專利名稱：抗植物真菌病害的補骨脂查爾酮類化合物的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種抗植物真菌病害的化合物，特別是涉及一種抗植物真菌病害的補骨脂查爾酮類化合物。
背景技術：
補骨脂查爾酮(bavachalcone)、異補骨脂查爾酮(isobavachalcone)以及化學合成的類似物，對蘋果腐爛病菌、蘋果輪紋病菌、水稻稻瘟病菌、水稻紋枯病菌、黃瓜枯萎病菌、小麥赤霉病菌、黃瓜炭疽病菌、辣椒疫霉病菌等多種常見植物病害具有很好的抑菌活性。上述植物病害對我國的農業生產危害嚴重，據專家報道我國每年因蘋果輪紋病危害造成直接經濟損失就達30億到50億元人民幣；水稻稻瘟病，是全世界稻區危害最嚴重的水稻病害之一，一般造成水稻減產10％～20％，以我國為例，20世紀90年代以來，該病的年發生面積均在380萬hm2以上，年損失稻谷達數億千克。
目前，化學農藥的使用仍是防治上述植物病害行之有效的措施，但因一些常規品種的長期使用使病原菌產生抗藥性，致使田間用藥量逐年加大，對人類健康和生態環境造成極大危害。因此，高效、低毒、低殘留、與環境友善同時具有自主知識產權新農藥品種的創制迫在眉睫。
發明內容
本發明的目的在于提供一種天然有效成分-補骨脂查爾酮(bavachalcone)、異補骨脂查爾酮(isobavachalcone)，可以將其作為先導化合物為新藥的創制提供理論依據。同時，以補骨脂查爾酮(bavachalcone)、異補骨脂查爾酮(isobavachalcone)作為先導化合物創制新藥可以把植物農藥和化學農藥的優點集于一身，是國內外農藥創制的熱點之一。
本發明的目的是通過以下技術方案實現的 抗植物真菌病害的補骨脂查爾酮類化合物，本發明化合物是干燥補骨脂種子5Kg，用70％工業乙醇冷浸提取四次，浸出液減壓濃縮得乙醇提取物，加適量水混溶，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取。取乙酸乙酯萃取部位浸膏100g，經反復硅膠柱層析，用氯仿一乙酸乙酯梯度洗脫，分離得到補骨脂查爾酮(bavachalcone)(21mg)和異補骨脂查爾酮(isobavachalcone)(17mg)。
所述的抗植物真菌病害的補骨脂查爾酮類化合物，其補骨脂查爾酮(bavachalcone)，黃色粉末；分子式C21H20O4；ESIMSm/z339.2[M+H]+；HNMR(CDCl3)d1.77(3H，S，H-5″)，1.78(3H，S，H-4″)，3.48(2H，d，J＝7.4Hz，H-1″)，5.29(1H，br t，J＝8.4Hz，H-2″)，6.42(1H，s，H-3)，6.88(2H，d，J＝8.7Hz，H-3′，5′)，7.47(1H，d，J＝15.6Hz)，7.55(2H，d，J＝3Hz，H-2′，6′)，7.59(1H，S，H-6)，7.85(1H，d，J＝15.3Hz)，6.08(OH，br s)，13.88(OH，s)。13CNMR(CDCl3)d17.6(C-4″)，21.5(C-5″)，25.5(C-1″)，53.8(4-OMe)，107.1(C-3)，113.4(C-1)，115.8(C-3′，5′)，115.4(C-b)，117.4(C-5)，121.9(C-2″)，126.5(C-1′)，128.8(C-6)，130.3(C-2′，6′)，132.1(C-3″)，143.9(C-c)，159.5(C-4′)，161.8(C-2)，163.6(C-4)，192.1(C-a)。
補骨脂查爾酮(bavachalcone)結構式
所述的抗植物真菌病害的補骨脂查爾酮類化合物，其異補骨脂查爾酮(isobavachalcone)，黃色針晶，mp160～161℃；TLC檢查為黃色斑點。1HNMR1.77(3H，s，CH3)，1.81(3H，s，CH3)，3.22(2H，d，J＝6.1Hz)，5.28(1H，br t，J＝6.9Hz)，6.88(2H，d，J＝8.9Hz)，7.55(2H，d，J＝9.1Hz)，7.85(1H，d.J＝15.3Hz)；7.55(1H，d，J＝15.6Hz)，6.44(1H，d，J＝8.7Hz)，7.75(1H，d，J＝8.4Hz)，13.89(1H，s)； 異補骨脂查爾酮(isobavachalcone)結構式
本發明的優點與效果是 補骨脂查爾酮、異補骨脂查爾酮作為農用殺菌劑具有以下優勢 1.補骨脂查爾酮(bavachalcone)、異補骨脂查爾酮(isobavachalcone)是天然有效成分，本身作為農用殺菌劑具有高效、低毒、低殘留、不易產生抗藥性等特點。
2.藥效高。補骨脂查爾酮、異補骨脂查爾酮、福美胂、銀泰、甲基托布津、多菌靈6種原藥對蘋果腐爛病菌菌絲生長的抑制作用EC50分別為0.87、0.36、8.93、26.18、9.16、1.47mg/L，EC90分別為6.72、4.25、128.98、93.37、147.85、26.86mg/L。可見，補骨脂查爾酮、異補骨脂查爾酮的抑菌活性高于防治蘋果腐爛病菌的其它藥劑。
3.殺菌譜廣。補骨脂查爾酮、異補骨脂查爾酮對蘋果腐爛病菌、蘋果輪紋病菌、水稻稻瘟病菌、水稻紋枯病菌、黃瓜枯萎病菌、小麥赤霉病菌、黃瓜炭疽病菌、辣椒疫霉病菌等多種常見植物病害均具有很好的抑制活性。
具體實施例方式 本發明涉及的化合物包括補骨脂查爾酮(bavachalcone)、異補骨脂查爾酮(isobavachalcone)以及化學合成的類似物，對蘋果腐爛病菌(Valsa mali)，蘋果輪紋病菌(Physalospora piricola)，水稻稻瘟病菌(Pyricularia oryzae)，水稻紋枯病菌(Rhizoctonia solani Kuhn)，黃瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum)，小麥赤霉病菌(Gibberellazeae)，黃瓜炭疽病菌(Colletotrichum orbiculare)辣椒疫霉病菌(Phytophthora capsici)等多種植物病原菌具有很好的抑制活性。
本發明化合物是干燥補骨脂種子5Kg，用70％工業乙醇冷浸提取四次，浸出液減壓濃縮得乙醇提取物，加適量水混溶，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取。取乙酸乙酯萃取部位浸膏100g，經反復硅膠柱層析，用氯仿一乙酸乙酯梯度洗脫，分離得到補骨脂查爾酮(bavachalcone)(21mg)和異補骨脂查爾酮(isobavachalcone)(17mg)。
實例1用丙酮或二甲基亞砜將補骨脂查爾酮溶解配成10g/L的粗提物母液。加入適量粗提物母液于50℃的PDA培養基中，充分混勻，配成粗提物終濃度分別為0.12mg/L、0.6mg/L、3mg/L、15mg/L、75mg/L的含藥培養基，以等體積的丙酮或二甲基亞砜加入到PDA培養基中作對照，然后倒入直徑90mm培養皿內制成平板，備用。用直徑6mm的打孔器從事先在PDA平板上28℃下培養7～12d的各供試病菌菌落邊緣處切取菌餅，并移植于上述含不同濃度的粗提物平板和對照平板中央，每次處理重復3次，置28℃下培養7～12d，測量菌落直徑。每菌落取相交垂直線方向測其直徑，以其均值減去菌餅直徑即得菌落凈生長直徑(CK)，相對抑制率(％)＝(對照凈生長量一處理凈生長量)/對照凈生長量×100。根據病菌抑制率等有關指標，采用相應的數據分析軟件，計算出EC50值及EC90值限。
補骨脂查爾酮(bavachalcone)對幾種常見植物病原菌菌絲生長的抑制作用。
實例2試驗方法同實例1，異補骨脂查爾酮對幾種常見植物病原菌菌絲生長的抑制作用如下 異補骨脂查爾酮(isobavachalcone)對幾種植物病原菌菌絲生長的抑制作用。
實例3試驗方法同實例1，補骨脂查爾酮、異補骨脂查爾酮、福美胂、銀泰、甲基托布津、多菌靈6種原藥對蘋果腐爛病菌菌絲生長的抑制作用如下 6種藥劑對蘋果腐爛病菌菌絲生長的抑制作用
權利要求
1.抗植物真菌病害的補骨脂查爾酮類化合物，其特征在于該化合物是干燥補骨脂種子5Kg，用70％工業乙醇冷浸提取四次，浸出液減壓濃縮得乙醇提取物，加適量水混溶，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取；取乙酸乙酯萃取部位浸膏100g，經反復硅膠柱層析，用氯仿一乙酸乙酯梯度洗脫，分離得到補骨脂查爾酮(bavachalcone)21mg和異補骨脂查爾酮(isobavachalcone)17mg。
2.根據權利要求1所述的抗植物真菌病害的補骨脂查爾酮類化合物，其特征在于所述補骨脂查爾酮(bavachalcone)，黃色粉末；分子式C21H20O4；ESIMSm/z 339.2[M+H]+；HNMR(CDCl3)d1.77(3H，S，H-5″)，1.78(3H，S，H-4″)，3.48(2H，d，J＝7.4Hz，H-1″)，5.29(1H，br t，J＝8.4Hz，H-2″)，6.42(1H，s，H-3)，6.88(2H，d，J＝8.7Hz，H-3′，5′)，7.47(1H，d，J＝15.6Hz)，7.55(2H，d，J＝3Hz，H-2′，6′)，7.59(1H，S，H-6)，7.85(1H，d，J＝15.3Hz)，6.08(OH，br s)，13.88(OH，s)。13CNMR(CDCl3)d17.6(C-4″)，21.5(C-5″)，25.5(C-1″)，53.8(4-OMe)，107.1(C-3)，113.4(C-1)，115.8(C-3′，5′)，115.4(C-b)，117.4(C-5)，121.9(C-2″)，126.5(C-1′)，128.8(C-6)，130.3(C-2′，6′)，132.1(C-3″)，143.9(C-c)，159.5(C-4′)，161.8(C-2)，163.6(C-4)，192.1(C-a)；
補骨脂查爾酮(bavachalcone)結構式
3.根據權利要求1所述的抗植物真菌病害的補骨脂查爾酮類化合物，其特征在于所述異補骨脂查爾酮(isobavachalcone)VIII黃色針晶，mp160～161℃；TLC檢查為黃色斑點；1HNMR1.77(3H，s，CH3)，1.81(3H，s，CH3)，3.22(2H，d，J＝6.1Hz)，5.28(1H，br t，J＝6.9Hz)，6.88(2H，d，J＝8.9Hz)，7.55(2H，d，J＝9.1Hz)，7.85(1H，d.J＝15.3Hz)；7.55(1H，d，J＝15.6Hz)，6.44(1H，d，J＝8.7Hz)，7.75(1H，d，J＝8.4Hz)，13.89(1H，s)；
異補骨脂查爾酮(isobavachalcone)結構式
全文摘要
抗植物真菌病害的補骨脂查爾酮類化合物，涉及一種化合物，特別是涉及一種抗植物真菌病害的補骨脂查爾酮類化合物。本發明化合物是干燥補骨脂種子5Kg，用70％工業乙醇冷浸提取四次，浸出液減壓濃縮得乙醇提取物，加適量水混溶，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取。取乙酸乙酯萃取部位浸膏100g，經反復硅膠柱層析，用氯仿一乙酸乙酯梯度洗脫，分離得到補骨脂查爾酮(bavachalcone)(21mg)和異補骨脂查爾酮(isobavachalcone)(17mg)。可以將其作為先導化合物為新藥的創制提供理論依據。同時，作為先導化合物創制新藥可以把植物農藥和化學農藥的優點集于一身，是國內外農藥創制的熱點之一。
文檔編號C07C49/84GK101215229SQ20081001001
公開日2008年7月9日 申請日期2008年1月2日 優先權日2008年1月2日
發明者關麗杰, 紅 邵, 蔡麗麗, 雙 邵, 李海燕 申請人:沈陽化工學院