專利名稱：丹參中原兒茶醛的測定新方法
技術領域：
本發明涉及一種丹參中原兒茶醛的測定新方法。
丹參具祛瘀止痛、活血通經、清心除煩之功效，是臨床上治療冠心病、及心絞痛的有效藥物之一，據藥理研究證明，其治療心絞痛的有效成分為水溶性及脂溶性兩部分。水溶性成分多以原兒茶醛及丹參素為測定指標，來評價丹參藥材的質量、脂溶性的成分多以丹參酮IIA為評價指標。
目前為止，丹參藥材中原兒茶醛的測定方法報道的已有4種，分別為文獻1(復方丹參口含片原料質量標準(國家簡化四類新藥)，文獻2(竺葉青等，中成藥研究，1984，6(12)，11-12)，文獻3(楊樹德等，藥學學報，1981；16(7)530)，文獻4(王寶琹主編，中成藥質量標準與標準物質研究，中國醫藥科技出版社，1994，243頁)。上述四種測定方法均不能將藥材所含的原兒茶醛準確地測定出來，僅能測到其真實含量的1/20-1/171。不能為丹參藥材的合理應用提供準確的測定依據，導致大量的丹參藥材資源浪費。
本發明的目的是為了丹參藥材有效成分的充分利用，而提供一種方法簡便、精密度高、重現性好、穩定、沒有理論損失，易于普及及掌握的丹參中原兒茶醛的測定方法。
本發明的目的是通過下述技術方案實現的(1)供試品溶液的制備取丹參粉碎過65目篩，準確稱取1±1％g，置具塞三角瓶中，準確加0.04-0.1％的Na2CO3溶液50ml，稱重，80-100℃水浴中加熱2小時15分。取下，放冷，稱重，用水補足減失的重量，過濾；取續濾液10ml，于25ml容量瓶中，加甲醇至刻度，過濾，取續濾液，用微孔濾膜過濾，濾液作為供試品溶液；(2)對照品溶液制備精密稱取原兒茶醛對照品約10±1％mg置50ml量瓶中，加50％甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml置50ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液；(3)色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料，甲醇-1％冰醋酸溶液(15∶85)為流動相，檢測波長280nm±1nm，理論塔板數按原兒茶醛計應不低于2000；(4)測定法分別精密吸取對照品溶液及供試品溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，照高效液相色譜法測定、計算，即得。
本發明的原理如下本發明根據原兒茶醛為弱酸性的物質，溶于堿成鹽后，增大了其水中的溶解度以及成鹽后趨于穩定的性質，探討出了丹參中原兒茶醛的測定新方法。
本發明的優點如下(1)本發明能夠將丹參中原兒茶醛的真實含量準確地測定出來，以同一批丹參藥材飲片為樣品，采用文獻1-4的4種方法，及本發明的方法分別進行樣品處理，再用同一高壓液相法進行測定。本發明方法的測定結果是文獻報道方法的20-171倍(見附表1及附
圖1)。
利用本發明方法還測定了2批丹參個子貨(一批野生丹參，一批家種丹參)的含量，野生的原兒茶醛含量為0.28％，家種的為0.32％，其測定結果分別是文獻2丹參個子貨9批樣品的最高含量0.08％的3和4倍，最低含量0.03％的9-10倍，是文獻5(華西藥學雜志1996；11(4)214)2批丹參藥材0.098％的3倍，0.0201％的14倍和16倍，是文獻6(中成藥1996；18(10)20-22)及文獻7(中藥通報，1985；10(11)18-20)丹參飲片的0.03％的近10倍及0.02％的近15倍。
(2)本發明不僅為丹參藥材的合理應用提供了準確地測定方法，還為全國制藥行業尋找丹參及復方丹參制劑的合理提取工藝提供了新的對照標準，將為提高各類丹參制劑的質量及療效作出貢獻。
(3)本發明還具有方法簡便、穩定、精密度高、重現性好、沒有理論損失、易于普及掌握的特點。
本發明的實施例如下(1)供試品溶液的制備取丹參粉碎過65目篩，準確稱取1±1％g，置具塞三角瓶中，準確加0.04-0.1％的Na2CO3溶液50ml，稱重，80-100℃水浴中加熱2小時15分。取下，放冷，稱重，用水補足減失的重量，過濾；取續濾液10ml，于25ml容量瓶中，加甲醇至刻度，過濾，取續濾液，用微孔濾膜過濾，濾液作為供試品溶液；
(2)對照品溶液制備精密稱取原兒茶醛對照品約10±1％mg置50ml量瓶中，加50％甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml置50ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液；(3)色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料，甲醇-1％冰醋酸溶液(15∶85)為流動相，檢測波長280nm±1nm，理論塔板數按原兒茶醛計應不低于2000；(4)測定法分別精密吸取對照品溶液及供試品溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，照高效液相色譜法測定、計算，即得。
附方法學考察數據1、樣品、對照品紫外掃描圖譜樣品與對照品紫外掃描圖譜完全一致，均在280nm有最大吸收(見圖2)。
2、穩定性實驗取原兒茶醛標準品溶液(0.0188mg/ml)每隔一定時間，向高效液相色譜儀注一針，測定其峰面積，測定了53小時內的穩定性，結果表明8次的峰面積的平均值為2016913.75，RSD％為1.7。
3、線性關系分別吸取濃度為0.005185mg/ml，0.01037mg/ml，0.016592mg/ml，0.02074mg/m1，0.03111g/ml的標準品溶液，各進樣20μl，測其峰面積，計算回歸方程y＝5706926.5X-14717.42，γ＝0.9998，表明原兒茶醛在0.1037-0.6222μg范圍內，呈良好的線性關系。
4、精密度實驗取同一濃度的標準品溶液(0.0188mg/ml)，連續進樣5次，每次20μl，測定其吸收峰值，5次測定的平均峰面積為2038834，RSD％為1.14。
5、重現性實驗采用加樣回收實驗，即取同一份樣品6份，一份作為疊加樣品，其余5份按樣品標準品約為1∶1加入定量標準品，按樣品測定項下，進行提取測定，結果見附表2。
附表1同一批藥材用本發明方法及文獻報道方法的測定結果對比
附表2原兒茶醛回收率測定結果
附圖及圖面說明圖1-1為原兒茶醛標準對照品的測定圖譜。圖1-2為本發明方法的丹參中原兒茶醛的測定圖譜。圖1-3為文獻1法的丹參中原兒茶醛的測定圖譜。圖1-4為文獻2法的丹參中原兒茶醛的測定圖譜。圖1-5為文獻3法的丹參中原兒茶醛的測定圖譜。圖1-6為文獻4法的丹參中原兒茶醛的測定圖譜。圖2為原兒茶醛標準對照品及丹參藥材的紫外掃描圖譜。在圖1中，1為丹參素峰，2為原兒茶醛峰。在圖2中，a為原兒茶醛標準對照品，b為丹參藥材。
權利要求
1.丹參中原兒茶醛的測定新方法，其特征在于(1)供試品溶液的制備。取丹參粉碎過65目篩，準確稱取1±1％g，置具塞三角瓶中，準確加0.04-0.1％的Na2CO3溶液50ml，稱重，80-100℃水浴中加熱2小時15分。取下，放冷，稱重，用水補足減失的重量，過濾；取續濾液10ml，于25ml容量瓶中，加甲醇至刻度，過濾，取續濾液，用微孔濾膜過濾，濾液作為供試品溶液；(2)對照品溶液制備精密稱取原兒茶醛對照品10±1％mg置50ml量瓶中，加50％甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml置50ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液；(3)色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料，甲醇-1％冰醋酸溶液(15∶85)為流動相，檢測波長280nm±1nm，理論塔板數按原兒茶醛計應不低于2000；(4)測定法分別精密吸取對照品溶液及供試品溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，照高效液相色譜法測定、計算，即得。
全文摘要
本發明涉及一種丹參中原兒茶醛的測定新方法,首先制備供試品溶液,將丹參粉碎過65目篩,精密稱取1±1%g置三角瓶中,加0.04—0.1%的Na
文檔編號G01N30/00GK1264040SQ99117660
公開日2000年8月23日 申請日期1999年8月11日 優先權日1999年8月11日
發明者韓桂茹, 趙志軍, 劉鐵鋼 申請人:河北省藥品檢驗所