一種利伐沙班及有關物質的測定方法

一種利伐沙班及有關物質的測定方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于醫藥技術領域，更具體地說，涉及一種利伐沙班及有關物質的測定方 法。
【背景技術】
[0002] 利伐沙班，Rivaroxaban，其化學名稱為5_氯-N_( {(5S)_2_氧-3-[4-(3_氧代嗎 啉-4-基)苯基]-1，3-噁唑啉-5-基}甲基)噻吩-2-甲酰胺。
[0003] 利伐沙班結構式為：
利伐沙班是一種高選擇性，直接抑制因子Xa的口服藥物。通過抑制因子Xa可以中斷凝 血瀑布的內源性和外源性途徑，抑制凝血酶的產生和血栓形成，對血小板聚集沒有直接作 用。
[0004] 利伐沙班有關物質檢測的難度在于，產品在合成過程中產生的雜質較多，可能產 生的雜質包括關鍵起始物料、殘留中間廣品、副反應廣物、降解雜質等多種工藝雜質；利伐 沙班的雜質（雜質1、雜質2、雜質3、雜質4、雜質5、雜質6、雜質7、雜質8、雜質9、雜質10、雜質 11、雜質12、雜質13、雜質14、雜質15、中間體A、B、C、SM1、SM2、SM3等)較多，不易完全分離。且 其中中間體C、雜質12、SM2極性較大，在色譜系統中保留較弱或幾乎無保留；而雜質10、雜 質11極性較小，極性較小，在色譜系統中保留極強，不易被洗脫。極性差異使這些雜質難以 在同一色譜條件中檢測，而這些雜質的潛在性給利伐沙班原料藥有關物質檢測增加了難 度。利伐沙班的有關物質檢測方法的文獻報道極少，采用利伐沙班片進口質量標準有關物 質方法檢測利伐沙班有關物質時，雜質10、雜質11基本分離，但是中間體C、雜質12、SM2均與 溶劑峰重合，難以分離。
[0005] 雜質 10:
雜質11:
雜質12
中間體C: SM2：

【發明內容】

[0006] 本發明提供了一種高效液相色譜法，能夠將利伐沙班、利伐沙班的雜質（雜質9、雜 質10、雜質12、SM2、中間體C等)有效的分離，分析時間短，從而實現了利伐沙班的雜質的有 效檢測，保證了利伐沙班的質量控制，具有現實意義。
[0007] 本發明的目的是提供一種能檢測利伐沙班及有關物質的方法。
[0008] 具體地說，本發明提供了一種利伐沙班及有關物質的高效液相色譜檢測方法，該 檢測方法包括： 選用十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相的色譜柱； 以緩沖鹽水溶液和乙腈為流動相； 以紫外檢測器為檢測器。
[0009] 在本發明的一種優選實施方案中，本發明提供的一種利伐沙班及有關物質的高效 液相色譜檢測方法，其中，所述流動相流速為0.5~1.5ml/min，優選1.0 ml/min。
[0010] 在本發明的一種優選實施方案中，本發明提供的一種利伐沙班及有關物質的高效 液相色譜檢測方法，其中，所述紫外檢測器的檢測波長為220~250nm，最佳檢測波長250nm〇
[0011] 在本發明的一種優選實施方案中，本發明提供的一種利伐沙班及有關物質的高效 液相色譜檢測方法，其中，色譜柱的溫度為20~45°C，最佳柱溫為30°C。
[0012] 在本發明的一種優選實施方案中，本發明提供的一種利伐沙班及有關物質的高效 液相色譜檢測方法，其中，所述流動相中緩沖鹽水溶液和乙腈體積比例為如下梯度：
在本發明的一種優選實施方案中，本發明提供的一種利伐沙班及有關物質的高效液相 色譜檢測方法，其中，所述緩沖鹽選自可溶于水的磷酸金屬鹽，優選地，選自磷酸的鈉鹽或 鉀鹽，更優選地，選自磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉中的一種或幾種； 特別優選地，為磷酸氫二鈉。
[0013] 在本發明的一種優選實施方案中，本發明提供的一種利伐沙班及有關物質的高效 液相色譜檢測方法，其中，所述緩沖鹽水溶液的pH范圍為5.0~7.0。
[0014] 在本發明的一種特別優選實施方案中，本發明提供的一種利伐沙班及有關物質的 高效液相色譜檢測方法，其中，所述緩沖鹽水溶液為磷酸氫二鈉的水溶液，并且用磷酸將其 調節pH值為6.0。
[0015] 在本發明的一種更優選的實施方案中，本發明提供了一種利伐沙班及有關物質的 高效液相色譜檢測方法，包括如下操作： 取本品（即利伐沙班)適量，稱重，用稀釋液超聲溶解，配成每lml含利伐沙班0.5mg的樣 品溶液，流速為1. 〇ml/ml，檢測波長為250nm，柱溫30 °C ;精密量取樣品溶液10μ1注入液相色 譜儀，完成利伐沙班中活性組分及有關物質檢測。
[0016] 本發明的特點是:各雜質之間分離度好，各雜質與利伐沙班分離徹底，操作簡便快 捷，分析時間短，成本低，能有效的控制利伐沙班的有關物質，確保產品的安全性和有效性。
[0017] 在本發明的實施方案中，所述的百分比(％)除特別注明外都是指體積百分比。
[0018] 在本發明的實施方案中所述活性成分為利伐沙班，所述有關物質包括但不限于利 伐沙班的雜質(雜質2、雜質3、雜質5、雜質8、雜質9、雜質10、雜質11、雜質12、雜質14、中間體 Β、中間體C、SM2)。
【附圖說明】
[0019] 圖1表示的是本發明實施例1的色譜圖。
[0020] 圖2表示的是本發明實施例2的色譜圖。
[0021]
【具體實施方式】： 以下實施例用于說明本發明，但不作為對本發明保護范圍的限制。
[0022] 實施例1 儀器和條件
島津高效液相色譜儀，C18柱(4.6\250臟，5以111)，以緩沖鹽溶液(0.01111〇1/1的磷酸氫二 鈉水溶液，用磷酸調節pH至6.0)為流動相A，以乙腈作為流動相B，檢測波長為250nm，流速 l.Oml/min，柱溫30°C，稀釋液為乙腈:水（50:50)。進樣量為1(^1。按如下梯度程序進行洗 脫： 實脫步驟： 取利伐沙班及各雜質適量，稱重，用稀釋液超聲溶解，配制成每lml中含利伐沙班和利 伐沙班的雜質(雜質2、雜質3、雜質5、雜質8、雜質9、雜質10、雜質11、雜質12、雜質14、中間體 B、中間體C、SM2)各約0.5yg的混合溶液。按上述條件進行高效液相分析，記錄色譜圖。結果 見圖2。
[0023]
1工丄XCCj租眾?Τ I，口本w心丨口 "丄肉反義丁，?Τ本匕恨雙wyv j。川〇,且 45min內結束整個有關物質檢測，分析時間短，效率高，節約成本，滿足中國藥典的要求。
[0024] 實施例2 儀器和條件 島津高效液相色譜儀，C18柱(4.6\250臟，5以111)，以緩沖鹽溶液(0.01111〇1/1的磷酸氫二 鈉水溶液，用磷酸調節pH至6.0)為流動相A，以乙腈作為流動相B，檢測波長為250nm，流速 l.Oml/min，柱溫30°C，稀釋液為乙腈:水（50:50)。進樣量為1(^1。按如下梯度程序進行洗 脫：
實驗步驟： 取利伐沙班及各雜質適量，稱重，用稀釋液超聲溶解，配制成每lml中含利伐沙班和利 伐沙班的雜質(雜質2、雜質3、雜質5、雜質8、雜質9、雜質10、雜質11、雜質12、雜質14、中間體 B、中間體C、SM2)各約0.5yg的混合溶液。按上述條件進行高效液相分析，記錄色譜圖。結果 見圖1。
[0025]在上述色譜條件下，利伐沙班的雜質之間分離度好，各雜質理論板數均大于3000， 拖尾因子符合要求，且45min內結束整個有關物質檢測，分析時間短，效率高，節約成本，滿 足中國藥典的要求。
【主權項】
1. 一種利伐沙班及有關物質的高效液相色譜檢測方法，其特征在于該方法是采用十八 烷基硅烷鍵合硅膠為固定相的色譜柱，W緩沖鹽水溶液和乙臘為流動相，W紫外檢測器為 檢測器的高效液相色譜檢測方法。2. 根據權利要求1所述的檢測方法，其中，所述流動相流速為0.5~1.5ml/min，優選1.0 ml/min。3. 根據權利要求1所述的檢測方法，其中，所述紫外檢測器的檢測波長為220~250nm， 最佳檢測波長250nm。4. 根據權利要求1所述的檢測方法，其中，色譜柱的溫度為20~45°C，最佳柱溫為30°C。5. 根據權利要求1所述的檢測方法，其中，所述緩沖鹽水溶液和乙臘體積比例為如下梯 度：優選為，緩沖鹽水溶液和乙臘比例優選為如下梯度：6. 根據權利要求1-5中任一權利要求所述的檢測方法，其中，所述緩沖鹽選自可溶于水 的憐酸金屬鹽，優選地，選自憐酸的鋼鹽、或鐘鹽，更優選地，選自憐酸氨二鐘、憐酸二氨鐘、 憐酸氨二鋼、憐酸二氨鋼中的一種或幾種;特別優選地，為憐酸氨二鋼。7. 根據權利要求1-5中任一權利要求所述的檢測方法，其中，所述緩沖鹽水溶液的抑范 圍為5.0~7.0。8. 根據權利要求7所述的檢測方法，其中，所述緩沖鹽水溶液為憐酸氨二鋼的水溶液， 并且用憐酸將其調節pH值為5.0~7.0。9. 根據權利要求1所述的檢測方法，包括如下操作： 取本品（即利伐沙班)適量，稱重，用稀釋液超聲溶解，配成每1ml含利伐沙班0.5mg的樣 品溶液，流速為1. OmVml，檢測波長為250皿，柱溫30°C ;精密量取樣品溶液10山注入液相色 譜儀，完成利伐沙班中活性組分及有關物質檢測。
【專利摘要】本發明公開了一種利伐沙班及有關物質測定方法，該檢測方法為高效液相色譜法，色譜條件為：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為色譜柱填充劑，以緩沖鹽水溶液和乙腈為流動相進行梯度洗脫，以紫外檢測器為檢測器。采用本發明的方法，可以將利伐沙班與雜質很好的分離，分析時間短、效率高，為利伐沙班有關物質檢測提供了簡單可靠的方法。
【IPC分類】G01N30/02
【公開號】CN105651871
【申請號】
【發明人】廖興婷, 譚瑤, 肖玉梅, 胡容, 羅禮平, 于國鋒, 張競, 李宏偉
【申請人】重慶植恩藥業有限公司
【公開日】2016年6月8日
【申請日】2015年12月18日