專利名稱：一種提高菠蘿雜交種子成苗率的方法
技術領域：
本發明涉及菠蘿雜交種子成苗率的方法，具體涉及一種提高菠蘿雜交種子成苗率 的方法，屬于育苗技術領域。
背景技術：
菠蘿是世界第三大熱帶水果，也是世界第七大水果。我國2006年菠蘿種植面積為 5. 3萬公頃，產量為89. 06萬噸，產值為8. 79億元；2007年為5. 5萬公頃，產量為90. 80萬 噸，產值為10. 65億元(農業部南亞辦)。菠蘿產業已成為熱區致富的重要經濟支柱之一。我國目前生產上使用的菠蘿品種主要是1558年以前引進的皇后類巴厘種，占栽 培面積的80%以上，產量和品質現已表現嚴重下降。品種的單一和種性的退化嚴重制約我 國菠蘿產業健康發展。菠蘿是多年生草本果樹，生產上主要靠營養體繁殖種苗。菠蘿自花不實，同一品種 或同類型品種間授粉不實或結籽率低。菠蘿常規雜交育種采用不同類型品種間的優良親本 進行雜交或遠緣雜交，才有可能獲得大量雜交種子。菠蘿種子的種皮堅硬致密，種子吸脹 慢，發芽率低，發芽緩慢(1 6個月)，出苗不整齊等現象。其種子發芽非常困難，苗圃發芽 率不足10%，極大地限制了菠蘿新品種的選育。我國菠蘿育種工作始于上個世紀60年代，對于菠蘿雜交種子成苗難、成苗率低的 問題，我國科研人員做了一些探索性的研究，如細沙搓種法、濃硫酸浸泡法、組織培養等方 法促進種子萌發。細沙搓種法對促進菠蘿雜交種子萌發作用不明顯；濃硫酸浸泡菠蘿種 子能夠有效的提高菠蘿種子的萌發率，但萌發后有些幼苗生長勢弱，很難成活，最終成苗率 低；組織培養能夠有效的解決菠蘿雜交種子萌發難和成苗率低的問題，但組織培養費時費 工，同時需要解決培養過程中的污染問題，以及移栽成活的問題。總體而言，細沙搓種法成 苗率低于30%，濃硫酸浸種法成苗率不到50%，組織培養育苗成苗率在60%左右。由于菠蘿雜交種子萌發難、成苗率低，從而限制了大批量的菠蘿雜交后代的獲得， 影響到菠蘿的雜交選育種研究。
發明內容
為了克服現有技術的不足，本發明的目的是提供一種提高菠蘿雜交種子成苗率的
育苗方法。本發明所采用的技術方案是一種提高菠蘿雜交種子成苗率的育苗方法，其具體操作步驟如下(1)種子清洗、 消毒；(2)種子室內催芽、培養；(3)室內營養盤移栽；(4)移入大田定植。具體操作步驟如 下(1)種子清洗、消毒采收后的種子或貯藏的種子，置于沙袋中在流水中進行揉 搓、沖洗，將種子上附著的果肉等殘留物清洗干凈；不同雜交組合的菠蘿種子分類標記，清 水浸泡20-30小時，種子進行吸水吸漲，然后進行消毒處理種子浸泡后，淋干，先用75%的酒精消毒8-12分鐘，無菌水沖洗2-4遍；0. 1 %的升汞滅菌25-35分鐘，無菌水沖洗2_4遍， 消毒后的種子放于干凈的培養皿中備用；(2)種子室內催芽、培養消毒后的菠蘿雜交種子平鋪于培養皿中，厚度為1層種 子，不能堆積，以免污染和種子萌發中產生的有害物質，抑制其他種子的萌發，培養皿置于 專用的無菌培養間，種子進行24-26°C恒溫暗培養；種子催芽時間開始于12月至次年1月 份，種子萌發于春季，有利于幼苗生長；菠蘿雜交種子催芽培養時，培養皿中滴加無菌水，保持種子濕潤即可，種子每天進 行無菌水清洗2-4遍，及時將污染和發霉的種子挑除；污染的種子分類集中培養，發霉變 質的種子丟棄，污染嚴重的種子進行再次消毒無菌水沖洗2-4遍，將污染物清洗干凈，用 400-600mg/l的制菌霉素溶液浸泡25-35分鐘后，淋干，置于干凈的培養皿中進行培養；菠蘿種子培養1個月后，開始萌發，將同一組合萌發的菠蘿種子挑出，集中單獨培 養，污染的萌發種子用400-600mg/l的制菌霉素溶液消毒處理25-35分鐘，另行培養，每一 組合的種子標明雜交組合和培養時間，萌發的種子幼苗置于6-10小時光培養加14-18小時 暗培養，22-28°C恒溫培養的條件下。待幼苗長至3-5葉、3-6cm高時，可以進行室內營養盤 移栽；(3)室內營養盤移栽營養基質的配制干凈的河沙+腐熟牛糞+細質泥炭土，比 例為1 1 1，混合均勻后過篩，晾曬干燥，高壓滅菌、殺死蟲卵等，滅菌后的基質裝于營養 盤，營養盤為PVC硬質盤，盤上有孔穴；室內培養的菠蘿小苗定植于營養盤中，營養盤上有孔，每孔種植一株雜種苗，營養 盤置于可以避雨的玻璃溫室，移栽后15-20天內用遮陽網適當遮擋陽光，避免菠蘿幼苗暴 曬，定植后一周內，每天早上用噴霧器噴濕小苗和基質，清水噴霧，基質濕透即可，待幼苗生 根，開始長出新葉后，逐步撤掉遮陽網，開始用1/8的MS培養液營養液噴施幼苗，每周噴施 2次。其他時間仍用清水噴濕幼苗和基質，天氣晴朗、氣溫較高時，檢查基質墑情，基質干旱 缺水時，可適當補水一次；天陰或下雨時，視基質適度可隔天噴水一次；菠蘿雜種幼苗室內 苗盤生長期間，進行病蟲害防治；(4)移入大田定植菠蘿雜交苗長至15-20cm高，12-16片葉子時，可以進行田間移 栽；苗田準備每畝地施入有機肥(腐熟牛糞)800-1200kg，N、P、K復合肥80-120kg，待苗田 均勻施肥后，用旋耕機翻攪2-4遍，耙平，菠蘿雜交苗定植株行距為30-50CmX80-100Cm， 行距較寬，以利于雜種苗的田間調查；定植時挖淺坑，幼苗連同基質一起入坑，覆土壓實，定 植后6-8天內，每天澆定根水1-2次，根際土壤澆濕即可；菠蘿苗生根后，可根據土壤墑情進 行灌水；幼苗生長期進行除草、培土和病蟲害防治。本發明的有益效果是利用該技術方法，使菠蘿雜交種子成苗率提高到70%左右， 該方法為菠蘿雜交種子育苗提供了可靠的技術保障。
具體實施例方式下面通過實施例對本發明做進一步詳細說明，這些實施例僅用來說明本發明，并 不限制本發明的范圍。實施例1(1)種子清洗、消毒采收后的種子或貯藏的種子，置于沙袋中在流水中進行揉搓、沖洗，將種子上附著的果肉等殘留物清洗干凈；不同雜交組合的菠蘿種子分類標記，清 水浸泡24小時，種子進行吸水吸漲，然后進行消毒處理種子浸泡后，淋干；先用75%的酒 精消毒10分鐘，無菌水沖洗3遍；0. 的升汞滅菌30分鐘，無菌水沖洗3遍，消毒后的種 子放于干凈的培養皿中備用；(2)種子室內催芽、培養消毒后的菠蘿雜交種子平鋪于培養皿中，厚度為1層種 子，不能堆積，以免污染和種子萌發中產生的有害物質，抑制其他種子的萌發；培養皿置于 專用的無菌培養間，種子進行25°C恒溫暗培養；種子催芽時間開始于12月至次年1月份， 種子萌發于春季，有利于幼苗生長；菠蘿雜交種子催芽培養時，培養皿中滴加無菌水，保持種子濕潤即可，種子每天進 行無菌水清洗3遍，及時將污染和發霉的種子挑除，污染的種子分類集中培養，發霉變質的 種子丟棄，污染嚴重的種子進行再次消毒無菌水沖洗3遍，將污染物清洗干凈，用500mg/l 的制菌霉素溶液浸泡30分鐘后，淋干，置于干凈的培養皿中進行培養；菠蘿種子培養1個月后，開始萌發，將同一組合萌發的菠蘿種子挑出，集中單獨培 養，污染的萌發種子用500mg/l的制菌霉素溶液消毒處理30分鐘，另行培養，每一組合的種 子標明雜交組合和培養時間，萌發的種子幼苗置于8小時光培養/16小時暗培養，25°C恒溫 培養的條件下，待幼苗長至4片葉、5cm高時，可以進行室內營養盤移栽；(3)室內營養盤移栽營養基質的配制干凈的河沙+腐熟牛糞+細質泥炭土，比 例為1 1 1，混合均勻后過篩，晾曬干燥，高壓滅菌、殺死蟲卵等，滅菌后的基質裝于營養 盤，營養盤為PVC硬質方盤58cmX 32cm，每盤32孔；室內培養的菠蘿小苗定植于營養盤中，每孔種植一株雜種苗；苗盤置于可以避雨 的玻璃溫室，移栽后20天內用遮陽網適當遮擋陽光，避免菠蘿幼苗暴曬，定植后一周內，每 天早上用噴霧器噴濕小苗和基質，清水噴霧，基質濕透即可，待幼苗生根，開始長出新葉后， 逐步撤掉遮陽網，開始用1/8的MS營養液噴施幼苗，每周噴施2次，其他時間仍用清水噴濕 幼苗和基質，天氣晴朗、氣溫較高時，檢查基質墑情，基質干旱缺水時，可適當補水一次 ’天 陰或下雨時，視基質適度可隔天噴水一次；菠蘿雜種幼苗室內苗盤生長期間，進行病蟲害防 治；(4)移入大田定植菠蘿雜交苗長至20cm高，約15片葉子時，可以進行田間移栽； 苗田準備每畝地施入有機肥(腐熟牛糞)1000kg，N、P、K復合肥100kg，均勻施肥后，用旋 耕機翻攪2遍，耙平，菠蘿雜交苗定植株行距為50cmX 100cm，行距較寬，以利于雜種苗的 田間調查；定植時挖淺坑，幼苗連同基質一起入坑，覆土壓實；定植后7天內，每天澆定根水 一次，根際土壤澆濕即可，菠蘿苗生根后，可根據土壤墑情進行灌水，幼苗生長期進行除草、 培土和病蟲害防治。實施例22009年2月份在南亞熱帶作物研究所實驗樓組織培養間，對6個組合的菠蘿雜交 種子進行了室內催芽育苗試驗，各組合雜交種子發芽和成苗情況為泰國菠蘿X甜蜜蜜， 雜交種子26粒，累計發芽數19粒，發芽率為73. 08%，成苗18株，成苗率為69. 23% ；卡因X 泰國菠蘿，雜交種子1234粒，累計發芽數1098粒，發芽率為88. 98%，成苗979株，成苗率為 79. 34% ；卡因X金鉆，雜交種子75粒，累計發芽數55粒，發芽率為73. 33%，成苗52株， 成苗率為69. 33% ；巴厘X卡因，雜交種子601粒，累計發芽數455粒，發芽率為75.71%，成苗438株，成苗率為72. 88%;卡因XFresh Premium，雜交種子58粒，累計發芽數48粒， 發芽率為82. 76%，成苗40株，成苗率為68. 97% ；卡因X巴厘，雜交種子3882粒，累計發 芽數3054粒，發芽率為78. 67%，成苗3012株，成苗率為77. 59%。6個組合雜交種子平均 發芽率為78. 76 %，平均成苗率為72. 89 %。實施例32009年12月在南亞熱帶作物研所實驗樓組織培養間對4個組合的菠蘿雜交種 子進行催芽試驗，在隔離玻璃溫室進行雜種育苗。各組合雜交種子發芽和成苗情況為巴 厘X Soft Touch,雜交種子110粒，累計發芽數85粒，發芽率 為77. 27 %，成苗67株，成苗率 為60. 91% ；卡因X泰國菠蘿，雜交種子3753粒，累計發芽數3215粒，發芽率為85. 66%, 成苗3041株，成苗率為81. 03% ；卡因X剝粒菠蘿，雜交種子182粒，累計發芽數150粒， 發芽率為82. 42%，成苗132株，成苗率為72. 53% ；卡因X蜜寶，雜交種子18485粒，累計 發芽數16580粒，發芽率為89. 69%，成苗16219株，成苗率為87. 74%。4個組合雜交種子 平均發芽率為83. 76%，平均成苗率為75. 55%。實施例42010年1月在南亞熱帶作物研究所植保課題組玻璃檢疫溫室，對4個組合的菠 蘿雜交種子進行催芽和育苗試驗。各組合雜交種子發芽和成苗情況為卡因X印尼無刺， 雜交種子34粒，累計發芽數27粒，發芽率為79. 41 %，成苗21株，成苗率為61. 76 % ；卡 因XHoney Bright，雜交種子65粒，累計發芽數61粒，發芽率為93. 85%，成苗59株，成 苗率為90. 77% ；蜜寶X卡因，雜交種子801粒，累計發芽數630粒，發芽率為78. 65%， 成苗624株，成苗率為70. 90% ；粵脆X卡因，雜交種子5粒，累計發芽數3粒，發芽率為 60. 00 %，成苗3株，成苗率為60. 00 %。4個組合雜交種子平均發芽率為77. 98 %，平均成苗 率為 72. 61%。實施例52010年2月在南亞熱帶作物研究所植保課題組玻璃檢疫溫室，對4個組合的菠 蘿雜交種子進行催芽和育苗試驗。各組合雜交種子發芽和成苗情況為粵脆X蜜寶，雜 交種子1032粒，累計發芽數780粒，發芽率為75. 58%，成苗733株，成苗率為71. 03% ；珍 珠X蜜寶，雜交種子204粒，累計發芽數154粒，發芽率為75. 49%，成苗134株，成苗率為 65. 69%;卡因XFreshPremium，雜交種子304粒，累計發芽數298粒，發芽率為98. 03%，成 苗294株，成苗率為96. 71 % ；巴厘X卡因，雜交種子32128粒，累計發芽數24168粒，發芽 率為75. 22 %，成苗23526株，成苗率為73. 23 %。4個組合雜交種子平均發芽率為81. 08 %， 平均成苗率為76. 67%。
權利要求
一種提高菠蘿雜交種子成苗率的育苗方法，其特征在于包括如下步驟(1)種子清洗、消毒采收后的種子或貯藏的種子，用流水進行揉搓、沖洗，將種子上附著的殘留物清洗干凈，清水浸泡20-30小時，種子進行吸水吸漲，然后進行消毒處理，消毒后的種子放于干凈的培養皿中備用；(2)種子室內催芽、培養消毒后的菠蘿雜交種子平鋪于培養皿中，培養皿中滴加無菌水，保持種子濕潤，培養皿置于專用的無菌培養間進行培養；菠蘿雜交種子催芽培養時，種子每天進行無菌水清洗，待菠蘿種子培養1個月后，將同一組合萌發的菠蘿種子挑出，集中單獨培養，污染的萌發種子用400-600mg/l的制菌霉素溶液消毒處理25-35分鐘，另行培養，每一組合的種子做好標記，然后在24-26℃恒溫培養的條件下，萌發的種子幼苗置于6-10小時光培養和14-18小時暗培養進行培養，待幼苗長至3-5片葉、4-6cm高時，進行室內營養盤移栽；(3)室內營養盤移栽將滅菌后的基質裝于營養盤中，然后將步驟(2)培養的菠蘿小苗定植于營養盤中，營養盤置于溫室中，移栽后15-20天內用遮陽網適當遮擋陽光，避免菠蘿幼苗暴曬，定植后一周內，每天早上用噴霧器噴濕小苗和基質，清水噴霧，將基質濕透，待幼苗生根，開始長出新葉后，逐步撤掉遮陽網，開始用營養液噴施幼苗，每周噴施2次，其它時間仍用清水噴濕幼苗和基質，保證基質的墑情；(4)移入大田定植待菠蘿雜交苗長至15-20cm高，12-16片葉子時，進行田間移栽，將雜交苗在田間定植，定植后6-8天內，每天澆定根水1-2次，待菠蘿苗生根后，根據土壤墑情進行灌水。
2.根據權利要求1所述的一種提高菠蘿雜交種子成苗率的方法，其特征在于步驟(1) 所述的消毒處理是指在種子浸泡后，淋干，先用75 %的酒精消毒8-12分鐘，無菌水沖洗2-4 遍；0. 1 %的升汞滅菌25-35分鐘，再用無菌水沖洗2-4遍。
3.根據權利要求1所述的一種提高菠蘿雜交種子成苗率的方法，其特征在于步驟(2) 所述的平鋪是指平鋪厚度為1層種子，雜交種子不堆積。
4.根據權利要求1所述的一種提高菠蘿雜交種子成苗率的方法，其特征在于所述的 無菌培養間培養的培養條件是在24-26°C恒溫條件下暗培養。
5.根據權利要求1所述的一種提高菠蘿雜交種子成苗率的方法，其特征在于步驟(2) 所述的菠蘿雜交種子培養，雜交種子每天進行無菌水清洗2-4遍，及時將污染和發霉的種 子挑除，污染的種子分類集中培養，發霉變質的種子丟棄，污染嚴重的種子進行再次消毒， 用無菌水沖洗2-4遍，將污染物清洗干凈，用400-600mg/L的制菌霉素溶液浸泡25-35分 鐘，淋干，置于干凈的培養皿中進行培養。
6.根據權利要求1所述的一種提高菠蘿雜交種子成苗率的方法，其特征在于步驟(3) 所述的基質的配制為干凈的河沙腐熟牛糞細質泥炭土 =1 1 1，將基質原料混合均 勻后過篩，晾曬干燥，高壓滅菌、殺死蟲卵。
7.根據權利要求1所述的一種提高菠蘿雜交種子成苗率的方法，其特征在于營養盤 為PVC硬質盤，盤上有孔穴。
8.根據權利要求1所述的一種提高菠蘿雜交種子成苗率的方法，其特征在于所述的 營養液為1/8的MS培養液。
9.根據權利要求1所述的一種提高菠蘿雜交種子成苗率的方法，其特征在于田間移栽前準備苗田，每畝苗田地施入熟牛糞有機肥800-1200kg，N、P、K復合肥80-120kg，待苗田 均勻施肥后，用旋耕機翻攪2-4遍，耙平，菠蘿雜交苗定植株行距為30-50CmX80-100Cm， 行距較寬，利于雜交種苗的田間調查；定植時挖淺坑，幼苗連同基質一起入坑，覆土壓實。
10.根據權利要求1所述的一種提高菠蘿雜交種子成苗率的方法，其特征在于所述的 雜交種子催芽時間開始于12月至次年1月份，種子萌發于春季，有利于幼苗生長。
全文摘要
本發明涉及一種提高菠蘿雜交種子成苗率的育苗方法，其操作步驟包括(1)種子清洗、消毒；(2)種子室內催芽、培養；(3)室內營養盤移栽；(4)移入大田定植，具體方法是將采收后的種子或貯藏的種子，用流水清洗干凈，清水浸泡，然后進行消毒處理，消毒后的菠蘿雜交種子平鋪于培養皿中，用無菌水保持種子濕潤，在專用的無菌培養間進行培養；待菠蘿雜交種子萌發后置于6-10小時光培養和14-18小時暗培養，待幼苗長至3-5片葉、4-6cm高時，進行室內營養盤移栽；待菠蘿雜交苗長至15-20cm高，12-16片葉子時，進行田間移栽，將雜交苗在田間定植，采用該方法，菠蘿雜交種子成苗率提高到70％左右，為菠蘿雜交種子育苗提供了可靠的技術保障。
文檔編號A01G1/00GK101822165SQ201010178499
公開日2010年9月8日 申請日期2010年5月14日 優先權日2010年5月14日
發明者劉勝輝, 呂玲玲, 吳青松, 孫偉生, 孫光明, 左雪冬, 張秀梅, 石偉琦, 竇美安 申請人:中國熱帶農業科學院南亞熱帶作物研究所