一種半枝蓮中野黃芩苷提取方法
【專利摘要】本發明公開了一種半枝蓮中野黃芩苷提取方法，屬于中藥領域，由提取、純化步驟構成，本發明的方法泄漏率低，洗脫率高。
【專利說明】一種半枝蓮中野黃芩苷提取方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于中藥領域，具體涉及半枝蓮中成分的純化方法。
【背景技術】
[0002] 半枝蓮別名并頭草、牙刷草等，主要產自我國華北、中南、華東、華南、西南等地，為 唇形科黃苳屬植物半枝蓮Aarate D. Don)的干燥全草。該藥味辛、苦、性 寒，具有清熱解毒、散瘀止血、定痛等功效。用于治療癌癥、肝炎、咽喉腫痛、肺膿瘍、尿道炎、 痢疾和毒蛇咬傷等疾病。
[0003] 半枝蓮中黃酮類成分為其主要活性部位，具有多種生理活性，如可以抑制子宮肌 瘤細胞增殖，抑制葡萄球細菌，抑制肺癌細胞增生作用等。近幾年來有文獻報道采用大孔吸 附樹脂法對半枝蓮提取物進行純化富集的研究，但是還不夠深入，缺少實際生產需要的徑 高比等參數，也沒有解決其純化部位出膏率較高和顏色較深的問題。
【發明內容】
[0004] 本發明目的是提供一種純度高的半枝蓮的野黃芩苷提取方法。
[0005] 本發明所采用的技術方案是： 一種半枝蓮中野黃芩苷提取方法，由以下步驟構成： A、 提取：取半枝蓮藥材，加入70-90%乙醇，然后加熱回流提取3次，每次1小時，回收乙 醇，向提取液中緩緩加入1%鹽酸溶液，調節PH為3. 0-3. 3,然后離心，再濃縮得到生藥濃度 為0. 15-0. 2g ? mL-1的濃縮液； B、 純化：按照生藥質量與樹脂體積比為1:2稱取AB-8大孔吸附樹脂，AB-8樹脂徑高 比為1:5,將濃縮液上樣，上樣流速為2 BV/h，水洗體積為3. 5-4. 5 BV，洗脫溶劑為40-70% 乙醇，洗脫體積為4. 5-5. 5 BV，洗脫流速為2-4 BV/h，收集洗脫液，回收乙醇，減壓干燥得到 野黃芩苷。
[0006] 優選的，步驟A中的離心具體步驟如下：先將提取液離心，得到上清液I和沉淀， 然后將沉淀用1倍藥材量水洗滌，再離心分離，得到上清液II，將兩次上清液合并再濃縮。
[0007] 優選的,步驟A中加入的乙醇量為半枝蓮藥材的14倍。
[0008] 優選的，步驟B中水洗體積為4. 5 BV，洗脫溶劑為40%乙醇，洗脫體積為5. 5 BV， 洗脫流速為4 BV/h。
[0009] 優選的，步驟B中上樣體積為75-150ml。
[0010] 作為優選方式，所述方法由以下步驟構成： A、 提取：取半枝蓮藥材，加入14倍量70-90%乙醇，然后加熱回流提取3次，每次1小 時，回收乙醇，得到提取液，向提取液中緩緩加入1%鹽酸溶液，調節PH為3. 0-3. 3,然后離 心，得到上清液I和沉淀，然后將沉淀用1倍藥材量水洗滌，再離心分離，得到上清液II，將 兩次上清液合并，再濃縮得到生藥濃度為〇. 15-0. 2g .ml/1的濃縮液； B、 純化：上樣體積為75-150ml，按照生藥質量與樹脂體積比為1:2稱取AB-8大孔吸附 樹脂，AB-8大孔樹脂徑高比為1:5,將濃縮液上樣，上樣流速為2 BV/h，水洗體積為4.5 BV， 洗脫溶劑為40%乙醇，洗脫體積為5. 5 BV，洗脫流速為4 BV/h，收集洗脫液，回收乙醇，減壓 干燥得到野黃芩苷。
[0011] 為了說明本實驗的可行性，做了如下的實驗。
[0012] 1儀器與試劑 e2695 2988 型 Waters Alliance HPLC;色譜柱 Agilent Zorbax SB-C18;電子天平 AB135-S型分析天平(梅特勒-托利多科技有限公司）;AB-8型大孔樹脂(河北滄州寶恩化工 有限公司）；野黃芩苷對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：110842-200605);半枝蓮 藥材(產地：江蘇；由安國路路通藥材有限公司提供；批號：120103);甲醇(色譜純，Burdick & Jackson公司）；95%乙醇(分析純，北京化工廠） 2方法與結果： 2. 1野黃芩苷含量測定方法 2. I. 1野黃芩苷含量測定方法：參照2010版中國藥典(一部)半枝蓮[野黃芩苷]項下 方法進行： 色譜條件：色譜柱Agilent Zorbax SB-C18 250X4. 6 mm，5 柱溫：30°C;檢測波長： 335 nm;流動相：甲醇：水：醋酸（27:68. 5:4. 5);流速：1 mL ? miiT1 ;進樣量：10 iiL。 2. 1. 2野黃芩苷對照品溶液制備 精密稱取野黃芩苷對照品10. 46 mg，置于50 mL容量瓶中，加流動相定容至刻度，搖勻。 精密量取該溶液2 mL置于5 mL量瓶中，加流動相至刻度，搖勻，過0.22 iim微孔濾膜，制 成83. 68 ii g ? ml/1的野黃芩苷對照品溶液。
[0013] 2. 2.提取液沉淀脫色工藝的考察 半枝蓮上樣液pH值為2-3時，AB-8大孔吸附樹脂對半枝蓮中總黃酮吸附最好。當半 枝蓮提取液加酸后，沉淀明顯增多，藥液顏色明顯降低。為了降低制劑的色澤，提取濃縮液 在上大孔樹脂前需進行酸沉淀脫色處理。
[0014] 取實施例1步驟A中半枝蓮提取液四份，每份200 mL，分別緩緩加入1%鹽酸溶液， 調節pH值為2. 8、3. 0、3. 3及3. 5。邊加入邊攪拌，靜置，離心分離，得沉淀及離心上清液I ; 沉淀用1倍藥材量水洗滌，離心分離，得離心上清液II，分別測定兩次離心上清液中野黃芩 苷的含量，計算兩次離心上清液中野黃芩苷的轉移率。合并兩次離心上清液，采用澄清度檢 查法進行檢查，離心上清液與等量的濁度標準液進行比較，觀察其澄清度。
[0015] 表1取液沉淀脫色工藝的考察結果
【權利要求】
1. 一種半枝蓮中野黃芩苷提取方法，其特征在于所述方法由以下步驟構成： A、 提取：取半枝蓮藥材，加入70-90%乙醇，然后加熱回流提取3次，每次1小時，回收乙 醇，得到提取液，向提取液中緩緩加入1%鹽酸溶液，調節PH為3. 0-3. 3,然后離心，再濃縮得 到生藥濃度為0. 15-0. 2g . ml/1的濃縮液； B、 純化：按照生藥質量與樹脂體積比為1:2量取AB-8大孔吸附樹脂，AB-8大孔樹 脂徑高比為1:5,將濃縮液上樣，上樣流速為2 BV/h，水洗體積為3. 5-4. 5 BV，洗脫溶劑為 40-70%乙醇，洗脫體積為4. 5-5. 5 BV，洗脫流速為2-4 BV/h，收集洗脫液，回收乙醇，減壓干 燥得到野黃芩苷。
2. 根據權利要求1所述的方法，其特征在于步驟A中的離心具體步驟如下：先將提取 液離心，得到上清液I和沉淀，然后將沉淀用1倍藥材量水洗滌，再離心分離，得到上清液 II，將兩次上清液合并再濃縮。
3. 根據權利要求1所述的方法，其特征在于步驟A中加入的乙醇量為半枝蓮藥材的14 倍。
4. 根據權利要求1所述的方法，其特征在于步驟B中水洗體積為4.5 BV，洗脫溶劑為 40%乙醇，洗脫體積為5. 5 BV，洗脫流速為4 BV/h。
5. 根據權利要求1所述的方法，其特征在于步驟B中上樣體積為75-150ml。
6. 根據權利要求1所述的方法，其特征在于所述方法由以下步驟構成： A、 提取：取半枝蓮藥材，加入14倍量70-90%乙醇，然后加熱回流提取3次，每次1小 時，回收乙醇，得到提取液，向提取液中緩緩加入1%鹽酸溶液，調節PH為3. 0-3. 3,然后離 心，得到上清液I和沉淀，然后將沉淀用1倍藥材量水洗滌，再離心分離，得到上清液II，將 兩次上清液合并，再濃縮得到生藥濃度為〇. 15-0. 2g . ml/1的濃縮液； B、 純化：上樣體積為75-150ml，按照生藥質量與樹脂體積比為1:2稱取AB-8大孔吸附 樹脂，AB-8大孔樹脂徑高比為1:5,將濃縮液上樣，上樣流速為2 BV/h，水洗體積為4.5 BV， 洗脫溶劑為40%乙醇，洗脫體積為5. 5 BV，洗脫流速為4 BV/h，收集洗脫液，回收乙醇，減壓 干燥得到野黃芩苷。
【文檔編號】C07H17/07GK104277086SQ201310292221
【公開日】2015年1月14日 申請日期:2013年7月12日 優先權日:2013年7月12日
【發明者】劉丹, 郭珊珊, 王曙賓 申請人:河北以嶺醫藥研究院有限公司