本發明屬于實驗器具領域，具體涉及一種抗體孵育試劑盒及其使用方法。
背景技術：
生物實驗中經常使用westernblotting、southernblotting等印跡雜交方法檢測目的條帶。雜交的孵育過程，傳統方法是將分子所在的膜完全浸泡在含有抗體的液體中，經過>1小時的時間使得抗體與膜上的目的分子結合。
westernblotting中，一般將膜與抗體置于小盒中，搖床上孵育，此方法每次所需的抗體量較大；難以應對多抗體孵育；抗體回收不完全，根據小盒的材質不同，回收的效率不盡相同。目前另一種抗體孵育的方法，是將膜和抗體置于塑封膜做成的小袋中，此方法在加樣和抗體回收時造成時間和抗體的大量浪費，并且難以除去對實驗有極大影響的氣泡；另外一次性的使用塑封膜，造成資源浪費和環境污染。
因此很有必要提供一種方便快捷、效果穩定并且節約成本的試劑盒及其使用方法。
技術實現要素：
本發明的目的在于提供一種操作簡單、效果好、成本低的抗體孵育試劑盒及其使用方法。
為了實現本發明目的，本發明提供了一種抗體孵育試劑盒，包含盒體和盒蓋，所述盒體包含硅橡膠、不透水薄膜、濕巾和凹槽；所述盒體中裝有硅橡膠，不透水薄膜平鋪于硅橡膠上，不透水薄膜上設置有凹槽，盒體的內壁圍有濕巾。
進一步，所述硅橡膠為聚甲基乙烯基硅氧烷。
進一步，所述硅橡膠的厚度≥5mm。
進一步，所述不透水薄膜為錫箔紙、保鮮膜或封口膜。
進一步，所述凹槽的數量為一個以上。
進一步，所述凹槽為多邊形，圓形或不規則形狀；優選地，所述凹槽為契合雜交膜的多邊形，圓形或不規則形狀。
本發明還提供了一種上述抗體孵育試劑盒的使用方法：在平鋪于硅橡膠的不透水薄膜上制造出低于硅橡膠平面的凹槽，將雜交膜進行轉膜、漂洗后，雜交膜含蛋白的一面向上，另一面向凹槽底部，水平鋪于凹槽內，滴加抗體稀釋液，使雜交膜浸潤于抗體稀釋液中，進行雜交反應。
進一步，所述凹槽通過在不透水薄膜上施加一定壓力形成，使不透水薄膜與凹槽緊密貼合，凹槽的深度為2-3mm，凹槽面積大于雜交膜的面積。
進一步，所述抗體稀釋液的添加量為3～4ml抗體稀釋液/(6cm×8cm)雜交膜。
進一步，所述雜交膜為pvdf膜或nc膜。
一般情況下，實驗采用小盒孵育6cm×8cm雜交膜需10ml以上抗體稀釋液，本發明抗體稀釋液的添加量為3～4ml抗體稀釋液/(6cm×8cm)雜交膜，大大減少了抗體用量，有效節約了試劑成本。
本發明所述抗體孵育試劑盒在盒體內壁圍有一圈濕巾，可以有效防止稀釋液的蒸發。
本發明利用硅橡膠的流動性和可塑性，使平鋪于硅橡膠上的不透水薄膜制造出低于硅橡膠平面的凹槽，用于對抗體孵育提供空間。
本發明所述試劑盒簡便高效，使用方法簡單，可根據需要設置多個凹槽，同時進行不同抗體的孵育。凹槽可根據雜交膜的大小和形狀制作，可為圓形、多邊形或不規則圖形，所形成的空間極小，正合適探針稀釋液的施用，極大節省抗體量。
孵育多種抗體時，可以在同一個密封盒內的硅橡膠平面中，做出多個凹槽，同時進行實驗。抗體只存于凹槽中，無交叉污染。可放置搖床孵育以獲得更好的雜交效果。
由于形成了一定的凹槽，在搖床上孵育時，抗體稀釋液不會流出，孵育效果好。
凹槽便于抗體的直接回收，加之不透水薄膜的疏水性，因此本發明的抗體試劑盒的抗體稀釋液的回收率良好，可達99％。
本發明抗體孵育試劑盒的使用方法與用密封袋孵育抗體的方法相比，取pvdf膜和回收抗體均較為便捷和完全，節約了兩倍以上的時間成本和試劑成本。使用后所有器具和材料均可清洗后回收利用。
本發明抗體孵育試劑盒可用于westernblotting、southernblotting等印跡雜交實驗。
附圖說明
圖1為試劑盒俯視圖；
其中：盒體1，硅橡膠2，濕巾3，不透水薄膜4，凹槽5，雜交膜6。
具體實施方式
下面詳細描述本發明的實施例，所述實施例的示例旨在用于解釋本發明，而不能理解為對本發明的限制。實施例中未注明具體技術或條件者，按照本領域內的文獻所描述的技術或條件或者按照產品說明書進行。所用試劑或儀器未注明生產廠商者，均為可以通過市購獲得的常規產品。
實施例1抗體試劑盒的制備
1、取一個可密封的盒子，在其內部鋪設5mm厚度的硅橡膠2使在盒體1內形成一水平面。
2、裁剪長、寬均略大于pvdf膜6的不透水薄膜4，將不透水薄膜4安排于硅橡膠2平面上合適的位置平鋪。利用聚甲基乙烯基硅氧烷的可塑性，向不透水薄膜4面中部施加壓力，使得底面下沉2-3mm。至此不透水薄膜4底部成平面，形成凹槽5，凹槽5與不透水薄膜4緊密貼合。
3、在密封盒內壁圍一圈濕巾3，以防止抗體稀釋液的蒸發。
實施例中不透水薄膜可為封口膜、保鮮膜或錫箔紙。
實施例中硅橡膠為聚甲基乙烯基硅氧烷。
實施例2抗體試劑盒的使用
以westernblotting為例：
雜交膜6轉膜、漂洗過后，將pvdf膜的含蛋白一面向上，水平鋪于實施例1試劑盒中的凹槽5內，直接滴加抗體稀釋液。抗體稀釋液的添加量為3～4ml抗體稀釋液/(6cm×8cm)雜交膜。抗體稀釋液的體積不應大于凹槽5。使雜交膜6浸潤于抗體稀釋液中，進行雜交反應。孵育過程可以保持水平放置，也可以以小角度緩慢搖動。
抗體回收：提起一角取走雜交膜后，抗體溶液留存于不透水薄膜4形成的凹槽5中，可以直接使用移液槍快速吸取。
實施例中雜交膜為pvdf膜或nc膜。
經實驗證明，在無因操作不當導致抗體流失的情況下，此方法的抗體稀釋液的回收率可達99％。此方法所用器具和材料均可清洗后反復利用，節約耗材成本。
盡管上面已經示出和描述了本發明的實施例，可以理解的是，上述實施例是示例性的，不能理解為對本發明的限制，本領域的普通技術人員在不脫離本發明的原理和宗旨的情況下在本發明的范圍內可以對上述實施例進行變化、修改、替換和變型。