一種用于緩解戊唑醇種衣劑藥害的微生物菌株、細菌制備物及應用
【技術領域】
[0001] 本發明設及微生物技術領域，具體設及一種用于緩解戊挫醇種衣劑藥害的微生物 菌株、細菌制備物及應用。
【背景技術】
[0002] 玉米是我國重要的農作物，在國民經濟發展進程中具有重要地位。種衣劑在防治 玉米病蟲害方面起著重要的作用，且又可促進作物生長，增產，具有顯著的經濟和生態效 益。目前玉米種衣劑的主要成分為殺蟲劑（例如：化蟲嘟、毒死婢、辛硫憐等）和殺菌劑（例 如：福美雙、Ξ挫類、咯菌臘等）。上述的殺蟲劑和殺菌劑能起到較好的防治病蟲害的作用， 但作為化學農藥，其對種子的藥害不容忽視，如Ξ挫類殺菌劑會不同程度抑制玉米的發芽 和生長，尤其是戊挫醇種衣劑包衣玉米種子，春耕后，若發生倒春寒，戊挫醇的藥害發生率 很高，對春耕生產造成嚴重影響。因此，種衣劑的副作用嚴重制約著玉米種衣劑產業的健康 穩定發展，W及現有種衣劑在生產中的推廣應用。
[0003] 鑒于此，克服W上現有技術中的缺陷，提供一種緩解戊挫醇種衣劑對玉米等農作 物的藥害的制劑或方法成為本領域亟待解決的技術問題。
【發明內容】
[0004] 本發明的目的在于針對現有技術的上述缺陷，提供一種用于緩解戊挫醇種衣劑藥 害的微生物菌株。
[0005] 本發明的目的可通過W下的技術措施來實現：
[0006] -種用于緩解戊挫醇種衣劑藥害的微生物菌株，所述菌株為娃酸鹽細菌 度acillusmucilaginosus)SY-FX-77菌株，所述菌株的保藏號為CCTCCΜ2015434,保藏單 位：中國典型培養物保藏中屯、，保藏日期：2015年7月6日。
[0007] 進一步地，所述菌株的leSrRNA基因序列為沈QIDNo.1。
[0008] 本發明還提供了一種細菌制備物，所述細菌制備物為保藏號為CCTCCΜ2015434 的菌株的純培養物或培養物濃縮物或細菌懸液或發酵液。
[0009] 優選地，所述細菌制備物為保藏號為CCTCCΜ2015434的菌株在發酵培養液中經 過發酵培養形成的發酵液。
[0010] 優選地，所述發酵培養液的組成為：薦糖5g，胞2冊〇42g，Μ拆〇4· 7&0 0. 5g，化CI3 0. 005g，CaC〇30.Ig，侶上礦 0. 5g，水 1000ml。
[0011] 優選地，所述發酵培養液的組成為：膜蛋白腺lOg，酵母提取物5g，氯化鋼lOg，水 1000血。
[0012] 優選地，所述細菌制備物是經冷凍干燥的制備物。
[0013] 本發明還提供了上述的菌株在制備緩解戊挫醇種衣劑藥害的制劑中的應用。
[0014] 本發明還提供了上述的細菌制備物在制備緩解戊挫醇種衣劑藥害的制劑中的應 用。
[001引本發明的微生物菌株為娃酸鹽細菌度acillus mucilaginosus)，本發明的細菌制 備物能夠提高農作物種子活力，在一定程度上消除或減輕戊挫醇種衣劑對農作物種子的化 學農藥藥害，在種衣劑產業中具有一定的應用潛力。
【具體實施方式】
[0016] 為了使本發明的目的、技術方案及優點更加清楚明白，下面結合具體實施例對本 發明作進一步詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用W解釋本發明，并不用 于限定本發明。
[0017] 術語"發酵培養液"是指液體培養基；術語"發酵液"是指菌株在液體培養基中發 酵培養一段時間后所形成的液體（包括了培養液）；術語"細菌懸液"是發酵液經過離屯、處 理后收集沉淀（菌株培養物或菌體），將沉淀溶于水或緩沖液中，經過震蕩或吹打使得沉淀 狀的菌株培養物懸浮起來所形成的均一的懸濁液。
[0018] 本實施例提供了一種用于緩解戊挫醇種衣劑藥害的微生物菌株，所述菌株為 娃酸鹽細菌度acillus mucilaginosus)SY-FX-77菌株，所述菌株的保藏號為CCTCC Μ 2015434,保藏單位：中國典型培養物保藏中屯、，保藏日期：2015年7月6日。
[0019] 進一步地，所述菌株鑒定特征如下：（1)在娃酸鹽細菌培養基生長，半粒玻璃球 狀，凸起，無色透明，5-6天后中部有渾濁點，邊緣透明，表面光滑，粘稠，彈性大，可拉成絲 狀。（2)在LB培養基生長，菌體呈乳白色，圓形不透明菌落，菌落表面及邊緣光滑，無凸起。
[0020] 進一步地，所述菌株的leSrRNA基因序列為SEQIDNo. 1。根據測序結果與 Genbank中16SrRNA基因序列進行同源性比較，結果表明SY-FX-77菌株屬于娃酸鹽細菌 度acillusmucilaginosus)。
[0021] 本發明提供的細菌制備物為上述菌株的純培養物或培養物濃縮物或發酵液，可W 是上述菌株在固體培養基表面形成純培養物，例如：平板固體培養基或斜面固體培養基上 形成的菌落，也可W是上述菌株在液體培養基（發酵培養液）中發酵培養后經過離屯、分離 所得的細菌懸液，還可W是上述菌株在液體培養基（發酵培養液）中生長發酵形成的發酵 液。
[0022] 具體地，本發明所提供的娃酸鹽細菌SY-FX-77的培養方法包括：將所述娃酸鹽 細菌于保藏培養基中，在30-37°C活化12-24h;活化后菌株于種子培養基中，于30-37°C， 100-15化/min培養1-2天，作為種子液；將所得種子液W4-8% (v/v)接種比例接種于發酵 培養基中，在30-37°C下，100-150r/min振蕩培養12-3化。
[0023] 所述分離培養基、保藏培養基和種子培養基為同一種（娃酸鹽細菌培養基）：薦糖 5邑，胞2冊〇42g，Μ拆〇4· 7&0 0. 5g，FeCls 0. 005g，CaC〇30. 1邑，侶±礦0. 5g，水1000ml，pH 7. 0-7. 5。
[0024] 本發明的實施例中，優選WLB培養基作為發酵培養基，也可WW保藏培養基或其 他能夠適合該菌株生長的培養基作為發酵培養基，所述發酵培養基（LB培養基）：膜蛋白腺 lOg/l，酵母提取物 5g/l，氯化鋼lOg/l，水 1000血，pH7. 0-7. 5。
[00巧]W上述發酵培養基培養娃酸鹽細菌度acillus mucilaginosus) SY-FX-77獲得發 酵液，該發酵液能有效減輕戊挫醇種衣劑包衣玉米帶來的低溫藥害問題，有效減輕藥害引 起的玉米種子發芽率低、根長和芽長生長受抑制的狀況，能提高包衣玉米種子發芽率，促 進根伸長。關于娃酸鹽細菌在種衣劑解藥害方面的應用還未見文獻報道。
[0026] 實施例1
[0027]蔭株SY-FX-77的分離
[0028] 取石油污染±壤lOg，加入內裝100血無菌水和玻璃珠的Ξ角瓶中，于12化/min搖 床上振蕩30min，振蕩結束后靜置比，取上清0. 5