中理化性能指標指出，洗手液泡沫高度≥100mm為正常，本發明實施例制備的洗手液泡沫平均高度為644.2mm，符合且優于洗手液理化性能指標。

二、研究洗手液對金黃色葡萄球菌的抑制活性

在無菌操作臺上遴選被活化的供試菌2—3環，接入5ml液體培養基中，用100μl的移液槍吹打數次，取10μl均勻涂布于固體培養基平板上，置于無菌超凈臺放置3—4h，培養箱中培養4h。用平板計數器測量菌懸液的濃度，達到107—108cfu/ml，低溫留存備用。經高壓滅菌并烘干的濾紙制作成半徑為6mm的圓形濾紙片，放在干燥的平皿中，121℃濕熱滅菌30min，在平皿溫度降到室溫之后分別倒入不同配方的丹參多糖洗手液。

如圖3所示，一個平皿倒入無菌生理鹽水作為陰性對照(不加丹參多糖，洗手液的其余配方同實施例1)，另一個平皿倒入青霉素注射液作為陽性對照(不加丹參多糖，洗手液的其余配方同實施例1)，分別浸泡30min。在無菌操作臺上將營養瓊脂培養基熔化后倒入平皿中，待培養基凝固之后用無菌移液管量取約0.5ml的菌懸液，用涂布棒在培養基上涂布均勻，用無菌鑷子將濾紙片貼在培養基上，每個平皿均勻的分布4個，每個配方做4個平行，然后將平皿置于28℃的溫度下進行培養36h，每個處理設3次重復。定期觀察菌落形態，并用十字交叉法測量菌落直徑，計算抑制生長率。

對照例1、以酸提堿沉法得到的丹參多糖作為功能添加因子；

方法如下：丹參粉碎、過篩，稱取5g丹參粉末，加入ph＝5的乙酸溶液浸泡24h，置于60℃的水浴鍋中，控制提取時間40min，然后將混合物減壓抽濾，棄去沉淀物，上清液真空濃縮，加入0.1mol/l的氫氧化鈉溶液靜置3h,離心(5000r/min)40min,棄去沉淀，取上清液定容至一定體積，得到丹參多糖，標記為丹參多糖2號，洗手液的其余配方同實施例1，洗手液的制備方法同上。

對照例2、以乙醇-微波輔助法提取的丹參多糖作為功能添加因子；

方法如下：丹參粉碎、過篩，稱取5g丹參粉末，加入40％乙醇溶液浸泡24h，在微波功率360-400w條件下,控制微波反應時間5-10min，得粗提取液，減壓抽濾，將溶液真空濃縮，加入0.1mol/l乙醇溶液溶解濃縮液，離心(5000r/min)30-50min,棄去沉淀，取上清液加0.1mol/l的無水乙醇溶液定容至一定體積，得到丹參多糖，標記為丹參多糖3號，洗手液的其余配方同實施例1，洗手液的制備方法同上。

對照例3、不加丹參多糖，洗手液的其余配方同實施例1。

結果：比較不同添加量洗手液的抑菌試驗結果，實施例1-3制得的洗手液對金黃色葡萄球菌都一定的抑制作用，三個配方實驗組的抑菌直徑分別為34.4mm、32.9mm、33.8mm，根據陽性對照組的抑菌直徑(48.5mm)和陰性對照組的抑菌直徑(12.4mm)，分別計算其抑菌率分別為95.2％，91.1％，93.6％，其抑菌率的計算公式為：抑制率＝r1/r0-r*100％(式中：r1：實驗組的抑菌直徑，r0：陽性對照組的抑菌直徑；r：陰性對照組的抑菌直徑)。

從圖1和圖2可以看出，采用本發明乙醇硫酸銨雙水相提取并純化后的丹參多糖制備的洗手液對金黃色球菌具有較為明顯的抑制作用，能夠從圖1中看出實施例1-3制備的洗手液能夠產生明顯的透明圈，說明具有抑菌活性。而對照組采用酸提堿沉法提取的丹參多糖和采用乙醇-超聲輔助法提取的丹參多糖對金黃色葡萄球菌沒有抑菌作用，從圖2中看不到明顯的透明圈，因此沒有抑菌活性。