一種金黃色葡萄球菌選擇性培養基的制作方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及醫學檢驗領域，具體涉及一種金黃色葡萄球菌選擇性培養基。
【背景技術】
[0002]金黃色葡萄球菌，也稱“金葡菌”，細胞壁含90%的肽聚糖和10%的磷壁酸。其肽聚糖的網狀結構比革蘭氏陰性菌致密，染色時結晶紫附著后不被酒精脫色故而呈現紫色，相反，陰性菌的細胞壁肽聚糖層薄、交聯度差，脂類含量高，所以紫色復合物被酒精沖掉然后附著了沙黃的紅色。金黃色葡萄球菌與青霉素的發現有很大的淵源。當年弗萊明就是在他的金黃色葡萄球菌的培養皿中發現有些球菌被殺死了，于是發現了青霉素。而研究也表明青霉素只對以金黃色葡萄球菌為代表的革蘭氏陽性菌作用明顯。這也是由肽聚糖層的厚度和結構造成的。
【發明內容】
[0003]本發明的技術任務是針對以上現有技術的不足，提供一種金黃色葡萄球菌選擇性培養基。
[0004]本發明解決其技術問題的技術方案是:
一種金黃色葡萄球菌選擇性培養基，配制1000ml選擇性培養基的配方中含有胰蛋白胨25g;葡萄糖液200ml;芋酸5g;假細錐甲素0.5g;枸櫞酸鎂25g;丙酮酸鈉8?12mg;亞碲酸鉀0.6g;瓊脂0.2g ；蒸饋水加至1000ml。
[0005]進一步地，每100ml選擇性培養基還含有阿波酮酸0.lg。
[0006]進一步地，每1000ml選擇性培養基還含有濃度300g/L的馬鈴薯水煮液200?300ml ο
[0007]進一步地，每1000ml選擇性培養基還含有N-乙酰基-D-葡萄糖胺5mg;阿波酮酸0.lg；濃度300g/L的馬鈴薯水煮液200?300ml。
[0008]—種金黃色葡萄球菌選擇性培養基的制備方法，包括以下步驟:
(I)取馬鈴薯加水煮沸I小時，過濾，取濾液，調整體積到濃度為300g/L，得馬鈴薯水煮液；
(2 )取胰蛋白胨;葡萄糖液;芋酸;假細錐甲素;枸櫞酸鎂;丙酮酸鈉;亞碲酸鉀;瓊脂;阿波酮酸及N-乙酰基-D-葡萄糖胺溶于步驟I所得馬鈴薯水煮液中，混勻過濾后，蒸餾水定容，低溫滅菌2次，每次45min，滅菌后分裝。
[0009]該發明的有益效果在于:本發明與現有技術相比較，具有檢出可靠、金黃色葡萄球菌分離率高的特點。
【具體實施方式】
[0010]以下結合實際情況，對本發明的【具體實施方式】作詳細說明。
[0011]實施例1 配制100ml選擇性培養基的配方中含有:胰蛋白胨25g;葡萄糖液200ml;芋酸5g;假細錐甲素0.5g ；枸橡酸鎂25g;丙酮酸鈉8mg ；亞碲酸鉀0.6g ；瓊脂0.2g ；蒸饋水加至1000ml。制備方法:取胰蛋白胨;葡萄糖液;芋酸;假細錐甲素；枸櫞酸鎂;丙酮酸鈉;亞碲酸鉀;瓊脂溶于蒸餾水中，混勻過濾后，蒸餾水定容，低溫滅菌2次，每次45min，滅菌后分裝。
[0012]實施例2
配制100ml選擇性培養基的配方中含有:胰蛋白胨25g;葡萄糖液200ml;芋酸5g;假細錐甲素0.5g;枸櫞酸鎂25g;丙酮酸鈉12mg;亞碲酸鉀0.6g;瓊脂0.2g; N-乙酰基-D-葡萄糖胺5mg;蒸餾水加至1000ml。制備方法:取胰蛋白胨;葡萄糖液;芋酸;假細錐甲素;枸櫞酸鎂;丙酮酸鈉;亞碲酸鉀;瓊脂;N-乙酰基-D-葡萄糖胺溶于蒸餾水中，混勻過濾后，蒸餾水定容，低溫滅菌2次，每次45min，滅菌后分裝。
[0013]實施例3
配制100ml選擇性培養基的配方中含有:胰蛋白胨25g;葡萄糖液200ml;芋酸5g;假細錐甲素0.5g；枸橡酸鎂25g；丙酮酸鈉1mg；亞碲酸鉀0.6g；瓊脂0.2g;阿波酮酸0.lg；蒸饋水加至1000ml。制備方法:取胰蛋白胨;葡萄糖液;芋酸;假細錐甲素；枸櫞酸鎂;丙酮酸鈉;亞碲酸鉀;瓊脂;阿波酮酸溶于蒸餾水中，混勻過濾后，蒸餾水定容，低溫滅菌2次，每次45min，滅菌后分裝。
[0014]實施例4
配制100ml選擇性培養基的配方中含有:胰蛋白胨25g;葡萄糖液200ml;芋酸5g;假細錐甲素0.5g;枸櫞酸鎂25g;丙酮酸鈉9mg;亞碲酸鉀0.6g;瓊脂0.2g;濃度300g/L的馬鈴薯水煮液200ml;蒸餾水加至1000ml。制備方法:(I)取馬鈴薯加水煮沸I小時，過濾，取濾液，調整體積到濃度為300g/L，得馬鈴薯水煮液;(2)取胰蛋白胨;葡萄糖液;芋酸;假細錐甲素;枸櫞酸鎂；丙酮酸鈉；亞碲酸鉀;瓊脂；溶于步驟I所得馬鈴薯水煮液中，混勻過濾后，蒸餾水定容，低溫滅菌2次，每次45min，滅菌后分裝。
[0015]實施例5
配制100ml選擇性培養基的配方中含有:胰蛋白胨25g;葡萄糖液200ml;芋酸5g;假細錐甲素0.5g;枸櫞酸鎂25g;丙酮酸鈉I Img;亞碲酸鉀0.6g;瓊脂0.2g;N-乙酰基-D-葡萄糖胺5mg;阿波酮酸0.1g;濃度300g/L的馬鈴薯水煮液300ml;蒸餾水加至1000ml。制備方法為:(I)取馬鈴薯加水煮沸I小時，過濾，取濾液，調整體積到濃度為300g/L，得馬鈴薯水煮液；(2)取胰蛋白胨;葡萄糖液;芋酸;假細錐甲素；枸櫞酸鎂;丙酮酸鈉;亞碲酸鉀;瓊脂;阿波酮酸及N-乙酰基-D-葡萄糖胺溶于步驟I所得馬鈴薯水煮液中，混勻過濾后，蒸餾水定容，低溫滅菌2次，每次45min，滅菌后分裝。
[0016]本發明所得金黃色葡萄球菌選擇性培養基具有檢出可靠、金黃色葡萄球菌分離率高的特點，為臨床資料充分證明，有關資料如下。
[0017]I對象與方法:
1.1選擇性培養基制備:共設3組，分別為對照組、實施例1方案組、實施例5方案組。對照組為葡萄球菌選擇性枸櫞酸鎂110(CHAPMAN枸櫞酸鎂)；實施例1方案組、實施例5方案組的配方和制備方法見實施例。
[0018]1.2方法:將20份經由PCR確定金黃色葡萄球菌陽性的標本中混入金黃色葡萄球菌，接種于培養基上，在37 °C下孵育24小時。
[0019]1.3統計學分析:用SPSS12.0進行統計分析，P〈0.05表示有顯著性意義。
[0020]2結果:在20份接種標本中，細菌培養分離并鑒定為金黃色葡萄球菌的，實施例1方案組為16例，實施例5方案組為18例;對照組為3例，經統計學處理，本發明各實施例組與對照組比較具有明顯差異(P〈0.001)。結果表明，本發明實施例金黃色葡萄球菌分離率明顯高于現有的選擇性培養基。
[0021]以上所述是本發明的優選實施方式，應當指出，對于本技術領域的普通技術人員來說，在不脫離本發明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也視為本發明的保護范圍。
【主權項】
1.一種金黃色葡萄球菌選擇性培養基，其特征在于:配制100ml選擇性培養基的配方中含有胰蛋白胨25g;葡萄糖液200ml;芋酸5g;假細錐甲素0.5g;枸櫞酸鎂25g;丙酮酸鈉8?12mg ；亞碲酸鉀0.6g ；瓊脂0.2g ；蒸饋水加至1000ml。2.根據權利要求1所述的金黃色葡萄球菌選擇性培養基，其特征在于:每100ml選擇性培養基還含有阿波酮酸0.lg。3.根據權利要求1所述的金黃色葡萄球菌選擇性培養基，其特征在于:每1000ml選擇性培養基還含有濃度300g/L的馬鈴薯水煮液200?300ml。4.根據權利要求1所述的金黃色葡萄球菌選擇性培養基，其特征在于:每100ml選擇性培養基還含有N-乙酰基-D-葡萄糖胺5mg;阿波酮酸0.1g;濃度300g/L的馬鈴薯水煮液200?300ml ο5.根據權利要求1至4所述的金黃色葡萄球菌選擇性培養基，其特征在于:所述選擇性培養基的制備方法，包括以下步驟: (1)取馬鈴薯加水煮沸I小時，過濾，取濾液，調整體積到濃度為300g/L，得馬鈴薯水煮液； (2)取胰蛋白胨;葡萄糖液;芋酸;假細錐甲素;枸櫞酸鎂;丙酮酸鈉;亞碲酸鉀;瓊脂;阿波酮酸及N-乙酰基-D-葡萄糖胺溶于步驟I所得馬鈴薯水煮液中，混勻過濾后，蒸餾水定容，低溫滅菌2次，每次45min，滅菌后分裝。
【專利摘要】本發明涉及一種金黃色葡萄球菌選擇性培養基，配制1000ml選擇性培養基的配方中含有胰蛋白胨25g；葡萄糖液200ml；芋酸5g；假細錐甲素0.5g；枸櫞酸鎂25g；丙酮酸鈉8～12mg；亞碲酸鉀0.6g；瓊脂0.2g；蒸餾水加至1000ml。制備方法，包括以下步驟：（1）取馬鈴薯加水煮沸1小時，過濾，取濾液，調整體積到濃度為300g/L，得馬鈴薯水煮液；（2）取胰蛋白胨；葡萄糖液；芋酸；假細錐甲素；枸櫞酸鎂；丙酮酸鈉；亞碲酸鉀；瓊脂；阿波酮酸及N-乙酰基-D-葡萄糖胺溶于步驟1所得馬鈴薯水煮液中，混勻過濾后，蒸餾水定容，低溫滅菌2次，每次45min，滅菌后分裝。本發明與現有技術相比較，具有檢出可靠、金黃色葡萄球菌分離率高的特點。
【IPC分類】C12Q1/14, C12R1/445
【公開號】CN105603043
【申請號】CN201610213818
【發明人】董建紅, 董春紅
【申請人】董建紅, 董春紅
【公開日】2016年5月25日
【申請日】2016年4月8日