表面活性劑在穩定廢紙脫墨用堿性脂肪酶的酶活中的應用的制作方法
【專利摘要】本發明公開了一種表面活性劑在穩定廢紙脫墨用堿性脂肪酶的酶活中的應用，即在廢紙脫墨用堿性脂肪酶中加入表面活性劑，室溫下以50轉/分鐘攪拌30分鐘，將廢紙脫墨用堿性脂肪酶與所述表面活性劑混合均勻；表面活性劑為脂肪醇聚氧乙烯醚或烷基酚聚氧乙烯醚中的一種或兩種。表面活性劑在穩定廢紙脫墨用堿性脂肪酶的酶活的同時，還具有降低表面張力的能力，促進堿性脂肪酶分子快速到達油墨粒子表面，提高油墨分解效率，進一步提升脫墨效果。
【專利說明】表面活性劑在穩定廢紙脫墨用堿性脂肪酶的酶活中的應用
【技術領域】
[0001]本發明涉及生物工程【技術領域】，特別是涉及表面活性劑在穩定廢紙脫墨用堿性脂肪酶的酶活中的應用。
【背景技術】
[0002]脂肪酶是重要的工業酶制劑品種之一，可以催化解脂、酯交換、酯合成等反應，廣泛應用于油脂加工、食品、醫藥、飼料、油脂加工、造紙、皮革等工業。不同來源的脂肪酶具有不同的催化特點和催化活力。
[0003]用于廢紙脫墨的堿性脂肪酶，如綠微康⑶06脫墨酶，是一種特殊的酯鍵水解酶，它可作用于甘油三酯的酯鍵，使甘油三酯降解為甘油二酯、單甘油酯、甘油和脂肪酸。印刷油墨中大量使用植物油脂作為連接料，在現有脫墨工藝中，堿性脂肪酶可直接將植物油脂分解成脂肪酸和甘油，從而代替傳統皂、燒堿、硅酸鈉等脫墨化學品，大幅降低污水COD和B0D,減少污水處理壓力，有利于環境保護。
[0004]在廢紙制漿工藝中，為了適應連續化生產，通常使用廢紙脫墨用液體堿性脂肪酶。但是與固體脂肪酶相比，廢紙脫墨用液體堿性脂肪酶在運輸、儲存和使用過程中，由于溫度和環境的變化，酶的穩定性較差，酶活力損失較大，對脫墨效果造成不良影響，后續工藝中產生紙機紙病，嚴重影響成紙質量，導致經濟損失。因此，穩定液體堿性脂肪酶的酶活是液體堿性脂肪酶能用于廢紙脫墨的前提條件。目前常用的液體堿性脂肪酶穩定劑通常是小分子的多元醇和無機鹽類化合物，而脂肪醇聚氧乙烯醚或烷基酚聚氧乙烯醚在穩定廢紙脫墨用液體堿性脂肪酶的酶活中的應用未見報道。
【發明內容】
[0005]本發明主要解決的技術問題是提供一種表面活性劑在穩定廢紙脫墨用堿性脂肪酶的酶活中的應用，所述表面活性劑在穩定廢紙脫墨用堿性脂肪酶的酶活的同時，還具有降低表面張力的能力，促進堿性脂肪酶分子快速到達油墨粒子表面，提高油墨分解效率，進一步提升脫墨效果。
[0006]為解決上述技術問題，本發明采用的一個技術方案是:提供一種表面活性劑在穩定廢紙脫墨用堿性脂肪酶的酶活中的應用，即在廢紙脫墨用堿性脂肪酶中加入表面活性劑，室溫下以50轉/分鐘攪拌30分鐘，將所述廢紙脫墨用堿性脂肪酶與所述表面活性劑混合均勻；其中所述表面活性劑為脂肪醇聚氧乙烯醚或烷基酚聚氧乙烯醚中的一種或兩種。
[0007]優選地，按重量計，所述廢紙脫墨用堿性脂肪酶為85~99%，所述表面活性劑為1~15%。
[0008]優選地，所述脂肪醇聚氧乙烯醚的脂肪醇為碳鏈長度為8~18的直鏈或支鏈，聚氧乙烯醚的聚合單元數為3~100。
[0009]最優選地，所述脂肪醇聚氧乙烯醚的脂肪醇為碳鏈長度為12的直鏈或支鏈，聚氧乙烯醚的聚合單元數為9。[0010]優選地，所述烷基酚聚氧乙烯醚的烷基酚為碳鏈長度為8~18的直鏈或支鏈，聚氧乙烯醚的聚合單元數為3~100。
[0011]最優選地，所述烷基酚聚氧乙烯醚的烷基酚為碳鏈長度為9的直鏈或支鏈，聚氧乙烯醚的聚合單元數為10。
[0012]優選地，所述廢紙脫墨用堿性脂肪酶為綠微康⑶06脫墨酶。
[0013]本發明的有益效果是:區別于現有液體堿性脂肪酶在存放、運輸的過程中酶活損失較大的情況，本發明應用脂肪醇聚氧乙烯醚、烷基酚聚氧乙烯醚中的一種或兩種按一定比例加入到廢紙脫墨用堿性脂肪酶中，所述表面活性劑不僅能穩定廢紙脫墨用堿性脂肪酶的酶活，而且還具有降低表面張力的能力，促進堿性脂肪酶分子快速到達油墨粒子表面，提聞油墨分解效率，進一步提升脫墨效果。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0014]圖1為本發明表面活性劑在穩定廢紙脫墨用堿性脂肪酶的酶活應用效果示意圖。【具體實施方式】
[0015]下面結合附圖及實施例對本發明進行詳細說明。
[0016]表面活性劑在穩定廢紙脫墨用堿性脂肪酶的酶活中的應用，即在85~99%廢紙脫墨用堿性脂肪酶中加入為I~15%表面活性劑，室溫下以50轉/分鐘攪拌30分鐘，將廢紙脫墨用堿性脂肪酶與所述表面活性劑混合均勻；表面活性劑為脂肪醇聚氧乙烯醚或烷基酚聚氧乙烯醚中的一種或兩種；廢紙脫墨用堿性脂肪酶為綠微康CD06脫墨酶，該酶可以從深圳市綠微康生物工程有限公司購買。
[0017]實施例1`[0018]在1000升反應釜中，依次加入850公斤廢紙脫墨用堿性脂肪酶、100公斤十二醇聚氧乙烯(9)醚、50公斤壬基酚聚氧乙烯(10)醚，以50轉/分鐘攪拌30分鐘使其混合均勻，停止攪拌后，得淺黃色液體。
[0019]實施例2
[0020]在1000升反應釜中，依次加入950公斤廢紙脫墨用堿性脂肪酶、50公斤壬基酚聚氧乙烯(10)醚，以50轉/分鐘攪拌30分鐘使其混合均勻，停止攪拌后，得淺黃色液體。
[0021]實施例3
[0022]在1000升反應釜中，依次加入900公斤廢紙脫墨用堿性脂肪酶、100公斤十二醇聚氧乙烯(9)醚、以50轉/分鐘攪拌30分鐘使其混合均勻，停止攪拌后，得淺黃色液體。
[0023]實施例4
[0024]在1000升反應釜中，依次加入900公斤廢紙脫墨用堿性脂肪酶、50公斤十二醇聚氧乙烯(9)醚、50公斤壬基酚聚氧乙烯(10)醚，以50轉/分鐘攪拌30分鐘使其混合均勻，停止攪拌后，得淺黃色液體。
[0025]實施例5
[0026]在1000升反應釜中，依次加入990公斤廢紙脫墨用堿性脂肪酶、10公斤十二醇聚氧乙烯(9)醚，以50轉/分鐘攪拌30分鐘使其混合均勻，停止攪拌后，得淺黃色液體。
[0027]實施例6[0028]在1000升反應釜中，依次加入990公斤廢紙脫墨用堿性脂肪酶、10公斤壬基酚聚氧乙烯(10)醚，以50轉/分鐘攪拌30分鐘使其混合均勻，停止攪拌后，得淺黃色液體。
[0029]比較例I
[0030]以廢紙脫墨用堿性脂肪酶中不添加表面活性劑為對照組，以實施例1~6為實驗組，分別對實驗組和對照組進行酶活檢測。
[0031]脂肪酶酶活測定方法:
[0032]I 試劑
[0033]1.10.05mol/L Gly-NaOH 緩沖液(ρΗ9.4)
[0034]A 液:0.2mol/L NaOH，稱取 NaOH(A.R)8.0g，用蒸餾水定容至 1000ml ；
[0035]B液:0.2mol/L Gly,稱取甘氨酸15.014g,用蒸懼水定容1000ml ；
[0036]使用前取A液16.8ml+B液50ml，加部分蒸餾水稀釋，再用酸度計調節pH至9.4，定容到200ml。
[0037]1.2橄欖油
[0038]分析純。
[0039]1.34%聚乙烯醇(PVA)溶液
[0040]稱取聚乙烯醇40g(聚`合度 1750+50)，加 1000ml 0.05mol/L pH 9.4 的 Gly-NaOH緩沖液，沸水浴完全溶解后，冷卻，必要時過濾，溶解過程中蒸發的水分要用蒸餾水補充，定容至 1000ml。
[0041]1.4 乙醇
[0042]含量在95%以上，為分析純。
[0043]1.50.01mol/L NaOH 標準滴定溶液
[0044]制備標準滴定溶液的濃度值應在規定濃度值的± 10 %范圍以內。標準溶液置于塑料瓶中保存，I個月后需重新標定。
[0045]2儀器設備
[0046]2.1乳化容器:體積為500ml
[0047]2.2均質機:轉速10000轉/分
[0048]2.3震蕩恒溫水浴鍋
[0049]2.4液晶式酸度計
[0050]2.5多頭磁力攪拌器
[0051]3乳化液的制備
[0052]取4% PVA溶液與橄欖油2: I混合，放入燒杯或三角瓶中，然后用均質機乳化(外包冰塊)，轉速10000轉/分，一次乳化3分鐘，每次乳化間隔時間為3分鐘，共4次，立即使用。
[0053]4酶活測定
[0054]4.1酶活測定(NaOH滴定法):
[0055]準確吸取Iml樣品于100ml容量瓶中，用緩沖液定容到刻度，搖勻，進行下一步稀釋，稀釋倍數:以樣品與對照消耗堿量之差在4.5ml~5.5ml范圍內。
[0056]注意:再次稀釋次數不得超過兩次。
[0057]測定:取100ml三角瓶3只，其中2只是試樣，I只是空白照，每只中的組成液為:4.0ml緩沖液(pH9.4),5.0ml橄欖油乳化液，1.0ml酶液。以上除酶液以外的組成液置于36°C水浴鍋預熱5分鐘，然后精確加入Iml酶液，精確計時，緩慢振蕩(80次/分鐘)，保溫10分鐘，立即加入95%酒精20ml，取出，加入10ml30%的氯化鈉溶液，搖勻，使之破乳約I分鐘。并同時做空白對照，對照同樣品一樣，先預熱5分鐘，保溫10分鐘，立即加入20ml95%酒精(Iml酶液先加入該20ml 95%酒精中滅活)。
[0058]用0.01mol/LNaOH滴定樣品至空白溶液的pH。反應后的樣品應在半小時內完成滴定。
[0059]4.2 計算
【權利要求】
1.表面活性劑在穩定廢紙脫墨用堿性脂肪酶的酶活中的應用，其特征在于，在廢紙脫墨用堿性脂肪酶中加入表面活性劑，室溫下以50轉/分鐘攪拌30分鐘，將所述廢紙脫墨用堿性脂肪酶與所述表面活性劑混合均勻；其中所述表面活性劑為脂肪醇聚氧乙烯醚或烷基酚聚氧乙烯醚中的一種或兩種。
2.如權利要求1所述的應用，其特征在于，按重量計，所述廢紙脫墨用堿性脂肪酶為85~99%，所述表面活性劑為I~15%。
3.如權利要求1或2所述的應用，其特征在于，所述脂肪醇聚氧乙烯醚的脂肪醇為碳鏈長度為8~18的直鏈或支鏈，聚氧乙烯醚的聚合單元數為3~100。
4.如權利要求3所述的應用，其特征在于，所述脂肪醇聚氧乙烯醚的脂肪醇為碳鏈長度為12的直鏈或支鏈，聚氧乙烯醚的聚合單元數為9。
5.如權利要求1或2所述的應用，其特征在于，所述烷基酚聚氧乙烯醚的烷基為碳鏈長度為8~18的直鏈或支鏈，聚氧乙烯醚的聚合單元數為3~100。
6.如權利要求5所述的應用，其特征在于，所述烷基酚聚氧乙烯醚的烷基為碳鏈長度為9的直鏈或支鏈，聚氧乙烯醚的聚合單元數為10。
7.如權利要求1~6任一項所述的應用，其特征在于，所述廢紙脫墨用堿性脂肪酶為綠微康⑶06脫墨酶。`
【文檔編號】D21C5/02GK103667231SQ201210326112
【公開日】2014年3月26日 申請日期:2012年9月5日 優先權日:2012年9月5日
【發明者】郭宏濤, 王劍英, 張清輝 申請人:東莞市綠微康生物科技有限公司