一種新型細胞培養板的制作方法
【專利摘要】本實用新型的一種新型細胞培養板，包括培養板和上蓋，所述培養板內通過隔板隔成有若干底端封閉且上端敞開的培養孔，所述培養孔的縱剖面為上窄下寬的梯形，培養板側壁與其相鄰的隔板之間形成邊槽，所述邊槽的縱剖面為下窄上寬的梯形，所述上蓋設有至少一個通透孔，上蓋底部與培養板頂部之間覆蓋有可保濕且二氧化碳通透率高的薄膜。本實用新型的有益效果是：采用培養板的邊槽灌注細胞培養培養基，邊槽代替了目前傳統培養基的邊緣培養孔，邊緣效應的影響因素作用于邊槽，對邊槽內側的培養孔的影響減弱，從而降低了邊緣效應。
【專利說明】
一種新型細胞培養板
技術領域
[0001]本實用新型涉及一種屬于生物學細胞培養領域，具體涉及一種新型細胞培養板。
【背景技術】
[0002]細胞培養，將活細胞，常常是分散的活細胞，在體外進行培養。基因工程技術、細胞工程技術、酶工程技術和發酵工程技術，而這些現代生物技術的發展幾乎都離不開細胞培養。在醫藥領域、腫瘤研究領域，細胞培養更具有特殊的作用和價值。細胞培養是所有生物技術具有核心作用的技術之一，幾乎所有生物技術研究要用到細胞培養。
[0003]在生物技術研究中培養細胞使用的多是細胞培養板。使用細胞培養板進行細胞培養，經常會發生邊緣效應。邊緣效應是指在使用多孔板的細胞培養中，周邊孔中的細胞會集中在孔的外側，即外周孔細胞呈典型的月牙狀生長，這種現象在實驗中常用的96孔板、384孔板中十分明顯。由于大多細胞的生長會受周圍接觸細胞的抑制，所以邊緣效應導致邊緣孔內細胞平均生長速度要比其他孔來得慢，從而在實驗過程中引入系統誤差。在很多大規模藥物篩選實驗中，人們常常棄去周圍孔的實驗結果;或者細胞培養板外周一圈孔空著;或者額外在外周孔內添加培養基，以保證其他孔中細胞生長的均一性。而邊緣孔的數量占到總數的1/3，這樣浪費了培養板1/3的孔，從而間接增加使用成本，以及培養箱空間和實驗時間的浪費。形成邊緣效應的原因，目前有兩種的觀點:溫度效應和蒸發效應。
[0004]溫度效應，當鋪好的細胞培養板由室溫轉移到37°C培養箱時，由于周邊孔導熱不均勻，周邊孔中的細胞更傾向于聚集到相對溫暖的邊緣地帶。結果就是細胞分布不均。由于細胞密度不僅影響細胞生長速率，還會影響細胞代謝和細胞分化。造成一邊細胞過于擁擠增殖受阻，另一邊卻幾乎沒有細胞，最終必然是長勢不及中間孔。
[0005]根據溫度效應解決邊緣效應的方法是，在培養板內分入細胞后，在室溫下放置1-2個小時，讓細胞在沒有溫度差的情況下沉降，然后再轉移到37°C培養箱內，該方法至少適合CHO等在室溫下能貼壁的細胞;該方法的缺陷是對于脆弱的細胞外界環境溫度降低會導致細胞應激反應產生，從而改變細胞的性狀，尤其是原代培養的細胞更加不能承受如此苛刻的生存條件，因此會發生細胞生長狀態不佳、細胞凋亡甚至死亡。
[0006]蒸發效應，由于邊緣孔的濕度較中間孔更低，水分蒸發的現象就更嚴重，由于水分蒸發四周培養基的體積會明顯少于中間孔，而四個角落的孔尤為嚴重。特別在長時間培養時顯現的尤為突出。因而影響邊緣孔中細胞的生長。根據蒸發效應解決邊緣效應的方法是采用少開培養箱從而保持培養箱中的濕度等辦法來減輕，或培養箱內放置盛水的培養皿增加濕度，但不是解決蒸發效應的根本方法。
【發明內容】
[0007]為解決以上技術上的不足，本實用新型提供了一種細胞培養效果好的新型細胞培養板。
[0008]本實用新型是通過以下措施實現的:
[0009]本實用新型的一種新型細胞培養板，包括培養板和上蓋，所述培養板內通過隔板隔成有若干底端封閉且上端敞開的培養孔，所述培養孔的縱剖面為上窄下寬的梯形，培養板側壁與其相鄰的隔板之間形成邊槽，所述邊槽的縱剖面為下窄上寬的梯形，所述上蓋設有至少一個通透孔，上蓋底部與培養板頂部之間覆蓋有可保濕且二氧化碳通透率高的薄膜。
[0010]上述上蓋底部邊緣設置有與培養板頂部邊緣相配合的卡槽。
[0011]上述上蓋上的通透孔總面積大于上蓋面積的二分之一。
[0012]上述薄膜為PTFE封口膜或PE、PVDC保鮮膜。
[0013]本實用新型的有益效果是:1.采用培養板的邊槽灌注細胞培養培養基，邊槽代替了目前傳統培養基的邊緣培養孔，邊緣效應的影響因素作用于邊槽，對邊槽內側的培養孔的影響減弱，從而降低了邊緣效應。
[0014]2.采用培養板的邊槽灌注細胞培養培養基，有利于增加培養板的濕度，減弱了蒸發效應帶來的邊緣效應。
[0015]3.邊槽增加了培養基蒸發的面積，有利于增加濕度度，減弱了蒸發效應帶來的邊緣效應，灌注培養基后，相當于增加了培養板邊沿的厚度，同時水的比熱大，溫度變化比培養板更趨于平穩，不像傳統的細胞培養板邊緣溫度變化快，減少了溫度效應帶來的邊緣效應。
[0016]4.培養孔底部接觸培養箱空氣面積大，更有利于所有培養孔均勻發生溫度變化，減少了溫度效應帶來的邊緣效應;減少了蒸發面積，減弱了蒸發效應帶來的邊緣效應;減少和外界空氣接觸面積，減少了污染的幾率。
[0017]5.上蓋具有通透孔，同時覆蓋保濕并且二氧化碳通透率高的薄膜，可以保持培養板內小環境的濕度，減弱了蒸發效應帶來的邊緣效應。同時通透二氧化碳，有利于細胞的正常生長。
[0018]6.上蓋邊緣具有卡槽，加上蓋后，培養板內部空間可以保持良好的封閉性，有利于保持培養板內小環境的濕度，減弱了蒸發效應帶來的邊緣效應。
【附圖說明】
[0019]圖1為本實用新型的縱剖面圖。
[0020]其中，I培養板，2邊槽，3隔板，4上蓋，5通透孔，6培養孔，7薄膜，8卡槽。
【具體實施方式】
[0021]下面結合附圖對本實用新型做進一步詳細的描述:
[0022]如圖1所示，本實用新型的一種新型細胞培養板，包括培養板I和上蓋4，培養板I內通過隔板3隔成有若干底端封閉且上端敞開的培養孔6，培養孔6的縱剖面為上窄下寬的梯形，培養板I側壁與其相鄰的隔板3之間形成邊槽2，邊槽2的縱剖面為下窄上寬的梯形，上蓋4設有至少一個通透孔5，上蓋4底部與培養板I頂部之間覆蓋有可保濕且二氧化碳通透率高的薄膜7。上蓋4底部邊緣設置有與培養板I頂部邊緣相配合的卡槽8。上蓋4上的通透孔5總面積大于上蓋4面積的二分之一。薄膜7為PTFE封口膜或PE、PVDC保鮮膜。
[0023]使用本實用新型細胞培養板時，先在邊槽2灌注培養基，然后按照常規流程操作鋪細胞。在上蓋4內部覆蓋保濕并且二氧化碳通透的無菌PTFE封口膜，然后將上蓋4蓋在培養板I上，注意使培養板I的外側邊沿進入上蓋4的卡槽8內，使培養板I密封，放置水分蒸發。
[0024]由于培養孔6邊沿高度小于邊槽2外側邊沿，蓋上上蓋4后，培養板I內部上空水分、二氧化碳可以互通，保持一致的濕潤的內部小環境。并且邊槽2的設計可以減弱溫度效應、蒸發效應帶來的邊緣效應，培養孔6的設計也可以減弱溫度效應、蒸發效應帶來的邊緣效應。本新型細胞培養板I的設計能夠很好地減少溫度效應、蒸發效應帶來的邊緣效應，大大提高細胞培養的效果，提高實驗的一致性、精確性。
[0025]以上所述僅是本專利的優選實施方式，應當指出，對于本技術領域的普通技術人員來說，在不脫離本專利技術原理的前提下，還可以做出若干改進和替換，這些改進和替換也應視為本專利的保護范圍。
【主權項】
1.一種新型細胞培養板，包括培養板和上蓋，其特征在于:所述培養板內通過隔板隔成有若干底端封閉且上端敞開的培養孔，所述培養孔的縱剖面為上窄下寬的梯形，培養板側壁與其相鄰的隔板之間形成邊槽，所述邊槽的縱剖面為下窄上寬的梯形，所述上蓋設有至少一個通透孔，上蓋底部與培養板頂部之間覆蓋有可保濕且二氧化碳通透率高的薄膜。2.根據權利要求1所述新型細胞培養板，其特征在于:所述上蓋底部邊緣設置有與培養板頂部邊緣相配合的卡槽。3.根據權利要求1所述新型細胞培養板，其特征在于:所述上蓋上的通透孔總面積大于上蓋面積的二分之一。4.根據權利要求1所述新型細胞培養板，其特征在于:所述薄膜為PTFE封口膜或PE、PVDC保鮮膜。
【文檔編號】C12M1/00GK205676455SQ201620560938
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年6月13日 公開號201620560938.3, CN 201620560938, CN 205676455 U, CN 205676455U, CN-U-205676455, CN201620560938, CN201620560938.3, CN205676455 U, CN205676455U
【發明人】劉志方, 楊豐華, 鄒水燕, 孔葉
【申請人】山東大學