一種血小板衍生因子拮抗多肽及其應用
【專利說明】
[0001]技術領域:
本發明涉及藥物領域，具體涉及用于預防和治療肝癌的血小板衍生因子拮抗多肽。
[0002]【背景技術】:
肝癌即肝臟惡性腫瘤，是外科疾病中的常見病和多發病。由于肝臟是人體最大的實質性器官，承擔人體的各類重要代謝功能，因此，肝臟一旦出現惡性腫瘤將導致未及生命的嚴重后果。又由于肝臟具有豐富的血流供應，與人體的重要結構如下腔靜脈、門靜脈、膽道系統等關系密切；肝臟惡性腫瘤發病隱匿，侵襲性生長快速，其治療甚為困難。因此，需要早期發現、早期診斷、早期治療。目前認為其發病是多因素、多步驟的復雜過程，受環境和因此雙重因素影響。研宄認為，肝損傷引起的肝纖維化，導致肝硬化，最后發展為肝癌。在這一過程中，血小板衍生因子(PDGF)起著重要的作用。
[0003]PDGF是一種重要的促有絲分裂因子，具有刺激特定細胞群分裂增殖的能力。肝受損時，大量分泌的TOGF刺激間質星形細胞增殖，轉化為肌纖維樣母細胞，并促使星形細胞迀移，聚集于炎癥受損區。而肌纖維樣母細胞合成大量細胞外基質沉積于肝細胞胞間質，促進肝纖維化發生。TOGF能夠促進肌纖維母細胞產生膠原，尤其是I型及III型膠原，導致肝硬化。I3DGF還可通過上調組織金屬蛋白酶抑制劑(??ΜΡ-1)抑制膠原酶的作用，以減少細胞外基質的降解。因此，抑制TOGF，可以減少可以減少膠原的形成，促進膠原酶對膠原的降解，從而抑制肝損傷引起的肝纖維化及肝硬化，最終減少肝癌的發生。
[0004]目前，靶向TOGF的抑制劑已成為開發新興抗肝癌的研宄熱點。盡管如此，并沒有成熟開發的血小板衍生因子拮抗多肽問世，用于預防和治療肝癌。
[0005]
【發明內容】
:
本發明目的是針對設計一種血小板衍生因子拮抗多肽，可以用于預防和治療肝癌。
[0006]本發明技術方案是提供一種血小板衍生因子拮抗多肽，其序列為YCRCADQDTffLGHTRISETI，及在預防和治療肝癌藥物中的應用。
[0007]本發明的原理在于血小板衍生因子拮抗多肽與血小板衍生因子受體結合，抑制血小板衍生因子受體產生生理或病理的效應，抑制細胞內結構域酪氨酸殘基自身磷酸化，從而將信號傳入細胞內，調控細胞的生命活動，包括肝癌細胞的分裂增殖，從而起到治療肝癌的作用。
[0008]有益結果:
本發明中的血小板衍生因子拮抗多肽序列YCRCADQDTWLGHTRISETI，可以靶向抑制血小板衍生因子受體，抑制血小板衍生因子產生的生理或病理的效應，達到預防和治療肝癌的效果。
【具體實施方式】
[0009]實施例1
血小板衍生因子拮抗多肽對體外血小板衍生因子受體與血小板衍生因子親和力的影響。
[0010]將對數生長的H印G2細胞，以1.0X 15加入96孔培養板中，培養24h，實驗孔、陽性藥物對照孔分別加入不同濃度的實驗藥物血小板衍生因子拮抗多肽(上海生工合成)和陽性對照藥物長春新堿；空白組加入相同體積的溶劑，同時，加入125I標記的血小板衍生因子。每孔設五個復孔，培養48h。洗去上清液，用Y-液體閃爍計數器計算放射強度，判斷血小板衍生因子受體與血小板衍生因子的結合力，放射強度強度越強，結合越多，反之，放射強度強度越弱，結合越少。結果表明，隨血小板衍生因子拮抗多肽濃度增加，與血小板衍生因子結合逐漸增加，說明與血小板衍生因子結合能力隨藥物濃度的增加而不斷減少。
[0011]實施例2
血小板衍生因子拮抗多肽對體外培養腫瘤細胞的生長和存活IC50。
[0012]采用MTT比色法。將對數生長的H印G2細胞，以1.0X 15加入96孔培養板中，培養24h，實驗孔、陽性藥物對照孔分別加入不同濃度的實驗藥物血小板衍生因子拮抗多肽(上海生工合成)和陽性對照藥物長春新堿；空白組加入相同體積的溶劑。每孔設五個復孔，培養4811，分別在他、211、811、1411、2011、2411、3611、，4811每孔加入MTT，作用4h后，加入DMS0，孵育30min，在酶標儀620nm處測定吸光度A值，按公式腫瘤細胞生長抑制率=(1-實驗組吸光值/對照組吸光值)X 100%。計算出實驗藥物的IC50為35.01 μΜ。
[0013]實施例3
用腫瘤模型檢測血小板衍生因子拮抗多肽的體內活力。
[0014]建立HepG2腫瘤模型，陽性對照藥物長春新堿；空白組加入相同體積的溶劑，實驗組多肽(上海生工合成)設3個劑量:1.0、2.0、3.0μΜ /Kg0 21天后，觀察小鼠存活數量，計算存活率。結果顯示，血小板衍生因子拮抗多肽(上海生工合成)可有效地保護小白鼠，提高荷瘤小鼠的生存率，生存率達到53.2%。
【主權項】
1.血小板衍生因子拮抗多肽，其特征在于其序列YCRCADQDTWLGHTRISETI。
2.血小板衍生因子拮抗多肽在制備預防和治療肝癌藥物中的應用。
【專利摘要】本發明涉及藥物領域，具體涉及具有抑制血小板衍生因子受體，能治療肝癌的多肽。其序列為YCRCADQDTWLGHTRISETI是全新的序列，本發明的有益效益是可用于預防和治療肝癌，具有潛在的新藥開發價值。
【IPC分類】A61K38-10, A61P35-00, C07K7-08
【公開號】CN104725482
【申請號】CN201510157259
【發明人】羅瑞雪
【申請人】蘇州普羅達生物科技有限公司
【公開日】2015年6月24日
【申請日】2015年4月6日