一種從筍殼中提取木寡糖并分離獲得木寡糖單體的方法
【專利摘要】本發明涉及從筍殼中提取木寡糖并分離獲得木寡糖單體的方法，步驟如下：a）筍殼堿降解后微波消解，加入木聚糖酶酶解得上清液；b）活性碳柱用50%-70%乙醇以2-3ml/min的流速平衡3個柱體積，再用去離子水以2-3ml/min平衡3個柱體積，該活性炭柱Φ=3.5cm，H=45cm，內裝層析用活性碳85g；c）將木寡糖上清液上樣，先用去離子水以2-3ml/min的流速洗脫1－3個柱體積，再以0.1%－37%的乙醇以同一流速線性洗脫7-10個柱體積，流速為2－3ml/min，并對乙醇洗脫部分進行收集。本發明的木聚糖提取率高，能從木二至五糖含量較低的木寡糖水溶液分離到高純度單體，易操作，重復性好。
【專利說明】一種從筍殼中提取木寡糖并分離獲得木寡糖單體的方法
【【技術領域】】
[0001]本發明涉及生物化學【技術領域】，具體地說，是一種從筍殼中提取木寡糖并分離獲得木寡糖單體的方法。
【【背景技術】】
[0002]竹筍是我國的傳統的綠色蔬菜之一，在我國自古就被當成“菜中珍品”。隨著筍用林和筍竹兩用林豐產技術的推廣，我國鮮筍產量逐年遞增。竹筍殼又稱竹籜(bambusaSPP)，是竹筍加工當中的大宗廢棄物。筍殼富含纖維素(主要成分是多戊糖)，含量約為35.08%，這與目前生產低聚木糖的主要原料玉米芯中半纖維素的含量相當，因此筍殼是提取低聚木糖的較好資源。
[0003]低聚木糖又稱木寡糖，是由2-7個木糖分子以β_1，4糖苷鍵結合而成的功能性聚合糖。與通常人們所用的大豆低聚糖、低聚果糖、低聚異麥芽糖等相比具有獨特的優勢，它可以選擇性地促進腸道雙歧桿菌的增殖活性，其雙歧因子功能是其它聚合糖類的10-20倍。
[0004]木二糖的制備可采用水解木聚糖或半纖維素，再經過分離純化獲得。水解方法有酸水解、高溫裂解、酶水解等。酶法水解的木二糖得率高，水解進程容易控制。但大多數木聚糖酶水解木聚糖的效果不是很理想，主要因為水解產物中木二糖的比例低，后續分離困難。采用凝膠色譜柱法分離低聚木糖或制備少量高純度的單一木二糖已有一些報道。凝膠層析柱所用柱料為聚丙烯酰胺凝膠Bio-Gel Ρ-4和Ρ-2等，價格昂貴，且該技術處理量小、產品濃度低、操作要求高。中國期刊《食品科學》，2008，Vol.29，N0.10，刊出的論文“利用固定化耐高溫木聚糖酶生產木二糖”，將重組海棲熱袍菌(Thermotoga maritima)極耐熱木聚糖酶B固定于鎳螯合環氧載體Eupergit C250L(固定化XynB)上,水解玉米芯汽爆液連續生產低聚木糖，特別是木二糖。固定化XynB操作穩定性很高，批次水解15次仍保持92%的初始水解活性。90°C下連續水解168h后保持83.6%的初始水解活性，連續操作半衰期為577.6h(24d)。HPLC分析表明，連續水解液中主要含有49.8%木二糖和22.6%木糖。活性碳層析柱可吸附木二糖，利用乙醇梯度洗脫木二糖的收率為84.7%，純度為97.2%。其中，該論文使用活性碳柱層析分離水解液制備木二糖的具體方法是:將活性碳柱(Φ=3.5cm,H=45cm,內裝層析用活性碳85g)用去離子水以流速為105ml/h平衡12h后備用。取連續水解試驗收集的前2L樣品，濃縮至500ml左右上樣。將含總糖為16g的濃縮液以流速IlOml/h上樣，結束后開始洗脫(速度11Oml/h)，IL去離子水水洗后，再用O~15%乙醇溶液(總體積8L)線性洗脫，洗脫液用自動部分收集器收集(I瓶/h)，線性洗脫后采用50%乙醇溶液IL洗脫并收集；測定所收集的每瓶糖液的總糖含量，并TLC檢測糖組成；最后合并含單一木二糖組分的收集液于55°C真空濃縮至過飽和糖漿狀態，加入稍許木二糖晶種，室溫靜置等待結晶。但是該論文中使用活性碳柱層析的是木二糖含量高達49.8%的水解液，但是很多制備方法并不能制備出木二糖含量如此高的水解液。因此對于木二糖含量較低的樣品，還沒有快速、經濟、高效的分離方法。同樣地，目前也未見其它木寡糖單體的快速、經濟、高效的分離方法。
[0005]綜上可知，從笑殼中提取木募糖并聞效分尚獲得木募糖單體，將有助于竹笑加工的廢棄物的再利用，減少環境污染和增加產值，同時有助于木寡糖的進一步開發利用。
【
【發明內容】
】
[0006]本發明的目的是針對現有技術中的不足，提供一種從筍殼中提取木寡糖并分離獲得木寡糖單體的方法。
[0007]為實現上述目的，本發明采取的技術方案是:
[0008]一種從筍殼中提取木寡糖并分離獲得木寡糖單體的方法，所述的方法包括以下步驟:
[0009]a)木寡糖的提取:稱取筍殼加NaOH溶液浸泡后烘干至恒重，稱取烘干后樣品至消解罐中，加入蒸餾水后于消解爐中降解，微波功率為600-800W，消解時間為6-10min，最后用蒸餾水定容，取其上清液即為粗木聚糖溶液，然后在此粗木聚糖溶液中加入木聚糖酶，加酶量為10-60IU/g木聚糖，酶解6-10h，取上清液；
[0010]b)活性炭柱的處理:將活性碳柱用50%-70%的乙醇以2-3ml/min的流速平衡3個柱體積，再用去離子水以2-3ml/min的流速平衡3個柱體積，所述的活性炭柱Φ=3.5cm,H=45cm,內裝層析用活性碳85g ；
[0011]c)單體的分離:將步驟a)酶解后的木寡糖上清液上樣于活性炭柱，先用去離子水以2-3ml/min的流速洗脫 I 一 3個柱體積，再以0.1% 一 37%的乙醇以同一流速線性洗脫7-10個柱體積，流速為2 - 3ml/min，并對乙醇洗脫部分進行收集。
[0012]優選地,所述的活性炭是Cleanert PestiCarb NH2-石墨化碳。
[0013]作為本發明的一個實施例，所述的木寡糖是木二糖，步驟b)所述的乙醇體積濃度是 0.1% — 10%O
[0014]作為本發明的一個實施例，所述的木寡糖是木三糖，步驟b)所述的乙醇體積濃度是 15% — 25%。
[0015]作為本發明的一個實施例，所述的木寡糖是木四糖，步驟b)所述的乙醇體積濃度是 27% — 35%。
[0016]作為本發明的一個實施例，所述的木寡糖是木五糖，步驟b)所述的乙醇體積濃度是 36% — 37%。
[0017]優選地，所述的方法包括以下步驟:
[0018]a)木寡糖的提取:稱取筍殼加NaOH溶液浸泡后烘干至恒重，稱取烘干后樣品至消解罐中，加入蒸餾水后于消解爐中降解，微波功率為700W，消解時間為8min，最后用蒸餾水定容，取其上清液即為粗木聚糖溶液，然后在此粗木聚糖溶液中加入木聚糖酶，加酶量為35IU/g木聚糖，酶解8h，取上清液；
[0019]b)活性炭柱的處理:將活性碳柱用60%的乙醇以2.5ml/min的流速平衡3個柱體積，再用去離子水以2.5ml/min的流速平衡3個柱體積,所述的活性炭柱Φ=3.5cm,H=45cm,內裝層析用活性碳85g;
[0020]c)單體的分離:將步驟a)酶解后的木寡糖上清液上樣于活性炭柱，先用去離子水以2.5ml/min的流速洗脫2個柱體積，再以0.1% 一 37%的乙醇以同一流速線性洗脫8個柱體積，流速為2.5ml/min，并對乙醇洗脫部分進行收集。
[0021]本發明優點在于:
[0022]1、采用微波-酶法從筍殼中提取木寡糖，且微波前使用堿降解，大大提高了提取率，同時該方法便于后期木寡糖的分離純化，有效利用了竹筍加工的廢棄物，綠色環保；
[0023]2、本發明利用活性碳柱(尤其是Cleanert PestiCarb NH2-石墨化碳)對木二至五糖含量較低的木寡糖水溶液進行分離，且活性碳柱使用50%-70%的乙醇和去離子水進行平衡，能有效分離得到木二至五糖，具體優點體現在:(I)液相圖譜均呈現單峰，峰型對稱，純度均在95%以上；(2)活性炭柱子易于保存，對流量、壓力無特殊限制，吸附量大；(3)活性炭柱子可重復利用，成本低；(4)以水跟乙醇為洗脫液，無需二次除鹽；(5)分離時間大大縮短，操作簡單快捷；(6)方法重復性好。
【【專利附圖】
【附圖說明】】
[0024]附圖1是木二糖的TLC檢測結果。
[0025]附圖2是木二到五糖的TLC檢測結果。
[0026]附圖3是木二糖質譜圖譜。
[0027]附圖4是木三糖質譜圖譜。
[0028]附圖5是木四糖質譜圖譜。
[0029]附圖6是木五糖質譜圖譜。
[0030]附圖7是木二糖高效液相圖譜。
[0031]附圖8是木三糖高效液相圖譜。
[0032]附圖9是木四糖高效液相圖譜。
[0033]附圖10是木五糖高效液相圖譜。
【【具體實施方式】】
[0034]下面結合附圖對本發明提供的【具體實施方式】作詳細說明。
[0035]實施例1
[0036]一、方法
[0037]1、木寡糖的提取
[0038]稱取筍殼加10倍體積6mol/L NaOH溶液，在60°C條件下浸泡12h，用清水清洗至pH值8.0左右，在60°C烘箱中烘干至恒重。精確稱取烘干后樣品2g至消解罐中，加入50ml蒸餾水，加蓋密封后于消解爐中降解，微波功率為700W，消解時間為8min，待冷卻后取出，最后用蒸餾水定容至100ml，取其上清液即為粗木聚糖溶液，測定其中的木聚糖含量。然后在此粗木聚糖溶液中加入木聚糖酶，加酶量為35IU/g木聚糖，在50°C恒溫振蕩箱中酶解8h，取上清液保存。再使用DNS法測定酶解后上清液中糖含量，同時測定各木寡糖含量。
[0039]2、流動相的配置
[0040]蒸餾水和無水乙醇分別過0.22um的水膜和聚偏氟乙烯有機膜，低頻產生脫氣。
[0041]3、活性炭 柱的處理
[0042]將活性碳柱(Φ =3.5cm, H=45cm,內裝層析用活性碳85g,活性炭是CleanertPestiCarb NH2-石墨化碳)用體積分數60%的乙醇以2.5ml/min的流速平衡3個柱體積，再用去離子水以2.5ml/min的流速平衡3個柱體積。
[0043]4、單體的分離
[0044]4.1木二糖的分離
[0045]將步驟I中酶解后的木寡糖上清液上樣于活性炭柱，先用去離子水以2.5ml/min的流速洗脫2個柱體積，再以5%的乙醇以同一流速線性洗脫8個柱體積，流速為2.5ml/min，其中乙醇洗脫部分用自動收集器收集。
[0046]4.2木三糖的分離
[0047]將步驟I中酶解后的木寡糖上清液上樣于活性炭柱，先用去離子水以2.5ml/min的流速洗脫2個柱體積，再以20%的乙醇以同一流速線性洗脫8個柱體積，流速為2.5ml/min，其中乙醇洗脫部分用自動收集器收集。
[0048]4.3木四糖的分離
[0049]將步驟I中酶解后的木寡糖上清液上樣于活性炭柱，先用去離子水以2.5ml/min的流速洗脫2個柱體積，再以31%的乙醇以同一流速線性洗脫8個柱體積，流速為2.5ml/min，其中乙醇洗脫部分用自動收集器收集。
[0050]4.4木五糖的分離
[0051]將步驟I中酶 解后的木寡糖上清液上樣于活性炭柱，先用去離子水以2.5ml/min的流速洗脫2個柱體積，再以36.5%的乙醇以同一流速線性洗脫8個柱體積，流速為2.5ml/min，其中乙醇洗脫部分用自動收集器收集。
[0052]5、分離結果的檢測
[0053]將洗脫液分管收集，然后用TLC板進行檢測，確定2 - 5糖的具體分布及純度，其中TLC板展開劑為正丁醇:甲酸:水=4:6:1(體積比)。然后根據TLC板進行單組分合管。
[0054]6、純度測定
[0055]將合并的各個單組分進行濃縮除乙醇處理，凍干得固體單體，然后進行HPLC及MS檢測。
[0056]HPLC:檢測儀器:日本島津液相色譜儀；色譜柱:ClickXion(250mmX4.6mm, 10 μ m);流動相:A 水，B 乙腈；洗脫條件:0 ~40min,75%B 到 50%B ;檢測器:蒸發光散射檢測器；檢測器溫度:50°C ;柱溫:30°C ;流速:1.0mL/min ;進樣量:20 μ L。
[0057]MS:檢測儀器:美國Thermo Scientific LTQ Orbitrap XL質譜儀；檢測條件:正離子檢測模式，噴霧電壓(Spray voltage) 3.0kV，透鏡電壓(Tube lens) 80V，毛細管溫度(Capillary temp) 275 °C,毛細管電壓(Capillary voltage) 43V,鞘流氣體流速(Sheathgas flow rate)8arb,注射泵直接進樣,樣品流速10 μ L/min。
[0058]二、結果
[0059]1、木寡糖的提取
[0060]微波消解后得到粗木聚糖溶液，測定得其中木聚糖含量為106.5g/L。經DNS法測定，酶解后上清液中糖含量高達25%，同時測定各木寡糖含量，得木二糖占糖總量42.3%，木三糖占糖總量33.35%，木四糖占糖總量16.4%，木五糖占糖總量5.36%。
[0061]2、TLC 檢測
[0062]TLC檢測結果如圖1和2所示。從圖2可以看出，木二到木五糖均為單一斑點，說明分離效果好。[0063]3、HPLC 及 MS 檢測
[0064]將制備得到的木二到木五糖固體做HPLC及MS檢測，質譜圖譜如圖3_6所示，與文獻報道吻合，證實所得到的分離物確為木二到木五糖。木二到木五糖得液相圖譜如圖7-10所示，從液相圖譜可以看出，呈現單峰，且峰型對稱，說明其純度已達到很高水平，計算得出木二到木五糖純度都在95%以上，分別為99.4%,99.2%,98.8%,98.2%。
[0065]實施例2
[0066]—、方法
[0067]1、木寡糖的提取
[0068]稱取筍殼加10倍體積6mol/L NaOH溶液，在60°C條件下浸泡12h，用清水清洗至pH值8.0左右，在60°C烘箱中烘干至恒重。精確稱取烘干后樣品2g至消解罐中，加入50ml蒸餾水，加蓋密封后于消解爐中降解，微波功率為600W，消解時間為lOmin，待冷卻后取出，最后用蒸餾水定容至100ml，取其上清液即為粗木聚糖溶液，測定其中的木聚糖含量。然后在此粗木聚糖溶液中加入木聚糖酶，加酶量為60IU/g木聚糖，在50°C恒溫振蕩箱中酶解6h，取上清液保存。再使用DNS法測定酶解后上清液中糖含量，同時測定各木寡糖含量。
[0069]2、流動相的配置
[0070]蒸餾水和無水乙醇分別過0.22um的水膜和聚偏氟乙烯有機膜，低頻產生脫氣。
[0071]3、活性炭柱的處理 [0072]將活性碳柱(Φ =3.5cm, H=45cm,內裝層析用活性碳85g,活性炭是CleanertPestiCarb NH2-石墨化碳)用體積分數70%的乙醇以2ml/min的流速平衡3個柱體積，再用去離子水以3ml/min的流速平衡3個柱體積。
[0073]4、單體的分離
[0074]4.1木二糖的分離
[0075]將步驟I中酶解后的木寡糖上清液上樣于活性炭柱，先用去離子水以2ml/min的流速洗脫3個柱體積，再以0.1%的乙醇以同一流速線性洗脫10個柱體積，流速為2ml/min，其中乙醇洗脫部分用自動收集器收集。
[0076]4.2木三糖的分離
[0077]將步驟I中酶解后的木寡糖上清液上樣于活性炭柱，先用去離子水以2ml/min的流速洗脫3個柱體積，再以15%的乙醇以同一流速線性洗脫10個柱體積，流速為2ml/min，其中乙醇洗脫部分用自動收集器收集。
[0078]4.3木四糖的分離
[0079]將步驟I中酶解后的木寡糖上清液上樣于活性炭柱，先用去離子水以2ml/min的流速洗脫3個柱體積，再以27%的乙醇以同一流速線性洗脫10個柱體積，流速為2ml/min，其中乙醇洗脫部分用自動收集器收集。
[0080]4.4木五糖的分離
[0081]將步驟I中酶解后的木寡糖上清液上樣于活性炭柱，先用去離子水以2ml/min的流速洗脫3個柱體積，再以36%的乙醇以同一流速線性洗脫10個柱體積，流速為2ml/min，其中乙醇洗脫部分用自動收集器收集。
[0082]5、分離結果的檢測
[0083]具體操作同實施例1。[0084]6、純度測定
[0085]具體操作同實施例1。
[0086]二、結果
[0087]1、木寡糖的提取
[0088]微波消解后得到粗木聚糖溶液，測定得其中木聚糖含量為200.3g/L。經DNS法測定，酶解后上清液中糖含量高達24.6%，同時測定各木寡糖含量，得木二糖占糖總量41.2%，木三糖占糖總量32.06%，木四糖占糖總量17.8%，木五糖占糖總量5.32%。
[0089]2、TLC 檢測
[0090]從TLC檢測結果可以看出，木二到木五糖均為單一斑點，說明分離效果好。
[0091]3、HPLC 及 MS 檢測
[0092]將制備得到的木二到木五糖固體做HPLC及MS檢測，質譜圖譜與文獻報道吻合，證實所得到的分離物確為木二到木五糖。從木二到木五糖的液相圖譜可以看出，呈現單峰，且峰型對稱，說明其純度已達到很高水平，計算得出木二到木五糖純度都在95%以上，分別為98.5%, 98.2%, 98.0%、97.5%。
[0093]實施例3
[0094]一、方法
[0095]1、木寡糖的提取
[0096]稱取筍殼加10倍體積6mol/L NaOH溶液，在60°C條件下浸泡12h，用清水清洗至pH值8.0左右，在60°C烘箱中烘干至恒重。精確稱取烘干后樣品2g至消解罐中，加入50ml蒸餾水，加蓋密封后于消解爐中降解，微波功率為800W，消解時間為6min，待冷卻后取出，最后用蒸餾水定容至100ml，取其上清液即為粗木聚糖溶液，測定其中的木聚糖含量。然后在此粗木聚糖溶液中加入木聚糖酶，加酶量為10IU/g木聚糖，在50°C恒溫振蕩箱中酶解10h，取上清液保存。再使用DNS法測定酶解后上清液中糖含量，同時測定各木寡糖含量。
[0097]2、流動相的配置
[0098]蒸餾水和無水乙醇分別過0.22um的水膜和聚偏氟乙烯有機膜，低頻產生脫氣。
[0099]3、活性炭柱的處理
[0100]將活性碳柱(Φ=3.5cm, H=45cm,內裝層析用活性碳85g,活性炭，是CleanertPestiCarb NH2-石墨化碳)用體積分數50%的乙醇以3ml/min的流速平衡3個柱體積，再用去離子水以2ml/min的流速平衡3個柱體積。
[0101]4、單體的分離
[0102]4.1木二糖的分離
[0103]將步驟I中酶解后的木寡糖上清液上樣于活性炭柱，先用去離子水以3ml/min的流速洗脫I個柱體積，再以10%的乙醇以同一流速線性洗脫7個柱體積，流速為3ml/min，其中乙醇洗脫部分用自動收集器收集。
[0104]4.2木三糖的分離
[0105]將步驟1中酶解后的木寡糖上清液上樣于活性炭柱，先用去離子水以3ml/min的流速洗脫1個柱體積， 再以25%的乙醇以同一流速線性洗脫7個柱體積，流速為3ml/min，其中乙醇洗脫部分用自動收集器收集。
[0106]4.3木四糖的分離[0107]將步驟I中酶解后的木寡糖上清液上樣于活性炭柱，先用去離子水以3ml/min的流速洗脫I個柱體積，再以35%的乙醇以同一流速線性洗脫7個柱體積，流速為3ml/min，其中乙醇洗脫部分用自動收集器收集。
[0108]4.4木五糖的分離
[0109]將步驟I中酶解后的木寡糖上清液上樣于活性炭柱，先用去離子水以3ml/min的流速洗脫I個柱體積，再以37%的乙醇以同一流速線性洗脫7個柱體積，流速為3ml/min，其中乙醇洗脫部分用自動收集器收集。
[0110]5、分離結果的檢測
[0111]具體操作同實施例1。
[0112]6、純度測定
[0113]具體操作同實施例1。
[0114]二、結果
[0115]1、木寡糖的提取
[0116]微波消解后得到粗木聚糖溶液，測定得其中木聚糖含量為20.9g/L。經DNS法測定，酶解后上清液中糖含量高達24.77%，同時測定各木寡糖含量，得木二糖占糖總量43.1%,木三糖占糖總量34.25%，木四糖占糖總量15.82%，木五糖占糖總量5.20%。
[0117]2、TLC 檢測
[0118]從TLC檢測結果可以看出，木二到木五糖均為單一斑點，說明分離效果好。
[0119]3、HPLC 及 MS 檢測
[0120]將制備得到的木二到木五糖固體做HPLC及MS檢測，質譜圖譜與文獻報道吻合，證實所得到的分離物確為木二到木五糖。從木二到木五糖的液相圖譜可以看出，呈現單峰，且峰型對稱，說明其純度已達到很高水平，計算得出木二到木五糖純度都在95%以上，分別為98.3%, 98.1%、97.2%, 97.0%。
[0121]實施例4
[0122]實施例1-3的實驗各重復5次，計算木二至五糖純度，計算變異系數，結果見表1。由表1可以看出重復實驗的變異系數均較小，表明該方法重復性較好。
[0123]表1重復性實驗變異系數
[0124]
【權利要求】
1.一種從筍殼中提取木寡糖并分離獲得木寡糖單體的方法，其特征在于，所述的方法包括以下步驟: a)木寡糖的提取:稱取筍殼加NaOH溶液浸泡后烘干至恒重，稱取烘干后樣品至消解罐中，加入蒸餾水后于消解爐中降解，微波功率為600-800W，消解時間為6-10min，最后用蒸餾水定容，取其上清液即為粗木聚糖溶液，然后在此粗木聚糖溶液中加入木聚糖酶，加酶量為10-60IU/g木聚糖，酶解6-10h，取上清液； b)活性炭柱的處理:將活性碳柱用50%-70%的乙醇以2-3ml/min的流速平衡3個柱體積，再用去離子水以2-3ml/min的流速平衡3個柱體積,所述的活性炭柱Φ=3.5cm,H=45cm,內裝層析用活性碳85g; c)單體的分離:將步驟a)酶解后的木寡糖上清液上樣于活性炭柱，先用去離子水以2-3ml/min的流速洗脫I 一 3個柱體積，再以0.1% 一 37%的乙醇以同一流速線性洗脫7_10個柱體積，流速為2 - 3ml/min，并對乙醇洗脫部分進行收集。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的活性炭是CleanertPestiCarbNH2-石墨化碳。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的木寡糖是木二糖，步驟b)所述的乙醇體積濃度是0.1% - 10%。
4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的木寡糖是木三糖，步驟b)所述的乙醇體積濃度是15% - 25%。
5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的木寡糖是木四糖，步驟b)所述的乙醇體積濃度是27% - 35%。
6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的木寡糖是木五糖，步驟b)所述的乙醇體積濃度是36% - 37%。
7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的方法包括以下步驟: a)木寡糖的提取:稱取筍殼加NaOH溶液浸泡后烘干至恒重，稱取烘干后樣品至消解罐中，加入蒸餾水后于消解爐中降解，微波功率為700W，消解時間為8min，最后用蒸餾水定容，取其上清液即為粗木聚糖溶液，然后在此粗木聚糖溶液中加入木聚糖酶，加酶量為35IU/g木聚糖，酶解8h，取上清液； b)活性炭柱的處理:將活性碳柱用60%的乙醇以2.5ml/min的流速平衡3個柱體積，再用去離子水以2.5ml/min的流速平衡3個柱體積,所述的活性炭柱Φ=3.5cm,H=45cm,內裝層析用活性碳85g; c)單體的 分離:將步驟a)酶解后的木寡糖上清液上樣于活性炭柱，先用去離子水以2.5ml/min的流速洗脫2個柱體積，再以0.1% 一 37%的乙醇以同一流速線性洗脫8個柱體積，流速為2.5ml/min，并對乙醇洗脫部分進行收集。
【文檔編號】C07H1/08GK103789376SQ201410059775
【公開日】2014年5月14日 申請日期:2014年2月21日 優先權日:2014年2月21日
【發明者】張斌, 管昶, 王靜, 王麗麗, 張娜娜 申請人:青島博智匯力生物科技有限公司