大學精密儀器廠）
[0058]高效液相色譜(HPLC)條件：
[0059] 色譜柱：Ci8,150mmX 4.6mm，5um
[0060] 流動相：甲醇：水：乙酸=70:30:0 · 25 [0061 ]波長：230nm
[0062] 流速：0.8ml/min
[0063] 進樣量：10uL
[0064] 柱溫：35 Γ
[0065] 儀器：
[0066] 普析通用L6液相色譜儀
[0067] 日立L-7250自動進樣器
[0068] 普析通用LC Win色譜工作站
[0069] 實施例1
[0070] 本實施例用于說明本發明的（5-(2-腈基芐基)_4,5，6,7-四氫噻吩并[3,2-c]吡 啶-2-基）乙酸酯的晶型及其制備過程。
[0071] 制備（5-(2-腈基芐基)-4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-(：]吡啶-2-基）乙酸酯作為原 料。其制備過程可以參照中國發明專利公開CN102241690中記載的反應流程。例如，其反應 流程可以為：
[0072] 中間體i的制備：
[0073]
[0074] 在裝有攪拌、冷凝器、溫度計的反應瓶中加入5，6，7，7a_四氫噻吩并[3，2-c ]吡啶-2(4H)_酮19.2g，用70mL乙腈將其溶解，攪拌下冷卻至-10°C，加入無水碳酸鉀41.5g。將2-氰 基溴芐19.6g分批加入反應體系中，加畢升溫至45°C繼續反應4h(板層顯示反應完全）。過 濾，濾液蒸干溶劑乙腈，加入50mL二氯甲烷，用3 X 50mL水洗滌反應液，分取二氯甲烷層，用 無水硫酸鈉充分干燥，過濾，減壓蒸盡二氯甲烷，即得黃色油狀產物22.6g(HPLC:97.2%)。 Rf = 0.47[單點，展開劑:v(石油醚）：v(乙酸乙酯）=1:2]<^，111/2:270.0(1〇。
[0075] 式（I)化合物（（5-(2-腈基芐基)-4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-(：]吡啶-2-基）乙酸 酯）的制備：
[0076]
[0077] 在裝有攪拌、冷凝器、溫度計的反應瓶中加入2.7g上述制得的中間體1，用lOmL二 氯甲烷將其溶解，攪拌下加入氫氧化鈉1.2g。將反應體系冷卻至_20°C，將1.02g乙酸酐分 批加入反應體系。加完，于室溫下繼續攪拌反應lh(板層顯示反應完全）。用3X15mL水洗滌 反應液，分取二氯甲烷層，用無水硫酸鈉充分干燥，過濾，減壓蒸盡二氯甲烷，柱分離，即得 白色固體產物(1^(： :99.6%)。1^ = 0.58[單點，展開劑:￥(石油醚）：￥(乙酸乙酯）=4:1]。 1!1 NMR(DMS0-d6,400MHz)S:2.253(s，3H)，2.700(s，2H)，2.767~2.780(d，2H)，3.402(s，2H)， 3.816(s，2H)，6.421(s，lH)，7.452 ~7.489(t，lH)，7.606~7.625(d，lH)，7.660~7.697(t， 1!〇,7.803~7.822((1，1!〇。]^，111/2 :312.0(]\〇。
[0078] 對上述所得的白色固體產物（5-(2-腈基芐基）_4,5，6,7-四氫噻吩并[3,2-c]吡 啶-2-基）乙酸酯進行X射線粉末衍射(PXRD)表征，其PXRD圖譜如圖1所示。重復上述制備方 法，測定所得的白色固體產物的熔點均為85-85.5°C。
[0079]本發明晶型的制備：
[0080] 取3g上述方法制得的白色固體(5-(2-腈基芐基)-4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-(：]吡 啶-2-基）乙酸酯，加入18ml的乙醇，在攪拌下加熱至78°C，使其全部溶解，過濾，取濾液;將 所得濾液在室溫下放置5h析晶，過濾收集結晶，干燥，得到本發明的晶體2.92g。
[0081 ] 測得該晶型的熔點為89.8-89.9°C，使用HPLC測得該晶型的純度為99.9%。
[0082] 實施例2
[0083]本實施例用于說明本發明的（5-(2-腈基芐基）-4,5，6,7-四氫噻吩并[3,2-c]吡 啶-2-基）乙酸酯的晶型及其制備過程。
[0084]按照與實施例1中相同的方法制備式(I)化合物作為原料。
[0085] 取3g上述方法制得的白色固體(5-(2-腈基芐基)-4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-(：]吡 啶-2-基）乙酸酯，加入30ml的乙醇，在攪拌下加熱至65°C，使其全部溶解，過濾，取濾液;將 所得濾液在室溫下放置8h析晶，過濾收集結晶，干燥，得到本發明的晶體2.89g。
[0086] 測得該晶型的熔點為89.4-89.8°C，使用HPLC測得該晶型的純度為99.9%。
[0087] 實施例3
[0088] 本實施例用于說明本發明的（5-(2-腈基芐基)_4,5，6,7-四氫噻吩并[3,2-c]吡 啶-2-基）乙酸酯的晶型及其制備過程。
[0089] 按照與實施例1中相同的方法制備式(I)化合物作為原料。
[0090] 取3g上述方法制得的白色固體(5-(2-腈基芐基)-4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-(：]吡 啶-2-基）乙酸酯，加入48ml的乙醇，在攪拌下加熱至50°C，使其全部溶解，過濾，取濾液;將 所得濾液在室溫下放置l〇h析晶，過濾收集結晶，干燥，得到本發明的晶體2.86g。
[0091] 測得該晶型的熔點為89.6-89.8°C，使用HPLC測得該晶型的純度為99.7%。
[0092] 實施例4
[0093] 本實施例用于說明含有本發明晶型的片劑的制備。 處方 用量/片 實施例1制得的晶型 5: rag 微晶纖維素 80 mg 預膠化淀粉 70 mg
[0094] 聚乙烯吡咯烷酮 6 mg 羧甲基淀粉鈉鹽 5: mg 硬脂酸鎂 2 mg 滑石粉 2 mg
[0095] 將實施例1制得的樣品晶型、預膠化淀粉和微晶纖維素過篩，以處方量充分混合， 加入含有處方量聚乙烯吡咯烷酮的溶液，混合，制軟材，過篩，制濕顆粒，于50-60°C干燥;然 后將羧甲基淀粉鈉鹽、硬脂酸鎂和滑石粉預先過篩，以處方量加入到上述干燥后的顆粒中， 壓片，即得含有本發明的晶型的片劑。
[0096] 實施例5
[0097] 本試驗例用于說明本發明的晶型對大鼠血小板聚集的抑制作用。
[0098] 1、實驗藥物與試劑：
[0099]實施例1制備的晶型；
[0100] ADP: SIGMA公司產品；
[0101] 羧甲基纖維素鈉800-1200:國藥集團化學試劑有限公司，批號:F20051103。
[0102] 2、實驗動物：
[0103] Wistar大鼠：SPF級，雄性，中國醫學科學院實驗動物研究所提供，許可證號SCXK (京)2005 - 0013〇 [0104] 3、實驗儀器：
[0105] PAM-3型雙通道血小板聚集儀:江蘇省丹陽無線電廠產品。
[0106] 4、實驗方法與結果：
[0107] 選用健康雄性Wistar大鼠，體重210_250g，隨機分組。每批均設正常對照組和晶型 給藥組。晶型給藥組的劑量為30mg/kg。采用灌胃給藥，給藥容積均為10mL/kg · bw，正常對 照組給予等量0.5 % CMC-Na，給藥后2h，腹腔注射40mg/kg戊巴比妥鈉（lmL/kg)麻醉，腹主動 脈采血，用3.8 %枸櫞酸鈉抗凝，分別制備富血小板血漿(PRP)和貧血小板血漿(PPP)，在 PAM-3型雙通道血小板聚集儀測定ADP(終濃度：1.08μΜ)誘導的血小板最大聚集百分率。結 果見表2。
[0108] 表2對ADP誘導的血小板聚集的影響（充±.切）
[0109]
[0110] 由表2可見，與正常對照組相比，本發明的晶型（30mg/kg)有明顯的抗ADP誘導的血 小板聚集作用。因此其可以用于預防或治療因血小板聚集而引起的冠狀動脈綜合征、心肌 梗死、心肌缺血等心腦血管疾病。
[0111] 實施例6
[0112] 將實施例1制得的本發明的晶型與專利CN102241690晶型和專利CN104098586晶型 進行影響因素試驗，分別在光照(4500±5001^)、高溫(60°(：)和高濕(92.5%相對濕度)的條 件下放置三個月，與第〇天比較外觀、雜質個數及雜質量（以HPLC測定）。試驗結果分別見表 3-5 〇
[0113] 表3光照穩定性試驗數據
[0114]
[0115]
[0116] 表4高溫穩定性試驗數據
[0117]
[0119]表5高濕穩定性試驗數據
[0120]
[0122] 由表3-5可知，在為期3個月的光照、高溫、高濕條件下的穩定性試驗中，本發明晶 型的長期穩定性較好，特別優于CN102241690晶型和CN104098586晶型，同時通過HPLC測定， 其雜質數和雜質總量的增加速度也明顯慢于CN102241690晶型和CN104098586晶型，可見本 發明的晶型具有較好的長期貯存穩定性，可以作為式(I)化合物原料藥的穩定來源。
[0123] 盡管本發明已進行了一定程度的描述，明顯地，在不脫離本發明的精神和范圍的 條件下，可進行各個條件的適當變化。可以理解，本發明不限于所述實施方案，而歸于權利 要求的范圍，其包括所述每個因素的等同替換。
【主權項】
1. 一種（5-(2-腈基芐基)-4，5，6，7-四氫噻吩并[3，2-C ]吡啶-2-基）乙酸酯的晶型Π ， 其特征在于，所述晶型的X-射線粉末衍射圖譜如說明書附圖4所示。2. 根據權利要求1所述的晶型Π ，其特征在于，該晶型的熔點為89.4-89.9°C。3. 根據權利要求1或2所述的晶型Π 的制備方法，其特征在于，該方法包括以下步驟： (1) 按照1:6-16的重量體積比將(5- (2-腈基芐基)-4，5，6，7-四氫噻吩并[3，2-c ]吡啶-2-基）乙酸酯加入乙醇中，在攪拌下50°C~78°C加熱溶解，過濾； (2) 將步驟（1)過濾所得的濾液在室溫下放置5-10h析晶，過濾收集結晶，干燥，得到所 述晶型Π 。4. 根據權利要求3所述的制備方法，其特征在于，在步驟（1)中，所述重量體積比為1: 10;優選地，在攪拌下加熱至65°C，析晶8h。5. -種藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物包含有效量的權利要求1或2中所述 的晶型Π 和一種或多種藥學上可接受的輔料。6. 根據權利要求5所述的藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物為固體口服制劑、 液體口服制劑或注射劑。7. 根據權利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，所述固體口服制劑包括分散片、腸 溶片、咀嚼片、口崩片、膠囊或顆粒劑;所述液體口服制劑包括口服溶液劑;所述注射劑包括 注射用水針、注射用凍干粉針、大輸液或小輸液。8. 權利要求1或2中所述的晶型或按照權利要求3或4所述的方法制備的晶型Π 在制備 用于抗血小板聚集的藥物組合物中的用途。9. 權利要求1或2所述的晶型或按照權利要求3或4所述的方法制備的晶型Π 在制備用 于治療因抗血小板聚集而引起的冠狀動脈綜合征、心肌梗死、心肌缺血、心腦血管疾病的藥 物組合物中的用途。
【專利摘要】本發明屬于醫藥技術領域，更確切地說，本發明提供了一種(5-(2-腈基芐基)-4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)乙酸酯的晶型Ⅱ。本發明還提供了上述晶型的制備方法，以及晶型在制備用于抗血小板聚集的藥物組合物中的用途。
【IPC分類】C07D495/04, A61P9/10, A61P7/02, A61K31/4365
【公開號】CN105646525
【申請號】
【發明人】劉登科, 劉穎, 黃長江, 劉冰妮, 樊夢林
【申請人】天津藥物研究院有限公司
【公開日】2016年6月8日
【申請日】2016年3月2日