黃芪多糖與黃芪甲苷的含量測定方法
【專利摘要】黃芪多糖與黃芪甲苷的含量測定方法屬于測定方法【技術領域】，尤其涉及一種黃芪多糖與黃芪甲苷的含量測定方法。本發明提供一種測定方法簡單、精密度高，結果夠準確的黃芪多糖與黃芪甲苷的含量測定方法。本發明采用如下技術方案：稱取干燥至恒重的無水葡萄糖量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻得葡萄糖液；吸取步驟（1）的葡萄糖液于量瓶中，補足蒸餾水，并給試管編號。然后分別加2%苯酚試液，搖勻，緩慢滴加濃硫酸，振搖1～3min后，于沸水浴中加熱10～20min，取出置冷水中冷卻至室溫，用蒸餾水定溶至刻度，搖勻冷卻后以苯酚-濃硫酸溶液為空白，于波長490nm處測吸光度。
【專利說明】黃芪多糖與黃芪甲苷的含量測定方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于測定方法【技術領域】，尤其涉及一種黃芪多糖與黃芪甲苷的含量測定方法。
【背景技術】
[0002]黃芪為豆科植物蒙古黃芪或膜莢黃芪的干燥根，具有補氣升陽，固表止汗，托瘡生肌，利水消腫的作用，為許多中成藥的組成成分。黃芪的有效成分主要有黃芪多糖和黃芪皂苷，這兩種物質分屬于不同的提取部位。目前市場上以這兩種物質為有效成分的注射液，分別是主要成分為黃芪多糖的黃芪多糖注射液和主要成分為黃芪皂苷的黃芪注射液。黃芪皂苷對急梗犬心有改善心肌收縮功能，縮小心機梗塞面積，減輕心肌損傷的作用。
[0003]黃芪多糖可以提高機體免疫，并具有廣譜的抗病毒作用，能有效保護小鼠免受流感病毒的感染，對口腔炎病毒也有抑制作用。為充分發揮療效，本實驗研制了既含有黃芪皂苷又含有黃芪多糖的黃芪復合注射液。現有黃芪多糖與黃芪甲苷的含量測定方法復雜、精密度差，結果不夠準確。
【發明內容】
[0004]本發明就是針對上述問題，提供一種測定方法簡單、精密度高，結果夠準確的黃芪多糖與黃芪甲苷的含量測定方法。
[0005]為了實現上述目的，本發明采用如下技術方案。
[0006]( I)稱取干燥至恒重的無水葡萄糖量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻得葡萄糖液。
[0007](2)吸取步驟(I)的葡萄糖液于量瓶中，補足蒸餾水，并給試管編號。然后分別加2%苯酚試液，搖勻，緩慢滴加濃硫酸，振搖I?3min后，于沸水浴中加熱10?20min，取出置冷水中冷卻至室溫，用蒸餾水定溶至刻度，搖勻冷卻后以苯酚-濃硫酸溶液為空白，于波長490nm處測吸光度。
[0008]作為一種優選方案，本發明所述步驟(2)振搖2min。
[0009]作為另一種優選方案，本發明所述步驟(2)于沸水浴中加熱15min。
[0010]本發明有益效果。
[0011]黃芪甲苷是含有黃芪藥材的中藥制劑的常用檢測指標。目前黃芪甲苷的含量測定方法主要有薄層掃描法、高效液相色譜紫外檢測器測定法、高效液相色譜蒸發光檢測器測定法由于薄層掃描法受影響因素較多，干擾較難排除，精密度和準確度不高，重現性差，現已很少使用。而采用高效液相色譜紫外檢測器測定法測定黃芪甲苷含量，由于黃芪甲苷無特征紫外吸收，只能采用紫外檢測器末端波長檢測，對樣品純化要求較高，操作要求較為嚴格，容易受到雜質干擾，分離度和重現性均差。而蒸發光檢測器的原理是流動相被高壓氣流霧化，霧化形成的小液滴進入漂移管，流動相被蒸發，而被分析檢測的物質顆粒受激光照射產生散熱，散熱光由光電倍增管收集得到響應，由被分析物質的顆粒的數量和大小決定光散射檢測器的響應大小，而不受流動相溶劑的干擾。本文采用高效液相色譜蒸發光檢測器測定法測定黃芪復合注射液中黃芪甲苷含量，樣品分離度良好，回收率高，此方法簡單、精密度高，結果準確、可靠，可用于黃芪復合注射液中黃芪甲苷的質量控制。
【具體實施方式】
[0012]本發明采用如下技術方案。
[0013](I)稱取干燥至恒重的無水葡萄糖量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻得葡萄糖液。
[0014](2)吸取步驟(I)的葡萄糖液于量瓶中，補足蒸餾水，并給試管編號。然后分別加2%苯酚試液，搖勻，緩慢滴加濃硫酸，振搖I?3min后，于沸水浴中加熱10?20min，取出置冷水中冷卻至室溫，用蒸餾水定溶至刻度，搖勻冷卻后以苯酚-濃硫酸溶液為空白，于波長490nm處測吸光度。
[0015]所述步驟(2)振搖2min。
[0016]所述步驟(2)于沸水浴中加熱15min。
[0017]本發明可采用如下儀器與試藥。
[0018]美國Agilentl200高效液相色譜儀，AllteCh3300蒸發光檢測器，上海天美UV2300紫外可見分光光度計。黃芪甲苷對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號:110781-200613)，甲醇、苯酚、硫酸、正丁醇、亞鐵氰化鉀、硫酸鋅、無水葡萄糖均為分析純，乙腈為色譜純，水為重蒸懼水。
[0019]可以理解的是，以上關于本發明的具體描述，僅用于說明本發明而并非受限于本發明實施例所描述的技術方案，本領域的普通技術人員應當理解，仍然可以對本發明進行修改或等同替換，以達到相同的技術效果；只要滿足使用需要，都在本發明的保護范圍之內。
【權利要求】
1.黃芪多糖與黃芪甲苷的含量測定方法，其特征在于采用以下步驟: (1)稱取干燥至恒重的無水葡萄糖量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻得葡萄糖液； (2)吸取步驟(I)的葡萄糖液于量瓶中，補足蒸餾水，并給試管編號；然后分別加2%苯酚試液，搖勻，緩慢滴加濃硫酸，振搖I?3min后，于沸水浴中加熱10?20min，取出置冷水中冷卻至室溫，用蒸餾水定溶至刻度，搖勻冷卻后以苯酚-濃硫酸溶液為空白，于波長490nm處測吸光度。
2.根據權利要求1所述黃芪多糖與黃芪甲苷的含量測定方法，其特征在于所述步驟(2)振搖 2min。
3.根據權利要求1所述黃芪多糖與黃芪甲苷的含量測定方法，其特征在于所述步驟(2)于沸水浴中加熱15min。
【文檔編號】G01N21/31GK103808671SQ201210440668
【公開日】2014年5月21日 申請日期:2012年11月7日 優先權日:2012年11月7日
【發明者】惠鐵軍, 褚朝森 申請人:惠鐵軍