專利名稱：膽酸類偶合物、其制備方法和用途的制作方法
技術領域：
本發明屬藥物化學領域，涉及膽酸類化合物與胱胺的偶合物(I)，其制備方法和在 制備牛磺酸膽酸類偶聯物類治療藥物中的應用。
<formula>formula see original document page 3</formula> 式中禮，R2，R3表示H、a-OH、3 _0H、= 0 ；禮，R2和R3可以相同，也可以不同。膽酸類化合物廣泛存在于人和哺乳動物的膽汁中，通過其腸肝循環可促進脂肪及 脂溶性維生素的吸收。在人體肝臟中，膽酸類化合物由膽固醇合成，當人體腸肝循環受到一 些疾病的干擾，使膽酸類化合物的代謝受到阻礙時，可引起多種肝膽系統疾病，如膽汁淤 積、脂肪肝、膽固醇型結石、膽汁反流性胃炎、膽源性胰腺炎、高脂血癥、及各型肝炎等。目 前，臨床上對于這類肝膽系統疾病的治療多是給予外源性的膽酸類化合物或其氨基酸偶合 物。在天然膽汁中，膽酸類化合物多與牛磺酸結合，形成牛磺膽汁酸，由于這類結合型 膽汁酸在動物膽汁中含量較少，其大量來源有限，并且牛磺膽汁酸類化合物親水性強，提取 分離困難，成本較高。因此，現臨床上使用的膽酸偶聯物類治療藥物大部分是通過化學合 成法得到，已有文獻J Lipid Research 1973，14，367 ；J LipidResearch 1977，18，404 ;J Lipid Research 1989, 30, 771 ；Acta Chem Scand 1963,17,173 ；Bioorganic & Medicinal Chemistry 1996,4(6),885 ；Synlett 1995，861 ;Lipidsl997，32(7)，775 ;J Am Chem Soc 1937，59，2532 ;US 5362891 ；US 5508453 ；US 5565587 ；中國醫藥工業雜志 2003，34 (12)， 594 ；中國藥學雜志 1997，32(4)，236 ;CN 1896091 ；CN 101307088 ；CN 101503454 等描述了 這類膽酸偶聯物類治療藥物的制備方法，這些方法按照膽酸類化合物與牛磺酸形成酰胺鍵 的不同策略，可分為以下幾種方法一膽酸類化合物分子中的羧基用氯甲酸酯、N-乙氧羰基-2-乙氧基-1，2_ 二氫喹啉 (EEDQ)、碳二亞胺(DCC、EDCI)、氰基磷酸二乙酯(DEPC)、2_氯-4，6-二甲氧基-1，3，5-三 嗪化0肌)、氯化4-(4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪-2-基)-4-甲基嗎啉鹽(DMTMM)、巰基化 合物等縮合劑活化，形成混合酸酐或活性酯，然后再與牛磺酸化合物反應，經后處理得牛磺 酸膽酸偶聯物類治療藥物。
背景技術：
方法二膽酸類化合物在濃硫酸催化下與醇成酯，與水合胼反應得相應的酰胼，經重氮化生成酰基疊氮化合物后再與牛磺酸類化合物反應，經常規后處理，得牛磺酸膽酸偶聯物類 治療藥物。方法三將膽酸類化合物母環上羥基用甲酰化方法保護，然后與氯化亞砜作用生成相應酰氯，再與牛磺酸類化合物反應，常規后處理，得牛磺酸膽酸偶聯物類治療藥物。方法四膽酸類化合物與氯甲酸酯作用，形成混合酸酐后，與酚類化合物(如對硝基苯酚、對羥基苯丙酮等)反應，形成相應的膽酸類化合物活性酚酯，再與牛磺酸類化合物反 應，經后處理，得牛磺酸膽酸偶聯物類治療藥物。上述合成方法存在使用原料價格較高、且不易得(如EEDQ、DEPC、對羥基苯丙酮 等)；反應條件苛刻(需絕對無水溶劑)；反應步驟多、總收率偏低；制備過程中“三廢”排放 嚴重；反應操作及后處理過程繁瑣等不足；使膽酸偶聯物類治療藥物的制備成本較高，工 業規模制備受到限制。因此，本領域仍需開發原料價廉易得、反應條件溫和、操作簡便、收率 高、“綠色環保”的膽酸偶聯物類治療藥物合成方法。
發明內容
本發明的目的在于公開一種新型的用于制備牛磺酸膽酸類偶聯物的關鍵中間體一膽酸類化合物與胱胺的偶合物(I)；本發明的另一目的在于公開該類新型化合物的制備方法；本發明的第三個目的在于公開該類關鍵中間體在制備牛磺酸膽酸類偶聯物治療藥物中的應用。本發明所提出的膽酸類化合物與胱胺的偶合物(I)的化學結構式為
<formula>formula see original document page 4</formula>式中禮，R2，R3表示H、a-OH、3 _0H、= 0 ；禮，R2和R3可以相同，也可以不同。本發明所提出的膽酸類化合物與胱胺的偶合物(I)可利用膽酸類化合物與相應 的胱胺類化合物在縮合劑存在條件下制備得到，所得膽酸類化合物與胱胺的偶合物(I)可 用于制備牛磺酸膽酸類偶聯物類治療藥物，其合成路線如下<formula>formula see original document page 5</formula>
(II)式中禮，R2，R3表示H、a-OH、3 _0H、= 0 ；禮，R2和R3可以相同，也可以不同。上述化學反應式給出的膽酸類化合物與胱胺的偶合物(I)及其用于制備牛磺酸 膽酸類偶聯物類治療藥物的合成方法，其具體步驟為A)以膽酸類化合物為起始原料，與胱胺類化合物經縮合反應，制得膽酸類化合物 與胱胺的偶合物⑴；B)由步驟A)得到的膽酸類化合物與胱胺的偶合物(I)，經氧化反應得牛磺酸膽酸 類偶聯物(II)。本合成方法的各步驟具體描述如下步驟A)膽酸類化合物與胱胺類化合物在堿性和適當溶劑條件下，經縮合劑作用 發生縮合反應，得膽酸類化合物與胱胺的偶合物(I)。其中膽酸類化合物包括膽酸(禮=H，R2 = a -OH, R3 = a -OH)、去氧膽酸(禮= H，R2 = H, R3 = a -OH)、石膽酸(隊=H, R2 = H，R3 = H)、7-酮基石膽酸(隊=H，R2 = C =0，R3 = H)、豬膽酸(隊=a -OH, R2 = H，R3 = a -OH)、豬去氧膽酸(隊=a -OH, R2 = H， R3 = H)、鵝去氧膽酸(R: = H，R2 = a -OH, R3 = H)、熊去氧膽酸(R: = H, R2 = 3 -OH, R3 = H)；胱胺類化合物包括胱胺游離堿、胱胺無機酸鹽(如鹽酸鹽、氫溴酸、硫酸鹽、硝 酸鹽、磷酸鹽等)、胱胺有機酸鹽(如甲酸、乙酸、丙酸、苯甲酸、馬來酸、富馬酸、琥珀酸、酒 石酸、檸檬酸等；烷基磺酸，如甲基磺酸、乙基磺酸、樟腦磺酸等；芳基磺酸，如苯磺酸、對甲 苯磺酸等)；縮合反應所用溶劑為水、(V6脂肪醇、C3_8脂肪酮、C5_1(1脂肪烷烴(如正己烷、正 庚烷等)、N，N- 二甲基甲酰胺、醚類(如乙醚、異丙醚、甲基叔丁基醚、四氫呋喃、乙二醇二 甲醚等)、(^_6脂肪酸與(V6脂肪醇所形成酯、鹵代烴(如二氯甲烷、氯仿、1，2_ 二氯乙烷、 鄰二氯苯等)、芳香烴或取代芳香烴、乙腈，反應可在單一溶劑中進行，也可在混合溶劑中進 行，混合溶劑體積比為1 0.1 10，優選溶劑為四氫呋喃、N，N-二甲基甲酰胺、水、二氯甲 烷、異丙醇、丙酮、乙酸乙酯、甲苯、四氫呋喃/水(1 0.1 2.0);縮合反應所用堿為堿金屬或堿土金屬氫氧化物、堿金屬或堿土金屬碳酸鹽、堿金屬或堿土金屬碳酸氫鹽、有機叔胺類或季銨堿類(如三乙胺、三丁胺、三辛胺、吡啶、N， N- 二甲基-a -苯乙胺、4-甲基嗎啉、四丁基氫氧化銨)，優選堿為碳酸氫鈉、碳酸鉀、三乙 胺、N-甲基嗎啉、吡啶；堿用量與胱胺類化合物的摩爾投料比為0 8.0 1.0，優選摩爾投 料比為0 4. 5 1. 0 ；膽酸類化合物與胱胺類化合物的摩爾投料比為1.9 4.0 1.0，優選摩爾投料比 為 2. 0 2. 5 1. 0 ；縮合反應所用縮合劑為氯甲酸Ci_8脂肪醇酯類化合物(如氯甲酸乙酯、氯甲酸 叔丁酯、氯甲酸芐酯等)、N-乙氧羰基-2-乙氧基-1，2-二氫喹啉(EEDQ)、碳二亞胺類化合 物(如DCC、EDCI)、氰基磷酸二乙酯(DEPC)、2-氯-4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪(簡稱為 CDMT)、氯化4- (4，6- 二甲氧基-1，3，5-三嗪-2-基)~4~甲基嗎啉鹽(簡稱為DMTMM)，優選 縮合劑為氯甲酸乙酯、二環己基碳二亞胺(DCC)、DMTMM;所用縮合劑與膽酸類化合物的摩爾投料比為1.0 4. 5 1.0，優選摩爾投料比為 1. 0 2. 5 1. 0 ；縮合反應溫度為0 130°C，優選反應溫度為0 50°C ；縮合反應時間為30分鐘 48小時，優選反應時間為1 20小時。步驟B)膽酸類化合物與胱胺的偶合物(I)，在適當溶劑和氧化劑存在條件下經 氧化反應，得牛磺酸膽酸類偶聯物(II)。其中，氧化反應所用溶劑為水、脂肪酸、C^e 脂肪醇、乙腈、四氫呋喃、N，N- 二甲基甲酰胺、C3_8脂肪酮，優選溶劑為水、甲酸、乙酸、甲醇、 四氫呋喃；所用氧化劑為過氧化氫水溶液(H202含量為5% 90% )、(^_6脂肪酸的過氧化 物(如過氧甲酸、過氧乙酸等)、過氧苯甲酸類化合物(如間氯過氧苯甲酸、過氧苯甲酸 等)、尿素-過氧化氫復合物、過硼酸、C3_8脂肪酮或C3_8脂環酮的過氧化物(如過氧化丙 酮、過氧化環己酮)，優選氧化劑為過氧化氫水溶液(H202含量為20% 70% )、尿素-過 氧化氫復合物、過氧甲酸、過氧乙酸、間氯過氧苯甲酸；氧化劑與膽酸胱胺類偶合物(I)的 摩爾投料比為5.0 20.0 1.0，優選摩爾投料比為8.0 13.0 1. 0 ；氧化反應溫度 為-50 50°C，優選反應溫度為-15 30°C;氧化反應時間為20分鐘 48小時，優選反應 時間為1 12小時。本發明的優點在于與現有技術相比，該方法所用原料價廉易得、反應條件溫和、 反應所需溶劑不需無水處理，操作簡便、成本低、收率高、“三廢”污染少，適合大量制備牛磺 酸膽酸類偶聯物治療藥物。
具體實施例方式通過下面的實施例可對本發明進行進一步的描述，然而，本發明的范圍并不限于 下述實施例。本領域的專業人員能夠理解，在不背離本發明的精神和范圍的前提下，可以對 本發明進行各種變化和修飾。一.膽酸類化合物與胱胺的偶合物(I)的制備實施例1熊去氧膽酸胱胺偶合物的制備在反應瓶中加入熊去氧膽酸20. 0克(50. 95mmol)、四氫呋喃100毫升和三乙胺 8. 16毫升(58. 5mmol)，冷卻至0_5 °C，滴加氯甲酸乙酯5. 6毫升(58. 5mmol)，然后5 10°C保溫攪拌反應30分鐘，加入胱胺二鹽酸鹽5. 7克(25.0mmol)和三乙胺8. 16毫升(58. 5mmol)溶于100毫升去離子水的溶液，0 5°C保溫攪拌反應1小時后，再于室溫攪 拌反應10小時。反應結束后，減壓蒸除四氫呋喃，過濾析出的白色固體，所得濾餅用甲 醇/水(1 1)混合溶劑重結晶，得熊去氧膽酸胱胺偶合物的白色結晶性粉末固體20. 74 克，mpl50 152°C，[a]^= +48.5°(c=0.5，Et〇H)，收率 92. 0 % ；1HNMR(400MHz, DMS0_d6) 8 8 8. 01 (t, J = 5. 6Hz, 2H, 2 XNH), 4. 47 (brs, 2H, 2 X 7 ^ -OH), 3. 88 (brs, 2H, 2 X 3 a -OH), 3. 42 3. 36(m，4H，2XC7-H，2XC3-H)，3. 30(t，J = 7. 2Hz，4H，2XHNCH2)，2. 75 (t，J = 7. 2Hz，4H，2XSCH2)，0. 88(d，J = 8. 4Hz，6H，2 X 21_CH3)，0. 87 (s，6H，2 X 19_CH3)，0. 61 (s， 6H，2X18-CH3) ； 13C-NMR(100MHz，DMS0-d6) 8 :173. 29,70. 19,69. 92,60. 21,56. 36,55. 19, 43. 55，43. 46，42. 65，39. 23，38. 35，38. 18，37. 85，37. 72，35. 44，35. 30，34. 21，32. 86， 32. 06，30. 69，28. 68，27. 17，23. 79，21. 34，18. 92，12. 50。實施例2熊去氧膽酸胱胺偶合物的制備在反應瓶中加入熊去氧膽酸2. 0克(5. lmmol)、四氫呋喃15毫升和胱胺0. 39克 (2. 55mmol)，室溫攪拌均勻后，置冰浴中冷卻至0_5°C，加入DCC 1. 16克(5. 6mmol),0-5°C 保溫攪拌反應1小時后，升溫至室溫再反應15小時，反應結束后，過濾析出的白色固體，濾 液減壓蒸除溶劑，殘余物用甲醇/水(1 1)混合溶劑重結晶，得熊去氧膽酸胱胺偶合物 的白色結晶性粉末固體 2. 16 克，mpl50 152°C，[a]€= +48.0°(c=0.5, EtOH)，收率 95. 8% ； 'HNMR數據和13C-NMR數據與實施例1基本一致。實施例3熊去氧膽酸胱胺偶合物的制備將胱胺二鹽酸鹽0. 57克(2. 5mmol)、無水K2C03 0. 7克(5. Ommol)和異丙醇30毫 升混合，室溫攪拌反應30分鐘，加入熊去氧膽酸2.0克(5. lmmol)和氯化4-(4，6-二甲氧 基-1，3，5-三嗪-2-基)-4-甲基嗎啉鹽1.84克(6.63mmol)，室溫攪拌反應6小時。反應 結束后，過濾，濾液減壓蒸除溶劑，殘余物用甲醇/水(1 1)混合溶劑重結晶，得熊去氧膽 酸胱胺偶合物的白色結晶性粉末固體2. 23克，mpl50 152°C，[a]2》+49.0°(c=0.5, EtOH), 收率99. 0% ；1HNMR數據和13C-NMR數據與實施例1基本一致。實施例4鵝去氧膽酸胱胺偶合物的制備操作過程同實施例3，只是將熊去氧膽酸用鵝去氧膽酸替代，無水1(20)3用 4-甲基嗎啉替代，得鵝去氧膽酸胱胺偶合物的白色結晶性粉末固體，mpl43 145°C， [a] d= +5.7°(c=0.5, EtOH)，收率 98. O^jHNMR(400MHz，DMS0-d6) 8 :8. 00 (t，J = 5. 6Hz，2H， 2 X NH)，3. 84 3. 81 (m，2H，2 X C7_H)，3. 33 3. 28 (m，6H，2 X C「H，2 X HNCH2)，2. 75 (t，J = 7. 2Hz，4H，2XSCH2)，0. 88(d，J = 8. 4Hz，6H，2 X 21_CH3)，0. 84 (s，6H，2 X 19_CH3)，0. 60 (s， 6H，2X18-CH3) ； 13C-NMR(100MHz, DMS0_d6) 8 :173. 32,70. 48,66. 37,60. 20,56. 36,55. 99, 48. 69，42. 81，40. 53，38. 34，37. 82，35. 99，35. 84，35. 35，35. 30，34. 80，32. 76，31. 96， 30. 77，29. 65，28. 18，24. 35，24. 01,20. 88，18. 73，12. 32。實施例5豬去氧膽酸胱胺偶合物的制備操作過程同實施例3，只是將熊去氧膽酸用豬去氧膽酸替代，無水1(20)3用三乙胺 替代，異丙醇用去離子水替代，得豬去氧膽酸胱胺偶合物的白色結晶性粉末固體，mpl50 152 °C, [a] d= +6.0°(c=0.5, EtOH),收率 97. 2 % ；1HNMR(400MHz, DMS0_d6) 8 8. 02(t, J = 5. 6Hz，2H，2XNH)，4. 45(d，J = 4. 0Hz，2H，2 X 6 a-OH)，4. 26 (d，J = 4. 0Hz，2H，2 X 3 a -OH)，3. 84 3. 81 (m, 2H, 2 X C6_H)，3. 30 3. 28 (m, 6H, 2 X C3_H，2 XHNCH2)，2. 75 (t, J = 7. 2Hz，4H，SCH2)，0. 88 (d, J = 6. OHz，6H，2 X 21_CH3)，0. 84 (s，6H，2 X 19_CH3)，0. 60 (s, 6H,2X 18-CH3) ； 13C-NMR(100MHz, DMS0_d6) 8 :173. 23,70. 47,66. 35,60. 22,56. 37,55. 99, 48. 71，42. 81，40. 07，38. 33，37. 82，36. 00，35. 85，35. 35，34. 80，32. 75，31. 96，31. 15， 30. 79，29. 69，28. 18，24. 36，24. 03，20. 88，18. 74，12. 33。實施例6膽酸胱胺偶合物的制備操作過程同實施例3，只是將熊去氧膽酸用膽酸替代，無水1(20)3用4-甲基嗎啉替 代，得膽酸胱胺偶合物的白色結晶性粉末固體，mpl48 150°C，[ot] 2°=+28.9°(c=0.5, EtOH)， 收率 99.0 % ；1HNMR(400MHz, DMS0_d6) 8 7. 99 (t, J = 5. 6Hz，2H，2XNH)，3. 78 (m，2H， 2XC12-H)，3. 61 (m，2H，2XC7-H)，3. 45 (brs，6H，2X 12 a -OH, 2X7 a -OH, 2X3 a -OH)， 3. 33 3. 28(m，4H，2XHNCH2)，3. 19 3. 17 (m，2H，2 X C3_H)，2. 75 (t，J = 6.8Hz，4H， 2XSCH2) ,0. 91 (d, J = 8. 4Hz，6H，2X21-CH3)，0. 81 (s，6H，2X 19-CH3)，0. 58(s，6H， 2X I8-CH3) ； 13C-NMR(100MHz, DMS0-d6) 8 :173. 36,71. 48,70. 90,66. 71,60. 23,46. 61, 46. 19，41. 98，41. 81，38. 35，37. 80，35. 77，35. 59，35. 34，34. 84，32. 95，32. 13，30. 84， 29. 00，27. 77，26. 66，23. 27，23. 07，21. 22，17. 55，12. 80。實施例77-酮基石膽酸胱胺偶合物的制備操作過程同實施例3，只是將熊去氧膽酸用7-酮基石膽酸替代，無水K2C03用 4-甲基嗎啉替代，得7-酮基石膽酸胱胺偶合物的白色結晶性粉末固體，mpl46 148°C， [a] d= -25.0°(c=0.5, EtOH)’收率 98. 0 % ；1HNMR(400MHz, DMS0_d6) 8 :8. 00 (t, J = 5. 6Hz, 2H，2XNH)，3. 33 3. 28 (m，6H，2 X C3_H，2 XHNCH2)，2. 90(dd,2H, = 6. OHz, J2 = 12. OHz, C60-H) ,2. 75 (t, J = 6. 8Hz，4H，2XSCH2)，2. 44(t，2H，J = 12. 0Hz，C6a _H)，1. 17 (s，6H， 2X19-CH3),0. 88 (d, J = 8. 4Hz，6H，2 X 21_CH3)，0. 61 (s，6H，2 X 18_CH3) ;13C_WR(100MHz， DMS0-d6) 8 :211. 83，173. 21,69. 55,54. 83,49. 28,49. 04,45. 85,45. 53,42. 65,42. 63， 39. 76，39. 08，38. 34，37. 83，35. 24，35. 22，34. 33，32. 77，32. 02，30. 27，28. 33，24. 86， 23. 25,21. 69，18. 85，12. 36。實施例8石膽酸胱胺偶合物的制備操作過程同實施例3，只是將熊去氧膽酸用石膽酸替代，無水1(20)3用4-甲基嗎啉 替代，得石膽酸胱胺偶合物的白色結晶性粉末固體，收率96.6%。實施例9去氧膽酸胱胺偶合物的制備操作過程同實施例3，只是將熊去氧膽酸用去氧膽酸替代，無水1(20)3用4-甲基嗎 啉替代，得去氧膽酸胱胺偶合物的白色結晶性粉末固體，收率98.0%。實施例10豬膽酸胱胺偶合物的制備操作過程同實施例3，只是將熊去氧膽酸用豬膽酸替代，無水1(20)3用4-甲基嗎啉 替代，得豬膽酸胱胺偶合物的白色結晶性粉末固體，收率95. 9%。二.牛磺酸膽酸類偶聯物(II)的制備實施例11牛磺熊去氧膽酸的制備將30% H202水溶液13. 2毫升(130mmol)、無水甲酸100毫升混合，室溫攪拌反應 2小時，置冰鹽浴中冷卻至-5 0°C，分批加入熊去氧膽酸胱胺偶合物9. 01克(10. Ommol)， 繼續保溫攪拌反應5小時，反應結束后，加入飽和NaHS03水溶液破壞過量的過氧化物，過
8濾除去少量不溶物，所得濾液減壓蒸除溶劑，用10 %鹽酸水溶液調pH至1 2，加入少量 晶種，于-5 0°C攪拌12小時，抽濾，濾餅用少量丙酮洗滌，再用丙酮-水(12 1)重結 晶，得牛磺熊去氧膽酸白色粉末固體7. 59克，mpl43 145°C，[aff +44.1°(c =2.0, EtOH)， 收率 75. 9%0 'HNMR (400MHz，D20) 8 :3. 64 3. 61 (m，2H，C7_H，C3_H)，3. 61 (t，J = 7. 2Hz， 2H, CH2NH) ,3. 12 (t, J = 7. 2Hz,2H, CH2S03H)，2. 38 2. 32 (m, 1H, C23_H)，2. 24 2. 22 (m, 1H, C23-H)，2. 07 2. 05 (m, 1H, C12_H0)，1. 99 1. 74 (m，5H, C16_Ha，C15_Ha，C6_H0，C「Ha， C22-H0)，1. 67 1. 59 (m, 5H, C2_He，C4_Ha，C6_Ha，C4_HB，C5_He)，1. 55 1. 43 (m, 5H, C8_He， C9-Ha, Cn-Ha, C15_H0，C20-H), 1. 43 1. 22 (m, 6H, C22-Ha, C16-H0, Cn-H0，C14-Ha, C2-Ha, C12-Ha)，l. 16 1.08(m，2H，C17_Ha，Q-Hg), 1. 01 (d, J = 4. 2Hz，3H，CH3_21)，0. 98(s，3H， CH3-19)，0. 74(s，3H，CH3_18) ；13CNMR(100MHz, D20) 8 :179. 2,73. 5,73. 4,58. 2,57. 3,52. 5, 46. 1,45. 7,44. 9,42. 8,41. 9,39. 4,38. 8,37. 9,37. 8,37. 6,36. 4,35. 4,34. 4,32. 3,31. 0， 29. 2,26. 0,24. 0,21. 1，14. 7 ； ESI-MS (m/z, -Q) :498. 4(M-H)"0實施例12牛磺熊去氧膽酸的制備將熊去氧膽酸胱胺偶合物4. 51克(5. Ommol)溶于甲醇50毫升中，置冰鹽浴中冷 卻至-5 0°C，分批加入尿素-過氧化氫復合物5. 65克(60. Ommol)，繼續保溫攪拌反應8 小時，反應結束后，加入少量二甲硫醚破壞過量的過氧化物，過濾除去少量不溶物，所得濾 液減壓蒸除溶劑，用鹽酸水溶液調pH至1 2，加入少量晶種，于-5 0°C攪拌12小時，抽 濾，濾餅用少量丙酮洗滌，再用丙酮-水(12 1)重結晶，得牛磺熊去氧膽酸白色粉末固體 4. 15 克，mpl43 145°C，[a]空=+43.8°(c =2X),EtOH)，收率 83. 0%。^NMR 數據、13C_WR 和 ESI-MS數據與實施例11基本一致。實施例13牛磺熊去氧膽酸的制備操作過程同實施例12，只是將尿素-過氧化氫復合物用間氯過氧苯甲酸替代，得 牛磺熊去氧膽酸白色粉末固體，mpl42 145°C，[a]蕓=+42.9°(c =2.0，EtOH)，收率65. 0%。 'HNMR數據、13C-NMR和ESI-MS數據與實施例11基本一致。實施例14牛磺鵝去氧膽酸的制備操作過程同實施例12，只是將熊去氧膽酸胱胺偶合物用鵝去氧膽酸胱胺偶合物 替代，得牛磺鵝去氧膽酸白色粉末固體，mpl33 135°C，[a]$= +16.5°(c=().2,MeOH)，收率 85.1%。iHNMR (400MHz，D20) 8 3. 87 (m，1H，C7_H)，3. 57 (t，J = 7. 2Hz，2H，CH2NH)，3. 48 (m， 1H, C3-H) ,3. 07 (t, J = 7. 2Hz,2H, Q^SC^H)，2. 34 2. 29 (m, 1H, C23_H)，2. 19 2. 16 (m, 1H, C23-H), 2. 14 2. 07 (m, 1H, C4_Ha)，1. 96 1. 94(m，3H，C16_Ha，C12_H0，C6_H0)，1. 86 1.82(m，2H，C「Ha，C9-Ha)，1. 72 1.62(m，4H，C15_Ha，C22_H0，C4_H0，C2_H0)，1. 59 1. 51 (m，2H，C6-Ha，Cn_Ha)，1. 49 1. 32 (m，6H，C8_He，C20_H，C22_Ha，C14_Ha，C5_He，C2_Ha)， 1. 30 1.21(m，4H，C12_Ha，C16_He，Cn-He，C17_Ha)，1.12 0. 98 (m，2H，C15_He，C「He)， 0. 97 (d, J = 4. 2Hz，3H，CH3_21)，0. 92(s，3H，CH3_19)，0. 67(s，3H，CH3_18) ；13CWR(100MHz， D20) 8 ;179. 5,74. 7,71. 2,58. 0,53. 1,52. 9,45. 3,44. 5,42. 5,42. 4,41. 6,38. 5,38. 3， 38. 0,37. 7,37. 4,35. 7,35. 5,34. 7,32. 9,30. 1,26. 6,26. 0,23. 8,21. 3，14. 8 ；ESI-MS (m/ z, -Q) :498. 1(M-Hr。實施例15牛磺豬去氧膽酸的制備
操作過程同實施例12，只是將熊去氧膽酸胱胺偶合物用豬去氧膽酸胱胺偶合物 替代，得牛磺豬去氧膽酸白色粉末固體，mpl98 200°C，[cx]空=+6.5°(c=1.0，MeOH)，收率 78. 5%。屯匪！ (400MHz，D20) 8 4. 12 (m, 1H, C6_H)，3. 69 (m, 1H, C3_H)，3. 60 (t, J = 7. 2Hz, 2H, CH2NH)，3. 11 (t，J = 7. 2Hz,2H, CH2S03H)，2. 39 2. 31 (m, 1H, C23_H)，2. 25 2. 16 (m, 1H, C23-H)，2. 07 1. 91 (m, 2H, C4_Ha，C16_Ha，)，1. 83 1. 76 (m, 3H)，1. 75 1. 66 (m, 4H)， 1.53 1. 32(m，7H)，1. 31 1. 17 (m，8H)，1. 02 (d，J = 4. 8Hz，3H，CH3_21)，0. 99 (s，3H， CH3-19)，0. 73(s，3H，CH3_18) ；13CNMR(100MHz, D20) 8 :179. 4，74. 0，70. 8，58. 7，52. 8，50. 7， 45. 7,43. 0,42. 7,38. 7,38. 5,38. 3,38. 2,37. 8,36. 8,35. 9,34. 7,33. 2,32. 6,31. 1,30. 7， 27. 1,26. 5,23. 9,21. 4，15. 1 ； ESI-MS (m/z, -Q) :498. 3(M-H)"0實施例16牛磺膽酸的制備操作過程同實施例12，只是將熊去氧膽酸胱胺偶合物用膽酸胱胺偶合物替代， 得牛磺膽酸白色粉末固體，mpl26 128°C，[a]$= +30.6°(c=1.0, MeOH),收率79. 4%。 'HNMR(400MHz, D20) 8 :3. 96 (m, 1H，C12_H)，3. 80 (m, 1H，C7_H)，3. 47(t, J = 7. 2Hz, 2H, CH2NH)， 3. 41 3. 37 (m, 1H, C3_H)，2. 98 (t, J = 7. 2Hz,2H, CE,S03H)，2. 25 2. 19 (m, 1H, C23_H)， 2. 13 2. 07 (m, 1H, C23_H)，2. 03 1. 97 (m, 2H, C9_Ha，C4_Ha)，1. 96 0. 91 (m, 20H)，0. 88 (d, J = 4. 0Hz,3H, CH3-21) ,0. 82(s,3H, CH3_19)，0. 62 (s，3H，CH3_18) ； 13CNMR(100MHz, D20) 8 ;177. 0,72. 80,71. 47,67. 99,49. 81,46. 17,46. 00,41. 43,41. 32,39. 58,38. 38,35. 37， 35. 18，35. 12，34. 50，34. 10，32. 35，31. 54，29. 29，27. 97，27. 36，26. 37，23. 12，22. 41， 16. 79，12. 32 ； ESI-MS (m/z, -Q) :514. 0(M_Hr。實施例17牛磺-7-酮基石膽酸的制備操作過程同實施例12，只是將熊去氧膽酸胱胺偶合物用7-酮基石膽酸胱胺偶 合物替代，得牛磺7-酮基石膽酸白色粉末固體，mp224 226°C (dec), [a] d=-12.1°(c= 1.0, EtOH)，收率 73. 7 % ；1HNMR(400MHz, D20) 8 :3. 75 3. 65 (m, 1H, C3_H)，3. 62 (t，2H，J =7. 6Hz，2XHNCH2)，3. 16 (dd, 1H, = 6. 8Hz, J2 = 10. 8Hz, C60_H)，3. 15 (t，J = 7. 6Hz, 2H, SCH2) ,2. 79 (t, 1H, J = 10. 8Hz，C6a _H)，1. 31 (s，3H，19_CH3)，1. 02 (d，J = 6.4Hz，3H， 2I-CH3) ,0. 76(s,3H, I8-CH3) ； 13C-NMR(100MHz, D20) 8 :211. 94, 172. 94,69. 54,54. 80, 51. 00,49. 25,49. 05,45. 84,45. 51,42. 65,42. 62,39. 05,37. 80,35. 75,35. 25,35. 19， 34. 30,32. 90,31. 93,30. 21,28. 28,24. 84,23. 22,21. 67，18. 81，12.33 ；ESI-MS(m/z, -Q) 496. 1(M-Hr。實施例18牛磺石膽酸的制備操作過程同實施例12，只是將熊去氧膽酸胱胺偶合物用石膽酸胱胺偶合物替代， 得牛磺石膽酸白色粉末固體，mp210 212°C，[oc]節=+27.9°(c =1.0，EtOH),收率84. 5 % ； ESI-MS (m/z, -Q) 482. 2(M-H)"0實施例19牛磺去氧膽酸的制備操作過程同實施例12，只是將熊去氧膽酸胱胺偶合物用去氧膽酸胱胺偶合物 替代，得牛磺去氧膽酸白色粉末固體，mpl84 186°C，[ot]2^= +29.2°(c =1.0, H20)，收率 77. 6%0 'HNMR (400MHz, D20) 8 :4. 05 (m，1H，C12_H)，3. 60 (m，1H，C3_H)，3. 58 (t，J = 7. 2Hz， 2H, CH2NH) ,3. 09 (t, J = 7. 2Hz,2H, CH2S03H)，2. 40 2. 31 (m, 1H, C23_H)，2. 27 2. 16 (m,1H, C23-H), 1. 00 (d, J = 4.8Hz，3H，CH3_21)，0. 90 (s，3H，CH3_19)，0. 69 (s，3H，CH3_18)； 13CNMR(100MHz, D20) 8 :179. 6,75. 7,74. 2,52. 8,50. 7,49. 1,49. 0,45. 1,38. 7,38. 4,38. 3， 38. 2,38. 1,36. 8,36. 2,35. 0,34. 4,32. 3,30. 9,30. 3,30. 2,29. 0,26. 7,26. 0,19. 5，15. 4 ; ESI-MS (m/z, -Q) :498.0(M_Hr。實施例20牛磺豬膽酸的制備操作過程同實施例12，只是將熊去氧膽酸胱胺偶合物用豬膽酸胱胺偶合物替代， 得牛磺豬膽酸白色粉末固體；ESI-MS(m/z，-Q) :514. 2 (M_H)。本發明不限于上述實施例。
權利要求
一類具有如下通式的膽酸類化合物與胱胺的偶合物(I)其特征在于R1，R2，R3表示H、α-OH、β-OH、＝O；R1，R2和R3可以相同，也可以不同。FSA00000074556700011.tif
2.如權利要求1所述的膽酸類化合物與胱胺的偶合物(I)的制備方法，其特征在于以 膽酸類化合物和胱胺類化合物為起始原料，在堿性和適當溶劑條件下，經縮合劑作用發生 縮合反應，得膽酸類化合物與胱胺的偶合物(I)。
3.如權利要求2所述的制備方法，其特征在于膽酸類化合物為膽酸、去氧膽酸、石膽 酸、7-酮基石膽酸、豬膽酸、豬去氧膽酸、鵝去氧膽酸、熊去氧膽酸；胱胺類化合物為胱胺 游離堿、胱胺無機酸鹽、胱胺有機酸鹽。
4.如權利要求2所述的制備方法，其特征在于縮合反應所用溶劑為水、C^e脂肪醇、 C3_8脂肪酮、C5_10脂肪烷烴、N, N- 二甲基甲酰胺、醚類、Cm脂肪酸與CM脂肪醇所形成酯、 鹵代烴、芳香烴或取代芳香烴、乙腈，反應可在單一溶劑中進行，也可在混合溶劑中進行，混 合溶劑體積比為1 0. 1 10 ；縮合反應所用堿為堿金屬或堿土金屬氫氧化物、堿金屬或 堿土金屬碳酸鹽、堿金屬或堿土金屬碳酸氫鹽、有機叔胺類或季銨堿類；堿用量與胱胺類化 合物的摩爾投料比為0 8.0 1.0;縮合反應所用縮合劑為氯甲酸(V8脂肪醇酯類化合 物、N-乙氧羰基-2-乙氧基-1，2- 二氫喹啉、碳二亞胺類化合物、氰基磷酸二乙酯、2-氯-4， 6- 二甲氧基-1，3，5-三嗪、氯化4- (4，6- 二甲氧基-1，3，5-三嗪-2-基)-4-甲基嗎啉鹽。
5.如權利要求2所述的制備方法，其特征在于膽酸類化合物與胱胺類化合物的摩爾投 料比為1.9 4.0 1.0;縮合劑與膽酸類化合物的摩爾投料比為1.0 4. 5 1.0。
6.如權利要求2所述的制備方法，其特征在于縮合反應溫度為0 130°C;縮合反應時 間為30分鐘 48小時。
7.一種制備牛磺酸膽酸類偶聯物類治療藥物的方法，其特征在于，膽酸類化合物與胱 胺的偶合物(I)，在適當溶劑和氧化劑存在條件下經氧化反應，得牛磺酸膽酸類偶聯物。
8.如權利要求7所述的牛磺酸膽酸類偶聯物類治療藥物的制備方法，其特征在于，氧 化反應所用溶劑為水、脂肪酸、脂肪醇、乙腈、四氫呋喃、N，N- 二甲基甲酰胺、C3_8脂 肪酮；所用氧化劑為過氧化氫水溶液(H202含量為5% 90%)、(V6脂肪酸的過氧化物、過 氧苯甲酸類化合物、尿素_過氧化氫復合物、過硼酸、C3_8脂肪酮或C3_8脂環酮的過氧化物。
9.如權利要求7所述的牛磺酸膽酸類偶聯物類治療藥物的制備方法，其特征在于，氧 化劑與膽酸胱胺類偶合物(I)的摩爾投料比為5. 0 20. 0 1.0 ；氧化反應溫度為-50 50°C ；氧化反應時間為20分鐘 48小時。
10.如權利要求1所述的膽酸類化合物與胱胺的偶合物(I)的用途，其特征在于用于制 備牛磺酸膽酸類偶聯物類治療藥物。
全文摘要
本發明公開了膽酸類化合物與胱胺的偶合物(I)，還公開了該類化合物的制備方法，及其在制備牛磺酸膽酸類偶聯物治療藥物中的應用。式中R1，R2，R3表示H、α-OH、β-OH、＝O；R1，R2和R3可以相同，也可以不同。
文檔編號C07J41/00GK101798332SQ201010139549
公開日2010年8月11日 申請日期2010年4月6日 優先權日2010年4月6日
發明者吳成龍, 沈怡, 王海龍, 鄧勇 申請人:四川大學