專利名稱：一種用于尿液分析的中低濃度的陽性質控液的制作方法
技術領域：
本發明涉及尿液化學分析檢驗技術中對尿液化學分析系統進行質量控制的質控液，具體涉及一種用于尿液分析的中低濃度的陽性質控液。
背景技術：
在現有尿液(干化學)分析檢驗中，臨床上都用質控液對尿液化學分析系統的工作質量狀態進行質量控制，一般將檢測結果分為NOiormal，陰性)，士(可疑態)，+1 (陽性)，+2(陽性)，+3(陽性)，+4(陽性)，+5(陽性)等。已有的質控液，分為陰性質控液 (含超低濃度的質控物或不含相應的質控物)、高陽性質控液或者高濃度質控液(含較高濃度的質控物)，陰性質控液是低于檢測系統的檢出限的狀態，而高陽性質控液則處在檢測范圍的上端，這兩者質控液組成一低一高兩個質控濃度。在病變之初，尿液中與病理相關的各物質的變化是細微的，這一細微的變化，在尿常規檢驗中體現為各個監測檢出物呈現出由無到有的變化，并以陰性向微弱的陽性顯示。而現有的高陽性質控液對中低陽性濃度(具體指士(可疑態)和陽性等級為+1和+2的前兩個濃度范圍)檢測的靈敏度不夠高，檢測結果不夠準確。目前，市場上還沒有由多個組分組成的中低濃度的質控液，較為常見的是陰性質控液、高陽性質控液或者高濃度質控液中的一個或兩個組分為低濃度的質控物。如國家知識產權局2002年1月2日公開的公開號為CN 13^250A的中國發明專利，公開了一種尿液分析質控液及其配制方法，所述質控液由陰性質控液和陽性質控液組成，其中陽質控液中主要含有=PH為6. 0-7. 0的0. 2M磷酸鈉緩沖液1000ml、2，4- 二甲基吡口各-3,5- 二羧酸鈉50-1000mg、l-萘胺鹽酸鹽10-100mg、無水葡萄糖0. 99-1. 98g、酯酶20mg、血紅蛋白 22-30mg、人血清白蛋白l_3g、直接膽紅素120mg、亞硝酸鈉31_50mg、乙酰乙酸鎂1. 8mg。 該質控液可對酸堿度(PH)、白蛋白(PRO)、葡萄糖(GLU)、隱血(BLD)、酮體(KET)、尿比重 (SG)、膽紅素(BIL)、尿膽原(URO)、亞硝酸鹽(NIT)、白細胞(WBC) 10個項目進行質控。但上述質控液的穩定性不夠好，其中的乙酰乙酸鎂不穩定，在酯酶的作用下容易降解消耗；酯酶、白蛋白、血紅蛋白等容易受到亞硝酸鹽等化學物質的毒害而失活；直接膽紅素在堿性溶解較好，但易受到光照等影響而變化，影響質控效果。陽性質控液在各個質控組分低值的情況下，穩定性較差，尤其是血紅蛋白、人血清白蛋白、乙酰乙酸鎂較為突出。此外，上述質控液選用的質控物來源不廣，價格昂貴，具有較高的生物污染風險，如發明中人血清白蛋白和人血紅細胞，來源于人體；乙酰乙酸鎂由于制備困難，價格較為昂貴。
發明內容
本發明要解決的技術問題是提供一種靈敏度高、穩定性好的用于尿液分析的中低濃度的陽性質控液。本發明所述的用于尿液分析的中低濃度的陽性質控液，它包括PH值為4. 5 8. 5的緩沖溶液，20 200mmol/L ；
表面活性劑，20 200mmol/L ；糖類保護劑，20 200mmol/L ；蛋白類保護劑，20 200mmol/L ；無水葡萄糖，300 990mg/L ；牛血清白蛋白，100 1000mg/L ；牛血紅蛋白，0. 6 5mg/L ；酯酶，2 20mg/L;丙酮或乙酰乙酸鋰或乙基乙酰乙酸鈉或乙酰乙酸乙酯，50 900mg/L ；直接膽紅素或萘胺鹽，3 40mg/L。上述配方中緩沖溶液可為檸檬酸鹽緩沖液、硼酸鹽緩沖液、甘氨酸-tris、蛋氨酸類-胺類緩沖液或GOOD ‘S生物緩沖液；其中，GOOD ‘S生物緩沖液可選自PIPES、M0PS0、MOPS、BES和 HEPES緩沖液中的一種或任意兩種以上的組合。優選選用硼酸鹽緩沖液、甘氨酸-tris或蛋氨酸類-胺類緩沖液，濃度為40 150mmol/L之間，PH為5. 7 7. 3 ；更為優選的，選用蛋氨酸類-胺類緩沖液，濃度為90 150mol/L，PH為5. 8 6. 8。所述的表面活性劑為吐溫-20、吐溫-40、吐溫-60、吐溫-80、聚氧乙烯月桂醚 (Brij35)或曲拉通X-100。優選選用吐溫-20、吐溫-40或Brij35，濃度為25 120mmol/ L0更為優選的，選用Brij35，濃度為60 90mmol/L。所述的糖類保護劑為蔗糖、乳糖或海藻糖。優選為海藻糖或乳糖，濃度為50 130mmol/L ；更為優選的，選用乳糖，濃度為80 110mmol/L。所述的蛋白類保護劑為聚乙烯基吡咯烷酮(分子式為(C6H9N0)n，可以是K30或 K90)、明膠或球蛋白。優選選用K30或明膠，濃度為40 160mmol/L;更為優選的是明膠， 濃度為80 120mmol/L。所述的萘胺鹽為鹽酸萘乙二胺或1-萘胺鹽酸鹽。根據質控的項目，本發明所述陽性質控液還可進一步包括吡咯或2，4- 二甲基吡咯或2，5- 二甲基吡咯，5 80mg/L ；或者是包括吲哚類衍生物，30 1000mg/L ；所述的吲哚類衍生物選自2，3_苯并吲哚、4-羥基吲哚、5-羥基吲哚、1-甲基吲哚、2-甲基吲哚、3-甲基吲哚、4-甲基吲哚、5-甲基吲哚、6-甲基吲哚、7-甲基吲哚、1，2_ 二甲基吲哚、2，3_ 二甲基吲哚、5-氨基-2-甲基吲哚和1-甲基-6-羥甲基吲哚中的一種。在上述基礎上，本發明陽性質控液還可包括亞硝酸鹽，2 20mg/L ；和/或肌酐，300 2000mg/L ；和 / 或抗壞血酸，50 700mg/L ；和/或尿鈣，200 2000mg/L。與現有技術相比，本發明的優點在于1、通過加入特定濃度范圍的保護劑，有效減少各組分之間的相互干擾、降低個別組分受光照等條件約束造成的對質控效果的影響，使得各組分能共存并且穩定性好，靈敏度尚。
2、各組分毒性、生物風險性較小，而且來源廣泛，生產成本低。3、在陰性和陽性的基礎上對中低濃度陽性的質量控制范圍進行細化，對尿液質控體系進行了有效的補充，另一方面控制弱陽性的檢出質量，更加符合和貼近臨床結果的情況，為醫生對患者病情的觀察、診斷提供更為準確可信的依據。以下通過試驗說明本發明所述質控液的靈敏度一、材料1、質控液1)本發明所述的中低濃度的陽性質控液(以下簡稱中低濃度質控液)，由本申請人生產，批號為080085，有效期090715。2)某品牌市售的尿陽性質控液(該質控液為高值陽性質控液，以下簡稱市售質控液)，批號為61271，有效期20090731。2、主要器材四種不同的尿液分析系統(含兩個批號的配套試紙條)。其中，尿液分析系統1 西門子公司Clinitek-500型尿液分析儀(編號6470-1008405) 及Bayer Multistix IOSG尿十項試紙(試紙1 批號8B23D ；試紙2 批號8B31D)；尿液分析系統2 德國羅氏公司toisys 1800型尿液分析儀(編號8003086)及羅氏寶靈曼Junior尿十項試紙條(試紙1 批號30975021 ；試紙2 批號309750 )；尿液分析系統3 愛科來醫療電子上海有限公司PU-4010尿液分析儀(編號40810217)及愛科來ARKRAY IOEA尿試紙條(試紙1 批號0EA8G90 ；試紙2 批號 0EA8G93)；尿液分析系統4 桂林優利特醫療電子有限公司toiteSt-500B型尿液分析儀(編號50B01132)及 Uritest IlG 尿試紙條(試紙 1 批號 G1309045 ；試紙 2 批號 G1309051)3、臨床樣本取自桂林醫學院附屬醫院檢驗科的臨床樣本。取樣后2小時內進行測試。二、實驗及方法1、分析系統測試環境溫度對質控結果及臨床結果的對應性研究(臨床樣本為90 個)采用尿液分析系統1進行測試。首先調節測試環境溫度為10士2攝氏度，將儀器、 試劑及臨床尿樣置于調節好溫度的環境中穩定30分鐘，在測試臨床尿樣之前用市售質控液和中低濃度質控液進行五次質控測試，記錄質控結果后再進行臨床尿樣的測試；再分別將測試環境溫度調節為25士2攝氏度和35士2攝氏度，在不同的溫度下重復進行試驗。最后，收集、整理數據，比較質控液測試及臨床尿樣的結果隨溫度變化的情況是不是具有相關性。在所有的測試之前，用廠家配套的校準灰條對儀器進行檢測通過后再進行質控液和臨床樣本的測試。2、分析系統靈敏度變化的監測及臨床對應性研究(臨床樣本為100個)在測試環境溫度為25士3°C條件下，將儀器、試劑及臨床尿樣置于調節好溫度的環境中穩定30分鐘。在測試臨床尿樣之前用市售質控液和中低濃度質控液進行三次質控測試，記錄質控結果后再進行臨床尿樣的測試。最后，收集、整理數據，比較質控液測試及臨床尿樣的結果隨溫度變化的情況是不是具有相關性。在所有的測試之前，用廠家配套的校準灰條對儀器進行檢測通過后再進行質控液和臨床樣本的測試。三、實驗結果1、不同測試環境質控結果與臨床結果相關性1)市售質控液測試結果市售質控液在10°C、25°C、35°C三個不同的環境溫度下進行質控測試，質控結果都保持一致(如表1所示)，反映不出環境溫度對分析系統的影響。表1
權利要求
1.一種用于尿液分析的中低濃度的陽性質控液，其特征在于它包括 PH值為4. 5 8. 5的緩沖溶液，20 200mmol/L ；表面活性劑，20 200mmol/L ； 糖類保護劑，20 200mmol/L ； 蛋白類保護劑，20 200mmol/L ； 無水葡萄糖，300 990mg/L ； 牛血清白蛋白，100 1000mg/L ； 牛血紅蛋白，0. 6 5mg/L ； 酯酶，2 20mg/L;丙酮或乙酰乙酸鋰或乙基乙酰乙酸鈉或乙酰乙酸乙酯，50 900mg/L ；直接膽紅素或萘胺鹽，3 40mg/L。
2.根據權利要求1所述的用于尿液分析的中低濃度的陽性質控液，其特征在于所述的表面活性劑為吐溫-20、吐溫-40、吐溫-60、吐溫-80、聚氧乙烯月桂醚或曲拉通X-100。
3.根據權利要求1所述的用于尿液分析的中低濃度的陽性質控液，其特征在于所述的糖類保護劑為蔗糖、乳糖或海藻糖。
4.根據權利要求1所述的用于尿液分析的中低濃度的陽性質控液，其特征在于所述的蛋白類保護劑為聚乙烯基吡咯烷酮、明膠或球蛋白。
5.根據權利要求1所述的用于尿液分析的中低濃度的陽性質控液，其特征在于該陽性質控液還包括吡咯或2，4- 二甲基吡咯或2，5- 二甲基吡咯，5 80mg/L。
6.根據權利要求1所述的用于尿液分析的中低濃度的陽性質控液，其特征在于該陽性質控液還包括吲哚類衍生物，30 1000mg/L。
7.根據權利要求6所述的用于尿液分析的中低濃度的陽性質控液，其特征在于所述的吲哚類衍生物選自2，3-苯并吲哚、4-羥基吲哚、5-羥基吲哚、1-甲基吲哚、2-甲基吲哚、 3-甲基吲哚、4-甲基吲哚、5-甲基吲哚、6-甲基吲哚、7-甲基吲哚、1，2_ 二甲基吲哚、2， 3-二甲基吲哚、5-氨基-2-甲基吲哚和1-甲基-6-羥甲基吲哚中的一種。
8.根據權利要求5或6所述的用于尿液分析的中低濃度的陽性質控液，其特征在于 該陽性質控液還包括亞硝酸鹽，2 20mg/L ；和/或肌酐，300 2000mg/L ；和/或抗壞血酸，50 700mg/L ；和/或尿鈣，200 2000mg/L。
9.根據權利要求1所述的用于尿液分析的中低濃度的陽性質控液，其特征在于該陽性質控液還包括亞硝酸鹽，2 20mg/L ；和/或肌酐，300 2000mg/L ；和/或抗壞血酸，50 700mg/L ；和/或尿鈣，200 2000mg/L。
全文摘要
本發明公開了一種用于尿液分析的中低濃度的陽性質控液，它包括pH值為4.5～8.5的緩沖溶液，20～200mmol/L；表面活性劑，20～200mmol/L；糖類保護劑，20～200mmol/L；蛋白類保護劑，20～200mmol/L；無水葡萄糖，300～990mg/L；牛血清白蛋白，100～1000mg/L；牛血紅蛋白，0.6～5mg/L；酯酶，2～20mg/L；丙酮或乙酰乙酸鋰或乙基乙酰乙酸鈉或乙酰乙酸乙酯，50～900mg/L；直接膽紅素或萘胺鹽，3～40mg/L。還可根據需要添加相應項目的質控物。與現有技術相比，本發明所述質控液穩定性好，靈敏度高且各組分毒性較小，來源廣泛，生產成本低。
文檔編號G01N33/50GK102226805SQ20111009030
公開日2011年10月26日 申請日期2011年4月12日 優先權日2011年4月12日
發明者冼慶勇, 劉云鵬 申請人:桂林優利特醫療電子有限公司