專利名稱：N－取代－N′－取代脲衍生物及其用作TNF－α生成抑制劑的用途的制作方法
背景技術：
本發明涉及新的N-取代-N’-取代脲衍生物，含有該化合物的藥物組合物，TNF-α生成抑制劑和自身免疫疾病治療劑。
TNF-α(Tumor Necrosis Factor-α腫瘤壞死因子)現在，雖然作為在生物防御免疫機構中廣泛相關的細胞因子被認識，但TNF-α持續且過量的產生會引起組織障礙，成為各種疾病的原因或造成惡化的主要原因。例如，作為與TNF-α相關疾病的例子，可列舉關節風濕病，全身性紅斑狼瘡(SLE)，惡液質，急性感染性疾病，變態反應，發熱，貧血，糖尿病等(山崎，臨床免疫，27，1270，1995)。另外，有報道說TNF-α在作為自身免疫疾病的慢性風濕病和克羅恩氏病的發病中起到重要作用。(Andreas Eigler et al.，Immunology Today，18，487，1997)。
因此，可抑制TNF-α的產生或其作用的化合物，可期待在上述疾病的治療中是有用的，對此進行了各種研究(上述文獻山崎，臨床免疫，27和Andreas Eigler et al.，Immunology Today，18)。
本發明的另一目的是提供在制造該化合物中有用的中間體。
本發明的另一目的是提供含有該化合物的藥物組合物，TNF-α產生抑制劑和自身免疫疾病治療劑。
本發明者對于以前基本上沒有作為藥物進行研究的具有脲結構作為基本結構的化合物的合成進行了深入研究，創制了很多新的化合物，并發現其中下述通式I所示的N-取代-N’-取代脲衍生物具有優秀的TNF-α產生抑制活性，并基于此發現完成了本發明。
即，本發明提供了下述通式I所示的N-取代-N’-取代脲衍生物及其藥學上可接受的鹽。 (式中，R1表示氫原子，低級烷基，芳基，或式II所示的基團， R2表示氫原子，低級烷基，環烷基，芳基，羧基或酯基，或與R1一起形成環，R3和R4可相同或不同，分別表示氫原子，低級烷基，環烷基烷基，金剛烷基烷基，芳烷基，環烷基或芳基，R5表示氫原子，低級烷基，羥基，低級烷氧基或芳基，R6和R7可相同或不同，分別表示氫原子，低級烷基，環烷基烷基，環烷基或芳基，A1和A2可相同或不同，表示低級亞烷基，條件是R5與R6或R7之一一起形成，或R6和R7一起形成5～7員環，且R3和R4之一是環烷基烷基，金剛烷基烷基或芳烷基。)本發明還提供了下述通式III所示的N-取代-N’-取代脲衍生物及其鹽。 本發明還提供了含有上述N-取代-N’-取代脲衍生物或其藥學上可接受的鹽的藥物組合物，TNF-α產生抑制劑和自身免疫疾病治療劑。
這些低級烷基，環烷基和低級烷氧基可被鹵原子(氟原子，氯原子，碘原子，溴原子等)，羥基等取代基取代。另外，環烷基可被低級烷基或低級烷氧基取代。
作為低級亞烷基，可列舉亞甲基，亞乙基，亞丙基，亞異丙基，甲基亞甲基，四亞甲基，2-甲基三亞甲基，六亞甲基等碳原子數1～8的直鏈或支鏈亞烷基，優選碳原子數1～5的亞烷基，更優選碳原子數2～4的亞烷基，特別優選碳原子數2或3的亞烷基。
另外，作為芳基，可列舉取代或未取代的碳原子數6～12的苯基，萘基和芳香雜環基，優選取代或未取代的苯基，特別優選未取代的苯基或聯苯基。這里，作為取代基，可列舉鹵原子(氟原子、氯原子、碘原子、溴原子等)，羥基，氨基，低級烷基，低級烷氧基，環烷基，苯基等。
作為環烷基烷基，金剛烷基烷基和芳烷基，可列舉碳原子數1～8的直鏈或支鏈烷基，優選碳原子數1～5的烷基，更優選碳原子數1～3的烷基，特別優選乙基與上述環烷基，金剛烷基或芳基連接的基團。
作為酯基，可列舉低級烷基酯，芐基酯，苯基酯等。
作為R2與R1一起形成的環，是R1連接的硫原子也包括在內形成的5或6員非芳香族雜環，可列舉例如四氫噻吩，硫內酯和二硫戊環等。
作為R5與R6或R7之一一起形成，或R6和R7一起形成的5～7員環，可列舉具有環內氮原子或具有氮原子與氧原子或硫原子的非芳香族雜環，更優選具有1個或2個的氮原子的，具有1個氮原子和1個氧原子的雜環。具體的例子有，吡咯啉環，吡咯烷環，噁唑啉環，噁唑烷環，噻唑啉環，噻唑烷環，咪唑啉環，咪唑烷環，吡唑啉環，吡唑烷環，二氫吡啶環，四氫吡啶環，哌啶環，哌嗪環，嗎啉環，高哌嗪環，高哌啶環。其中，優選吡咯啉環，吡咯烷環，四氫吡啶環，哌啶環，哌嗪環，嗎啉環，高哌啶環；更優選吡咯烷環、哌啶環、哌嗪環、四氫吡啶環和高哌啶環。特別優選吡咯烷環，哌啶環和高哌啶環。這些5～7員環可具有低級烷基，低級烷基氨基，氨基或羥基等取代基，也可與苯環稠合。
本發明通式I所示化合物具有巰基、羥基、氨基或雜環氮原子時，這些基團可用常用的保護基進行保護。
作為巰基的保護基，可列舉酰基，取代的硫基等作為巰基保護基慣用的基團。具體可列舉低級烷酰基，苯基羰基，噻吩甲酰基，煙酰基，低級烷氧羰基，取代的低級烷氧羰基，取代的氨基甲酰基等酰基；低級烷硫基，苯基硫基等取代的硫基。另外，上述苯基羰基和苯基硫基的苯環可被鹵原子，低級烷基，低級烷氧基或硝基取代。
這其中優選乙酰基，丙酰基，丁酰基，新戊酰基，苯甲酰基，噻吩甲酰基，叔丁氧羰基，芐氧羰基等酰基；乙基硫基，叔丁基硫基，苯基硫基等取代的硫基，更優選低級烷基羰基(特別是碳原子數2～5的)。
作為羥基保護基，可列舉酰基，取代的低級烷基，取代的甲硅烷基等作為羥基保護基慣用的基團。具體可列舉甲酰基，低級烷酰基，鹵代低級烷酰基，苯基羰基，低級烷氧羰基，苯基低級烷氧羰基等酰基；烯丙基，低級烷氧低級烷基，取代的低級烷氧低級烷基，苯基低級烷基，四氫吡喃基，四氫呋喃基等取代的低級烷基；低級烷基甲硅烷基，苯基甲硅烷基等取代的甲硅烷基。另外，上述苯基羰基，苯基低級烷氧羰基，苯基低級烷基和苯基甲硅烷基中的苯環可被鹵原子，低級烷基，低級烷氧基或硝基取代。
這其中，作為保護基優選甲酰基，乙酰基，新戊酰基，單氯乙酰基，三氯乙酰基，三氟乙酰基，苯甲酰基，甲氧羰基，乙氧羰基，異丁氧羰基，叔丁氧羰基，芐氧羰基等酰基；烯丙基，甲氧甲基，1-乙氧乙基，2-甲氧乙氧甲基，芐氧甲基，芐基，4-甲氧芐基，三苯甲基，2-四氫吡喃基，2-四氫呋喃基等取代的烷基；三甲基甲硅烷基，三乙基甲硅烷基，三異丙基甲硅烷基，叔丁基二甲基甲硅烷基，叔丁基二苯基甲硅烷基等取代的甲硅烷基，更優選三低級烷基甲硅烷基。
作為氨基和雜環氮原子的保護基，可列舉酰基，取代的低級烷基，取代的磺酰基等作為氨基和雜環氮原子的保護基慣用的基團。具體可列舉甲酰基，低級烷酰基，鹵代低級烷酰基，苯基羰基，低級烷氧羰基，取代的低級烷氧羰基，苯氧羰基等酰基；烯丙基，苯基低級烷基，苯甲酰低級烷基等取代的低級烷基；低級烷基磺酰基，苯基磺酰基等取代的磺酰基。另外，上述苯基羰基，苯氧羰基，苯基低級烷基，苯甲酰低級烷基和苯基磺酰基中的苯環可被鹵原子，低級烷基，低級烷氧基或硝基取代。
這其中，作為保護基優選甲酰基，乙酰基，三氯乙酰基，三氟乙酰基，苯甲酰基，甲氧羰基，異丁氧羰基，叔丁氧羰基，烯丙氧羰基，2，2，2-三氯乙氧羰基，芐氧羰基，二苯基甲氧羰基，苯氧羰基等酰基；烯丙基，芐基，三苯甲基，(4-甲氧苯基)二苯基甲基等取代的烷基；苯磺酰基，2，4，6-三甲基苯磺酰基，甲苯磺酰基等取代的磺酰基，更優選低級烷氧羰基。
在本發明的通式I中，作為R1，優選氫原子，低級烷基或式II所示基團，且R1是氫原子時，優選用巰基保護基保護的基團。另外，作為R1，優選氫原子或低級烷基，且R1是氫原子時，優選必須用巰基保護基保護的基團。且R1是低級烷基時，優選未取代的基團。
作為R2，優選氫原子或芳基，特別優選氫原子。R2是芳基時，A1中與S原子連接的碳原子被定義為第1碳原子，優選芳基與第2或第3碳原子連接，更優選與第2碳原子連接。
R3和R4可相同或不同，優選氫原子，低級烷基，環烷基烷基，金剛烷基烷基或芳烷基。進一步優選R3是環烷基烷基，金剛烷基烷基或芳烷基，特別優選環烷基烷基和金剛烷基烷基。R4優選氫原子，低級烷基或芳烷基，特別優選氫原子。
優選上述R3和R4表示不同基團，優選其中一方表示氫原子，優選R4表示氫原子。且，作為R3和R4中的低級烷基，優選碳原子數4～8的直鏈或支鏈烷基。
優選R5表示氫原子，低級烷基，羥基或芳基，更優選表示氫原子，低級烷基或芳基。R5表示羥基時，可用羥基保護基保護。R5是氫原子以外的取代基時，將與構成脲的N原子連接的A2的碳原子定義為第1碳原子，優選R5與第1、2或3碳原子連接，更優選與第1或2碳原子連接。
R6和R7可相同或不同，優選表示氫原子，低級烷基或芳基，更優選低級烷基。
A1和A2可相同或不同，優選表示碳原子數2～4的低級亞烷基，特別優選A1表示碳原子數2或3的低級亞烷基。
另外，通式I中，作為R5與R6(或R7)形成的5～7員環，可列舉上述環，但特別優選吡咯烷環和哌啶環。R6和R7一起形成的5～7員環中，優選的環如上所述。
本發明的通式I中，優選下列物質。(i)通式I中，R1表示氫原子或低級烷基，R2表示氫原子或芳基，R3和R4可相同或不同，分別表示氫原子，低級烷基，環烷基烷基，金剛烷基烷基或芳烷基，R5表示氫原子，低級烷基，羥基，或芳基，R6和R7可相同或不同，分別表示氫原子，低級烷基或芳基，A1和A2可相同或不同，表示碳原子數2或3的亞烷基。(ii)通式I中，或上述(i)中，R6和R7表示氫原子或低級烷基，A1是碳原子數2的亞烷基，A2表示碳原子數2或3的亞烷基。(iii)上述(i)或(ii)中，R3是環烷基烷基，金剛烷基烷基或芳烷基，R4表示氫原子。(iv)上述(i)～(iii)中，R5表示氫原子，低級烷基或芳基，R6和R7一起形成5～7員環。(v)上述(iv)中，R6和R7一起形成的5～7員環，可再含有氮原子、氧原子或硫原子，或可含有雙鍵。(vi)上述(i)～(iii)中，R5與R6或R7之一一起形成5～7員環，R6或R7中未形成環的基團為低級烷基。(vii)上述(i)～(vi)中，R1是氫原子時，用低級烷基羰基保護者。
作為本發明化合物的具體例子，優選下列化合物及其藥學上可接受的鹽1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[2-(1-吡咯烷基)乙基]脲，1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[3-(1-吡咯烷基)丙基]脲，1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[3-(1-哌啶基)丙基]脲，1-[2-(乙酰基硫)乙基]-3-[(1S)-1-芐基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基]-1-苯乙基脲，1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[2-(1-高哌啶基)乙基]脲，1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[2-(1，2，5，6-四氫吡啶-1-基)乙基]脲，1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[[(2RS)-1-乙基-2-吡咯烷基]甲基]脲，1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[2-(1-哌啶基)乙基]脲，1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[2-[4-(二甲基氨基)-1-哌啶基]乙基]脲，1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[(1-甲基-4-哌啶基)甲基]脲，1-(2-環己基乙基)-1-[2-(甲基硫)乙基]-3-[2-(1-哌啶基)乙基]脲。
本發明中的鹽，只要是作為藥物可允許的鹽都可以，對此沒有特別的限制，可列舉與鹽酸、硝酸、硫酸等無機酸成的鹽，與乙酸，富馬酸，馬來酸，酒石酸，檸檬酸等有機酸成的鹽，或與鈉、鉀、鈣等堿金屬或堿土金屬成的鹽。另外，本發明化合物中存在幾何異構體或光學異構體時，這些異構體也包括在本發明范圍內。另外，本發明化合物也可以水合物的形式存在。
本發明通式I所示化合物，例如可用下述代表性方法或這些方法的類似方法合成。 上述方法中，包括下述2個合成方法。合成方法A式[IV]化合物→式[III]化合物→通式I所示化合物合成方法B式[IV]化合物→通式I所示化合物下面對這些方法進行具體說明。合成方法A
將式[IV]化合物與氨基醇衍生物[VI]在縮合劑(例如1，1’-羰基二咪唑[VII])存在下反應，得到式[III]化合物，然后，將所得式[III]化合物與硫醇衍生物[VIII]用Mitsunobu反應縮合，得到本發明的通式I所示化合物。
合成方法B 將式[IV]化合物與式[IX]化合物在縮合劑(例如1，1’-羰基二咪唑[VII])存在下反應，直接得到本發明的通式I所示化合物。這里，式[IV]化合物和式[IX]化合物可通過特愿平10-79154號說明書中記載的方法容易地合成。
上述式[III]化合物是新化合物，是本發明通式I所示化合物的有用的制備中間體。式中，R2，R3，R4，R5，R6，R7，A1和A2具有與通式I中相同的定義，且優選的基團也與通式I中一樣。
在上述合成方法中，反應物的分子內具有巰基、羥基，氨基或雜環氮原子時，可根據需要將這些基團用適當的保護基保護，且它們的保護基可在反應后用常規方法除去。另外，反應物分子內有羧基時，可根據需要將羧基酯化，然后通過水解可將酯轉變為羧酸。
本發明化合物中，R2與和A1相鄰接的硫原子連接形成硫內酯環時，除了上述路徑以外，還可使用下述方法合成。即，在式[I]中，R2代表羧基，R1代表氫原子時，通過縮合這些基團也可合成硫內酯環。
按照上述方法得到的化合物可用常規方法轉化為前述的鹽。
本發明化合物的TNF-α產生抑制作用可用后述的藥理試驗明示，在試驗中對于脂多糖(LPS)刺激引起的TNF-α釋放的抑制效果進行了體外和體內研究，結果表明本發明化合物顯示優秀的TNF-α產生抑制作用。
由于已知TNF-α的產生與類風濕性關節炎，克羅恩氏病，系統性紅斑狼瘡等自身免疫疾病，惡液質，急性感染性疾病，變態反應，發熱，貧血，糖尿病等的發病密切相關，因此可期待象本發明化合物那樣的可抑制其產生的化合物，在這些疾病的治療中是有用的。
本發明化合物可經口服給藥，或非口服給藥。作為給藥劑型，可列舉片劑，膠囊劑，顆粒劑，粉末劑，注射劑等，可使用常規技術進行制劑化。例如，在制備片劑，膠囊劑，顆粒劑，粉末劑等口服給藥劑型時，可根據需要加入乳糖，結晶纖維素，淀粉，植物油等填料，硬脂酸鎂，滑石等潤滑劑，羥丙基纖維素，聚乙烯基吡咯烷酮等粘合劑，羧甲基纖維素鈣，低取代的羥丙基甲基纖維素等崩解劑，羥丙基甲基纖維素，聚乙烯醇，硅樹脂等包衣劑，明膠薄膜等薄膜形成劑等。
本發明化合物的給藥量可根據癥狀、年齡、劑型等進行適當選擇，如果口服給藥，通常為每天0.1～5000mg，優選1～1000mg一次或分數次給藥。
下面，揭示本發明化合物的制備例，制劑例和藥理試驗的結果，這些例子用于更好地理解本發明，并不用于限定本發明的范圍。參考例1(1S)-1-芐基-2-(4-甲基-哌嗪-1-基)乙胺(參考化合物1-1) 在氮氣氛下，冰冷卻的同時將氫化鋁鋰(531mg)懸浮于無水乙醚(14ml)中，滴加入1-[(2S)-2-氨基-3-苯基丙酰基]-4-甲基哌嗪(1.48g)的無水四氫呋喃(7ml)溶液。在室溫攪拌4小時。在冰冷卻下，向反應液中慢慢滴加入乙酸乙酯直到不再發泡為止。然后，加入2N氫氧化鈉水溶液，用氯仿萃取。有機層用無水硫酸鈉干燥后減壓濃縮，得到標題化合物(參考化合物1-1，1.25g)。D20+9.1°(c＝1.0，氯仿)IR(Film，cm-1)3288，2936，2795，1601，1495，1455，1374，1283，1166，1013參考例23-(1-吡咯烷基)丙胺(參考化合物2-1) 將N-[3-(1-吡咯烷基)丙基]鄰苯二甲酰亞胺(729mg)和肼一水合物(284mg)溶解于甲醇(9ml)中，加熱回流2小時。冷卻后，將反應液減壓濃縮，向殘留物中加入4N氫氧化鈉水溶液，用氯仿萃取。有機層用無水硫酸鈉干燥后，減壓濃縮，得到標題化合物(參考化合物2-1，216mg)。
IR(Film，cm-1)3283，2932，2874，2786，1584，1460，1386，1350，1293，1203，1145，877使用與參考例2同樣的方法得到下列化合物。
·3-(1-哌啶基)丙胺(參考化合物2-2)IR(Film，cm-1)3286，2933，2853，1592，1469，1442，1124·[(3RS)-1-甲基-3-哌啶基]甲胺(參考化合物2-3)IR(Film，cm-1)3286，2931，2848，2775，1655，1598，1465，1446，1094·(2RS)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙胺(參考化合物2-4)mp35.0～40.0℃IR(KBr，cm-1)3363，3290，2934，2855，2800，1594，1459，1359，1284，1247，1166，1115，1012，965，877，834，776參考例32-(1-高哌啶基)乙胺2鹽酸鹽(參考化合物3-1)
在氮氣氛圍下，向N-(叔丁氧羰基)-2-(1-高哌啶基)乙胺(2.31g)的乙醚(5ml)溶液中加入4N氯化氫乙酸乙酯溶液(24ml)。在室溫攪拌15分鐘后，過濾收集析出的物質，得到標題化合物為結晶(參考化合物3-1，1.59g)。
mp162～173℃IR(KBr，cm-1)3510，3384，2938，2624，2045，1604，1572，1463使用與參考例3同樣的方法得到下列化合物。
·2-(4-甲基-1-哌啶基)乙胺2鹽酸鹽(參考化合物3-2)mp155～161℃IR(KBr，cm-1)3477，3395，2956，2630，1600，1566，1502，1455，1054，962·2-[4-(二甲基氨基)-1-哌啶基]乙胺3鹽酸鹽(參考化合物3-3)mp250℃以上IR(KBr，cm-1)3566，2991，2546，1578，1515，1468·2-(3-吡咯啉-1-基)乙胺2鹽酸鹽(參考化合物3-4)IR(Film，cm-1)3400，2958，1607，1454，1040，694
·2-(1，2，5，6-四氫吡啶-1-基)乙胺2鹽酸鹽(參考化合物3-5)mp82～98℃IR(KBr，cm-1)3450，2981，2587，1596，1477，1035，939·2-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)乙胺2鹽酸鹽(參考化合物3-6)IR(Film，cm-1)3396，2960，1608，1455，1161，1026，754參考例4[1-(芐氧羰基)-4-哌啶基]甲胺鹽酸鹽(參考化合物4-1) 在氮氣氛下，用干冰-甲醇冷卻的同時，向4-氨基甲基哌啶(7.19g)的無水二氯甲烷(80ml)溶液中，滴加入芐氧羰基氯(3.0ml)的無水二氯甲烷(25ml)溶液。滴加完成后20分鐘，在干冰-甲醇冷卻的同時進行攪拌，然后，再在室溫攪拌2小時。將反應液減壓濃縮，向殘留物中加入乙醚和檸檬酸水溶液。水層用乙醚洗滌2次。向水層加入氯仿后，在室溫攪拌的同時加入碳酸鈉使之呈堿性。將有機層用飽和食鹽水洗凈，用無水硫酸鎂干燥后，減壓濃縮。將所得油狀物溶解于乙醚，在冰冷卻下加入4N氯化氫乙酸乙酯溶液(10ml)。過濾收集析出物，得到標題化合物(參考化合物4-1，1.86g)，為結晶。
mp130.0～135.0℃IR(KBr，cm-1)2926，1699，1604，1468，1436，1366，1282，1245，1170參考例52-[4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-1-哌啶基]乙胺(參考化合物5-1) 在氮氣氛下，向N-(芐氧羰基)-2-[4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-1-哌啶基]乙胺(1.47g)的四氫呋喃(37ml)溶液中，加入20％氫氧化鈀炭(100mg)。在氫氣氛圍下攪拌2天。用硅藻土過濾，除去氫氧化鈀炭，減壓濃縮濾液。將所得油狀物用硅膠柱層析純化，得到標題化合物(參考化合物5-1，0.28g)。
IR(Film，cm-1)3788，3357，2950，2857，1582，1551，1531，1470，1254，1098，874，835使用與參考例5同樣的方法，得到下列化合物。
·2-[(2S)-2-(叔丁氧基二甲基甲硅烷氧基甲基)-吡咯烷基]乙胺(參考化合物5-2)[α]D20-33.7°(c＝1.0，甲醇)IR(Film，cm-1)2952，1471，1254，1099，839
(化合物1-1)IR(Film，cm-1)3342，2923，2850，1626，1536，1127，1064
使用與實施例1同樣的方法得到下列化合物。
·1-(2-環己基乙基)-1-(2-羥基乙基)-3-[2-(1-吡咯烷基)乙基]脲(化合物1-2)IR(Film，cm-1)3351，2922，2851，1747，1633，1538，1447，1408，1372，1268，1147，1055，754·1-(2-環己基乙基)-1-(2-羥基乙基)-3-[3-(1-吡咯烷基)丙基]脲(化合物1-3)IR(Film，cm-1)3330，2922，2850，2799，1626，1537，1448，1406，1372，1270，1143，1056，872，764·1-(2-環己基乙基)-1-(2-羥基乙基)-3-[3-(1-哌啶基)丙基]脲(化合物1-4)IR(Film，cm-1)3324，2924，2851，1624，1538，1447，1124，1062·1-(2-環己基乙基)-1-(2-羥基乙基)-3-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基]脲(化合物1-5)IR(Film，cm-1)3353，2922，2849，1629，1536，1448，1285，1165，1053，1012，753·1-[(1S)-1-芐基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基]-3-(2-羥基乙基)-3-苯乙基脲(化合物1-6)D20+9.8°(c＝0.94，氯仿)IR(Film，cm-1)3305，2938，2805，1630，1496，1454，1405，1373，1285，1167，1011·1-(2-環己基乙基)-1-(2-羥基乙基)-3-[2-(4-嗎啉基)乙基]脲(化合物1-7)mp98.5～100.7℃IR(KBr，cm-1)3356，3119，2920，2846，1640，1538，1494，1298，1119，1054，1007，864，764·1-(2-環己基乙基)-1-(2-羥基乙基)-3-[3-(4-嗎啉基)丙基]脲(化合物1-8)IR(Film，cm-1)3325，2922，2851，1626，1537，1118，1066·1-(2-環己基乙基)-1-(2-羥基乙基)-3-[2-(1-高哌啶基)乙基]脲(化合物1-9)IR(Film，cm-1)3338，2922，2851，1626，1537，1448，1268，1167，1132，1054·1-(2-環己基乙基)-1-(2-羥基乙基)-3-[2-(4-甲基-1-哌啶基)乙基]脲(化合物1-10)IR(Film，cm-1)3339，2922，2850，1626，1536，1448，1261，1064，753
·1-(2-環己基乙基)-1-(2-羥基乙基)-3-[2-[4-(二甲基氨基)1-哌啶基]乙基]脲(化合物1-11)IR(Film，cm-1)3118，2923，2851，1626，1538，1448，1256，1063·1-(2-環己基乙基)-1-(2-羥基乙基)-3-[2-(3-吡咯啉-1-基)乙基]脲(化合物1-12)IR(Film，cm-1)3340，2922，2850，1628，1540，1448，1270，1055·1-(2-環己基乙基)-1-(2-羥基乙基)-3-[2-(1，2，5，6-四氫吡啶-1-基)乙基]脲(化合物1-13)IR(Film，cm-1)3350，2922，2850，1629，1536，1268，1054，754·1-(2-環己基乙基)-1-(2-羥基乙基)-3-[2-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)乙基]脲(化合物1-14)IR(Film，cm-1)3354，2922，2850，1633，1520，751·1-(2-環己基乙基)-1-(2-羥基乙基)-3-[2-[(2RS)-1-甲基-2-吡咯烷基]乙基]脲(化合物1-15)
IR(Film，cm-1)3329，2922，2850，2786，1626，1536，1448，1407，1375，1227，1124，1055·1-(2-環己基乙基)-1-(2-羥基乙基)-3-[[(3RS)-1-甲基-3-哌啶基]甲基]脲(化合物1-16)IR(Film，cm-1)3326，2922，2850，2782，1626，1538，1448，1268，753·1-(2-環己基乙基)-1-(2-羥基乙基)-3-[(2RS)-1-乙基-2-吡咯烷基]甲基]脲(化合物1-17)IR(Film，cm-1)3338，2923，2851，1633，1538，1448，1406，1374，1246，1056，754·1-[[1-(芐氧羰基)-4-哌啶基]甲基]-3-(2-環己基乙基)-3-(2-羥基乙基)脲(化合物1-18)mp94.5～95.5℃IR(KBr，cm-1)3247，2923，2850，1700，1618，1557，1477，1452，1435，1365，1318，1282，1254，1244，1220，1149·1-[(2RS)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-3-(4-甲基-1-哌嗪基)丙基]-3-(2-環己基乙基)-3-(2-羥基乙基)脲(化合物1-19)IR(Film，cm-1)3340，2926，2852，2803，1633，1530，1460，1405，1360，1283，1251，1167，1097，1012，836，810，777，754
·1-[2-[4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-1-哌啶基]乙基-3-(2-環己基乙基)-3-(2-羥基乙基)脲(化合物1-20)IR(Film，cm-1)3339，2926，2853，1630，1536，1471，1449，1407，1375，1360，1252，1098，1056·1-[2-[(2S)-2-[(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)甲基]-1-吡咯烷基]乙基]-3-(2-環己基乙基)-3-(2-羥基乙基)脲(化合物1-21)IR(Film，cm-1)3340，2925，2853，1631，1530，1471，1448，1255，1088·1-[2-(1-金剛烷基)乙基]-1-(2-羥基乙基)-3-[2-(1-哌啶基)乙基]脲(化合物1-22)
在氮氣氛圍下，冰冷卻的同時將氫化鋁鋰(117mg)懸浮于無水乙醚中(10ml)中，滴加入3-(2-環己基乙基)-3-(2-羥基乙基)-1-[[1-(芐氧羰基)-4-哌啶基]甲基]脲(化合物1-18，454mg)的無水四氫呋喃(5ml)溶液。在室溫攪拌45分鐘。在冰冷卻下，保持不發泡的條件向反應液中慢慢滴加入乙酸乙酯和1N鹽酸，再加入1N鹽酸。然后，加入乙醚洗凈。向水層中加入2N氫氧化鈉水溶液使之呈堿性，用氯仿萃取。有機層用無水硫酸鈉干燥后減壓濃縮得到標題化合物(化合物2-1，361mg)。
IR(Film，cm-1)3328，2922，2850，2784，1629，1540，1448，1406，1374，1276，1154
IR(Film，cm-1)3392，2923，2850，1692，1633，1532，1250，1222使用與實施例3同樣的方法得到下列化合物。
·1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[2-(1-吡咯烷基)乙基]脲(化合物3-2)IR(Film，cm-1)3350，2923，2851，2794，1693，1634，1537，1447，1404，1354，1294，1138，951，753·1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[3-(1-吡咯烷基)丙基]脲(化合物3-3)IR(Film，cm-1)3324，2922，2598，2484，1691，1633，1531，1448，1295，1135，951，753·1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[3-(1-哌啶基)丙基]脲(化合物3-4)IR(Film，cm-1)3350，2923，2851，1693，1632，1537，1446，1133
·1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基]脲(化合物3-5)IR(Film，cm-1)3396，2923，2848，2795，1691，1636，1535，1450，1293，1165，1014，950，760·1-[2-(乙酰基硫)乙基]-3-[(1S)-1-芐基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基]-1-苯乙基脲(化合物3-6)[α]D20-12.2°(c＝1.0，甲醇)IR(Film，cm-1)3391，2936，2796，1681，1643，1530，1496，1455，1286，1140，1013，750，701·1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[2-(4-嗎啉基)乙基]脲(化合物3-7)IR(Film，cm-1)3400，2921，250，1691，1639，1531，1447，1356，1296，1140，1118，949，865·1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[3-(4-嗎啉基)丙基]脲(化合物3-8)IR(Film，cm-1)3360，2922，2851，1693，1632，1532，1293，1118·1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[2-(1-高哌啶基)乙基]脲(化合物3-9)IR(Film，cm-1)3367，2922，2850，1693，1634，1532，1448，1402，1355，1294，1219，1135·1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[2-(4-甲基-1-哌啶基)乙基]脲(化合物3-10)IR(Film，cm-1)3400，2922，2850，1693，1633，1531，1448，1293，1132，951，753·1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[2-[4-(二甲基氨基)-1-哌啶基]乙基]脲(化合物3-11)·1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[2-(3-吡咯啉-1-基)乙基]脲(化合物3-12)IR(Film，cm-1)3368，2923，2851，2789，1692，1634，1535，1137，754·1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[2-(1，2，5，6-四氫吡啶-1-基)乙基]脲(化合物3-13)IR(Film，cm-1)3400，2922，2850，1691，1637，1531，1137，754·1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[2-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)乙基]脲(化合物3-14)IR(Film，cm-1)3398，2922，2850，1692，1644，1531，1136，747
·1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[2-[(2RS)-1-甲基-2-吡咯烷基]乙基]脲(化合物3-15)IR(Film，cm-1)3350，2922，2850，2780，1694，1633，1538，1448，1355，1295，1214，1136，1019·1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[[(3RS)-1-甲基-3-哌啶基]甲基]脲(化合物3-16)IR(Film，cm-1)3350，2923，2850，2777，1693，1632，1537，1448，1293，1139，950，753·1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[[(2RS)-1-乙基-2-吡咯烷基]甲基]脲(化合物3-17)IR(Film，cm-1)3368，2923，2851，1693，1640，1530，1448，1402，1355，1293，1220，1137，950，753·1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[(1-甲基-4-哌啶基)甲基]脲(化合物3-18)·1-[2-(乙酰基硫)乙基]-3-[(2RS)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-3-(4-甲基-1-哌嗪基)丙基]-1-(2-環己基乙基)脲(化合物3-19)IR(Film，cm-1)3411，2926，2852，2795，1693，1644，1520，1456，1403，1359，1294，1250，1166，1111，1014，836，777·1-[2-(乙酰基硫)乙基]-3-[2-[4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-1-哌啶基]乙基]-1-(2-環己基乙基)脲(化合物3-20)IR(Film，cm-1)3407，2926，2854，1692，1640，1531，1448，1293，1100，1056·1-[2-(乙酰基硫)乙基]-3-[2-[(2S)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)甲基]-1-吡咯烷基]乙基]-1-(2-環己基乙基)脲(化合物3-21)[α]D20-23.8°(c＝1.0，甲醇)IR(Film，cm-1)3401，2925，2854，1692，1641，1530，1448，1357，1292，1253，1103，1006·1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-[2-(1-金剛烷基)乙基]-3-[2-(1-哌啶基)乙基]脲(化合物3-22)
在氮氣氛圍下，向2-(1-哌啶基)乙胺(151ml)的無水四氫呋喃(5.9ml)溶液中加入1，1’-羰基二咪唑(228mg)，在室溫攪拌15分鐘。然后，加入2-環己基-N-[2-(甲基硫)乙基]乙胺鹽酸鹽(309mg)，加熱回流45分鐘。冰冷卻下，向反應液中加入乙酸乙酯，用飽和碳酸氫鈉水溶液，飽和食鹽水洗凈，用無水硫酸鈉干燥后減壓濃縮。所得油狀物用硅膠柱層析純化，得到標題化合物(化合物4-1)。
IR(Film，cm-1)3350，2923，1691，1630，1532，1449，1355，1292，1244，1166，1139，1104，1012，950，818，755使用與實施例5同樣的方法得到下列化合物。
·1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[2-(4-羥基-1-哌啶基)乙基]脲(化合物5-2)IR(Film，cm-1)3388，2923，2850，1693，1632，1537，1448，1406，1356，1294，1137，1074·1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[2-(2S)-2-(羥基甲基)-1-吡咯烷基]乙基]脲(化合物5-3)[α]D20-23.2°(c＝1.0，甲醇)IR(Film，cm-1)3390，2922，2850，1692，1631，1536，1448，1406，1355，1294，1246，1137，1042
在氮氣氛圍下，向1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[2-(1-哌啶基)乙基]脲(化合物3-1，618mg)的乙醚溶液中加入4N氯化氫乙酸乙酯溶液(0.4ml)。過濾收集析出物，得到標題化合物(化合物6-1，401mg)，為結晶。
mp131.5～133.5℃IR(KBr，cm-1)3391，2923，2852，2619，2585，2498，2409，1684，1633，1538，1485，1453，1414，1403，1354，1297，1247，1222，1197，1137，1112使用與實施例6同樣的方法得到下列化合物。
·1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[2-[4-(二甲基氨基)-1-哌啶基]乙基]脲2鹽酸鹽(化合物6-2)mp170℃(分解)IR(KBr，cm-1)3442，2922，2851，2653，1694，1631，1536，1449，1409，1294·1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[(1-甲基-4-哌啶基)甲基]脲鹽酸鹽(化合物6-3)mp178.5～179.3℃IR(KBr，cm-1)3331，2922，2850，2692，2576，2528，1699，1630，1539，1481，1449，1432，1409，1354，1314，1292，1255，1214，1136
·1-(2-環己基乙基)-1-[2-(甲基硫)乙基]-3-[2-(1-哌啶基)乙基]脲鹽酸鹽(化合物6-4)mp68.9～70.8℃IR(KBr，cm-1)3384，3298，2924，2851，2641，2585，2551，1657，1626，1560，1496，1448，1408，1360，1325，1298，1254，1224，1204，1185，1152，1101，1083[制劑例]下面列出本發明化合物的口服制劑和注射劑的一般制劑例。
1)片劑處方1 100mg中本發明化合物 1mg乳糖 66.4mg玉米淀粉 20mg羧甲基纖維素鈣6mg羥丙基纖維素 4mg硬脂酸鎂 0.6mg對于上述處方的片劑使用2mg包衣劑(例如，羥丙基甲基纖維素，聚乙烯醇或硅樹脂等常用包衣劑)進行包衣，得到所需的包衣片劑(以下處方的片劑也一樣)。另外，可通過適當改變本發明化合物和添加物的量，得到所需的片劑。
2)膠囊劑處方1 150mg中本發明化合物5mg乳糖145mg
通過適當改變本發明化合物和乳糖的混合比，可得到所需膠囊劑。
3)注射劑處方1 10ml中本發明化合物 10～100mg氯化鈉 90mg氫氧化鈉(或鹽酸) 適量滅菌純化水 適量通過適當改變本發明化合物和添加物的混合比，可得到所需的注射劑。[藥理試驗]按照McGeehan等的方法(Nature，370，558-561(1994))，對于脂多糖(LPS)刺激引起的TNF-α生成的抑制效果以體外和體內試驗進行研究。
1)體外試驗該試驗是測定LPS刺激引起的從人單核細胞系THP-1產生的TNF-α的量。培養基使用含有胎牛血清(10％)，L-谷酰胺(2mM)，2-巰基乙醇(50μM)，青霉素(50單位/ml)和鏈霉素(50μg/ml)的RPMI1640培養基。
將在上述培養基中培養的人單細胞系THP-1細胞在100×g離心5分鐘除去上清液后，再懸浮于培養基中使用。LPS使用來自S.Typhimurium的物質，將其溶解于純化水中，用培養基稀釋使用。將被測化合物溶解于二甲基亞砜(DMSO)后，用培養基稀釋使用。
將如上所述配制的細胞(106個/ml)，LPS(2μg/ml)和被測化合物(10-5M)混合，在37℃保溫培養2小時后，在1000×g離心5分鐘分離。使用人TNF-α特異性ELISA試劑盒測定培養上清液中的TNF-α水平。另外，沒有LPS時(對照組)，確認在培養上清液中沒有TNF-α的產生。
被測化合物的TNF-α產生抑制率，用下式求出。
抑制率(％)＝100×(A-B)/A
A沒有被測化合物時，培養上清液中的TNF-α水平B被測化合物存在時，培養上清液中的TNF-α水平(結果)作為試驗結果的例子，在10-5M濃度時TNF-α的抑制率(％)顯示于表1。
如表1所示，可確認本發明化合物在低濃度對TNF-α的產生有抑制作用。
2)體內試驗試驗動物使用體重約20g，7周齡左右的雌性小鼠(一組5只)。LPS使用來自沙門氏菌屬的物質，在磷酸緩沖的生理鹽水中溶解使用(20μg/ml)。被測化合物用含有2％的二甲基亞砜的生理鹽水溶解或調制成均一懸浮液(1mg/ml)。
使用上述調制的LPS溶液(10ml/kg)對小鼠腹腔內給藥。LPS給藥后，立即使用被測化合物配制液(10ml/kg，含有10mg/kg的被測化合物)皮下給藥。LPS給藥1小時后，斷頭取血，在4℃，3000rpm離心分離5分鐘。使用小鼠TNF-α特異性ELISA試劑盒測定所得血漿中的TNF-α水平。另外，確認在LPS-非給藥組(對照組)，血漿中沒有TNF-α的產生。
被測化合物的TNF-α產生抑制率，用下式求出。
抑制率(％)＝100×(A-B)/AA被測化合物非給藥組血漿中的TNF-α水平B被測化合物給藥組血漿中的TNF-α水平(結果)用10mg/kg皮下給藥，對TNF-α的產生抑制率(％)顯示于表2。
表2
從以上可知，本發明化合物具有優秀的TNF-α產生抑制作用，因此作為與TNF-α相關疾病例如類風濕性關節炎，克羅恩氏病，系統性紅斑狼瘡等自身免疫疾病，惡液質，急性感染性疾病，變態反應，發熱，貧血，糖尿病等的治療劑，具有廣泛的醫藥用途。
權利要求
1.下述通式I所示的N-取代-N’-取代脲衍生物及其藥學上可接受的鹽， 式中，R1表示氫原子，低級烷基，芳基，或式II所示的基團， R2表示氫原子，低級烷基，環烷基，芳基，羧基或酯基，或與R1一起形成環，R3和R4可相同或不同，表示氫原子，低級烷基，環烷基烷基，金剛烷基烷基，芳烷基，環烷基或芳基，R5表示氫原子，低級烷基，羥基，低級烷氧基或芳基，R6和R7可相同或不同，表示氫原子，低級烷基，環烷基烷基，環烷基或芳基，A1和A2可相同或不同，表示低級亞烷基，條件是R5與R6或R7之一一起形成，或R6和R7一起形成5～7員環，且R3和R4之一是環烷基烷基，金剛烷基烷基或芳烷基。
2.權利要求1中記載的脲衍生物及其藥學上可接受的鹽，通式I中，R1表示氫原子或低級烷基，R2表示氫原子或芳基，R3和R4可相同或不同，表示氫原子，低級烷基，環烷基烷基，金剛烷基烷基或芳烷基，R5表示氫原子，低級烷基，羥基或芳基，R6和R7可相同或不同，表示氫原子，低級烷基或芳基，A1和A2可相同或不同，表示碳原子數2或3的亞烷基。
3.權利要求2中記載的脲衍生物及其藥學上可接受的鹽，通式I中，R6和R7表示氫原子或低級烷基，A1是碳原子數2的亞烷基，A2表示碳原子數2或3的亞烷基。
4.權利要求1～3任一項中記載的脲衍生物及其藥學上可接受的鹽，通式I中，R3是環烷基烷基，金剛烷基烷基，或芳基烷基，R4是氫原子。
5.權利要求1～4任一項中記載的脲衍生物及其藥學上可接受的鹽，通式I中，R5是氫原子，低級烷基或芳基，R6和R7一起形成5～7員環。
6.權利要求5中記載的脲衍生物及其藥學上可接受的鹽，R6和R7一起形成的5～7員環可進一步含有氮原子，氧原子或硫原子，或可含有雙鍵。
7.權利要求1～4任一項中記載的脲衍生物及其藥學上可接受的鹽，R5與R6或R7之一一起形成5～7員環，R6或R7中未形成環的基團為低級烷基。
8.權利要求1～7任一項中記載的脲衍生物及其藥學上可接受的鹽，R1是氫原子時，用低級烷基羰基保護。
9.選自下列化合物及其藥學上可接受的鹽1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[2-(1-吡咯烷基)乙基]脲，1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[3-(1-吡咯烷基)丙基]脲，1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[3-(1-哌啶基)丙基]脲，1-[2-(乙酰基硫)乙基]-3-[(1S)-1-芐基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基]-1-苯乙基脲，1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[2-(1-高哌啶基)乙基]脲，1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[2-(1，2，5，6-四氫吡啶-1-基)乙基]脲，1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[[(2RS)-1-乙基-2-吡咯烷基]甲基]脲，1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[2-(1-哌啶基)乙基]脲，1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[2-[4-(二甲基氨基)-1-哌啶基]乙基]脲，1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-環己基乙基)-3-[(1-甲基-4-哌啶基)甲基]脲，1-(2-環己基乙基)-1-[2-(甲基硫)乙基]-3-[2-(1-哌啶基)乙基]脲。
10.下述通式III所示N-取代-N’-取代脲衍生物及其藥學上可接受的鹽。 (式中，R2～R7，A1和A2與權利要求1中定義相同)。
11.含有權利要求1～9任一項中記載的N-取代-N’-取代脲衍生物或其藥學上可接受的鹽的藥物組合物。
12.含有權利要求1～9任一項中記載的N-取代-N’-取代脲衍生物或其藥學上可接受的鹽的TNF-α生成抑制劑。
13.含有權利要求1～9任一項中記載的N-取代-N’-取代脲衍生物或其藥學上可接受的鹽的自身免疫疾病治療劑。
全文摘要
本發明提供了右式所示的N－取代－N’－取代脲衍生物,其類似物或它們的藥學上可接受的鹽。該化合物具有TNF－α產生抑制活性。
文檔編號C07D211/70GK1352632SQ00806692
公開日2002年6月5日 申請日期2000年4月7日 優先權日1999年4月7日
發明者三田四郎, 堀內正人, 伴正和, 須原寬 申請人:參天制藥株式會社