本發明涉及化學藥物領域，具體涉及叔丁醇在去水衛矛醇或其組合物采用冷凍干燥法制成疏松干燥物過程中的應用。
背景技術：
：1,2-5,6二脫水衛矛醇(1,2-5,6-Dianhydrogalactito.DAD為己糖醇類抗癌藥，又稱去水衛矛醇(C6H10O4)、二去水衛矛醇，衛康醇，脫水半乳糖醇。【外文名】Dianhydrogalactitol。是抗癌藥1,6-二溴衛矛醇的轉化產物，對慢粒白血病有較好的近期療效，緩解率為86％。對肺癌、多發性骨髓瘤、鼻咽癌等也有一定療效，對各型肺癌的有效率，僅低于氮芥、絲裂霉素C和甲氨喋呤，但毒性則較輕。去水衛矛醇對動物的移植性腫瘤有廣譜抗腫瘤活性。臨床研究證明對慢性粒細胞白血病(慢粒)有較好的近期療效，緩解率為86.0％，且顯效快，與文獻報道的馬利蘭及靛玉紅比較，緩解率與馬利蘭相近而高于靛玉紅，但完全緩解率低于馬利蘭。DAD顯效較其他二藥快，副作用比馬利蘭輕，與馬利蘭無交叉耐藥，可作為誘導緩解藥物推廣使用。另外去水衛矛醇與對肺癌及其它惡性胸部腫瘤的藥比較，對腺癌的療效僅次于氮芥，絲裂霉素C及甲氨蝶呤、而骨髓，消化道及肝腎等毒性較上述二藥為輕。對多發性骨髓瘤有效率55.6％，其余臨床癥狀改善，骨痛明顯減輕，對漿細胞多發性骨髓瘤也有一定療效，因而有進一步研究開發的價值。由于現有凍干工藝的限制，去水衛矛醇凍干品每批之間的熔點、水溶性及脂溶性存在極大差異，針對上述問題，通過改進凍干工藝，改善產品的穩定性，提出了本發明。技術實現要素：本發明的目的是提供叔丁醇在去水衛矛醇或其組合物采用非水冷凍干燥法制成疏松干燥物過程中的應用。優選地，本發明所述的叔丁醇含2-甲基-2-丙醇為95.0％～100％。優選地，本發明所述的叔丁醇含水量不高于5％。優選地，本發明所述的去水衛矛醇或其組合物中，1,2-5,6二去水衛矛醇含量為5％～100％。本發明的另一目的是提供叔丁醇在去水衛矛醇或其組合物采用非水冷凍干燥法制成 疏松干燥物過程中的非水冷凍干燥步驟。本發明所述非水冷凍干燥法包括非水配制與冷凍干燥兩個步驟。本發明所述的非水配制包括以下步驟：取去水衛矛醇或其組合物加叔丁醇液使溶解，制成含去水衛矛醇為0.5％～20％的溶液。優選地，本發明所述非水配制時溶解溫度為20℃～50℃。本發明所述的冷凍干燥包括如下步驟：1)預凍：將去水衛矛醇或其組合物加叔丁醇使溶解，濾過，濾液分裝至開口容器中，置于凍干柜內，在0.25h～5h內持續降溫至10℃～-5℃，并在該溫度維持0.25h～5h；2)凍結與系統平衡：預凍結束后，在0.25h～5h的時間之內持續降溫，將凍干柜內溫度降至-3℃～-80℃，并在-3℃～-80℃下維持0.25h～5h，然后維持溫度不變將凍干柜內的壓力調整為2Pa～10Pa；3)升華：通入無菌蒸汽或氣體使真空度提升至20Pa～150Pa，保持0.25h～5h；繼續通入無菌蒸汽或氣體使真空度在30Pa～150Pa，將凍干柜內板層溫度由基礎溫度-3℃～-80℃在0.5～5h內提升至10℃～-2℃，并保持在該溫度0.5～5h；4)解析：升華結束后，繼續通入無菌蒸汽或氣體使真空度在30Pa～150Pa，調整凍干柜內板層溫度為20℃～40℃，并在此條件下維持0.5h～10h；5)凍干結束：當凍干柜內溫度到達20℃且至少兩支產品溫度探頭超過20℃后，調整凍干柜內的真空度至0.1Pa～5Pa并保持1～10h，結束凍干操作，打開柜門，出料。本發明提供的非水冷凍干燥法制備去水衛矛醇疏松干燥物或其組合物，該應用具有以下優點：1、本發明制成的去水衛矛醇疏松干燥體，熔點為101.5±2℃；置40℃放置7d后，熔點無降低，加水或無水乙醇溶解時均為澄清溶液，無沉淀生成，質量穩定。文獻報道，去水衛矛醇結晶的熔點為95.5～102.5℃，但對于去水衛矛醇凍干粉，則未見有熔點測定的要求。制備去水衛矛醇疏松干燥體時，如制備過程中選用水作為溶解介質，所得產品的熔點通常下降為76～95℃；置40℃放置7d后，加水或無水乙醇溶解時均形成乳狀渾濁液，沉淀不溶于丙酮。本發明所得產品保留了以水為溶媒所得的產品外觀成型性好，即具有海綿狀團狀結構，無硬殼、萎縮、塌陷、灰散等現象的優點。2、“有機溶劑的冷凍干燥研究”(食品工業科技，Vol.27,No.05,2006)，公開了叔丁醇因為具有高熔點、高蒸汽壓，因此可作為理想的凍干溶劑。另外，少量的叔丁醇加入到水 溶液中，凍結時可以改變水的結晶形態，形成針狀結晶，更有利于水的揮發，因此目前的研究熱點是叔丁醇－水共溶劑。公開文獻叔丁醇在凍干中解決的技術問題是：(a)生物制品難溶于水或其水溶液不穩定；(b)提高干燥速率。本發明主旨是倡導非水冷凍干燥法，與公開文獻所述叔丁醇－水共溶劑不同，本發明采用純度含量在95％以上的叔丁醇代替水溶解衛矛醇，盡量避免水參與整個凍干過程，從而避免產品發生水降解反應。3、現有中國專利申請201180050147.6公開了在衛矛醇的純化過程中將二溴衛矛醇與堿金屬的碳酸鹽置入叔丁醇中起反應，生成二去水衛矛醇。但未公開叔丁醇在凍干過程中可以使用。在純化階段可以使用的試劑，不表示在凍干過程也可以使用，因為兩者使用的目的不同，解決的技術問題不同，達到的技術效果也不同。在合成過程使用的目的是促使其反應生成去水衛矛醇，本發明在凍干過程中使用叔丁醇的目的是溶解去水衛矛醇，并避免去水衛矛醇在冷凍干燥過程中生成活躍晶型，從而解決了產品保存期間穩定差的問題。因此，在純化過程中使用叔丁醇與在凍干中使用叔丁醇是完全不同的性質，不具備參考意義。4、本發明根據去水衛矛醇的自身固有特征，研究出適合去水衛矛醇及其組合物的冷凍干燥參數，用本發明限定的冷凍干燥方法制備所得產品，與現有冷凍干燥方法所得去水衛矛醇凍干產品相比，提高了長時間保存的質量穩定性。對比不同冷凍干燥方法所得產品的熔點可以得知：本發明所得產品的熔點為101℃左右，經過3個月的加速穩定性試驗，樣品熔點無變化。對比例所得產品的熔點為95～99℃，經過3個月的加速穩定性試驗，樣品熔點均下降至85～98℃。熔點是一種物質的一個物理性質，在有機化學領域中，對于純粹的有機化合物，一般都有固定熔點。在壓強固定的情況下，其熔點是不變化的。但當這個物質中含有其他成分，會使這個物質的熔點發生較大變化，因此，本發明通過測定產品的熔點來確認去水衛矛醇的穩定性。從實驗結果可以得知，本發明冷凍干燥方法所得去水衛矛醇質量穩定，無論是制備時每批之間的差異，還是加速后的熔點對比，均非常穩定。對比例所得產品不但剛剛制備出來時每批之間差異較大，加速試驗后，通過測定熔點，我們可以知道其產品質量發生了顯著性變化，雜質明顯高于加速試驗前數據，證明其產品極不穩定。5、本發明提供的凍干粉制備方法，適合用于非水法冷凍干燥產品，所選用的叔丁醇溶媒毒性與乙醇相近，對凍干設備除注意防爆外，無其他特殊要求。按給出的冷凍干燥工 藝，所得產品的有機溶媒殘留總量不高于0.001％，且所得產品品相好，與水凍干品無明顯差異。具體實施方式下面通過實施例進一步說明本發明。應該理解的是，本發明的實施例是用于說明本發明而不是對本發明的限制。根據本發明的實質對本發明進行的簡單改進都屬于本發明要求保護的范圍。除非另有說明，本發明中的濃度百分數是溶質體積百分數，g/v表示溶液的溶質體積比。實施例1：稱取去水衛矛醇，按下述步驟操作：1)預凍：將去水衛矛醇加入含2-甲基-2-丙醇95％、且含水量為0.1％的叔丁醇，在20℃下溶解制成0.5％的溶液，濾過，濾液分裝至開口容器中，置于凍干柜內，在0.25h內持續降溫至10℃，并在該溫度維持0.25h；2)凍結與系統平衡：預凍結束后，在0.25h的時間之內持續降溫，將凍干柜內溫度降至-3℃，并在此溫度下維持0.25h，然后維持溫度不變將凍干柜內的壓力調整為2Pa；3)升華：通入無菌蒸汽使真空度在150Pa，保持0.25h；繼續通入無菌蒸汽或氣體使真空度在150PaPa，將凍干柜內板層溫度由基礎溫度-3℃在0.5h內提升至-2℃，并保持在該溫度0.5h；4)解析：升華結束后，繼續通入無菌蒸汽或氣體使真空度在30Pa，調整凍干柜內板層溫度為20℃，并在此條件下維持0.5h；5)凍干結束：當凍干柜內溫度到達20℃且至少兩支產品溫度探頭超過20℃后，調整凍干柜內的真空度至0.1Pa并保持1h，結束凍干操作，打開柜門，出料。以上操作重復三個批次。經檢測，叔丁醇殘留量為0.0005％、0.0003％、0.0004％，1,2-5,6二去水衛矛醇含量為100.0％、99.8％、99.7％。實施例2：稱取去水衛矛醇，按下述步驟操作：1)預凍：將去水衛矛醇加入含2-甲基-2-丙醇98％、且含水量為5％的叔丁醇，在35℃下溶解制成10％的溶液，濾過，濾液分裝至開口容器中，置于凍干柜內，在3h內持續降溫至0℃，并在該溫度維持3h；2)凍結與系統平衡：預凍結束后，在3h的時間之內持續降溫，將凍干柜內溫度降至-40℃，并在此溫度下維持3h，然后維持溫度不變將凍干柜內的壓力調整為5Pa；3)升華：通入常溫無菌氣體使真空度在75Pa，保持3h；繼續通入無菌蒸汽或氣體使真空度在90PaPa，將凍干柜內板層溫度由基礎溫度-40℃在3h內提升至5℃，并保持在該溫度3h；4)解析：升華結束后，繼續通入無菌蒸汽或氣體使真空度在90Pa，調整凍干柜內板層溫度為30℃，并在此條件下維持5h；5)凍干結束：當凍干柜內溫度到達20℃且至少兩支產品溫度探頭超過20℃后，調整凍干柜內的真空度至3Pa并保持5h，結束凍干操作，打開柜門，出料。以上操作重復三個批次。經檢測，叔丁醇殘留量為0.0004％、0.0003％、0.0003％，1,2-5,6二去水衛矛醇含量為98.0％、98.2％、98.5％實施例3：稱取去水衛矛醇，按下述步驟操作：1)預凍：將去水衛矛醇與聚維酮(PVP)加入含2-甲基-2-丙醇100％、且含水量為2％的叔丁醇中，在50℃下溶解制成含20％去水衛矛醇的溶液，濾過，濾液分裝至開口容器中，置于凍干柜內，在5h內持續降溫至-5℃，并在該溫度維持5h；2)凍結與系統平衡：預凍結束后，在5h的時間之內持續降溫，將凍干柜內溫度降至-80℃，并在此溫度下維持5h，然后維持溫度不變將凍干柜內的壓力調整為10Pa；3)升華：通入常溫無菌氣體使真空度在20Pa，保持5h；繼續通入無菌蒸汽或氣體使真空度在30Pa，將凍干柜內板層溫度由基礎溫度-80℃在5h內提升至10℃，并保持在該溫度5h；4)解析：升華結束后，繼續通入無菌蒸汽或氣體使真空度在150Pa，調整凍干柜內板層溫度為40℃，并在此條件下維持10h；5)凍干結束：當凍干柜內溫度到達35℃且至少兩支產品溫度探頭超過30℃后，調整凍干柜內的真空度至5Pa并保持10h，結束凍干操作，打開柜門，出料。以上操作重復三個批次。經檢測，叔丁醇殘留量為0.0002％、0.0003％、0.0001％，1,2-5,6二去水衛矛醇含量為95.0％、95.6％、95.3％。對比例1：用水為溶劑制備去水衛矛醇凍干粉稱取去水衛矛醇，按下述步驟操作：1)預凍：將去水衛矛醇加入水中，在20℃下溶解制成0.5％的溶液，濾過，濾液分裝至開口容器中，置于凍干柜內，在0.25h內持續降溫至10℃，并在該溫度維持0.25h；2)凍結與系統平衡：預凍結束后，在0.25h的時間之內持續降溫，將凍干柜內溫度降至-3℃，并在此溫度下維持0.25h，然后維持溫度不變將凍干柜內的壓力調整為2Pa；3)升華：通入無菌蒸汽使真空度在150Pa，保持0.25h；繼續通入無菌蒸汽或氣體使真空度在150PaPa，將凍干柜內板層溫度由基礎溫度-3℃在0.5h內提升至-2℃，并保持在該溫度0.5h；4)解析：升華結束后，繼續通入無菌蒸汽或氣體使真空度在30Pa，調整凍干柜內板層溫度為20℃，并在此條件下維持0.5h；5)凍干結束：當凍干柜內溫度到達20℃且至少兩支產品溫度探頭超過20℃后，調整凍干柜內的真空度至0.1Pa并保持1h，結束凍干操作，打開柜門，出料。以上操作重復三個批次。經檢測，1,2-5,6二去水衛矛醇含量為95.5％、95.8％、95.6％。對比例2：調整不同凍干曲線制備去水衛矛醇凍干粉稱取去水衛矛醇，按下述步驟操作：1)預凍：將去水衛矛醇加叔丁醇使溶解制成6％的溶液，濾過，濾液分裝至開口容器中，置于凍干柜內，在0.5h內持續降溫至11℃，并維持該在溫度1.5h；2)凍結與系統平衡：預凍結束后，在1.5h的時間之內持續降溫，將凍干柜內溫度降至-2℃，并在此溫度下維持1.5h，然后維持溫度不變將凍干柜內的壓力調整為15Pa，維持1h；3)升華：維持真空度在15Pa，將凍干柜內板層溫度由基礎溫度-4℃提升至11℃，并保持在該溫度6h；然后維持凍干柜內溫度不變，調整真空度為15Pa，并保持1h；4)解析：升華結束后，調整凍干柜內板層溫度為45℃、真空度為15Pa，并在此條件下維持6h；5)凍干結束：當凍干柜內溫度到達45℃且至少兩支產品溫度探頭超過40℃后，調整凍干柜內的真空度至1Pa并保持2h，結束凍干操作，打開柜門，出料。以上操作重復三個批次。經檢測，叔丁醇殘留量為1.2％、1.3％、1.15％，1,2-5,6二去水衛矛醇含量為96.4％、96.0％、96.8％。不同方法制備的去水衛矛醇凍干粉劑比較1、對實施例1-4、以及對比例1-2的去水衛矛醇冷凍干燥效果及熔點進行比較，結果見表1。表1：去水衛矛醇凍干粉的干燥情況比較樣品熔點在水中復溶性在無水乙醇中復溶性實施例1101.5±0.3℃溶解，澄清溶解，澄清實施例2101.5±0.5℃溶解，澄清溶解，澄清實施例3/溶解，澄清溶解，澄清對比例195.8±1.1℃微渾渾濁對比例298.5±1.1℃溶解，澄清溶解，澄清2、在溫度為40℃、濕度為75％下進行加速穩定性試驗，3個月后的檢測結果見表2。表2：去水衛矛醇凍干粉加速穩定試驗結果比較樣品熔點(℃)水中復溶性無水乙醇中復溶性實施例1101.5±0.5℃溶解，澄清溶解，澄清實施例2101.5±0.5℃溶解，澄清溶解，澄清實施例3/溶解，澄清溶解，澄清對比例185.8±1.1℃渾濁渾濁對比例297.5±1.1℃溶解，澄清溶解，澄清結論：從表1數據可以看出，利用本發明制備方法所得樣品的熔點高于對比例。加速穩定性試驗3個月后，表2結果顯示，加速試驗前后，本發明的樣品熔點幾乎沒有變化，證明其物質與剛制備出來時保持一致，質量穩定；而對比例1雖然使用了相同的凍干曲線，但使用水為溶劑，對比例2雖然均使用叔丁醇為溶劑，但未使用本發明限定的凍干曲線，溶劑殘留量遠高于實施例，樣品經加速試驗后，其熔點均有不同程度的變化，證明在保存過程中，樣品發生了本質的變化。由上述試驗可知，去水衛矛醇凍干粉是一種極不穩定的物質，雖然尚不清楚在生產或存放過程中，去水衛矛醇發生變化的細節以及最終形成的雜質是什么，但是發明人通過控制凍干過程，控制產品的熔點在99.5-103.5℃時，可以使產品保持質量穩定。雖然，上文中已經用一般性說明、具體實施方式及試驗，對本發明作了詳盡的描述， 但在本發明基礎上，可以對之作一些修改或改進，這對本領域技術人員而言是顯而易見的。因此，在不偏離本發明精神的基礎上所做的這些修改或改進，均屬于本發明要求保護的范圍。當前第1頁1 2 3