一種抗衰老制劑及化妝品的制作方法
【專利摘要】本發明涉化妝品【技術領域】，具體涉及一種抗衰老制劑及化妝品。所述抗衰老制劑通過先將硫辛酸和谷胱甘肽或棕櫚酰寡肽中的一種或兩種包裹在前脂質體A中，然后再將前脂質體A與孔雀石提取物、白茶提取物、VA或丹參酮中的一種或兩種和葡萄籽提取物、碧蘿芷提取物、銀杏葉提取物或猴面包樹提取物中的一種或多種一起包裹在脂質體B內部制備而得到。將得到的抗衰老制劑添加到化妝品中使用時，通過不同成分的分階段先后釋放后，作用于皮膚細胞，在細胞的不同的位置發揮立體抗衰老作用，抗衰老效果顯著并持久。
【專利說明】一種抗衰老制劑及化妝品
【技術領域】
[0001]本發明涉及化妝品【技術領域】，更具體地，涉及一種抗衰老制劑及化妝品。
【背景技術】
[0002]隨著時間的推移，所有個體都會發生功能性和器質性衰退的漸進過程，即衰老。衰老又稱老化，是生命活動進程中的必經階段，皮膚衰老在機體衰老過程中表現最為明顯。
[0003]皮膚由表皮、真皮、皮下組織構成，主要功能是保護機體免受不利外界環境的傷害，它會因外界、遺傳等多方面因素的影響而功能減弱，表現出衰老癥狀。皮膚衰老的形式主要為自然衰老(即內源性衰老)和光老化(即外源性衰老)，自然衰老主要由機體遺傳因素引起，限于全身部位，明顯特征為皺紋和松弛，并出現色素沉著等現象；光老化主要是紫外線損害累積所致的皮膚衰老，是自然衰老和紫外線照射共同作用的結果，限于皮膚暴露部位，主要特征為皮膚粗糙無光澤、皺紋加粗加深、色素沉著加深、皮膚微循環變差、彈性組織變性，表皮表現為更新減慢、角質形成細胞活力下降、表皮受傷后修復能力及屏障功能減弱，真皮表現為清除力、膠原蛋白和彈性蛋白合成能力及免疫力下降，真皮厚度變薄、易發生過敏發炎等現象。
[0004]皮膚抗衰老一直被人們熱切關注，相關的衰老機理及抗衰老途徑也一直是人們研究的熱點。傾向性較多的有:自由基說、交聯學說、體細胞突變學說、環境因素、體液失衡、遺傳決定、生物鐘學說、微量元素說、代謝速變學說、氧化還原理論等幾十種，雖然這些學說和理論從不同的方面解釋了一些人體及皮膚衰老的現象，但其中許多機理是與遺傳相關的，從外用抗衰老化妝品角度講，主要有以下幾種:
[0005]自由基說，在正常情況下，機體內的自由基處于不斷產生與消除的動態平衡之中。如果自由基產生過多或清除過慢，機體內過量的自由基就會與氨基酸或蛋白質反應造成肽鏈斷裂，促使皮膚中膠原、彈性蛋白及表皮生長因子受體蛋白質發生交聯變性，造成皮膚彈性降低且變薄起皺；降解氧化皮膚中透明質酸等黏多糖為糖醛類產物，進而與蛋白質、核酸發生交聯變性；氧化細胞膜上的脂質，形成多種脂質過氧化物及其代謝產物丙二醛，進一步引起蛋白質或核酸的交聯形成無法消除的脂褐素等。
[0006]代謝失調學說，衰老雖然由遺傳基因所決定，但最終要通過細胞代謝來表達，因此改善皮膚新陳代謝可極大的延緩皮膚衰老。
[0007]非酶糖基化反應學說，真皮中蛋白質分子中的氨基酸容易與細胞外液中葡萄糖的醛基或酮基發生反應生成可逆或不可逆結合物，隨著年齡的增長、結合物含量的增加使膠原蛋白形成分子間交聯，降低皮膚的彈性和通透性及膠原的可溶性，從而加速皮膚衰老。
[0008]基質金屬蛋白酶(MMP)學說，MMP是一個鋅依賴性的酶家族，能夠特異性的降解真皮中的膠原蛋白及彈性蛋白，實驗表明MMP分泌增加或減少均能加速膠原蛋白的降解、流失，使皮膚呈現衰老現象。紫外線照射和炎性細胞因子(如白介素-1、干擾素)可誘導MMP表達。
[0009]光老化學說，皮膚光老化由環境因素(如紫外線、風吹、接觸化學物質等)引起的外源性老化，其中日光的長期反復照射是最重要因素。大量研究表明紫外線作用于皮膚后通過產生的自由基、細胞表皮生長因子受體、細胞因子受體及許多酶的交聯、激活轉錄因子激活蛋白，使MMP高度表達而降解細胞外基質，最終導致皮膚衰老。日光中的紫外線通過以下機制對皮膚造成損傷:損傷DNA，進行性蛋白質(膠原)的交聯，通過誘導抗原刺激反應的抵制途徑而降低免疫應答，產生高度反應的自由基與各種細胞內結構相互作用而造成細胞和組織的損傷。
[0010]依據以上皮膚衰老機理，可以看出皮膚衰老是多種機理同時參與的一種復雜的多因素過程，針對單一機理產生的抗衰物質只能解決衰老的某一環節問題，從多角度多層次出發才能研制出高效的抗衰老化妝品。
[0011]現有的抗衰老化妝品主要通過清除過量自由基，防御紫外線，促進皮膚細胞新陳代謝，保濕和修復皮膚屏障功能，補充膠原蛋白和彈性蛋白這五方面來延緩衰老；雖然這五方面可以解決皮膚衰老的大部分問題，但延緩衰老的途徑相對單一。而且基于這五方面的抗衰物質主要為抗氧劑、防曬劑、維A酸類、保溫劑、營養劑等，以酶類、肽類、維生素類、植物提取物等為代表的抗氧化劑，如S0D、輔酶Q10、谷胱苷肽、維生素C、維生素E、多酚類、黃酮類，它們多為生物活性物質甚至本身就是酶、多肽，對熱敏感易失活，在較高溫度下乳化均質制備的化妝品體系中會不同程度的失去應有的抗衰功能，有些對光照穩定性不高，如輔酶QlO遇光易分解，在光照條件下含量下降明顯；有些應用受限，如維生素E只能在膜和脂質區域才能發揮清除脂質自由的作用，在水相中幾乎沒有這一活性。另外，抗衰物質的經皮滲透也是一個非常關鍵的問題，現有抗衰物質多使用普通制劑類型或其它傳統的制劑載體，針對皮膚衰老主要發生部位一基底細胞及真皮層以下，其活性成分不能有效抵達皮膚深層發揮功效。而皮膚衰老是多方面復雜的生化過程，這要求抗衰老化妝品需要綜合運用多種抗衰老途徑，多角度、多層次的解決皮膚衰老問題。在清除過量自由基，防御紫外線，促進皮膚細胞新陳代謝，保濕和修復皮膚屏障功能，補充膠原蛋白和彈性蛋白的同時，強化皮膚防御和免疫系統，抑制MMP活性、抑制非酶糖基化反應、改善微循環、抗敏抗炎，從多種途徑入手，并盡可能的使用天然物質，選擇適合皮膚的抗衰老生物活性物質及其載體系統，研制出更安全、高效的抗衰老化妝品。
【發明內容】
[0012]本發明要解決的技術問題是針對現有抗衰劑存在抗衰途徑相對單一、穩定性差、有效性不高問題，以及孔雀石提取物在抗衰老應用方面的技術不足，提供一種含有孔雀石提取物、多種抗衰途徑協同并運用載體技術提高透皮吸收的抗衰老制劑。
[0013]本發明的另一個目的是提供一種含有抗衰老制劑的化妝品。
[0014]本發明的目的通過以下技術方案予以實現:
[0015]一種抗衰老制劑，通過以下方法制備得到:
[0016]SI前脂質體A的制備:將硫辛酸和谷胱甘肽或棕櫚酰寡肽中的一種或兩種一起包裹在前脂質體A中，得到前脂質體A粉末；
[0017]S2.將前脂質體A粉末、孔雀石提取物、白茶提取物、VA或丹參酮中的一種或兩種和葡萄籽提取物、碧蘿芷提取物、銀杏葉提取物或猴面包樹提取物中的一種或多種一起包裹在脂質體B中，即得抗衰老制劑。[0018]作為優選的實施方案，前脂質體A中，硫辛酸可部分用VE代替。
[0019]優選地，所述抗衰老制劑通過以下方法制備得到:
[0020]S1.將硫辛酸和谷胱甘肽或棕櫚酰寡肽中的一種或兩種一起包裹在前脂質體A中，得到前脂質體A粉末；
[0021]S2.將脂質材料、VA或丹參酮中的一種或兩種、乳化劑、抗氧化劑和醇類溶解于乙醇溶劑中，水浴溶解得類脂質溶液Tl ；
[0022]S3.將保護劑、前脂質體A粉末、孔雀石提取物、白茶提取物和葡萄籽提取物、碧蘿芷提取物、銀杏葉提取物或猴面包樹提取物中的一種或多種溶解于磷酸緩沖液中得溶液T2 ；
[0023]S4.將類脂質溶液Tl與溶液T2按比例混勻后得溶液B，溶液B經過濾、冷凍干燥、壓蓋封口即得脂質體B粉末，該粉末即為抗衰老制劑。優選地，S4所述類脂質溶液Tl與溶液T2的重量比為1:20~30。
[0024]優選地，在脂質體B的制備中:(前脂質體A粉末+VA或丹參酮中的一種或兩種+孔雀石提取物、白茶提取物和葡萄籽提取物、碧蘿芷提取物、銀杏葉提取物或猴面包樹提取物中的一種或多種):脂質材料:抗氧化劑:乳化劑:保護劑:醇類的重量比為8~20:15~50:0.5~2:0.2~2:0.5~5:0~I。所述前脂質體A粉末:(VA或丹參酮中的一種或兩種):(孔雀石提取物、白茶提取物和葡萄籽提取物、碧蘿芷提取物、銀杏葉提取物或猴面包樹提取物中的一種或多種)的重量比為3~6:0.5~1:1~2.5。
[0025]所含脂質材料為磷脂和膽固醇，磷脂:膽固醇的重量比為I~4:1。
[0026]所含抗氧劑為生育酚或生育酚乙酸酯中的一種或兩種。
[0027]所含乳化劑為吐溫80、`異硬脂醇二聚甘油琥珀酸酯、聚甘油-3- 二異硬脂酸酯或膽酸鈉中的一種或多種，復配成與體系HLB值相匹配的乳化劑。
[0028]所含保護劑采用甘露醇、山梨醇、乳酸、海藻糖或蔗糖的一種或多種。
[0029]所述醇類為丙二醇。
[0030]其中，所述前脂質體A粉末的制備方法包括如下步驟:
[0031]S1.將脂質材料、硫辛酸、乳化劑、抗氧化劑和醇類溶解于乙醇中得溶液1，向溶液I中加入適量水，充分攪拌并均質后得I相；
[0032]S2.將保護劑和谷胱甘肽或棕櫚酰寡肽中的一種或兩種溶解于磷酸緩沖液中，混合均勻得II相；
[0033]S3.將II相緩慢加入到I相中，邊加入邊超聲，加入完畢再過濾制備得到脂質體A，脂質體A經冷凍干燥即得前脂質體A粉末。其中，硫辛酸可部分用VE代替。
[0034]優選地，SI所述脂質材料、硫辛酸、乳化劑和抗氧化劑的重量總和:乙醇:水的重量比為1:4~8:3~5 ;S3所述I相:II相的重量比為I~2:1。
[0035]優選地，在前脂質體A的制備過程中硫辛酸+谷胱甘肽或棕櫚酰寡肽中的一種或兩種:脂質材料:抗氧化劑:保護劑:乳化劑:醇類的重量比為5~15:15~50:0.5~2:0.5~5:0.2~1.5:0~1.5。其中，硫辛酸:谷胱甘肽或棕櫚酰寡肽中的一種或兩種的重量比為I~5:0.I~10。
[0036]所述脂質材料為磷脂和膽固醇，磷脂:膽固醇的重量比為I~4:1。
[0037]所述抗氧劑采用的是生育酚或生育酚乙酸酯中的一種或兩種。[0038]所含乳化劑為吐溫80、異硬脂醇二聚甘油琥珀酸酯、聚甘油-3- 二異硬脂酸酯或膽酸鈉中的一種或多種，復配成與體系HLB值相匹配的乳化劑。
[0039]所含保護劑采用甘露醇、山梨醇、乳酸、海藻糖或蔗糖的一種或多種。
[0040]所述醇類為丙二醇。
[0041]通過本發明包裹模式得到的抗衰老制劑在使用的時候，最主要的紙質體結構形式為:從外到內，最外層是脂質體壁材，壁材中包裹了 VA或丹參酮中的一種或兩種活性成分，接下來芯材，芯材中包裹了前脂質體A和水溶性活性成分，水溶性活性成分為孔雀石提取物、白茶提取物和銀杏葉提取物、葡萄籽提取物、碧蘿芷提取物或猴面包樹提取物中的一種或多種的活性成分。在前脂質體A中，前脂質體A的壁材中含有硫辛酸，芯材中包裹了水溶性的谷胱甘肽或棕櫚酰寡肽中的一種或兩種活性成分，最主要的紙質體結構形式如圖1所示。當然在制備的抗衰制劑中除了上述脂質體存在形式外，還存在少量單室脂質體(單室脂質體即為未被包裹的前紙質體A)，及少量未被包裹的活性成分和其他成分等。
[0042]一種化妝品，在化妝品中的添加用量為5~10%重量百分比的如上所述的抗衰老制劑。
[0043]本發明的有益效果是:
[0044]1、本發明通過特殊的包裹方式，
[0045]最主要的紙質體結構形式為:從外到內，最外層是脂質體壁材,壁材中包裹了 VA或丹參酮中的一種或兩種活性成分，接下來芯材，芯材中包裹了前脂質體A和水溶性活性成分，水溶性活性成分為孔雀石提取物、白茶提取物和銀杏葉提取物、葡萄籽提取物、碧蘿芷提取物或猴面包樹提取物中的一種或多種的活性成分。在前脂質體A中，前脂質體A的壁材中含有硫辛酸，芯材中包裹了水溶性的谷胱甘肽或棕櫚酰寡肽中的一種或兩種活性成分，最主要的紙質體結構形式如圖1所示。當然在制備的抗衰制劑中除了上述脂質體存在形式外，還存在少量單室脂質體(單室脂質體即為未被包裹的前紙質體A)，及少量未被包裹的活性成分和其他成分等。
[0046]2、本發明主要通過上述主要脂質體多層包裹技術發揮作用，將抗衰老制劑添加到化妝品中，大部分柔性的脂質體穿透或進入角質層，最外面的壁材首先破裂，壁材中的油溶性的VA、丹參酮等將最早發揮功效，維A酸能夠促進上皮細胞增生、分化、角質溶解等代謝，健全皮膚角質層組織、改善皮膚的粗糙、干燥狀態，并具有抗菌作用。丹參酮可以抑制低密度蛋白的氧化、抑制脂質代謝酶活性、改善脂質代謝過程，保護內皮細胞、改善血液代謝等功效，兩者或一種能改善角質層并具有抗菌抗敏的作用。接下來是第一次水溶性活性成分的釋放，該水溶性成分主要是孔雀石提取物、白茶提取物、銀杏葉提取物、葡萄籽提取液、碧蘿芷提取物、猴面包樹提取物中的一種或多種，孔雀石提取物主要是在細胞間質中通過促進膠原蛋白之間的鍵合，此外作為信號因子刺激機體內抗氧化活性酶的產生，間接發揮抗氧化及清除自由基作用，白茶提取物及銀杏提取物在細胞間質中發揮抗氧化、抗炎、吸收紫外線等作用，葡萄籽提取液及碧蘿芷提取物也主要發揮抗氧化清除自由基等作用，猴面包樹提取物主要為多糖類物質，能更好的保護角質層細胞的完整性，彈性，蓄水性等，上述可溶性活性成分首先在角質層，及角質層下面的細胞間質中釋放，主要作用是抗菌、抗炎、抗紫外線、保護角質層細胞、保護及促進膠原蛋白的作用，當然部分水溶性成分能進一步向下遷移，通過主動或被動吸收進入到基地細胞中，進一步發揮相關作用；隨著脂質體最外層壁材的破裂和相關活性成分的釋放，被包裹的較小的前脂質體A在外一層脂質體的保護下進一步向皮膚底層遷徙，該部分脂質體部分能進入到基底層細胞中，其中的活性成分硫辛酸、VE、谷胱甘肽、棕櫚酰寡肽中的一種或多種能進入到細胞中，參與到細胞內的自由基的清除、抗氧化、激活抗氧化酶、促進膠原生成等，發揮抗衰作用。
[0047]3、本發明所述抗衰老制劑的包裹模式是發明人綜合考慮各抗衰老活性成分的作用機理、細胞衰老代謝過程間的復雜關系，創造性地探索出的一種新的模式，這種新的包裹模式獲得了一種意想不到的技術效果。按照這種包裹模式，各抗衰老活性成分可以先后釋放出來，在細胞特點的代謝周期及時起到抗衰老作用，這樣的釋放模式，既可以起到保護活性成分穩定性和溶劑性的作用，同時，能從根本上起到抗衰老作用，抗衰老效果顯著并持久。
[0048]綜上所述，本發明所述抗衰老制劑，通過活性成分分階段的釋放作用，在不同的位置發揮立體抗衰老的作用。
[0049]說明書附圖
[0050]圖1.本發明抗衰老制劑中主要形式的紙質體B的結構示意圖。
【具體實施方式】
[0051]下面結合具體實施例進一步詳細說明本發明。除非特別說明，本發明采用的試劑、設備為本【技術領域】常規試劑和設備。
[0052]實施例1
[0053]一種抗衰老制劑，通過以下方法制備得到:
[0054]SI前脂質體A粉末的制備:按重量份數計，前脂質體A粉末含有如下各組分:
[0055]`
硫辛酸2份；
棕櫚酰寡肽3份；
磷脂10份；
膽固醇6份；
生育酚0.8份；
吐溫800.8份；
異硬脂醇二聚甘油琥珀酸酯 0.2份；
甘露醇2份；
丙二醇0.5汾；
[0056]制備方法:(1) I相制備:將脂質材料(磷脂+膽固醇)、油溶性活性成分(硫辛酸)、乳化劑(吐溫80+異硬脂醇二聚甘油琥珀酸酯)、抗氧化劑(生育酚)和醇類(丙二醇)充分混合，再溶解到乙醇溶劑中得溶液1，向溶液I中加入適量水，充分攪拌并均質得I相，其中(脂質材料+活性成分+乳化劑+抗氧化劑+醇類):乙醇:水的重量比為1:6:4 ；(2) II相制備:將水溶性活性成分(棕櫚酰寡肽)及保護劑(甘露醇)溶解于磷酸緩沖液(PH6.4)中，充分混合均勻得II相；(3)將II相緩慢加入到I相中，邊加入邊超聲，其中I相:11相的重量比為2:1，加入完畢，經0.22um超濾膜高壓擠出過濾得濾液A。將濾液A經冷凍干燥(-20℃ 10h, -1O℃ 8h，-4°C 5h，25°C 2h，真空度小于 0.1MPa)，得到前脂質體 A 粉末。
[0057]S2.脂質體B的制備:
[0058]按重量份數計，所述脂質體B含有如下成分:
[0059]
前脂質體A粉末6份；
VA1份
孔雀石提取液1份；
白茶提取物0.5份；
碧蘿芷0.5份；
磷脂35份；
膽固醇15份；
生育酚0.4份；
生育酚乙酸酯0,6份；
吐溫800.3份；
甘油硬脂酸酯檸檬酯0.7份；
甘露醇1.5份；
蔗糖0.5份。
[0060]所述脂質體B的制備方法為:(1)稱取脂質材料(磷脂+膽固醇)、油溶性活性成分(VA)、乳化劑(吐溫80+甘油硬脂酸酯檸檬酯)和抗氧劑(生育酚+生育酚乙酸酯)充分溶解于乙醇溶劑中，(脂質材料+油溶性活性成分+抗氧化劑+乳化劑):乙醇的重量比為1:3，于60°C下水浴溶解，充分攪拌直到完全溶解得類脂質溶液Tl ; (2)取一定質量的過200目篩的保護劑粉末(甘露醇+蔗糖)，前脂質體A粉末、水溶性活性成分(孔雀石提取物、白茶提取物、碧蘿芷提取物)與適量磷酸緩沖液(PH6.4)混勻后得溶液T2 ；(3)將溶液T2與類脂質溶液Tl充分高速攪拌混合均勻(Tl:T2的重量比為1:20)，經5um濾膜擠出過濾得濾液B。將濾液 B 于-20°C預冷 12h，冷凍干燥(_20°C 10h,-10°C 8h, -4°C 5h，25°C 2h，真空度小于0.1MPa)，壓蓋封口即得脂質體B粉末，該脂質體B粉末即為抗衰老制劑。
[0061]實施例2
[0062]一種抗衰老制劑，通過以下方法制備得到:
[0063]SI前脂質體A粉末的制備:按重量份數計，前脂質體A粉末含有如下各組分:
[0064]
硫辛酸7份；
VE
1份
[0065]谷胱甘肽2份；
磷脂30份
膽固醇10份；
生育酚乙酸酯1.2份；
吐溫800.2份；
聚甘油-3-二異硬脂酸酯0.9份；
甘露醇1.8份；
海藻糖1.8份；
丙二醇0.8份；
[0066]制備方法:(1) I相制備:將脂質材料(磷脂+膽固醇)、油溶性活性成分(硫辛酸+VE)、乳化劑(吐溫80+聚甘油-3- 二異硬脂酸酯)、抗氧化劑(生育酚乙酸酯)和醇類(丙二醇)充分混合，再溶解到乙醇溶劑中的溶液1，向溶液I中加入適量水，充分攪拌并均質得I相，其中(脂質材料+活性成分+乳化劑+抗氧化劑+醇類):乙醇:水的重量比為1:8:5;(2) II相制備:將水溶性活性成分(谷胱甘肽)及保護劑(甘露醇+海藻糖)溶解于磷酸緩沖液(PH6.4)中，充分混合均勻得II相；(3)將II相緩慢加入到I相中，邊加入邊超聲，其中I相:II相的重量比為2:1，加入完畢，經0.22um超濾膜高壓擠出過濾得濾液A。將濾液A經冷凍干燥(_20°C 10h, -1O0C 8h，-4°C 5h，25°C 2h，真空度小于0.1MPa)，得到前脂質體A粉末。
[0067]S2.脂質體B的制備:按重量份數計，所述脂質體B含有如下成分:
[0068]
前脂質體A粉末8份；
丹參酮2份；
孔雀石提取液0.8份；
白茶提取物0.5份；
碧蘿芷提取物0.4份；
猴面包樹提取物0.3份.’
磷脂30份；
膽固醇10份；
生育酚1.2份；
吐溫801.5份；
[0069]乳酸0.2份；
甘露醇1.5份；
蔗糖1.5份。
[0070]所述脂質體B的制備方法為:(1)稱取脂質材料(磷脂+膽固醇)、油溶性活性成分(丹參酮)、乳化劑(吐溫80)和抗氧劑(生育酚)充分溶解于乙醇溶劑中，(脂質材料+油溶性活性成分+抗氧化劑+乳化劑):乙醇的重量比為1:4，于60°C下水浴溶解，充分攪拌直到完全溶解得類脂質溶液Tl ; (2)取一定質量的過200目篩的保護劑粉末(甘露醇+蔗糖+乳酸)，前脂質體A粉末、水溶性活性成分(孔雀石提取物、白茶提取物、碧蘿芷提取物+猴面包樹提取物)與適量磷酸緩沖液(PH6.4)混勻后得溶液T2 ; (3)將溶液T2與類脂質溶液Tl充分高速攪拌混合均勻得溶液B (Tl:T2的重量比為1:25)，經5um濾膜擠出過濾得濾液B。將濾液B于-20°C預冷12h，冷凍干燥(_20°C 10h, -10°C 8h，-4°C 5h，25°C 2h，真空度小于0.1MPa)，壓蓋封口即得脂質體B粉末，該脂質體B粉末即為本發明抗衰老制劑。
[0071]實施例3
[0072]一種抗衰老制劑，通過以下方法制備得到:
[0073]SI前脂質體A粉末的制備:按重量份數計，前脂質體A粉末含有如下各組分:
[0074]
硫辛酸10份；
棕櫚酰寡肽2份；
谷胱甘肽3份；
磷脂24份；
膽固醇6份；
生育酚乙酸酯2.0份；
吐溫800.3份；
聚甘油-3-二異硬脂酸酯 1份；
膽酸鈉0.2份；
甘露醇5份；
丙二醇1.2份；
[0075]制備方法:(1) I相制備:將脂質材料(磷脂+膽固醇)、油溶性活性成分(硫辛酸)、乳化劑(吐溫80+聚甘油-3- 二異硬脂酸酯+膽酸鈉)、抗氧化劑(生育酚乙酸酯)和醇類(丙二醇)充分混合，再溶解到乙醇溶劑中得溶液1，向溶液I中加入適量水，充分攪拌并均質得I相，其中(脂質材料+活性成分+乳化劑+抗氧化劑+醇類):乙醇:水的重量比為1:4:3;(2) II相制備:將水溶性活性成分(谷胱甘肽+棕櫚酰寡肽)及保護劑(甘露醇)溶解于磷酸緩沖液(PH6.4)中，充分混合均勻得II相；(3)將II相緩慢加入到I相中，邊加入邊超聲，其中I相:II相的重量比為2:1，加入完畢，經0.22um超濾膜高壓擠出過濾得濾液A。將濾液A經冷凍干燥(_20°C 10h,-10°C 8h，-4°C 5h，25°C 2h，真空度小于0.1MPa)，得到前脂質體A粉末。
[0076]S2.脂質體B的制備:按重量份數計，所述脂質體B含有如下成分:
[0077]
前脂質體A粉末12份；
丹參酮1份；
VAI 份；
孔雀石提取液2份；
白茶提取物1份；
銀杏葉提取物0.5份；
猴面包樹提取物0.5份；
磷脂24份；
膽固醇6份；
生育酚1.9份；
吐溫800.4份；
甘油硬脂酸酯檸檬酯1.3份；
膽酸鈉0.3份；`
甘露醇3.0份；
海藻糖2份；
丙二醇0.7份；
[0078]所述脂質體B的制備方法為:(1)稱取脂質材料(磷脂+膽固醇)、油溶性活性成分(丹參酮+VA)、乳化劑(吐溫80+甘油硬脂酸酯檸檬酯+膽酸鈉)、醇類(丙二醇)和抗氧劑(生育酚)充分溶解于乙醇溶劑中，(脂質材料+油溶性活性成分+抗氧化劑+乳化劑+醇類):乙醇的重量比為1:5，于60°C下水浴溶解，充分攪拌直到完全溶解得類脂質溶液Tl ; (2)取一定質量的過200目篩的保護劑粉末(甘露醇+海藻糖)，前脂質體A粉末、水溶性活性成分(孔雀石提取物、白茶提取物、銀杏葉提取物+猴面包樹提取物)與適量磷酸緩沖液(PH6.4)混勻后得溶液T2 ; (3)將溶液T2與類脂質溶液Tl充分高速攪拌混合均勻得溶液B (Tl:T2的重量比為1:30),經5um濾膜擠出過濾得濾液B。將濾液B于_20°C預冷12h,冷凍干燥(-200C 10h,-10°C 8h，-4°C 5h，25°C 2h，真空度小于0.1MPa)，壓蓋封口即得脂質體B粉末，該脂質體B粉末即為抗衰老制劑。
[0079]對比例I
[0080]一種抗衰老制劑，通過以下方法制備得到:
[0081]SI前脂質體A粉末的制備:按重量份數計，前脂質體A粉末含有如下各組分:
[0082]丹參酮1份；
VAI 份；
孔雀石提取液2份;
白茶提取物1份；
銀杏葉提取物0.5份；
猴面包樹提取物0.5份；
磷脂12份；
膽固醇3份；
生育酚乙酸酯2.0份；
吐溫800.3份；
聚甘油-3-二異硬脂酸酯 1.2份；
甘露醇5份；
丙二醇1.2
[0083]制備方法:(1) I相 制備:將脂質材料(磷脂+膽固醇)、油溶性活性成分(丹參酮+VA)、乳化劑(吐溫80+聚甘油-3- 二異硬脂酸酯)、抗氧化劑(生育酚乙酸酯)和醇類(丙二醇)充分混合，再溶解到乙醇溶劑中得溶液1，向溶液I中加入適量水，充分攪拌并均質得I相，其中(脂質材料+活性成分+乳化劑+抗氧化劑+醇類):乙醇:水的重量比為1:4:3;
(2)II相制備:將水溶性活性成分(孔雀石提取物、白茶提取物、銀杏葉提取物+猴面包樹提取物)及保護劑(甘露醇)溶解于磷酸緩沖液(PH6.4)中，充分混合均勻得II相；(3)將II相緩慢加入到I相中，邊加入邊超聲，其中I相:II相的重量比為2:1，加入完畢,經0.22um超濾膜高壓擠出過濾得濾液A。將濾液A經冷凍干燥(_20°C 10h,-10°C 8h，-4°C 5h，25°C 2h，真空度小于0.1MPa)，得到前脂質體A粉末。
[0084]S2.脂質體B的制備:按重量份數計，所述脂質體B含有如下成分:
[0085]前脂質體A粉末25份；
硫辛酸2.18份；
棕櫚酰寡肽0.44份；
谷胱甘肽0.65份；
磷脂24份；
膽固醇6份；
生育酚1.9份；
吐溫800.4份；
甘油硬脂酸酯檸檬酯1.6份；
甘露醇3.0份；
海藻糖2份；
丙二醇0.7份；
[0086]所述脂質體B的制備方法為:(1)稱取脂質材料(磷脂+膽固醇)、油溶性活性成分(硫辛酸)、乳化劑(吐溫80+甘油硬脂酸酯檸檬酯)、醇類(丙二醇)和抗氧劑(生育酚)充分溶解于乙醇溶劑中，(脂質材料+油溶性活性成分+抗氧化劑+乳化劑+醇類):乙醇的重量比為1:5，于60°C下水浴溶解，充分攪拌直到完全溶解得類脂質溶液Tl ; (2)取一定質量的過200目篩的保護劑粉末(甘露醇+海藻糖)，前脂質體A粉末、水溶性活性成分(谷胱甘肽+棕櫚酰寡肽)與適量磷酸緩沖液(PH6.4)混勻后得溶液T2 ; (3)將溶液T2與類脂質溶液Tl充分高速攪拌混合均勻的溶液B(T1:T2的重量比為1:30)，經5um濾膜擠出過濾得濾液B。將濾液 B 于-20°C預冷 12h，冷凍干燥(_20°C 10h,-10°C 8h, -4°C 5h，25°C 2h，真空度小于0.1MPa)，壓蓋封口即得脂質體B粉末，該脂質體B粉末即本發明所述抗衰老制劑。
[0087]對比例2
[0088]一種抗衰老制劑，通過以下方法制備得到。本實施例所述的抗衰老制劑是將所有的水溶性抗衰老活性成分和所有的油溶性抗衰老活性成分同時包裹在同一個脂質體腔室內。
[0089]按重量份數計， 所述抗衰老制劑含有如下各組分:
[0090]硫辛酸2.18份；
棕櫚酰寡肽0.44份；
谷胱甘肽0.65份；
丹參酮1份；
VAI 份；
孔雀石提取液2份；
白茶提取物1份；
銀杏葉提取物0.5份；
猴面包樹提取物0.5份；
磷脂24份；
膽固醇6份；
生育酚1.9份；
生育酚乙酸酯2.0份；
吐溫800.7份；
甘油硬脂酸酯檸檬酯1.6份；`聚甘油-3-二異硬脂酸酯1.2份；
甘露醇8.0份；
海藻糖2份；
丙二醇1.9份；
[0091]制備方法:(1)按上方稱取脂質材料(磷脂+膽固醇)、油溶性抗衰老活性成分(硫辛酸+丹參酮+VA)、水溶性抗衰老成分(孔雀石提取液+白茶提取物+銀杏葉提取物+猴面包樹提取物+谷胱甘肽+棕櫚酰寡肽)、乳化劑(吐溫80+聚甘油-3- 二異硬脂酸酯+甘油硬脂酸酯檸檬酯)、醇類(丙二醇)和抗氧化劑(生育酚+生育酚乙酸酯)充分溶解于乙醇溶劑中，于60°C下水浴溶解，充分攪拌直到完全溶解得類脂質溶液Tl ；S2.取一定質量的過200目篩的甘露醇和海藻糖粉末，與適量磷酸緩沖液(pH6.4)混勻后得溶液T2 ；S3.將溶液T2與類脂質溶液Tl充分攪拌混合均勻(Tl:T2=1:30),并進行均質處理得溶液B，經0.22um超濾膜高壓擠出過濾得濾液B。將濾液B于_20°C預冷12h，冷凍干燥(-200C 10h,-10°C 8h，-4°C 5h，25°C 2h，真空度小于0.1MPa)，壓蓋封口即得脂質體B粉末，該粉末即為抗衰老制劑。
[0092]實施例4抗衰老組合物實驗報告如下:
[0093]一、體外評價
[0094]1、試驗目的:與市售常用抗衰劑進行清除自由基能力測定的比較。
[0095]2、試驗儀器與試劑:分光光度計SpectronicGENESYS-5,美國Thermo公司；其他試劑為常規試劑；比較本發明實施例1~3抗衰老組合物(6%)、本發明對比例I和對比例2(6%)、微生物C (3%)、維生素E (3%)、蘆丁(5%)的抗氧化能力。
[0096]3、試驗方法
[0097]清除DPPH自由基能力的測定:依次將3mLpH6.8磷酸緩沖液，4mL、0.4mmol/LDPPH無水乙醇溶液,0.2mL待測樣品加入到IOmL離心管中充分混勻，30min后，離心IOmin(8000r/min)，取上清液，在516nm處測定吸光度值，平行操作3次取平均值，樣品對DPPH自由基的清除率=[1 - (Al - A2)/A3]。式中Al為加樣品反應后DPPH溶液的吸光度值，A2為不加DPPH(用無水乙醇代替)只加樣品溶液的吸光值，A3為不加樣品只加DPPH及水溶液的吸光值。
[0098]清除超氧陰離子自由基能力的測定:配制pH值為8.20的緩沖體系(Tris-HCl-EDTA)。在IOmL離心管中加入待測樣品0.6mL，加入5.2mL緩沖液，用移液管加入0.045mol/L鄰苯三酚溶液0.2mL,迅速搖勻，等待反應5分鐘(時間必須精確)后迅速于干燥比色皿中，在325nm處測吸光度值,記為AO, IOmin后再測記為A4。以蒸懼水代替樣品測定的吸光值分別記為BO和B4。平行操作3次取平均值，樣品對超氧陰離子的抑制率= [(B4 — B0) — (A4 — AO) ] / (B4 — B0)。
[0099]清除羥自由基能力的測定:分別將lmL、0.4mmol/L結晶紫，3mL、0.2mol/LpH7.4磷酸緩沖液，lmL、0.001mol/LFeS04溶液，ImL待測樣品，加入IOmL離心管中，最后加lmL30%H202啟動反應，于室溫下反應Ih后12000r/min離心5min，取上清液在5 IOnm下測定吸光值記為C，用蒸餾水代替樣品時的吸光值記為Cl，用蒸餾水代替樣品和H2O2時的吸光值記為C2。平行操作3次取平均值，樣品對羥自由基的清除率=(C - C1)/(C2 - Cl)。
[0100]4.試驗結果
[0101]表1清除DPPH自由基 能力的測定結果
[0102]
【權利要求】
1.一種抗衰老制劑，其特征在于，通過以下方法制備得到: SI前脂質體A的制備:將硫辛酸和谷胱甘肽或棕櫚酰寡肽中的一種或兩種一起包裹在前脂質體A中，得到前脂質體A粉末； S2.將前脂質體A粉末、孔雀石提取物、白茶提取物、VA或丹參酮中的一種或兩種和葡萄籽提取物、碧蘿芷提取物、銀杏葉提取物或猴面包樹提取物中的一種或多種一起包裹在脂質體B中，即得抗衰老制劑。
2.根據權利要求1所述抗衰老制劑，其特征在于，所述硫辛酸能部分用VE代替。
3.根據權利要I所述抗衰老制劑，其特征在于，所述抗衰老制劑通過以下方法制備得到: 51.將硫辛酸和谷胱甘肽或棕櫚酰寡肽中的一種或兩種一起包裹在前脂質體A中，得到前脂質體A粉末； 52.將脂質材料、VA或丹參酮中的一種或兩種、乳化劑、抗氧化劑和醇類溶解于乙醇溶劑中，水浴溶解得類脂質溶液Tl ； 53.將保護劑、前脂質體A粉末、孔雀石提取物、白茶提取物和葡萄籽提取物、碧蘿芷提取物、銀杏葉提取物或猴面包樹提取物中的一種或多種溶解于磷酸緩沖液中得溶液T2 ； 54.將類脂質溶液Tl與溶液T2按比例混勻后得溶液B，溶液B經過濾及冷凍干燥、壓蓋封口即得脂質體B粉末，該粉末即為抗衰老制劑。
4.根據權利要3所述抗衰老制劑`，其特征在于，所述前脂質體A粉末的制備方法包括如下步驟: 51.將脂質材料、硫辛酸、乳化劑、抗氧化劑和醇類溶解于乙醇中得溶液1，向溶液I中加入適量水，充分攪拌并均質后得I相； 52.將保護劑和谷胱甘肽或棕櫚酰寡肽中的一種或兩種溶解于磷酸緩沖液中，混合均勻得II相； 53.將II相緩慢加入到I相中，邊加入邊超聲，加入完畢再過濾制備得到脂質體A，脂質體A經冷凍干燥即得前脂質體A粉末。
5.根據權利要求3所述抗衰老制劑，其特征在于，S4所述類脂質溶液Tl與溶液T2的重量比為1:20~30。
6.根據權利要求4所述抗衰老制劑，其特征在于，SI所述脂質材料、硫辛酸、乳化劑和抗氧化劑的重量總和:乙醇:水的重量比為1:4~8:3飛；S3所述I相:II相的重量比為f 2:1
7.一種化妝品，其特征在于，在化妝品中的添加用量為5~10%重量百分比的權利要求1至6任一項所述抗衰老制劑。
【文檔編號】A61Q19/08GK103550104SQ201310553885
【公開日】2014年2月5日 申請日期:2013年11月8日 優先權日:2013年11月8日
【發明者】曾颯, 殷露琴, 周娟娟, 唐新明 申請人:廣州棟方日化有限公司