專利名稱：：甘油磷酸鈉中游離磷酸鹽的檢測方法
技術領域：
：本發明涉及甘油磷酸鈉中游離磷酸鹽的檢測方法，屬于化藥領域。
背景技術：
：甘油磷酸鈉作為營養藥，是α-甘油磷酸鈉與β-甘油磷酸鈉的混合物。其中，β-甘油磷酸鈉是藥效部分，而α-甘油磷酸鈉并不具備藥物活性，目前現有合成工藝生產的β-甘油磷酸鈉含量較低。甘油磷酸鈉制備過程及成品需要檢測游離磷酸鹽，目前現有技術中沒有簡單有效的方法
發明內容本發明目的在于提供一種甘油磷酸鈉中游離磷酸鹽的檢測方法。本發明所述甘油磷酸鈉中游離磷酸鹽的檢測方法為采用紫外-可見分光光度法測定，波長范圍為700-715nm；供試品溶液制備方法為甘油磷酸鈉水溶液先后加入鉬酸銨溶液與氯化亞錫溶液，搖勻，放置5分鐘以上；對照品溶液制備方法為磷酸鹽標準溶液先后加入鉬酸銨溶液與氯化亞錫溶液，搖勻，放置5分鐘以上；其中鉬酸銨溶液為鉬酸銨水溶液與硫酸水溶液的混合液，鉬酸銨與硫酸摩爾比為1140-160，優選為1150；氯化亞錫溶液為氯化亞錫溶液的鹽酸水溶液，氯化亞錫與鹽酸的摩爾比為17-12，優選為110;所述磷酸鹽標準溶液中磷酸鹽為4X10_5-6X10_5摩爾/升；優選5.26XΙΟ"5摩爾/升。甘油磷酸鈉中游離磷酸鹽的檢測方法包括如下步驟供試品溶液取甘油磷酸鈉0.5-1.5g，精密稱定，置IOOml容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，精密吸取5-15ml至IOOml容量瓶中，加水40_60ml，搖勻，加鉬酸銨溶液2_6ml搖勻，加氯化亞錫溶液0.05-0.15ml，搖勻，加水稀釋至刻度，搖勻，放置5_20分鐘；對照品溶液取磷酸鹽標準溶液10-30ml至IOOml容量瓶中，加水40_60ml，搖勻，加鉬酸銨溶液2-6ml，搖勻，加氯化亞錫溶液0.05-0.15ml，搖勻，加水稀釋至刻度，搖勻，放置5-20分鐘；空白溶液取IOOml容量瓶，加水40-60ml，加鉬酸銨溶液2_6ml，搖勻，加氯化亞錫溶液0.05-0.15ml，搖勻，加水至刻度，搖勻，放置5-20分鐘；測定法照紫外_可見分光光度法，在707nm的波長處測定吸光度，計算，即得；所述供試品溶液中鉬酸銨溶液的制備方法為取鉬酸銨l_4g，加水10_30ml，加熱溶解，取硫酸20-40ml用40-60ml水稀釋放冷，混合兩液，并用水稀釋成IOOml；所述供試品溶液中氯化亞錫溶液的制備方法為取氯化亞錫2_4g，加鹽酸0.5-1.5ml溶解，加水至5-15ml，量取0.5-1.5ml加l_3mol/L鹽酸溶液5_15ml，混合，即得；所述對照品溶液中磷酸鹽標準溶液的制備方法為精密稱取磷酸二氫鉀0.4-1.Og至1000ml容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取0.5-1.5ml至IOOml容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，即得。上述游離磷酸鹽的檢測方法優選為供試品溶液取甘油磷酸鈉1.00g，精密稱定，置IOOml容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，精密吸取IOml至IOOml容量瓶中，加水50ml，搖勻，加鉬酸銨溶液4ml搖勻，加氯化亞錫溶液0.1ml，搖勻，加水稀釋至刻度，搖勻，放置10分鐘；對照品溶液精密量取磷酸鹽標準溶液20ml或適量至IOOml容量瓶中，加水50ml，搖勻，加鉬酸銨溶液4ml，搖勻，加氯化亞錫溶液0.Iml，搖勻，加水稀釋至刻度，搖勻，放置10分鐘；空白溶液取IOOml容量瓶，加水50ml，加鉬酸銨溶液4ml，搖勻，加氯化亞錫溶液0.1ml，搖勻，加水至刻度，搖勻，放置10分鐘；測定法照紫外_可見分光光度法，在707nm的波長處測定吸光度，計算，即得；所述供試品溶液中鉬酸銨溶液的制備方法為取鉬酸銨2.5g，加水20ml，加熱溶解，取硫酸28ml用50ml水稀釋放冷，混合兩液，并用水稀釋成IOOml；所述供試品溶液中氯化亞錫溶液的制備方法為取氯化亞錫3.3g，加鹽酸Iml溶解，加水至10ml，量取Iml加2mol/L鹽酸溶液9ml，混合，即得；所述對照品溶液中磷酸鹽標準溶液的制備方法為精密稱取磷酸二氫鉀0.716g至IOOOml容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取1.Oml至IOOml容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，即得。本發明提供的檢測方法，具有精度高、重復性好、易操作、抗干擾的特點。具體實施例方式實施例1游離磷酸鹽的檢測方法供試品溶液精密稱取甘油磷酸鈉1.OOg至IOOml容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，精密吸取IOml至IOOml容量瓶中，加水50ml，搖勻，加鉬酸銨溶液(取鉬酸銨2.5g，力口水20ml，加熱溶解，取硫酸28ml用50ml水稀釋，放冷，混合兩液，并用水稀釋成100ml)4ml,搖勻，加氯化亞錫溶液(取氯化亞錫3.3g，加鹽酸Iml溶解，加水至10ml，量取Iml加2mol/L鹽酸溶液9ml，混合，即得。)0.1ml，搖勻，加水稀釋至刻度，搖勻，放置10分鐘。對照品溶液精密量取磷酸鹽標準溶液(精密稱取磷酸二氫鉀0.716g至IOOOml容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取1.Oml至IOOml容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，即得)20ml或適量至IOOml容量瓶中，加水50ml，搖勻，加鉬酸銨溶液4ml，搖勻，加氯化亞錫溶液0.1ml，搖勻，加水稀釋至刻度，搖勻，放置10分鐘。空白溶液取IOOml容量瓶，加水50ml，加鉬酸銨溶液4ml，搖勻，加氯化亞錫溶液0.1ml，搖勻，加水至刻度，搖勻，放置10分鐘。測定法照紫外-可見分光光度法(中國藥典2005年版附錄IVA)，在707nm的波長處測定吸光度，計算，即得。實施例2:穩定性試驗取實施例1對照品溶液，分別于0分鐘、5分鐘、10分鐘、15分鐘、20分鐘、30分鐘、60分鐘、90分鐘在707nm波長處測定吸收值，結果吸收值在10分鐘前不穩定，但在10至90分鐘內吸收值幾乎無變化，即溶液應放置10分鐘使其顯色完全，10至90分鐘內溶液穩定。表1放置時間與吸收值的關系<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>實施例3線性考察實驗(實施例1的方法)分別精密量取磷酸鹽標準溶液Iml、2ml、5mlUOml,20ml、25ml、30ml至100ml容量瓶中，加水50ml，搖勻，加鉬酸銨溶液4ml，搖勻，加氯化亞錫溶液0.Iml，搖勻，加水稀釋至刻度，搖勻，放置10分鐘；以上述空白溶液作空白，在707nm波長測定吸收值，并以吸收值A對相應的濃度C進行線性回歸。結果表明，磷酸鹽(以PO43-)在0.051.5μg/ml濃度范圍內，線性關系良好，回歸方程為C=3.673A-0.0073，r=0.999，η=7。表2吸收值與濃度的關系<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>實施例4重復性試驗精密稱取甘油磷酸鈉各l.OOg至IOOml容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，精密吸取IOml至IOOml容量瓶中，加水50ml，搖勻，加鉬酸銨溶液4ml，搖勻，加氯化亞錫溶液0.1ml，搖勻，加水稀釋至刻度，搖勻，放置10分鐘，作為供試品溶液。分別精密量取磷酸鹽標準溶液適量至IOOml容量瓶中，加水50ml，搖勻，加鉬酸銨溶液4ml，搖勻，加氯化亞錫溶液0.1ml，搖勻，加水稀釋至刻度，搖勻，分別得每Iml中含磷酸鹽(以P043_)約0.75μg、1.00g、l.25g的溶液，放置10分鐘，即得三種不同濃度的對照品溶液。分別依法測定吸收值，以不同對照品濃度，分別計算游離磷酸鹽的含量。結果表明，重復性滿意。表3<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>實施例5干擾試驗1、供試品溶液1(不加甘油)精密稱取三批甘油磷酸鈉各1.OOg至IOOml容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，精密吸取IOml至IOOml容量瓶中，加水50ml，搖勻，加鉬酸銨溶液(取鉬酸銨2.5g，加水20ml，加熱溶解，取硫酸28ml用50ml水稀釋，放冷，混合兩液，并用水稀釋成100ml)4ml，搖勻，加氯化亞錫溶液(取氯化亞錫3.3g，加鹽酸Iml溶解，加水至10ml，量取Iml加2mol/L鹽酸溶液9ml，混合，即得。本液應臨用新配。)0.1ml，搖勻，加水稀釋至刻度，搖勻，放置10分鐘。2、供試品溶液2(加甘油)精密稱取上述三批甘油磷酸鈉各1.OOg至IOOml容量瓶中，加水50ml溶解，再分別加入甘油l.Og，搖勻，加水稀釋至刻度，精密吸取IOml至IOOml容量瓶中，加水50ml，搖勻，加鉬酸銨溶液4ml，搖勻，加氯化亞錫溶液0.Iml，搖勻，加水稀釋至刻度，搖勻，放置10分鐘。3、供試品溶液3(甘油)精密稱取甘油約0.Ig至IOOml容量瓶中，加水50ml，搖勻，加鉬酸銨溶液4ml，搖勻，加氯化亞錫溶液0.1ml，搖勻，加水稀釋至刻度，搖勻，放置10分鐘。4、對照品溶液精密量取磷酸鹽標準溶液(精密稱取磷酸二氫鉀0.716g至IOOOml容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取1.Oml至IOOml容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，即得)20ml或適量至IOOml容量瓶中，加水50ml，搖勻，加鉬酸銨溶液4ml，搖勻，加氯化亞錫溶液0.1ml，搖勻，加水稀釋至刻度，搖勻，放置10分鐘。5、空白溶液取IOOml容量瓶，加水50ml，加鉬酸銨溶液4ml，搖勻，加氯化亞錫溶液0.Iml，搖勻，加水至刻度，搖勻，放置10分鐘。6、測定法照紫外-可見分光光度法(中國藥典2005年版附錄IVA)，在707nm的波長處分別測定吸光度，計算，即得。表4批號0802100-010802140-010803040-01甘油含Ρ0Λ(不加甘油)0.050%0.041%0.048%0%含Ρ0Λ(加甘油)0.052%0.043%0.045%最大偏差0.002%0.002%0.003%/_^___甘油對游離磷酸鹽的含量測定無干擾__7、測定結果供試品溶液3(甘油)在707nm的波長處幾乎無吸光度，供試品溶液1(不加甘油)和供試品溶液2(加甘油)，測定的游離磷酸鹽結果幾乎無差別，則證明甘油對游離磷酸鹽含量測定無干擾。實施例6甘油磷酸鈉的制備方法(1)成鹽、酯化將定量的磷酸、甘油投入到酯化反應缸內，再加入碳酸鈉，三者按重量計為碳酸鈉53g、磷酸98g、甘油184g；通入蒸氣；在反應缸內磷酸與碳酸鈉發生鹽反應生成磷酸二氫鈉，然后磷酸二氫鈉與甘油發生酯化反應生成雙酯甘油磷酸鈉；反應過程控制PH值為3.0-5.5、保持蒸氣壓力0.4-0.5MPa、反應溫度130°C；反應完后加適量的純化水使之稀釋；(2)水解待酯化后，加入40ml30%氫氧化鈉溶液；雙酯甘油磷酸鈉與氫氧化鈉發生水解反應生成甘油磷酸鈉和甘油；此反應過程需煮沸后回流10個小時，PH值控制在8.0-11.0，應加2.5mlNa0H；水解完后根據中檢游離磷酸鹽的含量，加入1.5g的MgO，以除去反應后的游離磷酸鹽；(3)濃縮、分離游離甘油將粗品甘油磷酸鈉濃縮，并將游離甘油分離；(4)成品脫色將分離合格后的粗品甘油磷酸鈉脫色，取樣中檢合格后可作液狀成品包裝，或者通過結晶做固體包裝；(5)結晶，甩干，烘干結晶，甩干，烘干，取樣全檢，合格后包裝入庫；其中，步驟(2)水解反應中游離磷酸鹽的含量用如下方法定量檢測實施例7實施例6甘油磷酸鈉制備中游離磷酸鹽的檢測供試品溶液取甘油磷酸鈉1.00g，精密稱定，置IOOml容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，精密吸取IOml至IOOml容量瓶中，加水50ml，搖勻，加鉬酸銨溶液(取鉬酸銨2.5g，加水20ml，加熱溶解，取硫酸28ml用50ml水稀釋放冷，混合兩液，并用水稀釋成100ml)4ml搖勻，加氯化亞錫溶液(取氯化亞錫3.3g，加鹽酸Iml溶解，加水至10ml，量取Iml加2mol/L鹽酸溶液9ml，混合，即得；本液應臨用新配)0.1ml，搖勻，加水稀釋至刻度，搖勻，放置10分鐘；對照品溶液精密量取磷酸鹽標準溶液(精密稱取磷酸二氫鉀0.716g至IOOOml容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取1.Oml至IOOml容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，即得)20ml或適量至IOOml容量瓶中，加水50ml，搖勻，加鉬酸銨溶液4ml，搖勻，加氯化亞錫溶液0.1ml，搖勻，加水稀釋至刻度，搖勻，放置10分鐘；空白溶液取IOOml容量瓶，加水50ml，加鉬酸銨溶液4ml，搖勻，加氯化亞錫溶液0.1ml，搖勻，加水至刻度，搖勻，放置10分鐘；測定法照紫外_可見分光光度法，在707nm的波長處測定吸光度，計算，即得。實施例8甘油磷酸鈉的制備方法(1)成鹽、酯化將定量的磷酸、甘油投入到酯化反應缸內，再加入碳酸鈉，三者按重量計為碳酸鈉53g、磷酸98g、甘油184g；通入蒸氣；在反應缸內磷酸與碳酸鈉發生鹽反應生成磷酸二氫鈉，然后磷酸二氫鈉與甘油發生酯化反應生成雙酯甘油磷酸鈉；反應過程控制PH值為3.5、保持蒸氣壓力0.45MPa、反應溫度135°C；反應完后加適量的純化水使之稀釋；(2)水解待酯化后，加入50ml30%氫氧化鈉溶液；雙酯甘油磷酸鈉與氫氧化鈉發生水解反應生成甘油磷酸鈉和甘油；此反應過程需煮沸后回流10個小時，PH值控制在9.0，應加2mlNaOH；水解完后根據中檢游離磷酸鹽的含量，加入l_2g的MgO，以除去反應后的游離磷酸鹽；(3)濃縮、分離游離甘油將粗品甘油磷酸鈉濃縮，并將游離甘油分離；(4)成品脫色將分離合格后的粗品甘油磷酸鈉脫色，取樣中檢合格后可作液狀成品包裝，或者通過結晶做固體包裝；(5)結晶，甩干，烘干結晶，甩干，烘干，取樣全檢，合格后包裝入庫；其中，步驟(2)水解反應中游離磷酸鹽的含量用如下方法定量檢測供試品溶液取甘油磷酸鈉1.20g，精密稱定，置IOOml容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，精密吸取IOml至IOOml容量瓶中，加水50ml，搖勻，加鉬酸銨溶液(取鉬酸銨2.5g，加水20ml，加熱溶解，取硫酸28ml用50ml水稀釋放冷，混合兩液，并用水稀釋成100ml)3ml搖勻，加氯化亞錫溶液(取氯化亞錫3.3g，加鹽酸Iml溶解，加水至10ml，量取Iml加2mol/L鹽酸溶液9ml，混合，即得；本液應臨用新配)0.12ml，搖勻，加水稀釋至刻度，搖勻，放置10分鐘；對照品溶液精密量取磷酸鹽標準溶液(精密稱取磷酸二氫鉀0.716g至IOOOml容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取1.Oml至IOOml容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，即得)15ml或適量至IOOml容量瓶中，加水50ml，搖勻，加鉬酸銨溶液6ml，搖勻，加氯化亞錫溶液0.06ml，搖勻，加水稀釋至刻度，搖勻，放置10分鐘；空白溶液取IOOml容量瓶，加水50ml，加鉬酸銨溶液6ml，搖勻，加氯化亞錫溶液0.06ml，搖勻，加水至刻度，搖勻，放置10分鐘；測定法照紫外_可見分光光度法，在707nm的波長處測定吸光度，計算，即得。實施例9方案篩選總結一、方法1.方法1(滴定法)取本品2.5g，精密稱定，加水25ml，搖勻，加麝香草酚藍指示液2滴，用鹽酸滴定液(0.lmol/L)滴定至黃色，再加氯化鈣溶液(3—10)(對麝香草酚藍指示液顯中性)40ml，煮沸5分鐘，放冷，用氫氧化鈉滴定液(0.lmol/L)滴定至藍色，每Iml的氫氧化鈉滴定液(0.lmol/L)相當于9.5mg的游離磷酸鹽(以P043_計)。重復性試驗(甘油磷酸鈉中游離磷酸鹽含量彡0.1時)樣品1_1_2_3_4_5_RSD%_P0,%_032_035_031_030_033_6.0%重復性試驗(甘油磷酸鈉中游離磷酸鹽含量<0.時)樣品2_1_2_3_4_5_RSD%P0,%_008_012_012_014_013_19.3%從以上實驗數據可以證明本法重復性差，精密度低，誤差大，特別是當甘油磷酸鈉中的游離磷酸鹽含量低于0.時，誤差很大，棄用。2.方法2供試品溶液精密稱取甘油磷酸鈉1.OOg至IOOml容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密吸取IOml至IOOml量瓶中，精密加入顯色試液〔3mol/L硫酸-水-2.5%鉬酸銨溶液-10%抗壞血酸溶液(1511)〕10ml，加水稀釋定容，置45°C水浴中加熱10分鐘，放冷至室溫。對照品溶液精密稱取磷酸二氫鉀(105°C干燥至恒重)0.716g，置IOOOml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取1.Oml至IOOml量瓶中，精密加入顯色試液〔3mol/L硫酸-水-2.5%鉬酸銨溶液-10%抗壞血酸溶液(1511)〕10ml，加水稀釋定容，置45°C水浴中加熱10分鐘，放冷至室溫。空白溶液取IOOml容量瓶，精密加入顯色試液〔3mol/L硫酸-水-2.5%鉬酸銨溶液-10%抗壞血酸溶液(1511)〕10ml，加水稀釋定容，置45°C水浴中加熱10分鐘，放冷至室溫。測定法照紫外-可見分光光度法(中國藥典2005年版附錄IVA)，在650nm的波長處測定吸光度，計算，即得。3.方法3供試品溶液精密稱取甘油磷酸鈉1.OOg至IOOml容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，精密吸取IOml至IOOml容量瓶中，加水50ml，搖勻，加鉬酸銨溶液(取鉬酸銨2.5g，力口水20ml，加熱溶解，取硫酸28ml用50ml水稀釋，放冷，混合兩液，并用水稀釋成100ml)4ml,搖勻，加氯化亞錫溶液(取氯化亞錫3.3g，加鹽酸Iml溶解，加水至10ml，量取Iml加2mol/L鹽酸溶液9ml，混合，即得。本液應臨用新配。)0.lml，搖勻，加水稀釋至刻度，搖勻，放置10分鐘。對照品溶液精密量取磷酸鹽標準溶液(精密稱取磷酸二氫鉀0.716g至IOOOml容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取1.Oml至IOOml容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，即得)20ml或適量至IOOml容量瓶中，加水50ml，搖勻，加鉬酸銨溶液4ml，搖勻，加氯化亞錫溶液0.1ml，搖勻，加水稀釋至刻度，搖勻，放置10分鐘。空白溶液取IOOml容量瓶，加水50ml，加鉬酸銨溶液4ml，搖勻，加氯化亞錫溶液0.1ml，搖勻，加水至刻度，搖勻，放置10分鐘。測定法照紫外-可見分光光度法(中國藥典2005年版附錄IVA)，在707nm的波長處測定吸光度，計算，即得。二、方法2與方法3的比較1.條件比較方法2常溫下顯色慢，需水浴45'C加熱10分鐘-方法3_常溫放置10分種即顯色完全_2.穩定性比較供試品溶液放置時間與吸收值的關系放置時間(inin)_1_2030_40_50_60_90方法2_0.3520.3600.3630.3700.3750.3820.388方法3_0.2780.2760.2770.2770.2780.2780.2763.回收率試驗比較在線性濃度范圍內配制了7個不同濃度的磷酸二氫鈉標準溶液，分別按1比1加入甘油及甘油磷酸鈉對照品進行回收率試驗。濃度(WgAnl)_0.050_0.1000.2500.500_1.001.251.50方法2:回收率_99.4%_104.8%97.4%106.1%105.7%98.4%107.2%方法3:回收率_99.4%_98.6%98.8%99.0%99.6%99.1%99.8%4.重復性試驗配制三個不同濃度的標準溶液，測定同一批甘油磷酸鈉制成的三個供試液中的游<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>以上實驗數據表明，方法2顯色條件應加熱，不穩定，重復性差，回收率偏差大，甘油及甘油磷酸鈉對游離磷酸鹽測定有干擾，方法3常溫下10分鐘顯色完全且穩定，重復性好，回收率好，甘油及甘油磷酸鈉對游離磷酸鹽測定無干擾，測定結果準確、可靠、簡便、快速。權利要求一種甘油磷酸鈉中游離磷酸鹽的定量檢測方法，其特征在于該方法為供試品溶液取甘油磷酸鈉0.5-1.5g，精密稱定，置100ml容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，精密吸取5-15ml至100ml容量瓶中，加水40-60ml，搖勻，加鉬酸銨溶液2-6ml搖勻，加氯化亞錫溶液0.05-0.15ml，搖勻，加水稀釋至刻度，搖勻，放置5-20分鐘；對照品溶液精密量取磷酸鹽標準溶液10-30ml至100ml容量瓶中，加水40-60ml，搖勻，加鉬酸銨溶液2-6ml，搖勻，加氯化亞錫溶液0.05-0.15ml，搖勻，加水稀釋至刻度，搖勻，放置5-20分鐘；空白溶液取100ml容量瓶，加水40-60ml，加鉬酸銨溶液2-6ml，搖勻，加氯化亞錫溶液0.05-0.15ml，搖勻，加水至刻度，搖勻，放置5-20分鐘；測定法照紫外-可見分光光度法，在707nm的波長處測定吸光度，計算，即得。2.如權利要求1所述的檢測方法，其特征在于所述供試品溶液中鉬酸銨溶液的制備方法為取鉬酸銨l_4g，加水10-30ml，加熱溶解，取硫酸20-40ml用40-60ml水稀釋放冷，混合兩液，并用水稀釋成100ml；所述供試品溶液中氯化亞錫溶液的制備方法為取氯化亞錫2-4g，加鹽酸0.5-1.5ml溶解，加水至5-15ml，量取0.5-1.5ml加l_3mol/L鹽酸溶液5_15ml，混合，即得；所述對照品溶液中磷酸鹽標準溶液的制備方法為精密稱取磷酸二氫鉀0.4-1.0g至1000ml容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取0.5-1.5ml至100ml容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，即得。3.如權利要求2所述的檢測方法，其特征在于該方法為供試品溶液取甘油磷酸鈉1.00g，精密稱定，置100ml容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，精密吸取10ml至100ml容量瓶中，加水50ml，搖勻，加鉬酸銨溶液4ml搖勻，加氯化亞錫溶液0.1ml，搖勻，加水稀釋至刻度，搖勻，放置10分鐘；對照品溶液精密量取磷酸鹽標準溶液20ml或適量至100ml容量瓶中，加水50ml，搖勻，加鉬酸銨溶液4ml，搖勻，加氯化亞錫溶液0.1ml，搖勻，加水稀釋至刻度，搖勻，放置10分鐘；空白溶液取100ml容量瓶，加水50ml，加鉬酸銨溶液4ml，搖勻，加氯化亞錫溶液0.1ml，搖勻，加水至刻度，搖勻，放置10分鐘；測定法照紫外_可見分光光度法，在707nm的波長處測定吸光度，計算，即得。4.甘油磷酸鈉中游離磷酸鹽的檢測方法，其特征在于該方法為采用紫外-可見分光光度法測定，波長范圍為700-715nm；供試品溶液制備方法為甘油磷酸鈉水溶液先后加入鉬酸銨溶液與氯化亞錫溶液，搖勻，放置5分鐘以上；對照品溶液制備方法為磷酸鹽標準溶液先后加入鉬酸銨溶液與氯化亞錫溶液，搖勻，放置5分鐘以上；其中鉬酸銨溶液為鉬酸銨水溶液與硫酸水溶液的混合液，鉬酸銨與硫酸摩爾比為1140-160;氯化亞錫溶液為氯化亞錫的鹽酸水溶液，氯化亞錫與鹽酸的摩爾比為17-12；所述磷酸鹽標準溶液中磷酸鹽為4X10_5-6X10_5摩爾/升。5.如權利要求4所述的甘油磷酸鈉中游離磷酸鹽的檢測方法，其特征在于鉬酸銨溶液鉬酸銨與硫酸摩爾比為1150。6.如權利要求4所述的甘油磷酸鈉中游離磷酸鹽的檢測方法，其特征在于氯化亞錫溶液中氯化亞錫與鹽酸的摩爾比為110。7.如權利要求4所述的甘油磷酸鈉中游離磷酸鹽的檢測方法，其特征在于磷酸鹽標準溶液中磷酸鹽為5.26X10_5摩爾/升。8.如權利要求4所述的甘油磷酸鈉中游離磷酸鹽的檢測方法,其特征在于紫外_可見分光光度法測定時波長為707nm。全文摘要本發明公開了甘油磷酸鈉中游離磷酸鹽的檢測方法，采用紫外-可見分光光度法測定，波長范圍為700-715nm；供試品溶液制備方法為甘油磷酸鈉水溶液先后加入鉬酸銨溶液與氯化亞錫溶液，搖勻，放置5分鐘以上；對照品溶液制備方法為磷酸鹽標準溶液先后加入鉬酸銨溶液與氯化亞錫溶液，搖勻，放置5分鐘以上；本發明提供的檢測方法，具有精度高、重復性好、易操作、抗干擾的特點。文檔編號G01N21/33GK101832920SQ20101019455公開日2010年9月15日申請日期2010年6月8日優先權日2009年9月1日發明者申辛申請人:紫光古漢集團衡陽制藥有限公司