一種含滸苔多糖的抑菌中藥及其制備方法和應用
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種含滸苔多糖的抑菌中藥，具體的涉及一種含滸苔多糖的抑菌中藥 及其制備方法和在抑制魚類嗜水氣單胞菌中的應用，屬于中藥技術領域。
【背景技術】
[0002] 嗜水氣單胞菌是一種人-獸-魚共患病的病原菌，特別魚類一旦感染，能引起敗血 性疾病，由嗜水氣單胞菌感染的疾病一般病情嚴重，具有快速傳染性，死亡率高。目前無有 效的疫苗，水產動物感染后主要使用抗生素，但長期使用，會產生耐藥性和藥物殘留。
[0003] 關于魚類感染嗜水氣單胞菌，一直是水產養殖中研究的重要問題之一。目前使用 的藥物，以抗生素為主，不僅會產生抗藥性，而且，影響魚本身的營養品質，所造成的殘留也 會危害人類健康。
[0004] 現有技術也有一些關于嗜水氣單胞菌的中藥類抑制藥物的研究，但效果都不理 想，人們一直在嘗試和研究更合適的中藥。
[0005] 現有技術具有以下缺陷：（1)對嗜水氣單胞菌的抑制效果不好；（2)用藥量大；（3) 抗生素類藥物殘留嚴重，易產生抗藥性。
【發明內容】
[0006] 本發明為解決現有技術存在的不足，提供一種含滸苔多糖的抑菌中藥及其制備方法和 應用，以實現以下發明目的： 1、 本發明抑菌中藥，對嗜水氣單胞菌的抑制效果好，抑菌圈直徑為16.3~21.3mm; 2、 本發明抑菌中藥，用藥量小，對嗜水氣單胞菌的最低抑菌濃度為0.016~0.032 g/ ml ； 3、 本發明抑菌中藥，不含抗生素類成分，使用后無殘留，無污染； 4、 采用本發明抑菌中藥，可明顯降低虹鱒魚的嗜水氣單胞菌感染率和虹鱒魚的死亡 率； 5、 采用本發明抑菌中藥，可提高虹鱒魚肉質的營養品質。
[0007]為解決上述技術問題，采用以下技術方案： 一種含滸苔多糖的抑菌中藥，其原料包括滸苔、楊樹花、槐花、連翹、板藍根、蘆薈。 [0008]以下是對上述技術方案的進一步改進： 所述中藥各原料組分的重量份配比為:消1苔40~60重量份、楊樹花8~10重量份、槐花8 ~10重量份、連翹8~10重量份、板藍根8~10重量份、蘆薈8~10重量份。
[0009]所述中藥各原料組分的重量份配比為:消1苔50重量份、楊樹花10重量份、槐花10重 量份、連翹10重量份、板藍根10重量份、蘆薈10重量份。
[0010] 所述滸苔中滸苔多糖的含量為60.2%。
[0011] -種含滸苔多糖的抑菌中藥的制備方法，包括研磨步驟:研磨細度為200目。
[0012] 還包括抽提步驟:加熱至100°C，煮沸lh。
[0013] 制得的中藥濃度為2g/ml。
[0014] 本發明中藥對嗜水氣單胞菌的抑菌圈直徑為16.3~21.3_。
[0015]本發明中藥對嗜水氣單胞菌的最低抑菌濃度為0.016~0.032 g/ml。
[0016] -種含滸苔多糖的抑菌中藥的應用，本發明中藥在魚類養殖中的應用量為飼料質 量的2%。
[0017] 與現有技術相比，本發明的有益效果是： 1、 本發明抑菌中藥，對嗜水氣單胞菌的抑制效果較好，抑菌圈直徑為16.3~21.3mm; 2、 本發明抑菌中藥，對嗜水氣單胞菌的最低抑菌濃度為0.016~0.032 g/ml; 3、 本發明抑菌中藥，不含抗生素類成分，使用后無殘留，無污染； 4、 采用本發明抑菌中藥，可明顯降低虹鱒魚的嗜水氣單胞菌感染率和虹鱒魚的死亡 率； 5、 采用本發明抑菌中藥，可提高虹鱒魚肉質的營養品質。
【具體實施方式】
[0018] 實施例1 一種含滸苔多糖的抑菌中藥及其制備方法 所述的中藥，為液體制劑，其原料包括以下重量份的組分： 消1苔40重量份、楊樹花8重量份、槐花8重量份、連翹8重量份、板藍根8重量份、蘆薈8重 量份； 所述滸苔:為8月份采自青島海域的新鮮滸苔烘干后得到的干品；滸苔中滸苔多糖含量 為60.2%;上述百分數為質量百分數。
[0019] 所述楊樹花:為曬干保存的干花，3月份采自青云山上的楊樹； 所述槐花:為曬干保存的干花，4~5月份采自云門山上的槐樹； 所述連翹、板藍根、蘆薈均購自濰坊藥材公司。
[0020] 制備方法包括以下步驟： 1、 將滸苔清洗干凈，烤箱烘干，控制溫度為87~95 °C，烘干時間為25~35min; 2、 研磨 將楊樹花、槐花、連翹、板藍根、蘆薈和烘干的滸苔，分別研磨成粉末，細度為200目； 3、 稱量 按配方的重量份比例，用電子天平精確稱取研磨后的滸苔、楊樹花、槐花、連翹、板藍 根、蘆薈，混合； 4、 抽提 向混合后的粉末中，加入蒸餾水；加熱至100 °C，煮沸Ih，用8層紗布趁熱過濾，取過濾 液； 向過濾后的濾渣加入蒸餾水，100 °C煮沸Ih，用8層紗布趁熱過濾，取過濾液； 重復上述操作3次； 5、 合并上述4次過濾的濾液，濃縮至濃度2g/ml;用細菌濾器過濾得到濾液，即為成品。
[0021] 實施例2 -種含滸苔多糖的抑菌中藥及其制備方法 所述的中藥，為液體制劑，其原料包括以下重量份的組分： 消1苔50重量份、楊樹花10重量份、槐花10重量份、連翹10重量份、板藍根10重量份、蘆薈 10重量份； 所述滸苔:為8月份采自青島海域的新鮮滸苔烘干后得到的干品；滸苔中滸苔多糖含量 為60.2%;上述百分數為質量百分數。
[0022]所述楊樹花:為曬干保存的干花，3月份采自青云山上的楊樹； 所述槐花:為曬干保存的干花，4~5月份采自云門山上的槐樹； 所述連翹、板藍根、蘆薈均購自濰坊藥材公司。
[0023] 制備方法:與實施例1的制備方法相同。
[0024] 實施例3 -種含滸苔多糖的抑菌中藥及其制備方法 所述的中藥，為液體制劑，其原料包括以下重量份的組分： 消1苔60重量份、楊樹花9重量份、槐花8.5重量份、連翹8重量份、板藍根9重量份、蘆薈10 重量份； 所述滸苔:為8月份采自青島海域的新鮮滸苔烘干后得到的干品；滸苔中滸苔多糖含量 為60.2%;上述百分數為質量百分數。
[0025]所述楊樹花:為曬干保存的干花，3月份采自青云山上的楊樹； 所述槐花:為曬干保存的干花，4~5月份采自云門山上的槐樹； 所述連翹、板藍根、蘆薈均購自濰坊藥材公司。
[0026] 制備方法:與實施例1的制備方法相同。
[0027] 實施例4、一種含滸苔多糖的抑菌中藥的抑菌效果實驗 步驟1、材料準備 采用的菌株:嗜水氣單胞菌，保藏號為ATCC 7966，購自中科院微生物研究所； 采用的培養基:RS培養基、普通瓊脂培養基、營養肉湯培養基，均購自青島海博生物技 術有限公司； 其他材料:96孔板，購自北京陸橋生物技術有限公司。
[0028]步驟2、嗜水氣單胞菌菌懸液制備 在RS培養基上培養ATCC 7966嗜水氣單胞菌； 用接種環挑取培養的嗜水氣單胞菌的單個菌落，接種到4ml營養肉湯培養基中； 28°C溫箱中培養18h; 用平板稀釋法進行計數，用滅菌生理鹽水將各原菌液進行稀釋，配制成含菌數為IO7~ 108CFU/mL的菌懸液備用。
[0029]步驟3、牛津杯法測定抑菌效果 準備好瓊脂培養基9個，25 mL/個;分別吸取0.1 mL步驟2制備的菌懸液，均勻涂布于瓊 脂培養基表面;分為3組，每組3個培養基，分別為實施例1組、實施例2組、實施例3組； 實施例1組：用直徑6 mm的牛津杯在每個瓊脂培養基平板上打4個孔;其中3個孔各加 入0.1 mL的實施例1制備的中藥，另外1個孔加入0.1 mL滅菌生理鹽水，做為對照； 實施例2組：用直徑6 mm的牛津杯在每個瓊脂培養基平板上打4個孔;其中3個孔各加 入0.1 mL的實施例2制備的中藥，另外1個孔加入0.1 mL滅菌生理鹽水，做為對照； 實施例3組：用直徑6 mm的牛津杯在每個瓊脂培養基平板上打4個孔;其中3個孔各加 入0.1 mL的實施例3制備的中藥，另外1個孔加入0.1 mL滅菌生理鹽水，做為對照； 將上述3組接種的培養基置28°C溫箱中，培養18 h;觀察細菌生長情況，記錄抑菌圈直 徑，并求平均值，具體結果見表1。
[0030] 步驟4、測定最小抑菌濃度 實施例1組： 取96孔板，每孔加入100μΙ營養肉湯培養基； 在第1孔中加入1〇〇μ1實施例1的中藥，按2倍的比例倍比稀釋至第12孔； 然后，每孔加入1 〇〇μ1的步驟2制備