一種從山橿中提取的化合物sj-15及其制備方法與應用
【技術領域】
[0001] 本發明涉及醫藥，特別是一種從山檯中提取的化合物SJ-15及其制備方法與應 用。
【背景技術】
[0002] 山楂系樟科（Lauraceae)山胡椒屬植物山楂（Lindera refIexa Hemsl.)的干燥 根，收載于《河南省中藥材標準》（1993年版），具有行氣止痛，健脾消積、活血消腫等功效。 根據文獻報道，山檯的主要化學成分有揮發油類、生物堿類、黃酮類等，隨著山檯藥用價值 的提高，對山檯活性成分的研宄也越來越多，但至今如何從山檯中提取新的化合物，從而開 拓出山檯藥材的新用途，是本領域技術人員所關心要解決的技術問題。
【發明內容】
[0003] 針對上述情況，為克服現有技術之缺陷，本發明之目的就是提供一種從山檯中提 取的化合物SJ-15及其制備方法與應用，可有效解決從山檯中提取新的化合物，開拓山檯 新的藥用價值的問題。
[0004] 本發明解決的技術方案是，針對山檯申請人對山檯的有效成分進行了深入系統的 研宄，包括溶劑提取，所得的揮發油部位、水部位、正丁醇部位、乙酸乙酯部位和石油醚部位 的提取物，進行了鎮痛、消炎、抗潰瘍等藥理活性篩選，對山檯活性部位化學成分的提取分 離之后發現的新化合物具有抑制腫瘤細胞A549 (人肺癌細胞），HCT-8 (回盲腸癌細胞）的 活性，從山檀中提取的新化合物命名為：4_羥基_3_[ (IR, 6R) -1-對薄荷條基]_6_(4_苯 基-2-乙酰氧基-丁基）-二氫-吡喃_2_酮，簡稱SJ-15,分子結構式為：
[0005]
【主權項】
1. 一種從山檯中提取的化合物SJ-15,該化合物為4-羥基-3-[ (IR, 6R)-1-對薄荷烯 基]-6-(4-苯基-2-乙酰氧基-丁基）-二氫-吡喃-2-酮，簡稱SJ-15,分子結構式為：
2. 權利要求1所述的從山檯中提取的化合物SJ-15的制備方法，其特征在于，由以下步 驟實現： (1) 制備山楂乙醇浸霄：取干山楂，研磨成過60-80目篩的山楂粉，山楂粉中加入質量 濃度為95%的乙醇，乙醇的加入量為山檯粉重量的10-12倍，在90-95°C水浴下回流提取 2-3個小時，過濾，得第一次濾液，得第一次濾液后的藥渣再加入質量濃度為95%的乙醇， 乙醇的加入量為山檯粉重量的8-10倍，在90-95°C水浴下回流提取2-3個小時，過濾，得第 二次濾液，得第二次濾液后的藥渣再加入質量濃度為95%的乙醇，乙醇的加入量為山檯粉 重量的6-8倍，在90-95°C水浴下回流提取2-3個小時，過濾，得第三次濾液，棄去藥渣；合 并三次濾液，置于旋轉蒸發器中，40-50°C旋轉蒸發除去乙醇，濃縮成相對密度1. 1-1. 4的 山檯乙醇浸膏； (2) 、制備山檯乙酸乙酯部位稠膏：取山檯乙醇浸膏620g，加水2000ml溶解，成水溶浸 膏液，將水溶浸膏液倒入分液漏斗中，然后加入石油醚l〇〇〇ml，在60-90°C震蕩10_20min， 靜置2h，分離出上層石油醚萃取液，下層的水溶浸膏液重新倒入分液漏斗中，按上述方法連 續萃取5次，合并5次上層石油醚萃取液，得山檯石油醚部位的總萃取液，得山檯石油醚部 位總萃取液后的水溶浸膏倒入分液漏斗中，加入乙酸乙酯1000ml，震蕩10-20min，靜置2h， 分離出上層石油醚萃取液，下層的水溶浸膏液重新倒入分液漏斗中，按上述方法連續萃取 10次，合并10次上層乙酸乙酯萃取液，得山檯乙酸乙酯部位的總萃取液，余下的水溶浸膏 液另用，將山檯乙酸乙酯部位的總萃取液置于旋轉蒸發器中，40-50°C旋轉蒸發除去乙酸乙 酯，得到相對密度為1. 1-1. 4的山檯乙酸乙酯部位稠膏； (3) 、制備山檯乙酸乙酯部位干膏：取山檯乙酸乙酯部位稠膏315g倒入蒸發皿中，將裝 有山檯乙酸乙酯部位稠膏的蒸發皿放置于水浴鍋上，60-70°C的水浴蒸干，放涼，得山檯乙 酸乙酯部位干膏； (4) 、干膏裝柱處理：在山檯乙酸乙酯部位干膏中加入等重量的甲醇，攪拌混均，然后再 加入與干膏等重量的硅膠，拌勻，置于水浴鍋上，80°C水浴揮干甲醇，得上柱用樣品，干法裝 柱，每530g上柱用樣品用硅膠1000g，以徑高比1 : 8將硅膠裝入硅膠柱中，在硅膠上方緩 緩加入已研細的上柱用樣品，再將脫脂棉塞到樣品上方，加入石油醚直至高于脫脂棉2-3cm 處，靜置30min，再用石油醚、氯仿組成的混合液進行洗脫，每530g樣品用混合液1500ml，石 油醚與氯仿的體積比為I : 3,洗脫后所得的洗脫液置于旋轉蒸發器中，40-50°C旋轉蒸發 除去石油醚、氯仿，濃縮成相對密度1. 1-1. 4的洗脫液浸膏，將洗脫液浸膏倒入蒸發皿中放 置于水浴鍋上，以60°C水浴進一步揮干石油醚、氯仿，得洗脫后的第一次干膏； (5) 、對第一干膏純化：干膏中加入等重量的甲醇，攪拌混均，然后再加入與干膏等重量 的硅膠，拌勻，置于水浴鍋上，80°C水浴揮干甲醇，得上柱用樣品，干法裝柱，按照干膏與硅 膠重量比1:2加入硅膠拌勻，以徑高比1 : 8將硅膠裝入硅膠柱中，在硅膠上方緩緩加入已 研細的上柱用樣品，再將脫脂棉塞到樣品上方，加入石油醚直至高于脫脂棉2-3cm處，靜置 3〇min，再用石油醚、氯仿組成的混合液進行洗脫，石油醚與氯仿的體積比為1 : 10,加入混 合液1000-1500ml，洗脫后所得的洗脫液置于旋轉蒸發器中，40-50°C旋轉蒸發除去石油醚、 氯仿，濃縮成相對密度1. 1-1. 4的洗脫液浸膏，將洗脫液浸膏倒入蒸發皿中放置于水浴鍋 上，以60°C水浴進一步揮干石油醚、氯仿，得洗脫后的第一次干膏； (6) 、制備第二次干膏：第一次干膏中加入等重量的甲醇，攪拌混均，然后再加入與干 膏等重量的Pharmadex LH-20,拌勻，置于水浴鍋上，80°C水浴揮干甲醇，得上柱用樣品， 干法裝柱，按照干膏與Pharmadex LH-20重量比1:2加入Pharmadex LH-20拌勾，以徑高 比1 : 8將Pharmadex LH-20裝入柱中，在Pharmadex LH-20上方緩緩加入已研細的上柱 用樣品，再將脫脂棉塞到樣品上方，加入石油醚直至高于脫脂棉2-3cm處，靜置30min，再 用石油醚乙酸乙酯組成的混合液進行洗脫，石油醚與氯仿的體積比為10 : 1，加入混合液 1000-1500ml，洗脫后所得的洗脫液置于旋轉蒸發器中，40-50°C旋轉蒸發除去石油醚、乙酸 乙酯，濃縮成相對密度1. 1-1. 4的洗脫液浸膏，將洗脫液浸膏倒入蒸發皿中放置于水浴鍋 上，以60°C水浴進一步揮干石油醚、乙酸乙酯，得洗脫后的第二次干膏； (7) 、制備新化合物：第二次干膏中加入等重量的甲醇，攪拌混均，然后再加入與干膏等 重量的ToyopearI HW-40，拌勻，置于水浴鍋上，80°C水浴揮干甲醇，得上柱用樣品，干法裝 柱，按照干膏與Toyopearl HW-40重量比1:2加入Toyopearl HW-40拌勾，以徑高比1 : 8 將Toyopearl HW-40裝入柱中，在Toyopearl HW-40上方緩緩加入已研細的上柱用樣品，再 將脫脂棉塞到樣品上方，加入石油醚直至高于脫脂棉2-3cm處，靜置30min，再用石油醚乙 酸乙酯組成的混合液進行洗脫，用體積比為1 : 1石油醚與乙酸乙酯混合制成的混合液作 為沖洗液對第二次干膏進行沖洗，加入混合液1000-1500ml，收集沖洗液，將得到的沖洗液 置于旋轉蒸發器中，40-50°C旋轉蒸發除去石油醚及乙酸乙酯，再置于水浴鍋上，以60°C水 浴揮干，即得新化合物4-羥基-3- [ (IR, 6R) -1-對薄荷烯基]-6- (4-苯基-2-乙酰氧基-丁 基）_二氫-吡喃-2-酮，簡稱SJ-15。
3.權利要求1所述的化合物4-羥基-3- [ (IR, 6R) -1-對薄荷烯基]-6- (4-苯基-2-乙 酰氧基-丁基）_二氫-吡喃-2-酮在制備治療腫瘤藥物中的應用。
【專利摘要】本發明涉及從山橿中提取的化合物SJ-15及其制備方法與應用，有效解決從山橿中提取新的化合物的問題，方法是，干山橿粉碎，用乙醇進行水浴回流提取，提取液濃縮成山橿乙醇浸膏；將山橿乙醇浸膏加水溶解，再分別用石油醚、乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯萃取液濃縮成山橿乙酸乙酯部位稠膏；水浴蒸干，放涼，將干膏裝硅膠柱，用石油醚與氯仿的混合液洗脫，洗脫液蒸發至干，再反復上硅膠柱純化，濃縮干燥，然后再裝柱上樣，用石油醚與乙酸乙酯混合制成的混合液進行沖洗，收集沖洗液，水浴揮干，即得新化合物，發明具有抑制腫瘤細胞的活性，有效用于制備治療腫瘤藥物，開拓了山橿的藥用價值新用途。
【IPC分類】A61P35-00, C07D309-38
【公開號】CN104744417
【申請號】CN201510080457
【發明人】陳隨清, 王利麗, 魏雅磊, 王三姓, 孫孝亞
【申請人】河南中醫學院
【公開日】2015年7月1日
【申請日】2015年2月13日