專利名稱：一種大黃魚配合飼料專用復合酶制劑的制作方法
技術領域：
本發明屬于詞料添加劑技術領域，具體涉及一種大黃魚配合飼料專用復合酶制劑。
背景技術：
大黃魚是我國獨有的、經濟價值很高的魚類，其肉質鮮美，營養豐富，曾經是我國 四大海產經濟魚類之一。近30年來，由于掠奪性捕撈，日然資源日漸枯竭。隨著大黃 魚人工魚苗技術在我國東南沿海的福建、廣東、浙江等省市取得成功，網箱養殖大黃魚 發展迅速。目前，大黃魚已成為我國主要的海水養殖品種之一。隨著網箱養殖密度的不 斷增加，生產水平和集約化程度的不斷提高，大黃魚養殖暴露出較多的問題，其中最為 明顯的問題是大黃魚的體脂含量過高、抗病力低以及過度投料導致的海水富營養化，這 嚴重影響了大黃魚養殖業的經濟效益，破壞了水體環境，進而嚴重影響了大黃魚養殖業 的可持續發展。在這種情況下，開發合適的飼料添加劑，來降低大黃魚體脂含量，減少 氮磷排泄量，防止海水富營養化就勢在必行。
酶是活細胞產生的具有特殊催化能力的蛋白質，它廣泛存在于各種生物體內，參與 機體和各種生化反應。將生物體內產生的酶經過加工后的產品稱為酶制劑。酶制劑是一 種天然綠色詞料添加劑，酶制劑可以提高動物養分消化率，降低氮磷等有機物排泄量， 防止動物疾病。目前，酶制劑已經在畜禽飼料中廣泛應用，在淡水水產養殖業中也有應 用，但在海水養殖魚類配合飼料中的應用尚處于初級階段。仲軍(1994)用加酶飼料飼 喂南美白對蝦，結果表明，添加lg/kg復合酶，個體增重率提高12.13%，單產提高13.87 %，詞料系數降低12.02%,經濟效益提高23.06%。劉文斌等(1999)在異育銀卿飼料 中添加0.75g/kg酶制劑，結果表明，增重率提高26.98%，餌料系數降低19.85%。黃峰 (2008)在異育銀鯽飼料中添加100-400mg/kg的復合酶制劑，結果表明，異育銀鯽的 增重率及血清、肝胰臟和頭腎中SOD、溶菌酶活性均顯著提高。王紀亭(2005)用非淀 粉多糖酶制劑飼喂羅非魚，結果表明，羅非魚的特定生長率、飼料效率均顯著提高，干 物質、粗蛋白、能量及某些氨基酸的消化率顯著提高。從目前的研究及應用情況來看， 酶制劑在畜禽及淡水水產飼料中的報道較多，但海水養殖魚類的飼料酶制劑則鮮有報 道，因此，開發海水養殖魚類專用酶制劑十分必要。
發明內容
本發明針對現有技術的上述不足，提供一種可降低大黃魚體脂含量，減少氮磷排泄 量，防止海水富營養化的大黃魚配合飼料專用復合酶制劑。
為了解決上述技術問題，本發明的技術方案為 一種大黃魚配合飼料專用復合酶制 劑，它含有中性蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等三種單酶，將三種單酶按比例加入到含復合 穩定劑的水溶液中配制成液態的本發明的大黃魚配合飼料專用復合酶制劑，使得該大黃 魚配合飼料專用復合酶制劑中各種單酶酶活如下
1) 中性蛋白酶的酶活性為1000-3000 IU/g;
2) 淀粉酶的酶活性為5000~15000 IU/g;
3) 脂肪酶的酶活性為10~25IU/g。
本發明上述的含復合穩定劑的水溶液為含有1.5g/L山梨醇、1.0g/L殼聚糖、0.15g/L 水合氯化鈣、5g/L山梨酸鉀的水溶液，山梨醇、殼聚糖、水合氯化鈣和山梨酸鉀的加入 是用以保證復合酶活力。
本發明的復合酶制劑在全價配合飼料中的添加量為500~1000克/噸。 本發明的優點本發明從大黃魚的消化生理特點和各種商業酶制劑的特性出發，運 用營養學和生物化學方法，將中性蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶等單酶通過合理配伍，研制 了一種大黃魚詞料專用復合酶制劑。應用本發明的復合酶制劑能夠明顯提高大黃魚對蛋 白質、淀粉及脂肪的消化率，提高大黃魚對能量的利用率，降低養殖大黃魚腹脂含量， 防止大黃魚脂肪肝的發生，提高大黃魚抗病力，并能夠大大降低大黃魚氮的排泄量，減 輕養殖水體富營養化，改善水體環境，具有十分明顯的經濟效益和社會效益。經多項詞 養試驗及實驗室分析，本復合酶制劑安全、高效、無公害，飼喂的大黃魚完全符合食品 衛生要求。
具體實施例方式
下面通過實施例對本發明做進一步詳細描述，但本發明不僅僅局限于以下實施例。
本發明的大黃魚配合飼料專用復合酶制劑使用的中性蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶三種 單酶是由丹麥諾維信有限公司提供，其中中性蛋白酶的活性為120000IU/g、淀粉酶的活 性為80000IU/g、脂肪酶的活性為2500IU/g (本發明的下述實施例中采用的單酶即為上 述購買的三種單酶)。將上述的三種單酶按照比例溶于含復合穩定劑的水溶液中，該復合穩定劑的水溶液 中含有1.5g/L山梨醇、1.0g/L殼聚糖、0.15g/L水合氯化鈣、5g/L山梨酸鉀。
大黃魚配合飼料制粒后，將本發明的復合酶制劑噴涂到飼料顆粒表面，以避免失活。 常溫保存6個月后，該復合酶制劑的酶活損失不超過20%。按全價配合飼料計，其添加 量為500-1000克/噸。
實施例1:
按復合酶制劑中中性蛋白酶1000IU/g、淀粉酶5000IU/g、脂肪酶25IU/g，將三 種酶復配，溶于含有復合穩定劑的水溶液中，混合均勻，制備成本發明的一種大黃魚配 合飼料專用復合酶制劑。
配置過程如下以配置1000g復合酶制劑為例中性蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶三種 單酶加入的質量設為Xi、 x2、 x3，則120000IU/g xx產lOOO IU/gxl000g; 80000IU/g xx2=5000 IU/gxl000g; 2500IU/g xX3=25IU/gxl000g得到x產25/3 g"8.3g; x2=62.5g; x3=10g，則再稱取含有1.5g/L山梨醇、1.0g/L殼聚糖、0.15g/L水合氯化鈣、5g/L山梨
酸鉀的復合穩定劑的水溶液1000- (x!+ x2+ x3) =919.2g，將上述三種單酶溶于含有復
合穩定劑的水溶液中，混合均勻，制備成本發明的大黃魚配合飼料專用復合酶制劑(本 發明實施例2~20的大黃魚配合飼料專用復合酶制劑的配置方法亦同)。
實施例2:
按復合酶制劑中中性蛋白酶1000IU/g、淀粉酶8000IU/g、脂肪酶20IU/g，將三種 酶復配，溶于含有復合穩定劑的水溶液中，混合均勻，制備成一種大黃魚配合飼料專用 復合酶制劑。
實施例3:
按復合酶制劑中中性蛋白酶1000IU/g、淀粉酶10000IU/g、脂肪酶15IU/g，將三 種酶復配，溶于含有復合穩定劑的水溶液中，混合均勻，制備成一種大黃魚配合飼料專 用復合酶制劑。
實施例4:
按復合酶制劑中中性蛋白酶1000IU/g、淀粉酶12000IU/g、脂肪酶10IU/g，將三 種酶復配，溶于含有復合穩定劑的水溶液中，混合均勻，制備成一種大黃魚配合飼料專用復合酶制劑。 實施例5:
按復合酶制劑中中性蛋白酶1500IU/g、淀粉酶5000IU/g、脂肪酶25IU/g，將三種 酶復配，溶于含有復合穩定劑的水溶液中，混合均勻，制備成一種大黃魚配合飼料專用 復合酶制劑。
實施例6:
按復合酶制劑中中性蛋白酶1500IU/g、淀粉酶8000IU/g、脂肪酶20IU/g，將三種 酶復配，溶于含有復合穩定劑的水溶液中，混合均勻，制備成一種大黃魚配合詞料專用 復合酶制劑。
實施例7:
按復合酶制劑中中性蛋白酶1500IU/g、淀粉酶10000IU/g、脂肪酶15IU/g，將三 種酶復配，溶于含有復合穩定劑的水溶液中，混合均勻，制備成一種大黃魚配合飼料專 用復合酶制劑。
實施例8:
按復合酶制劑中中性蛋白酶1500IU/g、淀粉酶12000IU/g、脂肪酶10IU/g，將三 種酶復配，溶于含有復合穩定劑的水溶液中，混合均勻，制備成一種大黃魚配合飼料專 用復合酶制劑。
實施例9:
按復合酶制劑中中性蛋白酶2000IU/g、淀粉酶5000IU/g、脂肪酶25IU/g，將三種 酶復配，溶于含有復合穩定劑的水溶液中，混合均勻，制備成一種大黃魚配合詞料專用 復合酶制劑。
實施例10:
按復合酶制劑中中性蛋白酶2000IU/g、淀粉酶8000IU/g、脂肪酶20IU/g，將三種 酶復配，溶于含有復合穩定劑的水溶液中，混合均勻，制備成一種大黃魚配合飼料專用 復合酶制劑。
實施例11:
按復合酶制劑中中性蛋白酶2000IU/g、淀粉酶12000IU/g、脂肪酶15IU/g，將三 種酶復配，溶于含有復合穩定劑的水溶液中，混合均勻，制備成一種大黃魚配合飼料專用復合酶制劑。 實施例12:
按復合酶制劑中中性蛋白酶2000IU/g、淀粉酶15000IU/g、脂肪酶10IU/g，將三
種酶復配，溶于含有復合穩定劑的水溶液中，混合均勻，制備成一種大黃魚配合飼料專 用復合酶制劑。
實施例13:
按復合酶制劑中中性蛋白酶2500IU/g、淀粉酶5000IU/g、脂肪酶25IU/g，將三種 酶復配，溶于含有復合穩定劑的水溶液中，混合均勻，制備成一種大黃魚配合飼料專用 復合酶制劑。 實施例14-
按復合酶制劑中中性蛋白酶2500IU/g、淀粉酶8000IU/g、脂肪酶20IU/g，將三種 酶復配，溶于含有復合穩定劑的水溶液中，混合均勻，制備成一種大黃魚配合飼料專用 復合酶制劑。
實施例15:
按復合酶制劑中中性蛋白酶2500IU/g、淀粉酶12000IU/g、脂肪酶15IU/g，將三 種酶復配，溶于含有復合穩定劑的水溶液中，混合均勻，制備成一種大黃魚配合飼料專 用復合酶制劑。 實施例16:
按復合酶制劑中中性蛋白酶2500IU/g、淀粉酶15000IU/g、脂肪酶10IU/g，將三 種酶復配，溶于含有復合穩定劑的水溶液中，混合均勻，制備成一種大黃魚配合飼料專 用復合酶制劑。 實施例17:
按復合酶制劑中中性蛋白酶3000IU/g、淀粉酶5000IU/g、脂肪酶25IU/g，將三種 酶復配，溶于含有復合穩定劑的水溶液中，混合均勻，制備成一種大黃魚配合詞料專用 復合酶制劑。
實施例18:
按復合酶制劑中中性蛋白酶3000IU/g、淀粉酶8000IU/g、脂肪酶20IU/g，將三種 酶復配，溶于含有復合穩定劑的水溶液中，混合均勻，制備成一種大黃魚配合詞料專用復合酶制劑。 實施例19:
按復合酶制劑中中性蛋白酶3000IU/g、淀粉酶12000IU/g、脂肪酶15IU/g，將三
種酶復配，溶于含有復合穩定劑的水溶液中，混合均勻，制備成一種大黃魚配合飼料專 用復合酶制劑。
實施例20:
按復合酶制劑中中性蛋白酶3000IU/g、淀粉酶15000IU/g、脂肪酶10IU/g，將三 種酶復配，溶于含有復合穩定劑的水溶液中，混合均勻，制備成一種大黃魚配合飼料專 用復合酶制劑。 應用效果
課題組在浙江寧波、臺州等地IO余個大黃魚養殖場進行的對比試驗表明
在大黃魚全價配合飼料中添加500-1000克/噸本發明的大黃魚配合飼料專用復合酶 制劑后，對大黃魚生長性能的影響見表l。
表1復合酶制劑對大黃魚生長性能的影響
對照組加酶組I組加酶組n組加酶組.III組
初始體重(g)31.86±1.2930.56±1.9833.57±2.8728.49±2.55
結束體重(g)121.25±3.56a128.22±4.22b135.25±5.19bc134.78±5.32e
魚體增重率2.813.203.033.73
飼料系數1.891.751.781.68
特定生長率1.31±0.04a1.40±0.06b1.37±0.03b1.52±0.05c
注同一行中右上角小寫字母不同代表組間差異顯著(P<0.05)，小寫字母相同則代表差異不
顯著(&0.05)。
由表1可見，在大黃魚日糧中添加500-1000克/噸的復合酶制劑，經102天飼養試 驗，結果表明，本發明的復合酶制劑能夠顯著提高魚體增重率，降低飼料系數，提高其 特定生長率(P<0.05)。表2復合酶制劑對大黃魚氨氮排泄量的影響(mg/kg h)
日糧處理饑餓狀態飽食狀態
對照組4.69±0.0516.27±0.08a
加酶組I組4.49±0.0415.01±0.05b
加酶組n組4.38±0.0514,21±0.07e
加酶組ni組4.51±0.0313.85±0.10e
注同一列中右上角小寫字母不同代表組間差異顯著(PO.05),小寫字母相同則代表差異不顯
著(P>0.05)。
由表2可見，在大黃魚日糧中添加500克/噸(加酶I組)、750克/噸(加酶組II
組)及iooo克/噸(加酶組m組)本發明的大黃魚飼料專用酶制劑后，大黃魚饑餓狀態 下的氨氮排泄量沒有顯著變化，但三個加酶組大黃魚在飽食狀態下的氨氮排泄量分別比
不加酶的對照組降低了 7.74%、 12.66%、 14.87%，均差異顯著(尸<0.05)。這說明，在 飼料中添加本發明的復合酶制劑后，大黃魚對飼料中蛋白質的利用率顯著提高，從而降 低了氮的排泄量，減輕了養殖水體的富營養化程度，具有明顯的生態效益。
表3復合酶制劑對大黃魚體成分的影響(％)
對照組 加酶組I組 加酶組II組 加酶組III組
水分77.25±2.3478,23±1.8776.44±2.3578.17±2.99
粗蛋白17.08±3.56a18.67±4.22b18.98±5.19b18.77±5.32b
粗脂肪4.85±0.05a3.85±0.03b3.78±0.06b3.02±0.04b
粗灰分2.02±0.022.37±0.032.40士0,012.28±0.03
注同一行中右上角小寫字母不同代表組間差異顯著(尸<0.05)，小寫字母相同則代表差異不
顯著(P>0.05)。
從表3可以看出，在大黃魚R糧中添加500-1000克/噸復合酶制劑能夠明顯降低大 黃魚體脂肪的水平(/50.05)，顯著提高魚體蛋白質的含量(尸<0.05)。這說明添加酶制劑可 以降低大黃魚體脂含量，從而改善了養殖大黃魚體脂含量過高，口味欠佳的缺點，從而 提高了大黃魚養殖的經濟效益。表4復合酶制劑對大黃魚形態的影響組成對照組加酶組(500克/噸)
樣本數1010
魚體鮮重(克)253.10±13,56a269±12.20b
體長(cm)24.56±1.56a29.38±1.18b
體寬(cm)6.89±0.48a6.10±0.61b
體型指數(體長/體寬)3.56±0.21a4.82±0.23b
注同一行中右上角小寫字母不同代表組間差異顯著(P<0.05)。
從表4可以看出，在大黃魚日糧中添加500克/噸的復合酶制劑，可以提高大黃魚的 體長，降低體寬，從而導致體型指數比對照組提高35.4% (P<0.05)，從而改善了養殖大 黃魚的形態，滿足廣大消費者的需要，提高了大黃魚養殖的經濟效益。
權利要求
1、一種大黃魚配合飼料專用復合酶制劑，其特征在于它含有中性蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶三種單酶，將三種單酶加入到含復合穩定劑的水溶液中復配制得液態的復合酶制劑，該復合酶制劑中的中性蛋白酶的酶活性為1000～3000IU/g、淀粉酶的酶活性為5000～15000IU/g、脂肪酶的酶活性為10～25IU/g。
2、 根據權利1所述的一種大黃魚配合飼料專用復合酶制劑，其特征在于所述的 含復合穩定劑的水溶液為含有1.5g/L山梨醇、1.0g/L殼聚糖、0.15g/L水合氯化鈣、5g/L 山梨酸鉀的水溶液。
3、 根據權利1所述的一種大黃魚配合飼料專用復合酶制劑，其特征在于所述的 復合酶制劑在全價配合飼料中的添加量為500-1000克/噸。
全文摘要
本發明公開了一種大黃魚配合飼料專用復合酶制劑，它是將中性蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶三種單酶溶于含復合穩定劑的水溶液中制備而成。其中，中性蛋白酶的活性為1000～3000IU/g、淀粉酶的活性為5000～15000IU/g、脂肪酶的活性為10～25IU/g。在大黃魚全價配合飼料的基礎上，添加500～1000克/噸本發明的大黃魚專用復合酶制劑，進行飼喂，可顯著提高大黃魚的特定生長率，提高飼料效率，降低氨氮排泄量，減輕水體富營養化程度，預防傳染性疾病的發生，提高成活率，降低大黃魚體脂含量，改善大黃魚體形；并且安全、無公害、無殘留，應用該復合酶制劑養殖的大黃魚符合綠色食品衛生要求。
文檔編號A23K1/18GK101584381SQ20091009969
公開日2009年11月25日 申請日期2009年6月9日 優先權日2009年6月9日
發明者吳天星, 王進波, 齊莉莉 申請人:浙江大學寧波理工學院