一種鴉膽子組織培養育苗方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及中草藥材繁育技術，具體涉及一種鴉膽子育苗的方法，尤其是鴉膽子組織培養育苗的方法，屬于中草藥材繁育技術領域。
【背景技術】
[0002]鴉膽子為苦木科植物，學名:Brucea javanica，別名:鴨蛋子、老鴉膽、鴉蛋子、苦參子、小苦楝等，常為大灌木或小喬木，株高I?3米，全株被黃色柔毛，樹皮有苦味，奇數羽狀復葉互生，藥用部位為干燥成熟果實，其根、葉亦可入藥。
[0003]鴉膽子果實主要含生物堿、糖甙類以及黃酮類物質；其種子含鴉膽子苦醇等多種苦木素的苦味成分。鴉膽子的種仁含油酸、亞油酸等脂肪油，它們的含量高達56.23%，其中油酸是抗癌的有效活性成分，所得的鴉膽子油經多年臨床驗證具有一定的抗癌作用，臨床上制成10%鴉膽子油乳劑用于治療消化系統腫瘤如胃癌、食管癌等，特別是隨著介入放射學的發展，鴉膽子油乳對治療原發性肝癌方面有較大價值，常用鴉膽子油乳、絲裂霉素、碘油介入效果顯著。鴉膽子性寒，味苦，有小毒；具有清熱解毒，殺蟲、止痢、腐蝕螫疣功能，用于治療阿米巴痢疾、瘧疾、早期血吸蟲、菌痢等癥，外用治療雞眼、皮疣等。此外，利用鴉膽子還可以制造一些日用化工品，如藥阜、洗浴液、發乳、頭油、潤膚霜、農用乳油、鴉膽子冷浸液還可作為滅蚊劑。
[0004]隨著人們生活水平的提高和對健康的需求，鴉膽子的用途越來越多，人們對野生資源的濫采亂挖又使野生鴉膽子瀕臨滅絕，為滿足需要，人們不得不發展人工種植技術。
[0005]現有技術中，開展鴉膽子人工栽培，主要采用種子播種育苗方法，這種方法有兩個方面的缺陷:一是培育時間長，產量低，不能滿足市場對鴉膽子的需求；二是因鴉膽子種源有限，發芽率低，不能大面積發展鴉膽子人工種植，無法形成產業化。
【發明內容】
[0006]發明目的:本發明的目的是針對現有技術中鴉膽子人工繁育時間長，產量低，不能大面積發展的問題，提供一種組織培養育苗方法，縮短鴉膽子繁育時間，提高育苗成苗率，而且能保持鴉膽子藥用成分，移栽后生長快，可大面積進行鴉膽子人工栽培，形成產業化。
[0007]技術方案:本發明所述的一種鴉膽子組織培養育苗方法，具體包括以下步驟:
1.采種:選健壯、無病蟲害的野生鴉膽子植株作采種母株，每年霜降節氣過后，種子成熟，即可采種。
[0008]2.無菌苗的培養，將鴉膽子種子置于0.3%升汞溶液浸泡消毒15?18分鐘，在超凈工作臺上用無菌水浸洗3?5次，每次浸洗5?8分鐘，然后將種子播種于培養基，在室內自然散射光照下培養。
[0009]3.誘導培養基:以MS為基本培養基，加入植物激素進行誘導培養，植物激素用芐基嘌呤(BA)，濃度為2.0?2.5mg/L，同時加入2.8%?3%的蔗糖和0.8%的瓊脂，培養基溫度保持25°C?28°C，調節PH值為6.0?6.5。
[0010]4.叢生芽誘導:當步驟2培養的無菌苗長至5?6厘米后，切取上部2.5?3.0厘米長的頂芽莖段，接入誘導過的培養基培養28?30天后即有叢生芽形成。
[0011]5.叢生芽繼代增殖:叢生芽誘導至平均高達3.5厘米后(需48?52天)，將叢生芽切成3芽一簇，轉至另一誘導過的培養基，25天?30天后，每簇增殖至45?50個叢生芽。
[0012]6.誘導生根:當繼代增殖的叢生芽有70%長至3?4厘米時，將健壯的芽單切，并轉到新的誘導過的培養基上誘導生根，18天后基部切口開始分化出根。
[0013]7.試管苗的移栽:將發育良好，具有2?3張展開葉片的試管苗瓶蓋打開，置于室溫下煉苗3?5天后取出小苗，用清水洗去根部的培養基，在有65%?75%遮蔭度的大棚內，移栽到苗床或營養杯中，澆透水，并用塑料薄膜覆蓋，每天揭開薄膜換氣45分鐘，噴水霧保持空氣濕度85%以上，10?12天后，揭去薄膜，可移栽大田。
[0014]有益效果:本發明與現有技術相比，其有益效果是:
本發明的鴉膽子組織育苗方法，取材方便，叢生芽誘導率達65%?80%，成苗達85%以上，可在短時間內繁育大量的優質組培苗，以滿足人工大量栽培的需要，移栽定植后，生長迅速，產量比種子育苗移栽增加30%?35%，而且與野生鴉膽子的有效藥用成分一致。
【具體實施方式】
[0015]
下面結合具體實施事例對本發明技術方案進行詳細說明。
[0016]實施例1:一種鴉膽子組織培養育苗，具體步驟如下:
1.采種:選健壯、無病蟲害的野生鴉膽子植株作采種母株，每年霜降節氣過后，種子成熟，即可采種。
[0017]2.無菌苗的培養，將鴉膽子種子置于0.3%升汞溶液浸泡消毒15分鐘，在超凈工作臺上用無菌水浸洗3次，每次浸洗8分鐘，然后將種子播種于培養基，在室內自然散射光照下培養。
[0018]3.誘導培養基:以MS為基本培養基，加入植物激素進行誘導培養，植物激素用芐基嘌呤(BA)，濃度為2.0mg/L，同時加入2.8%的蔗糖和0.8%的瓊脂，培養基溫度保持25°C，調節PH值為6.0。
[0019]4.叢生芽誘導:當步驟2培養的無菌苗長至5厘米后，切取上部2.5厘米長的頂芽莖段，接入誘導過的培養基培養28天后即有叢生芽形成。
[0020]5.叢生芽繼代增殖:叢生芽誘導至平均高達3.5厘米后，將叢生芽切成3芽一簇，轉至另一誘導過的培養基，25天后，每簇增殖至45個叢生芽。
[0021]6.誘導生根:當繼代增殖的叢生芽有70%長至3厘米時，將健壯的芽單切，并轉到新的誘導過的培養基上誘導生根，18天后基部切口開始分化出根。
[0022]7.試管苗的移栽:將發育良好，具有2張展開葉片的試管苗瓶蓋打開，置于室溫下煉苗3天后取出小苗，用清水洗去根部的培養基，在有65%遮蔭度的大棚內，移栽到苗床或營養杯中，澆透水，并用塑料薄膜覆蓋，每天揭開薄膜換氣45分鐘，噴水霧保持空氣濕度85%以上，10天后，揭去薄膜，可移栽大田。
[0023]實施例2:—種鴉膽子組織培養育苗，包括以下具體步驟:
1.采種:選健壯、無病蟲害的野生鴉膽子植株作采種母株，每年霜降節氣過后，種子成熟，即可采種。
[0024]2.無菌苗的培養，將鴉膽子種子置于0.3%升汞溶液浸泡消毒16分鐘，在超凈工作臺上用無菌水浸洗4次，每次浸洗6分鐘，然后將種子播種于培養基，在室內自然散射光照下培養。
[0025]3.誘導培養基:以MS為基本培養基，加入植物激素進行誘導培養，植物激素用芐基嘌呤(BA)，濃度為2.2mg/L，同時加入2.9%的蔗糖和0.8%的瓊脂，培養基溫度保持26°C，調節PH值為6.3。
[0026]4.叢生芽誘導:當步驟2培養的無菌苗長至5.5厘米后，切取上部2.8厘米長的頂芽莖段，接入誘導過的培養基培養29天后即有叢生芽形成。
[0027]5.叢生芽繼代增殖:叢生芽誘導至平均高達3.5厘米后(需48?52天)，將叢生芽切成3芽一簇，轉至另一誘導過的培養基，28天后，每簇增殖至45?50個叢生芽。
[0028]6.誘導生根:當繼代增殖的叢生芽有70%長至3.5厘米時，將健壯的芽單切，并轉到新的誘導過的培養基上誘導生根，20天后基部切口開始分化出根。
[0029]7.試管苗的移栽:將發育良好，具有2張展開葉片的試管苗瓶蓋打開，置于室溫下煉苗4天后取出小苗，用清水洗去根部的培養基，在有70%遮蔭度的大棚內，移栽到苗床或營養杯中，澆透水，并用塑料薄膜覆蓋，每天揭開薄膜換氣45分鐘，噴水霧保持空氣濕度85%以上，11天后，揭去薄膜，可移栽大田。
[0030]實施例3:—種鴉膽子組織培養育苗，其具體步驟如下:
1.采種:選健壯、無病蟲害的野生鴉膽子植株作采種母株，每年霜降節氣過后，種子成熟，即可采種。
[0031]2.無菌苗的培養，將鴉膽子種子置于0.3%升汞溶液浸泡消毒18分鐘，在超凈工作臺上用無菌水浸洗5次，每次浸洗5分鐘，然后將種子播種于培養基，在室內自然散射光照下培養。
[0032]3.誘導培養基:以MS為基本培養基，加入植物激素進行誘導培養，植物激素用芐基嘌呤(BA)，濃度為2.5mg/L，同時加入3%的蔗糖和0.8%的瓊脂，培養基溫度保持28°C，調節PH值為6.5。
[0033]4.叢生芽誘導:當步驟2培養的無菌苗長至6厘米后，切取上部3.0厘米長的頂芽莖段，接入誘導過的培養基培養30天后即有叢生芽形成。
[0034]5.叢生芽繼代增殖:叢生芽誘導至平均高達3.5厘米后(需48?52天)，將叢生芽切成3芽一簇，轉至另一誘導過的培養基，30天后，每簇增殖至50個叢生芽。
[0035]6.誘導生根:當繼代增殖的叢生芽有70%長至4厘米時，將健壯的芽單切，并轉到新的誘導過的培養基上誘導生根，20天后基部切口開始分化出根。
[0036]7.試管苗的移栽:將發育良好，具有3張展開葉片的試管苗瓶蓋打開，置于室溫下煉苗5天后取出小苗，用清水洗去根部的培養基，在有75%遮蔭度的大棚內，移栽到苗床或營養杯中，澆透水，并用塑料薄膜覆蓋，每天揭開薄膜換氣45分鐘，噴水霧保持空氣濕度85%以上，12天后，揭去薄膜，可移栽大田。
【主權項】
1.一種鴉膽子組織培養育苗方法，其特征在于包括以下步驟: (1)采種:選健壯、無病蟲害的野生鴉膽子植株作采種母株，每年霜降節氣過后，種子成熟，即可米種； (2)無菌苗的培養，將鴉膽子種子置于0.3%升汞溶液浸泡消毒15?18分鐘，在超凈工作臺上用無菌水浸洗3?5次，每次浸洗5?8分鐘，然后將種子播種于培養基，在室內自然散射光照下培養； (3)誘導培養基:以MS為基本培養基，加入植物激素進行誘導培養，植物激素用芐基嘌呤(BA)，濃度為2.0?2.5mg/L，同時加入2.8%?3%的蔗糖和0.8%的瓊脂，培養基溫度保持25°(:?28°(:，調節？!1值為6.0?6.5 ； (4)叢生芽誘導:當步驟(2)培養的無菌苗長至5?6厘米后，切取上部2.5?3.0厘米長的頂芽莖段，接入誘導過的培養基培養叢生芽； (5)叢生芽繼代增殖:叢生芽誘導至平均高達3.5厘米后，將叢生芽切成3芽一簇，轉至另一誘導過的培養基，讓叢生芽增殖； (6)誘導生根:當繼代增殖的叢生芽有70%長至3?4厘米時，將健壯的芽單切，并轉到新的誘導過的培養基上誘導生根。2.根據權利要求1所述的鴉膽子組織培養育苗方法，其特征在于還包括步驟(7)試管苗的移栽:叢生芽誘導生根后，將發育良好，具有2?3張展開葉片的試管苗瓶蓋打開，置于室溫下煉苗3?5天后取出小苗，用清水洗去根部的培養基，在有65%?75%遮蔭度的大棚內，移栽到苗床或營養杯中，澆透水，并用塑料薄膜覆蓋，每天揭開薄膜換氣45分鐘，噴水霧保持空氣濕度85%以上，10?12天后，揭去薄膜，可移栽大田。
【專利摘要】本發明公開一種鴉膽子組織培養育苗方法，屬于中草藥材繁育技術領域，具體包括采種、無菌苗的培養、誘導培養基、？叢生芽誘導、叢生芽繼代增殖、誘導生根、試管苗的移栽7個步驟，有效解決了現有技術中鴉膽子人工繁育時間長，產量低，不能大面積發展的問題。其有益效果是：取材方便，叢生芽誘導率達65%～80%，成苗達85%以上，可在短時間內繁育大量的優質組培苗，以滿足人工大量栽培的需要，移栽定植后，生長迅速，產量比種子育苗移栽增加30%～35%，而且與野生鴉膽子的有效藥用成分一致。
【IPC分類】A01H4/00
【公開號】CN105165614
【申請號】
【發明人】莫玉明
【申請人】莫玉明
【公開日】2015年12月23日
【申請日】2015年9月27日