羅丹明6g酰肼衍生物、其制備方法、應用及作為熒光探針對次氯酸進行熒光分析的方法
【專利摘要】本發明公開了一種羅丹明6G酰肼衍生物、其制備方法、應用及作為熒光探針對次氯酸進行熒光分析的方法，該羅丹明6G酰肼衍生物可選擇性地與次氯酸發生反應，快速產生明顯的熒光增強效應。本發明可以在水中和細胞內實現對微量次氯酸的高靈敏性和高選擇性的定量檢測，在環境和生物等領域有廣泛的應用前景。
【專利說明】羅丹明6G酰肼衍生物、其制備方法、應用及作為熒光探針對次氯酸進行熒光分析的方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種檢測次氯酸的衍生物、其制備方法、應用及檢測方法，具體涉及一種羅丹明6G酰肼衍生物、其制備方法、應用及作為熒光探針對次氯酸進行熒光分析的方法。
【背景技術】
[0002]次氯酸(HOCl)是一種強氧化劑，能夠在環境水處理過程中和活性生物體內起到抗菌作用。在日常生活中，次氯酸因為殺菌效果好、價格低廉和使用方便，已被廣泛地用作自來水消毒劑。但是高濃度的次氯酸溶液刺激性強，傷害呼吸系統，易與水中有機物反應生成氯仿、四氯化碳等嚴重致癌物質，對人類的健康存在著潛在的危害。在生物體內，次氯酸是一類重要的活性氧物種(ROS)，在許多具有重要生理學和生物學意義的過程中起著關鍵性的作用。但是過量次氯酸的形成會誘發組織損傷，引起動脈硬化、關節炎甚至癌癥等系列疾病的產生。因此，發展具有高靈敏性和高選擇性的分析試劑和檢測方法，用于環境和生物體內次氯酸的檢測，具有十分重要的應用價值。
[0003]目前，檢測次氯酸的方法主要有硫代硫酸鈉滴定法(HG/T2498-93)、鄰聯甲苯胺比色法(GB5750-85)和四甲基聯苯胺(TMB)比色法等。這些試劑選擇性差，易受干擾，在應用方面有很大限制。另外，近年來發展的若干有機熒光探針對次氯酸檢測顯示出較好的靈敏性、選擇性和生物相容性(Org.Lett.2013，15:878-881 ；J.Am.Chem.Soc.2012，134:1200-1211 ；Chem.Eur.J.2012，18:2700-2706 ；J.Am.Chem.Soc.2011，133:5680-5682 ；Chem.Commun.2011,47:12691-12693)。但是，這些試劑的合成過程工序繁瑣、技術復雜，制約了它們在環境分析和生物分析中的實際應用。
【發明內容】
`
[0004]本發明的目的在于克服上述現有技術的缺點，提供了一種羅丹明6G酰肼衍生物、其制備方法、應用及作為熒光探針對次氯酸進行熒光分析的方法，該羅丹明6G酰肼衍生物可以有效對次氯酸進行檢測。
[0005]為達到上述目的，本發明所述的羅丹明6G酰肼衍生物的化學結構為
【權利要求】
1.一種羅丹明6G酰肼衍生物，其特征在于，所述羅丹明6G酰肼衍生物的化學結構為
2.一種羅丹明6G酰肼衍生物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟: 1)稱取一定量的羅丹明6G、乙醇以及質量濃度為80%的肼一水化合物，并將羅丹明6G溶解于乙醇中，再逐滴加入肼一水化合物，然后經回流及過濾后得沉淀，洗滌及干燥后，得粉紅色固體的羅丹明6G酰肼，其中羅丹明6G、乙醇及肼一水化合物的比例為l.0g: 20-30mL: 2_4mL ； 2)稱取一定量的1-萘甲酰氯及乙腈，然后將1-萘甲酰氯溶解到乙腈中，得1-萘甲酰氯的乙腈溶液，其中1-萘甲酰氯的乙腈溶液中1-萘甲酰氯與乙腈的比例為76-115 μ L: 10-15mL ； 3)稱取一定量的羅丹明6G酰肼及乙腈，然后將羅丹明6G酰肼溶解到乙腈中，得羅丹明6G酰肼的乙腈溶液，其中羅丹明6G酰肼的乙腈溶液中羅丹明6G酰肼與乙腈的比例為0.21g: 15-25mL ； 4)將步驟2)得到的1-萘甲酰氯的乙腈溶液逐滴加入到步驟3)得到的羅丹明6G酰肼的乙腈溶液中，其中羅丹明6G酰肼與1-萘甲酰氯的物質的量的比為1: 1-1.5，并在溫度為40-60°C的條件下攪拌反應，然后冷卻至室溫，并去除溶劑，再經柱層析洗脫后得粉紅色固體的羅丹明6G酰肼衍生物。
3.根據權利要求2所述的羅丹明6G酰肼衍生物的制備方法，其特征在于， 步驟I)回流時間為2-4h ； 步驟4)攪拌時間為4-8h ； 步驟4)柱層析洗脫的具體過程為以沸點為60-90°C的石油醚及乙酸乙酯的混合物為洗脫劑進行洗脫，其中石油醚與乙酸乙酯的體積比為5: 1-3: 2。
4.如權利要求1所述的羅丹明6G酰肼衍生物作為對次氯酸進行熒光分析的熒光探針的應用。
5.一種羅丹明6G酰肼衍生物作為熒光探針對次氯酸進行熒光分析的方法，基于權利要求I所述的羅丹明6G酰肼衍生物，其特征在于，包括以下步驟: 1)稱取一定量的羅丹明6G酰肼衍生物及乙醇，然后將羅丹明6G酰肼衍生物溶解到乙醇中，得羅丹明6G酰肼衍生物的乙醇溶液，其中羅丹明6G酰肼衍生物的乙醇溶液中羅丹明6G酰肼衍生物的溶度為0.1-1.0mM ； 2)將相同體積的N份步驟I)得到的羅丹明6G酰肼衍生物的乙醇溶液分別放置于N個離心管中，然后給N個離心管中分別加入N組不同體積的次氯酸鈉標準溶液，再通過磷酸鹽緩沖溶液定容，得N組混合溶液，其中，N組混合溶液中羅丹明6G酰肼衍生物的濃度均為10-50μΜ，N組混合溶液中羅丹明6G酰肼衍生物與次氯酸的物質的量的比均為I: 0.05-3.5，N為正整數，然后再將得到的N組混合溶液放置到室溫環境中，待其反應完成后，將N組反應完成后的混合溶液分別放置到石英比色皿中，設置激發和發射狹縫寬度為2.5-5.0nm，光電倍增管電壓為700V，用480-5IOnm范圍的波長激發，測得N組熒光發射光譜，然后再根據測得的N組熒光發射光譜對次氯酸進行熒光分析。
6.根據權利要求5所述的羅丹明6G酰肼衍生物作為熒光探針對次氯酸進行熒光分析的方法，其特征在于， 步驟2)磷酸鹽緩沖溶液的濃度為lO-lOOmM，pH值為7.0-7.4 ； 步驟2)室溫反應時間為2-10min。`
【文檔編號】C09K11/06GK103880853SQ201410090201
【公開日】2014年6月25日 申請日期:2014年3月12日 優先權日:2014年3月12日
【發明者】張禎, 鄧成權, 孟列素, 顏曉梅 申請人:西安交通大學