濁點萃取-紫外可見分光光度法測定痕量鋅離子的方法
【專利摘要】本發明公開了一種濁點萃取-紫外可見分光光度法測定痕量鋅離子的方法。本發明方法包括如下步驟：將待測樣品加到包含pH＝8.5的NH4Cl-NH3·H2O緩沖溶液、1-(2-吡啶偶氮)-2-萘酚、TritonX-100、SDS和飽和氯化鈉NaCl的濁點萃取體系中；混勻后，置于冰箱中平衡；再通過離心使兩相分離，收集下層相，用無水乙醇稀釋后，通過分光光度法測定鋅離子的含量；其中，分光光度法的吸收波長為549nm。本發明方法可用于測定環境水樣、土壤中痕量的鋅離子，鋅離子的檢出限是3.3ng·mL-1，富集倍數是38，相對標準偏差是2.8％，加標回收率在97.7～101.5％之間。
【專利說明】濁點萃取-紫外可見分光光度法測定痕量鋅離子的方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及測定痕量金屬離子的方法，具體涉及一種濁點萃取-紫外可見分光光度法測定痕量鋅離子的方法。
【背景技術】
[0002]鋅對于酶類的生成起重要的作用。鋅在免疫系統、消化系統、神經系統的功能中是很重要的，在一些食品中鋅也是很重要的。大量的鋅金屬酶被應用在所有的新陳代謝中。身體缺鋅會導致皮膚病，傷口恢復緩慢，味覺和嗅覺功能減退，易感染，生育能力降低，孩子生長緩慢，嗜睡，食欲不振及容易掉發。鋅是高度抗腐蝕的并且被廣泛用作為一種防護涂層在不同的產品中。美國環境保護機構(EPA)已經公布了飲用水中鋅的含量不超過
[0003]環境樣品中痕量元素的測定是一件很困難的分析任務，由于樣品成分是復雜的并且所測組分含量很低。因此需要靈敏的儀器檢測技術和預富集技術。傳統的萃取技術和其他的傳統分離方法是耗時耗力的，除此之外還需要大量高純度的有機溶劑，對環境造成嚴重的污染。濁點萃取預富集技術能夠解決這些問題。濁點萃取技術使用低毒性的表面活性劑代替有毒的有機溶劑。該方法是一種綠色的化學方法。一般在應用定量分析技術像火焰原子吸收光譜法、電感耦合等離子體發射光譜法及分光光度法之前，利用濁點萃取法萃取痕量的金屬螯合物。
【發明內容】
[0004]本發明的目的在于克服現有技術的缺點與不足，提供一種濁點萃取-紫外可見分光光度法測定痕量鋅離子的方法。
[0005]本發明的目的通過下述技術方案實現:
[0006]一種濁點萃取-紫外可見分光光度法測定痕量鋅離子的方法，包括如下步驟:將待測樣品加到包含NH4Cl-NH3.H2O緩沖溶液、1-(2-吡啶偶氮)_2_萘酚(PAN)、TritonX-100、SDS和NaCl的濁點萃取體系中，混勻后，置于冰箱中平衡；平衡結束后再通過離心使兩相分離，收集下層相，用無水乙醇稀釋后，通過分光光度法測定鋅離子的含量。
[0007]所述的NH4Cl-NH3.H2O 緩沖溶液的 pH 優選為 8.5 ；pH = 8.5 的 NH4Cl-NH3.H2O 緩沖溶液在濁點萃取體系中的終濃度優選為4% (v/v)。
[0008]所述的1-(2-吡啶偶氮)-2_萘酚在濁點萃取體系中的終濃度優選為
5.6 X 10 5mol.L、
[0009]所述的TritonX-1OO在濁點萃取體系中的終濃度優選為0.4% (v/v)。
[0010]所述的SDS在濁點萃取體系中的終濃度優選為0.1 % (w/w)。
[0011]所述的NaCl在濁點萃取體系中的終濃度按飽和NaCl溶液計優選為12% (v/v)，即ImL濁點萃取體系含0.12mL飽和NaCl溶液。
[0012]所述的平衡的溫度優選為0°C，平衡的時間優選為30min。
[0013]所述的離心的條件優選為4000r/min離心lOmin。
[0014]所述的分光光度法的吸收波長優選為549nm。
[0015]優選的，所述的濁點萃取-紫外可見分光光度法測定痕量鋅離子的方法包括如下步驟:將1.0mL待測樣品溶液加入到15mL離心管中，依次加入0.4mLpH = 8.5的NH4Cl-NH3.H2O 緩沖溶液，0.14mL4.0X 10_3mol.L—1 的 1-(2-吡啶偶氮)_2_ 萘酚，0.8mL5%(v/v)的 TritonX-1OO 溶液，1.0mLl % (w/w)的 SDS 溶液。然后加入 1.2mL 飽和 NaCl 溶液，整個體系立刻變得渾濁。用二次蒸餾水定容至10mL，混勻后，置于冰箱中在(TC保持30min，然后轉速在4000r/min離心1min使兩相分離。然后通過傾倒法將上層的主體水相去除掉。在下層小體積的表面活性劑富集相中加入無水乙醇定容至3.0mL進行稀釋，測定所得溶液在549nm的吸光度。通過作出的標準工作曲線，橫坐標是Zn2+濃度，縱坐標是吸光度值。根據吸光度值來確定Zn2+濃度。
[0016]本發明相對于現有技術具有如下優點和效果:
[0017]本發明測定痕量鋅離子的方法具有溶劑用量少，操作簡單，用時短，對環境無污染，富集倍數大，檢測限低等特點。由于操作條件是在o°c的低溫條件下即可達到很好的效果，對于熱敏性的金屬螯合物有很好的保護作用。因此金屬螯合物的萃取率很高。
[0018]本發明方法鋅離子的檢出限是3.3ng.mL—1，富集倍數是38，相對標準偏差是2.8% ;測定環境水樣、土樣、血樣中痕量的金屬離子Zn2+所得到的加標回收率在97.7?101.5%之間。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0019]圖1是不同濃度的Zn2+與PAN形成的金屬螯合物的吸收曲線圖，a到f濃度分別為 10、50、100、200、300、400ng.ml^Zn2+。
[0020]圖2是pH對Zn2+萃取率的影響結果圖。
[0021]圖3是PAN用量對Zn2+萃取率的影響結果圖。
[0022]圖4是TritonX-1OO濃度對Zn2+萃取率的影響結果圖。
[0023]圖5是平衡時間對Zn2+萃取率的影響結果圖。
[0024]圖6是SDS濃度對Zn2+萃取率的影響結果圖。
[0025]圖7是NH4Cl-NH3.H2O緩沖液用量對Zn2+萃取率的影響結果圖。
[0026]圖8是離心時間對Zn2+萃取率的影響結果圖。
[0027]圖9是飽和NaCl用量對Zn2+萃取率的影響結果圖。
【具體實施方式】
[0028]下面結合具體實施例對本發明做進一步詳細的描述。應理解，下面的實施例僅用于說明本發明而不用于限制本發明的范圍。
[0029]實施例1濁點萃取-紫外可見分光光度法測定痕量鋅離子的方法的建立
[0030]1、儀器、試劑
[0031](I)儀器:PHS-3C型數字式酸度計(上海奧斯儀器有限公司)，CAV214C電子天平(上海奧豪斯儀器有限公司)，DL-360E型智能超聲波清洗儀(上海之信儀器有限公司)，UV2550紫外可見分光光度計(日本島津公司)，TG6A離心機(上海盧湘儀儀器有限公司)，恒溫鼓風干燥箱(上海新苗醫療器械制造有限公司)，電熱恒溫水浴鍋(北京市永光明醫療儀器廠)。
[0032](2)試劑:lmg ^r1Zn2+標準儲備液其中加入一定量2% (v/v)的稀硝酸溶液，Zn2+標準工作溶液(5μ g.mL-1)是由Zn2+標準儲備液用水稀釋而成的。1-(2-吡啶偶氮)-2-萘酚(PAN) (99%，阿拉丁試劑公司)配制成 4.0X10_3mol ?Γ1 的乙醇溶液。TritonX-1OO (99%,阿拉丁試劑公司)配成5% (v/v)的水溶液。SDS(成都科龍試劑有限公司)配成濃度為1% (w/w)的水溶液。0.2mol.Γ1 的 NH4Cl 溶液和 0.2mol.Γ1 的 NH3.H2O 溶液配成 pH =
8.5的緩沖溶液。其他所用的試劑都是分析純級的，在實驗過程中的用水是二次蒸餾水。
[0033]2、試驗方法和結果
[0034]試驗方法:Zn2+標準溶液濁點萃取和測定的方法
[0035]取一定量的Zn2+標準工作溶液到15mL離心管中，依次加入0.4mLpH = 8.5的NH4Cl-NH3.H2O 緩沖溶液，0.14mL4.0X 10_3mol.L—1 的 1-(2-吡啶偶氮)_2_ 萘酚(PAN)，
0.8mL5% (v/v)的 TritonX-1OO 溶液，0.2mLl% (w/w)的 SDS 溶液。然后加入 1.5mL 飽和NaCl溶液，整個體系立刻變得渾濁。用二次蒸餾水定容至10mL，混勻后，置于冰箱中在0°C左右保持30min,然后轉速在4000r/min離心1min使兩相分離。此反應不需要冰浴，因為此反應體系的膠束相是由SDS與TritonX-1OO組成的混和表面活性劑作為萃取劑。然后通過傾倒法將上層的主體水相去除掉。在下層小體積的表面活性劑富集相中加入無水乙醇定容至3.0mL進行稀釋，將所得溶液利用紫外-可見分光光度計進行吸收曲線或吸光度的測定。
[0036]以此方法為基礎，確定金屬絡合物最大吸收波長，并研究pH值、PAN用量、TritonX-1OO濃度、平衡時間、SDS濃度、緩沖液用量、離心時間、飽和NaCl用量等因素對濁點萃取的影響，以得出濁點萃取-紫外可見分光光度法測定痕量鋅離子的最優條件。
[0037]結果與討論:
[0038](I)金屬絡合物最大吸收波長的確定
[0039]因為絡合劑的不同金屬螯合物的最大紫外吸收波長也是不同的。所以在實驗條件的優化過程中，首先必須要確定金屬螯合物的最大吸收波長。
[0040]按照Zn2+標準溶液濁點萃取和測定的方法，測定不同濃度的Zn2+與PAN形成的金屬螯合物的吸收曲線，結果如圖1所示，結果顯示，在本實驗中，鋅離子富膠束相在549nm處吸光度是最大的，因此，接下來的所有紫外-可見分光光度測定中均選擇在549nm測定溶液的吸光度(Abs.)。
[0041]先取由小到大不同體積的Zn2+標準工作溶液，按Zn2+標準溶液濁點萃取和測定的方法進行濁點萃取，然后在549nm處分別測定各溶解的吸光度，根據朗伯-比耳定律，吸光度與濃度成正比關系，以濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪制出標準曲線并可計算出回歸方程。然后取待測溶液按同法進行濁點萃取，同樣在549nm處測定吸光度，根據回歸方程及取樣量，即可計算出待測溶液中Zn2+的含量。
[0042]⑵pH值對濁點萃取的影響
[0043]通過濁點萃取法將金屬離子萃取出來，前提是需要合適的絡合劑和金屬離子形成疏水性的螯合物。然后疏水性螯合物被萃取到表面活性劑富集相中，萃取率是依賴于螯合物形成時溶液的酸堿性。因此，PH主要影響螯合物的形成進而影響Zn2+的萃取率。
[0044]按照Zn2+標準溶液濁點萃取和測定的方法，取10ng.Hir1Zn2+標準溶液進行濁點萃取，549nm作為吸收波長進行吸光度測定。通過調整NH4Cl-NH3.H2O緩沖溶液的pH為7?11，研究pH值對萃取率的影響。結果如圖2所示，pH值在7?8.5范圍內隨著其值的增加，在pH = 8.5時萃取率達到最大。這是因為Zn2+與PAN必須在堿性條件下生成穩定的絡合物；但是在過大的堿性條件下，金屬離子容易水解成金屬氫氧化物，所以隨著繼續增大PH值，鋅離子的萃取率在逐漸下降。因此選擇pH = 8.5作為最佳pH值。
[0045]⑶PAN用量對濁點萃取的影響
[0046]濁點萃取法與火焰原子吸收光譜法聯用用于測定痕量的金屬離子，主要是選擇合適的絡合劑。
[0047]按照Zn2+標準溶液濁點萃取和測定的方法，取10ng.Hir1Zn2+標準溶液進行濁點萃取，549nm作為吸收波長進行吸光度測定。通過調整4.0X10_3mol.Γ1的1-(2-吡啶偶氮)-2_萘酚(PAN)的體積為0.06?0.20mL，研究絡合劑濃度對鋅萃取率的影響。結果如圖3所示，PAN體積在0.06?0.14mL范圍內隨著PAN濃度的增大，Zn2+萃取率是逐漸增大的。這是因為隨著絡合劑用量的增大，金屬離子與絡合劑形成的螯合物的量也在不斷的增大，進而被萃取到表面活性劑富集相的金屬離子在不斷地增大，所以Zn2+萃取率在不斷的增大。由圖3可知PAN體積為0.14mL時，回收率達到最大。繼續增大PAN的用量，其回收率在不斷地下降。由于絡合劑的疏水性要比所對應的金屬螯合物的疏水性要強，過量的絡合劑將金屬螯合物中的金屬離子置換出來進入主體水相，絡合劑會被優先的萃取到表面活性劑富集相中，因此Zn2+萃取率在不斷的減小。因此選擇4.0X 10_3mol.Γ1的PAN體積為
0.14mL作為最佳條件。
[0048](4) TritonX-1OO濃度對濁點萃取的影響
[0049]在濁點萃取中，TritonX-1OO是一種較為普遍的表面活性劑。因為該表面活性劑具有高純度的工業效應，低毒，價格便宜，濁點溫度低及密度大等優勢。高密度的表面活性劑富集相有利于相的分離。
[0050]按照Zn2+標準溶液濁點萃取和測定的方法，取10ng.Hir1Zn2+標準溶液進行濁點萃取，549nm作為吸收波長進行吸光度測定。通過調整5% (v/v) TritonX-1OO的加入體積，控制最終濃度為0.1?0.7% (v/v)，研究了表面活性劑濃度對濁點萃取的影響，通過控制不同濃度的TritonX-100(0.1?0.7%，v/v)對Zn2+萃取率的影響如圖4所示。在TritonX-1OO濃度在0.1?0.4%范圍內隨著TritonX-1OO濃度的增大，Zn2+萃取率是逐漸增大的，這是因為隨著表面活性劑用量的加大，金屬螯合物被萃取到表面活性劑富集相中的量是逐漸增大的。表面活性劑相體積太小，萃取后難以分離，重現性與準確性降低。TritonX-1OO濃度為0.4% (v/v)時，Zn2+萃取率的萃取率最大，繼續增大TritonX-1OO濃度，Zn2+萃取率基本上不變，因為隨著Triton X-100濃度的繼續增大，金屬離子被完全萃取出來。表面活性劑用量過大，則相體積比會減小，富集倍數降低。因此選擇加入0.8mL5%(v/v)TritonX-100,即控制其最終濃度為0.4% (v/v)作為最佳條件。
[0051](5)平衡時間對濁點萃取的影響
[0052]平衡時間對濁點萃取影響很大。為了在較短平衡時間內達到完全濁點萃取，按照Zn2+標準溶液濁點萃取和測定的方法，取10ng -mL^Zn2"標準溶液進行濁點萃取，549nm作為吸收波長進行吸光度測定。調整體系置于冰箱中在0°C左右保持的時間為15-50min，研究平衡時間對濁點萃取的影響。結果如圖5所示,在平衡時間為30min時，Zn2+的萃取率達到最大，繼續的延遲平衡時間，對萃取率的影響不大。因此，應該選擇在盡可能短的平衡時間內使金屬Zn2+萃取完全，選擇平衡時間為30min作為最佳條件。
[0053](6) SDS濃度對濁點萃取的影響
[0054]實驗發現僅使用TritonX-1OO作為表面活性劑萃取痕量的Zn2+，其萃取率是很低的，濁點溫度高。但是加入適量的陰離子表面活性劑SDS，可使整個體系的濁點溫度下降，在室溫條件下即可將痕量的金屬離子萃取出來。因為SDS被引入到TritonX-1OO溶液中，溶液的濁點溫度下降到0°C，只需要放置在冰箱中即可將金屬離子萃取出來。
[0055]按照Zn2+標準溶液濁點萃取和測定的方法，取10ng.Hir1Zn2+標準溶液進行濁點萃取，549nm作為吸收波長進行吸光度測定。調整I % SDS溶液的體積使SDS在體系中的終濃度為0.025-0.25%，研究SDS濃度對濁點萃取的影響。結果如圖6所示，在SDS質量濃度為0.1 %時，Zn2+的萃取率達到最大，繼續增大SDS的濃度，對萃取率的影響不大。因此，應該選擇在盡少量的使用SDS使金屬Zn2+萃取完全，選擇SDS質量濃度為0.1 %作為最佳反應條件。
[0056](7)緩沖液用量對濁點萃取的影響
[0057]緩沖液對金屬離子與絡合劑形成的金屬螯合物的影響很大。因此，盡可能使用較少量緩沖液使金屬離子萃取完全。按照Zn2+標準溶液濁點萃取和測定的方法，取10ng.mL_1Zn2+標準溶液進行池點萃取,549nm作為吸收波長進行吸光度測定。調整pH =
8.5的NH4Cl-NH3.H2O緩沖溶液的體積為0.1-0.8mL，研究緩沖液用量對濁點萃取的影響。結果如圖7所示，在緩沖液用量為時0.4mL時，Zn2+的萃取率達到最大，繼續增大緩沖液的用量，鋅離子的萃取率基本保持不變。因此，選擇緩沖液用量為0.4mL作為最佳優化條件。
[0058](8)離心時間對濁點萃取的影響
[0059]為了使溶液快速分離為兩相，需要借助外力即進行離心分離。隨著離心時間的增長，鋅離子的萃取率逐漸增大。當達到最大值時，隨著時間的加長，萃取率是基本保持不變的。由于混和表面活性劑的濁點溫度在o°c左右，因此增加離心時間其萃取率基本不變。
[0060]按照Zn2+標準溶液濁點萃取和測定的方法，取10ng.Hir1Zn2+標準溶液進行濁點萃取，549nm作為吸收波長進行吸光度測定。調整體系在4000r/min轉速下離心的時間為2-20min，研究離心時間對濁點萃取的影響。結果如圖8所示，在離心時間為1min時，Zn2+的萃取率達到最大，繼續延長離心時間，鋅離子的萃取率保持不變。因此，選擇離心時間為1min作為最佳優化條件。
[0061](9)飽和NaCl用量對濁點萃取的影響
[0062]一般情況下，添加劑對濁點萃取的影響不大，但是很多添加劑像電解質和有機物對萃取率的影響是很大的，因為它對濁點溫度的影響很大從而影響相的分離。TritonX-1OO的濁點溫度是65°C，如果加入適量的無機電解質溶液如NaCl，它能夠使膠束相的氫鍵斷裂，使疏水基團的物質從水相中分離出來并且濁點溫度也降低了。
[0063]按照Zn2+標準溶液濁點萃取和測定的方法，取10ng.Hir1Zn2+標準溶液進行濁點萃取，549nm作為吸收波長進行吸光度測定。調整飽和NaCl溶液的體積為0.4-2.0mL，研究飽和NaCl用量對濁點萃取的影響。結果如圖9，隨著NaCl用量的增大，萃取率是逐漸的增大的，在NaCl用量為1.2mL時，萃取率達到最大；繼續增大NaCl用量，Zn2+的回收率是逐漸下降的，因為隨著NaCl用量的加大，溶液的密度是逐漸增大的，表面活性劑不能與絡合物大面積的接觸，表面活性劑漂浮在上層，不利于膠束相萃取絡合物。因此，選擇NaCl用量為
1.2mL作為最佳優化條件。
[0064]通過上述內容得出濁點萃取-紫外可見分光光度法測定痕量鋅離子的最佳方法為:將1.0mL待測樣品溶液加入到15mL離心管中，依次加入0.4mLpH = 8.5的NH4Cl-NH3.H2O 緩沖溶液，0.14mL4.0X 10_3mol.L—1 的 1-(2-吡啶偶氮)_2_ 萘酚(PAN)，
0.8mL5 % (v/v)的 TritonX-1OO 溶液，1.0mLl % (w/w)的 SDS 溶液。然后加入 L2mL 飽和NaCl溶液，整個體系立刻變得渾濁。用二次蒸餾水定容至10mL，混勻后，置于冰箱中在0°C左右保持30min，然后轉速在4000r/min離心1min使兩相分離。然后通過傾倒法將上層的主體水相去除掉。在下層小體積的表面活性劑富集相中加入無水乙醇定容至3.0mL進行稀釋，測定所得溶液在549nm的吸光度。通過作出的標準工作曲線，橫坐標是Zn2+濃度，縱坐標是吸光度值。根據吸光度值來確定Zn2+濃度。
[0065]所述的待測樣品為預處理的樣品，樣品包括水樣、土樣和血樣；各樣品的預處理方法如下:
[0066]水樣的預處理:用0.45 μ m孔徑的濾膜過濾河水(西河)、江水(嘉陵江)、自來水(實驗室)樣品，目的是除去水體中懸浮的微粒，將處理好的水溶液冷藏備用。
[0067]土樣的預處理:
[0068]分別采集校區山地、花園和農田中的土樣。通過風干、粗碎，然后經四分縮分法將采集的土壤進行縮分，縮分后的土壤樣品在120°C恒溫干燥箱內加熱24h直至土壤烘干。用陶瓷研缽將土壤研細，挑出大塊巖石和草根等雜物，再用100目分樣篩進行過篩，得到的樣品以備后面的分析所用。在樣品處理之前，研缽，分樣篩等所用的工具要用無水乙醇清洗干凈，防止樣品被污染，對測定的結果產生影響。
[0069]分別稱取5.0g上述土壤,加入50mL0.1mol.L—1的鹽酸溶液,攪拌均勻浸泡過夜，在振蕩器中恒溫振蕩3h，靜置過濾，所得濾液即為土壤樣品溶液冷藏備用。
[0070]血樣的預處理:稱取5g全兔血樣到10mL錐形瓶中，加入5mL濃HNO3浸泡過夜，再加入2mL30% H2O2，將錐形瓶放在控溫加熱板上在120°C條件下消解至溶液澄清透明，繼續加熱進行趕酸，待溶液體積在ImL左右時，將錐形瓶取下，將溶液定容至50mL容量瓶，冷藏備用。
[0071]進一步研究了該方法的分析性能，取10、40、200、500、100ng.TaU1Zn2+標準溶液，按濁點萃取-紫外可見分光光度法測定痕量鋅離子的最佳方法進行濁點萃取，然后在549nm處分別測定各溶解的吸光度，計算得到的線性回歸方程為A =
0.00291C+0.001914 (R2 = 0.9976)，A代表吸光度值，C代表鋅離子的濃度，其線性范圍是10?100ng.mL'通過濁點萃取法富集鋅離子的富集倍數是38。該法的檢測限(3 σ )是
3.3ng.mL—1，相對標準偏差(RSD)為 2.8% (Zn2+ 的質量濃度為 10ng.mL—1，η = 11)。
[0072]實施例2干擾離子對濁點萃取-紫外可見分光光度法測定痕量鋅離子的方法的影響
[0073]根據實施例1的方法研究了幾種常見的金屬離子對鋅離子萃取率的影響，結果由表I所示，正常水樣、土樣、血樣中的金屬離子對鋅離子的萃取率基本不產生干擾。
[0074]表I干擾離子對濁點萃取的影響
[0075]
【權利要求】
1.一種濁點萃取-紫外可見分光光度法測定痕量鋅離子的方法，其特征在于包括如下步驟:將待測樣品加到包含NH4Cl-NH3.H2O緩沖溶液、1-(2-吡啶偶氮)_2_萘酚、TritonX-100,SDS和NaCl的濁點萃取體系中，混勻后，置于冰箱中平衡；平衡結束后再通過離心使兩相分離，收集下層相，用無水乙醇稀釋后，通過分光光度法測定鋅離子的含量。
2.根據權利要求1所述的測定痕量鋅離子的方法，其特征在于:所述的NH4Cl-NH3-H2O緩沖溶液的PH為8.5 ；pH = 8.5的NH4Cl-NH3 -H2O緩沖溶液在濁點萃取體系中的終濃度為4% (v/v)。
3.根據權利要求1所述的測定痕量鋅離子的方法，其特征在于:所述的1-(2-吡啶偶氮)-2_萘酚在濁點萃取體系中的終濃度為5.6X 10_5mol.L'
4.根據權利要求1所述的測定痕量鋅離子的方法，其特征在于:所述的TritonX-1OO在濁點萃取體系中的終濃度為0.4% (ν/ν) ο
5.根據權利要求1所述的測定痕量鋅離子的方法，其特征在于:所述的SDS在濁點萃取體系中的終濃度為0.1% (w/w)。
6.根據權利要求1所述的測定痕量鋅離子的方法，其特征在于:所述的NaCl在濁點萃取體系中的終濃度按飽和NaCl溶液計為12% (v/v)。
7.根據權利要求1所述的測定痕量鋅離子的方法，其特征在于:所述的平衡的溫度為0°C，平衡的時間為30min。
8.根據權利要求1所述的測定痕量鋅離子的方法，其特征在于:所述的離心的條件為4000r/min 離心1min0
9.根據權利要求1所述的測定痕量鋅離子的方法，其特征在于:所述的分光光度法的吸收波長為549nm。
10.根據權利要求1所述的測定痕量鋅離子的方法，其特征在于包括如下步驟:將1.0mL待測樣品溶液加入到15mL離心管中，依次加入0.4mLpH = 8.5的NH4Cl-NH3.H2O緩沖溶液，0.14mL4.0X 10_3mol.L-1 的 1-(2-吡啶偶氮)_2_ 萘酚，0.8mL5 % (v/v)的TritonX-1OO溶液，1.0mLl % (w/w)的SDS溶液,然后加入1.2mL飽和NaCl溶液,用二次蒸餾水定容至10mL，混勻后，置于冰箱中在0°C保持30min，再在4000r/min離心1min使兩相分離；通過傾倒法將上層的主體水相去除掉，在下層小體積的表面活性劑富集相中加入無水乙醇定容至3.0mL進行稀釋，測定所得溶液在549nm的吸光度；通過作出的標準工作曲線，橫坐標是Zn2+濃度，縱坐標是吸光度值，根據吸光度值來確定Zn2+濃度。
【文檔編號】G01N21/31GK104198412SQ201410449233
【公開日】2014年12月10日 申請日期:2014年9月4日 優先權日:2014年9月4日
【發明者】楊秀培, 楊曉萃, 王修海, 譚志敬, 李固, 賈智慧 申請人:西華師范大學