專利名稱:黃芩提取物鼻腔制劑的制作方法
技術領域：
本發明涉及中藥制藥領域。具體涉及一種含黃芩提取物的鼻腔制劑及其應用。
背景技術：
鼻腔炎癥性疾病主要可分為鼻炎和鼻竇炎。現代研究表明鼻炎主要有急性鼻炎、慢性鼻炎、萎縮性鼻炎等類型。急性鼻炎為鼻腔粘膜炎癥性疾病，俗稱“傷風”“感冒”也即中醫所稱的“傷風鼻塞”，其主要由病毒感染引起，在此基礎上導致繼發性細菌感染。當細菌感染鼻腔粘膜炎癥持續或反復發作數月以上時，形成慢性鼻炎，祖國醫學稱之為“鼻窒”。一般認為慢性鼻炎主要病因為細菌感染。當細菌侵入感染至鼻竇，破壞組織，發生急性或慢性炎癥，導致急性或慢性鼻竇炎，祖國醫學稱之為“鼻淵”。鼻腔炎癥性疾病常見的致病菌有鏈球菌、肺炎球菌、葡萄球菌等。在病理上表現出深層血管擴張，鼻粘膜充血水腫，毛細血管通透性增加，體液細胞分泌增加等炎癥性反應。其臨床上表現為鼻塞、流清涕或濃涕、頭痛，嚴重時往往伴有失眠、記憶力減退癥等癥狀。國內患鼻炎、鼻竇炎這類疾病的患者相當普遍。目前，臨床上治療鼻炎、鼻竇炎除主要用血管收縮劑(如麻黃素)和刺激性滴鼻劑(薄荷、細辛等)改善癥狀外，尚無理想的治療藥物。并且，血管收縮劑類藥物長期使用亦能導致藥物性鼻炎。
現代研究表明，黃芩提取物黃芩甙和其它黃酮有多種藥理活性。其活性主要集中于(1)抗微生物作用黃芩煎劑對葡萄球菌、鏈球菌、肺炎雙球菌、痢疾桿菌、大腸桿菌、副傷寒桿菌等多種細菌有抑制作用。對真菌和病毒也有不同程度的抑制作用。
(2)抗炎和抗變態反應作用通過涂抹、口服及腹腔注射等給藥途徑，黃芩提取物對小鼠耳腫脹、小鼠腹腔毛細血管通透性增高、小鼠濾紙片肉芽腫等急、慢性炎癥模型等上述各種炎癥均有明顯的抑制作用。小鼠灌服黃芩甲醇提取物， 黃芩素、黃芩甙對腹腔注射乙酸誘發的血管滲出有劑量依賴性作用。大鼠灌服黃芩甲醇提取物、黃芩素、黃芩甙對角叉菜膠引起的足腫脹有明顯的抑制作用。
黃芩水提物對被動皮膚過敏反應(PCA)有明顯抑制作用。豚鼠腹腔注射黃芩甙連續一周，對蛋清致敏的過敏反應有明顯抑制作用，可使發生驚厥的潛伏期明顯延長；黃芩素與黃芩甙對致敏豚鼠離體回腸與離體氣管由抗原產生的收縮有明顯的抑制作用。對化合物48/80誘導的大鼠肥大細胞的組胺釋放，黃芩所含多種黃酮，均有明顯抑制作用。
(3)其它作用如對免疫功能、降血壓和利尿作用，抗血小板聚集和抗凝作用等。
目前治療鼻炎的制劑中，尚無黃芩提取物如黃芩甙或其它黃酮提取物單獨作為有效成分局部用于治療鼻腔炎癥性疾病，特別是慢性鼻炎、鼻竇炎的制劑。
發明內容
本發明所要解決的技術問題是利用黃芩提取物的抗菌、抗炎等作用，提供一種直接作用于鼻炎病灶，療效確切的治療鼻炎、鼻竇炎藥物。
本發明公開的治療鼻炎、鼻竇炎的鼻腔制劑是以黃芩提取物為活性成份與藥用輔料以任意比例組成的各種直接用于鼻腔的制劑，如鼻腔滴劑、凝膠劑、粉霧劑、噴霧劑、氣霧劑、微球劑等，上述黃芩提取物中總黃酮含量重量百分比為30-100％，其中黃芩甙、或漢黃芩甙、或黃芩甙的鹽、或漢黃芩甙的鹽，或黃芩素、或漢黃芩素的單體化合物占總黃酮含量的30-100％。
本發明治療鼻炎、鼻竇炎的鼻腔制劑中的活性成份黃芩提取物，為采用常用提取物方法提取獲得的黃芩有效成份提取物，其主要成份為含有黃芩甙、黃芩素、漢黃芩素等的總黃酮等，亦可提純為單一化學組成，如黃芩甙、黃芩素、漢黃芩素或它們的鹽等。
本發明所要解決的技術問題是公開上述黃芩提取物鼻腔制劑在制備治療鼻炎、鼻竇炎藥物中的應用。
用本發明黃芩提取物鼻腔制劑進行有關藥效學研究1.抗鼻炎、鼻竇炎制劑對二甲苯所致小鼠耳廓炎癥作用的影響1.1.動物品系昆明種小白鼠性別雄性體重26-28g來源由上海醫藥工業研究院動物房提供動物合格證號滬動合證字第107號
1.3.試驗樣品名稱抗鼻炎、鼻竇炎制劑I號樣品(黃芩甙含量75mg/ml)II號樣品(黃芩甙含量25mg/ml)1.4.對照樣品名稱乙酰水楊酸腸溶片(阿司匹林)來源上海信誼白路達藥業有限公司性狀白色片劑規格25mg/kg批號011001配制200mg溶于20ml蒸餾水中(超聲波細胞粉碎器助溶)1.5.致炎物名稱二甲苯來源上海試劑一廠性狀無色有味液體1.6.實驗方法1.6.1.動物分組小鼠40只，雄性。按隨機數字法將小鼠分為4組，每組10只1.6.2.方法按體重給予阿司匹林組小鼠灌胃0.2ml/10g乙酰水楊酸溶液。給藥3 0分鐘后，給各組小鼠右耳滴二甲苯0.04ml致炎。30分鐘后用棉簽將第3組和第4組的小鼠右耳均勻涂抹受試藥。二小時后將小鼠脫頸椎處死，沿耳根剪下雙耳，用打孔器(直徑9mm)沿耳廓邊緣將耳打下，用分析天平稱重，按下列公式計算耳廓腫脹度。
右耳片重-左耳片重/左耳片重＝耳廓腫脹度表1.抗鼻竇炎制劑對二甲苯所致小鼠耳廓炎癥作用的影響(n＝10，X±SD)
**P＜0.01，與空白對照組相比1.7.結果與空白對照組相比，I和II號樣品對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹均有明顯抑制作用，其作用與陽性對照藥阿司匹林相似。兩個樣品與阿司匹林間的抗炎作用無顯著性差異(見表1)。
2.抗鼻炎、鼻竇炎制劑對角叉菜膠所致大鼠足跖腫脹作用的影響2.1.動物品系Wistar大白鼠性別雄性體重160-180g來源中科院上海實驗動物中心提供動物合格證號中科動管會005號2.2.對照樣品名稱乙酰水楊酸腸溶片(阿司匹林)來源上海信誼白路達藥業有限公司性狀白色片劑規格25mg/kg批號011001配制600mg溶于30ml蒸餾水中(超聲波細胞粉碎器助溶)2.3.致炎物名稱角叉菜膠來源上海生物制品廠(Fluka公司)性狀白色粉劑配制1％稱取0.1g角叉菜膠溶于60℃的10ml滅菌生理鹽水中，當天現配，4℃保存。
2.5.實驗方法2.5.1.動物分組按隨機數字法將40只大鼠分為4組，每組10只動物。
第1組空白對照組 生理鹽水，局部涂抹第2組阿司匹林組 0.2g/kg，1.0ml/100g體重，灌胃第3組I號樣品組 局部涂抹第4組II號樣品組 局部涂抹2.5.2.方法先測大鼠左后足踝關節周長，然后于左后足跖腱膜下注射1％角叉菜膠0.1ml，致炎后隨即局部涂抹受試藥，1小時后再次涂抹受試藥。并于涂受試藥1，2，3，4，5，6小時分別再測左后足踝關節周長，按下列公式計算其腫脹度，t檢驗。
致炎后各時間點足跖關節周長-原周長/原周長＝腫脹度表2.抗鼻炎、鼻竇炎制劑對角叉菜膠所致大鼠足跖腫脹作用的影響(n＝10，X±SD)
*P＜0.05，與空白對照組比2.1.結果與空白對照組相比，阿司匹林，I和II號樣品在致炎和給藥1小時后，對角叉菜膠所致大鼠足跖腫脹有一定程度的抑制作用，但無顯著性差異。在致炎和給藥2小時后，阿司匹林，I和II號樣品對角叉菜膠所致大鼠足跖腫脹均有明顯抑制作用，兩個樣品與阿司匹林間的抗炎作用無顯著性差異。在其它測試的時間點，給藥組和空白對照組間未見統計學所示差異(見表2)。
3.抗鼻炎、鼻竇炎制劑體外抗菌活性3.1 陽性對照藥硫酸慶大霉素上海第一制藥廠生產批號010444 2ml含8萬單位3.2 受試樣品，黃芩甙噴霧劑II號(黃芩甙含量25mg/ml)3.3 菌種革蘭氏陽性菌金黃色葡萄球菌26003；肺炎雙球菌31002；表皮葡萄球菌26069革蘭氏陰性菌肺炎桿菌46101；綠濃桿菌10124以上菌種由上海市衛生防疫站提供3.4 培養基Mueller-Hinton Broth(M.H.肉湯)批號2000-12-11由中國腹瀉病控制上海試劑供應中心提供。
3.5 方法采用肉湯稀釋法，每管接種105CFU。37℃培養24小時，觀才并記錄實驗結果，以抗菌藥物的抑制細菌生長的最低濃度為最低抑菌濃度(MIC)。
3.6 實驗結果見表3
表3.抗鼻炎、鼻竇炎制劑噴霧劑II號對5株菌株的MIC
3.7 結論實驗結果表明，黃芩甙噴霧劑II號有一定的抑菌活性.
黃芩及其提取物的藥理活性研究表明黃芩提取物黃芩甙和其它黃酮類化合物在鼻腔局部用藥對鼻腔炎癥疾病，特別是慢性鼻炎、慢性鼻竇炎應有很好的療效。在對患有慢性鼻炎和鼻竇炎的自愿受試者實驗，顯示出很好的療效。
本發明治療鼻炎、鼻竇炎的鼻腔制劑利用黃芩提取物的抗菌、抗炎等作用，直接作用于病灶，對鼻炎、鼻竇炎的治療具有顯著的效果，為鼻炎患者提供了一種新型的藥物。
具體實施方式
實施例1 黃芩甙粉霧劑黃芩酌予碎斷，加水煎煮兩次，每次1小時，分別濾過，合并濾液，濾液用鹽酸(2mol/L)調PH至1.0，在80度保溫30分鐘，靜置24小時，濾過，沉淀加濕重3～4倍量水，攪拌，用40％NaOH調PH至7，并加等量乙醇，攪拌，濾除沉淀，濾液用2N鹽酸調pH至2，80度保溫60分鐘，靜置12小時，濾過，即得黃芩甙，水沖洗至pH為4。真空干燥。黃芩甙含量70％以上。
黃芩甙研磨成細粉，過篩，收集80目～200目細粉用鼻腔粉霧劑包裝包裝，即得粉霧劑。
實施例2 黃芩甙鈉噴霧劑按實施例1方法制得黃芩甙提取物，加入水及10％NaOH調節pH為7，制得黃芩甙的鈉鹽。配成含相當于30mg黃芩甙/ml，加入防腐劑適量，分裝于5ml每撳0.1ml的噴霧瓶中。即得噴霧劑。
實施例3 黃芩氣霧劑黃芩酌予碎斷，加水煎煮兩次，每次1小時，分別濾過，合并濾液，濃縮至0.5g生藥/ml。加入乙醇至含醇量50％。過濾，收集濾液，除去乙醇。加水稀釋至含藥材0.5g生藥/ml(總黃酮占干固體量50％，黃芩甙占總黃酮70％)，裝入氣霧劑容器，安裝閥門，軋緊封帽后沖裝拋射劑F12，即得。
實施例4 黃芩甙吸入微球劑按實施例1方法制得黃芩甙提取物(黃芩甙含量90.8％)，加入水及10％NaOH調節pH為7，水浴50度，加入明膠使黃芩甙充分分散成含明膠25％。取液體石臘適量，加入Span 80適量，1000r/min攪拌，形成W/O型乳劑。加入甲醛固化，洗凈甲醛。干燥，得到20-200um的微球，含藥量為50mg/g。分裝于鼻腔吸入粉霧劑包裝，即得明膠微球粉霧劑。
實施例5 黃芩滴鼻劑黃芩酌予碎斷，加水煎煮兩次，每次1小時，分別濾過，合并濾液，濃縮至0.5g生藥/ml。加入乙醇至含醇量50％。過濾，收集濾液，除去乙醇。加水稀釋至含黃芩甙10mg/ml(總黃酮占干固體量50％，黃芩甙占總黃酮49％)，加入防腐劑，甘油，調節至人體等滲滲透壓，微孔濾膜過濾，無菌分裝于滴劑瓶中，即得。
實施6 黃芩凝膠劑黃芩酌予碎斷，加水煎煮兩次，每次1小時，分別濾過，合并濾液，濃縮至0.5g生藥/ml。加入乙醇至含醇量50％。過濾，收集濾液，除去乙醇。加水稀釋至加水稀釋至含黃芩甙10mg/ml(總黃酮含量51％)，加入防腐劑，加入Carbopol-934P至含量為0.5％，調節pH為7.0。無菌分裝于滴劑瓶中，即得。
實施例7 黃芩甙鉀凝膠劑按實施例1方法制得黃芩甙提取物(黃芩甙含量99.8％)，加入水及10％KOH調節pH為7，制得黃芩甙的鈉鹽。配成含相當于50mg黃芩甙/ml，加入HPMC及防腐劑適量，分裝于2ml每滴0.05ml的滴瓶中。即得黃芩甙鉀凝膠劑。
實施例8 黃芩素噴霧劑黃芩素提取物(純度80％)，加入水及甘胺膽酸鈉適量使之溶解，調節pH為7，制得黃芩素30mg黃芩素/ml，加入防腐劑適量，分裝于5ml每撳0.1ml的噴霧瓶中。即得噴霧劑。
實施例9 治療鼻炎×××，男，主要癥狀，鼻塞，鼻內分泌多，色黃，濃稠，常有″痰”感，晚間鼻塞加重，感冒后期鼻塞尤為嚴重。5-6年病史。經診斷為慢性鼻竇炎。使用黃芩滴鼻劑兩次后鼻塞癥狀和痰多癥狀明顯好轉。
實施例10 治療鼻竇炎×××，男，主要癥狀，鼻塞，″痰”多，色淡，略黃，約15分鐘吐痰一次。5-6年病史。經診斷為慢性鼻竇炎。使用黃芩噴霧劑后鼻塞癥狀立刻明顯好轉。每日3次，連續兩天后，痰量降低至約2小時吐痰一次，停藥后痰量比用藥前明顯減少。
實施例11 治療鼻竇炎×××，女，主要癥狀，鼻塞，″痰”多，色淡，約30鐘吐痰一次，睡覺前與起床時習慣性吐痰。3-4年病史。經診斷為慢性鼻炎/鼻竇炎。使用黃芩甙鈉凝膠劑后鼻塞癥狀立刻改善。每日3次，連續3天后，痰量降低，吐痰次數減少，睡覺前與起床時習慣性吐痰癥狀消除，停藥三天后痰量比用藥前明顯減少，且鼻腔癥狀明顯好轉。
權利要求
1.一種含黃芩提取物的鼻腔制劑，其特征在于該制劑通過下列方法制備的(1)制備黃芩提取物黃芩酌予碎斷，加水煎煮兩次，每次1小時，分別濾過，合并濾液，濾液用鹽酸2mol/L調PH至1.0，在80度保溫30分鐘，靜置24小時，濾過，沉淀加濕重3～4倍量水，攪拌，用40％NaOH調PH至7，并加等量乙醇，攪拌，濾除沉淀，濾液用2N鹽酸調pH至2，80度保溫60分鐘，靜置12小時，濾過，即得黃芩甙，水沖洗至pH為4，真空干燥；(2)制備制劑黃芩甙提取物加入水及10％NaOH調節pH為7，水浴50℃，加入明膠使黃芩甙充分分散成含明膠25％，取液體石臘適量，加入Span 80適量，1000r/min攪拌，形成W/O型乳劑。加入甲醛固化，洗凈甲醛。干燥，得到20-200μm的微球，含藥量為50mg/g，分裝于鼻腔吸入粉霧劑包裝，即得黃岑甙微球粉霧劑。
2.一種如權利要求
1所述的含黃芩提取物的鼻腔制劑，其特征在于其中所述的活性成份黃芩提取物中總黃酮含量的重量百分比為50-51％。
3.一種如權利要求
1所述的含黃芩提取物的鼻腔制劑，其特征在于其中所述的活性成份黃芩的提取物中黃芩甙占總黃酮含量的49-99.8％。
專利摘要
本發明涉及一種含黃芩提取物的鼻腔制劑及其應用。本發明公開的治療鼻炎、鼻竇炎的鼻腔制劑是以黃芩提取物為活性成份與藥用輔料以任意比例組成的各種直接用于鼻腔的制劑，如鼻腔滴劑、凝膠劑、粉霧劑、噴霧劑、氣霧劑、微球劑等，上述黃芩提取物中總黃酮含量為30-100%，其中黃芩甙、或漢黃芩甙、或黃芩甙的鹽、或漢黃芩甙的鹽，或黃芩素、或漢黃芩素的單體化合物占總黃酮含量的30-100%。本發明治療鼻炎、鼻竇炎的鼻腔制劑利用黃芩提取物的抗菌、抗炎等作用，直接作用于病灶，對鼻炎、鼻竇炎的治療具有顯著的效果，為鼻炎患者提供了一種新型的藥物。
文檔編號A61K31/7042GKCN1216609SQ02111347
公開日2005年8月31日 申請日期2002年4月15日
發明者程衛強, 陸偉根 申請人:上海醫藥工業研究院導出引文BiBTeX, EndNote, RefMan