專利名稱：白子菜的人工培育方法
技術領域：
本發明屬于植物人工培育技術領域，具體涉及一種白子菜的人工培育方法。
背景技術：
白子菜Gynura divaricata (Linn. ) DC.，又名白背三七，菊科菊三七屬，多年生草本植物，主要分布于臺灣至華南、西南一帶，具有食用和藥用的雙重價值。白子菜的嫩梢和嫩葉可作為蔬菜或加工成食品，口感好，營養豐富。白子菜中含有含量較高的鈣、鉀、鈉、 鎂、鐵等礦物質，其中鈣、鐵的含量是普通綠葉蔬菜的幾倍甚至幾十倍。白子菜中還富含多種有益于人體健康的活性成分，如可溶性膳食纖維、植物多糖、黃酮類物質，對人體有一定的營養保健作用。白子菜已被批準為新資源食品，對于增加我國蔬菜花色品種，提高蔬菜渡淡(渡過淡季)能力，豐富“菜籃子”均有重要意義。白子菜的全草均可入藥，味辛、淡、性平，具有清熱涼血、活血止痛、止血之效的藥用價值，根入藥有瀉火、涼血、生津之效，對于跌打損傷、血瘀腫痛、風濕骨痛、癰瘡腫毒、乳癰等均有顯著的療效。白子菜由于其食用和藥用的雙重性以及其內含降壓、降糖、降脂即“降三高“成分的獨特性符合社會發展、消費市場以及人類健康的需求，因此迫切需要建立白子菜的產業化生產模式。然而，目前白子菜只在我國南方少數地區有人工栽培，但缺乏科學繁殖和大面積人工栽培技術，不能保障種苗的數量、品質和優勢特性，北方地區由于自然條件的限制而不能實現白子菜的推廣種植。
發明內容
本發明為解決目前北方地區由于自然條件限制而不能推廣種植白子菜，提供一種白子菜的人工培育方法，保證其在北方地區也能正常生長，并保持其品質和優勢特性。本發明是采用以下技術方案實現的一種白子菜的人工培育方法，包括以下步驟
(1)選取白子菜優株(指遺傳性狀穩定、長勢良好、株高0.7-1.Om的健康植株)，剪取頂芽，滅菌后剝離出幼小頂芽作為外植體；
(2)選取無剝離傷痕的幼小頂芽，接種在附加2.0-4.0mg/L&6-BA(6-芐氨基嘌呤) 和0. 1-0. 6mg/L的ΝΑΑ( α -萘乙酸)的誘導培養基上進行芽誘導；
(3)將誘導出的葉芽切離原外植體，接種在附加2.0-4.Omg/L 6-BA (6-芐氨基嘌呤) 和0. 1-0. 6mg/L ΝΑΑ(α-萘乙酸)的繼代增殖培養基上進行增殖培養；
(4)切取繼代增殖培養基上生長正常、長度1.5-2. Ocm的芽，接種在附加0. 6-1. Omg/L 的I-BA (吲哚-6- 丁酸)和0. 1-0. 6mg/L的NAA ( α -萘乙酸)的生根培養基上進行生根培養，得到生根的組培苗；
上述誘導培養基和繼代增殖培養基以MS培養基為基本培養基，生根培養基以1/2 MS 培養基為基本培養基，三種培養基均附加重量百分比為2. 5%的蔗糖、重量百分比為0. 6%的瓊脂，PH值調至5-7 ；三種培養條件均為室溫控制在20-30°C，濕度保持在75%，光照強度為800-30001x，光照時間為 14h/d ；
(5)將生根的組培苗置于與培養基培養時相同溫濕度的環境中穴盤移栽，以砂子和草炭土以重量比1:1的配比作栽培基質，滅菌、遮陰、水肥保障，5-7天即可達種植標準(根長為 1. 0-1. 5cm)；
(6)4至9月進行大田種植，選擇地勢向陽、平整肥沃、排水良好的沙土或壤土，畝施腐熟有機肥(即慪制農家肥)2000-3000kg，拌施3 kg/畝的辛硫磷顆粒以殺滅地下害蟲，按照
1.0-1. 5m寬度起壟，壟高20-30cm，壟上覆膜，壟側種植，穴距40cm，畝植3000-3200株，移植當天灌水，隔十天再灌水一次，封壟前中耕，生長期保持土壤水分含量為50-70%，可隨水追施有機肥或噴施腐植酸葉面肥2-3次，注意遮陰和防凍，使高溫不高于60°C、低溫不低于 15°C，以防蟲網和粘板防蟲為主，當蟲害嚴重時，噴施2500倍(倍數濃度，指1份農藥的加水倍數，常用重量來表示)10% (百分比濃度，指100份藥液中含農藥有效成分的份數)二氯苯醚菊酯乳油，噴藥間隔期5-10天，不超過三次，正常生長45天即可舒枝采收莖葉。組織培養作為一種快繁技術，選取合適的外植體，通過無菌操作，在人工條件下培育再生植株。試管繁殖屬于組織培養，是一種微型的無性繁殖，取材于同一個體的體細胞而非性細胞，因此其后代遺傳性非常一致，能保持原有品種的優良性狀，對保質、保純有著特殊作用。試管繁殖是在人工控制的條件下進行的集約化生產，不受自然條件中季節和天氣的限制，可以全年進行連續生產，從取材-接種-培養-生根-移栽，實現工廠化生產以及反季節生產。在進行植物組織培養時，經常會出現試管苗玻璃化現象，這是植物組織培養過程中特有的一種生理失調或生理病變。瓊脂或蔗糖濃度與玻璃化成負相關，瓊脂或蔗糖濃度越高，玻璃化的比率越低。培養基中BA濃度或培養溫度與玻璃化成正相關，BA濃度或培養基溫度越高，玻璃化比率越大。通過增加瓊脂和蔗糖的濃度，適當提高培養基中瓊脂和蔗糖的含量，有效降低了試管苗的玻璃化比率。關于三種培養基附加激素的配比問題，誘導培養基和繼代增殖培養基使用
2.0-4. Omg/L的6-BA和0. 1-0. 6mg/L的NAA，既可以獲得較高的繁殖系數，又可以獲得理想的幼芽萌發率；生根培養基使用0. 6-1. Omg/L的I-BA和0. 1-0. 6mg/L的NAA，既可以獲得較高的生根系數，同時又能把小植株玻璃化和愈傷組織的發生控制到最低比率，而且小植株生長健壯，葉片正常，生產效率高。本發明通過實踐證明，有效的白子菜的組培快速繁殖技術路線為無菌材料獲取-不定芽誘導-壯芽繼代增殖培養-生根培養-煉苗-試管苗移植栽培，一方面通過調控培養基及其附加激素的濃度和比例進行芽誘導和繼代增殖培養，保持原植物特性，增強其環境適應性，另一方面以獨特的種植布局和合理的溫濕度控制，加之規范的田間作業保證其品質和產量，取得培養時間短、出苗快、變異少、植株質量好、生產效率高的效果。通過創設與北方種植白子菜相適應的環境條件，以利于白子菜在原本不適合栽培的北方環境條件下可以大范圍種植。本發明所述的白子菜的人工培育方法，對原種苗進行了脫毒、優化，保持了種苗的優勢特性，改善了植株的適應性，獲得種苗整齊、健壯。該方法具有組培周期短、繁殖速度快的特點，一般一個頂芽可繁殖30株，45天即可完成一個組培周期，并且移栽成活率在 85%_95%之間，適于北方種植。按照本發明所述的白子菜的人工培育方法，即可快速高效獲得優質的白子菜種苗，又能保證其在北方地區的自然條件下推廣種植，形成規模化產業，從而滿足市場需求。
具體實施例方式
一種白子菜的人工培育方法，包括以下步驟
(1)選取引種馴化經塑料大棚栽培后遺傳性狀穩定、長勢良好、株高0.7-1. Om的白子菜優株，剪取頂芽，去除外圍較大葉片，用自來水沖洗約30min，在超凈工作臺上先用75%酒精溶液浸泡30s，再用0. 1%氯化汞溶液浸泡IOmin左右，無菌水沖洗5_6次，無菌吸水紙吸干后剝離出幼小頂芽作為外植體；
(2)在通過污染關的無菌外植體材料中選取無剝離傷痕的幼小頂芽，接種在附加 2. 0-4. Omg/L (2. O mg/L 或 3· O mg/L 或 4· O mg/L)的 6-BA 和 0· 1-0. 6mg/L (0· 1 mg/L 或 0. 3 mg/L或0. 6 mg/L)的NAA的誘導培養基上進行芽誘導；
(3)將誘導出的葉芽切離原外植體，接種在附加2.0-4. Omg/L (2.0 mg/L或3. O mg/L 或 4· O mg/L) 6-BA 和 0. 1-0. 6mg/L (0· 1 mg/L 或 0. 3 mg/L 或 0. 6 mg/L) NAA 的繼代增殖培養基上進行增殖培養；
(4)切取繼代增殖培養基上生長正常、長度1.5-2. Ocm的芽，接種在附加0. 6-1. Omg/L (0. 6 mg/L 或 0. 8 mg/L 或 1· O mg/L)的 I-BA 和 0. 1-0. 6mg/L (0. 1 mg/L 或 0. 3 mg/L 或
0.6 mg/L)的NAA的生根培養基上進行生根培養，得到生根的組培苗；
上述誘導培養基和繼代增殖培養基以MS培養基為基本培養基，生根培養基以1/2 MS 培養基為基本培養基，三種培養基均附加重量百分比為2. 5%的蔗糖、重量百分比為0. 6%的瓊脂，PH值調至5-7 ；三種培養條件均為室溫控制在20-30°C，濕度保持在75%，光照強度為 800-3000 lx，光照時間為 14 h/d ；
(5)將生根的組培苗置于與培養基培養時相同溫濕度的環境中穴盤移栽，以砂子和草炭土以重量比1:1的配比作栽培基質，滅菌、遮陰、水肥保障，5-7天即可達到根長為
1.0-1. 5cm的種植標準；
(6)4至9月進行大田種植，選擇地勢向陽、平整肥沃、排水良好的沙土或壤土，畝施腐熟有機肥2000-3000kg，拌施3 kg/畝的辛硫磷顆粒以殺滅地下害蟲，按照1. 0-1. 5m寬度起壟，壟高20-30cm，壟上覆膜，壟側種植，穴距40cm，畝植3000-3200株，移植當天灌水，隔十天再灌水一次，封壟前中耕，生長期保持土壤水分含量為50-70%，可隨水追施有機肥或噴施腐植酸葉面肥2-3次，注意遮陰和防凍，使高溫不高于60°C、低溫不低于15°C，以防蟲網和粘板防蟲為主，當蟲害嚴重時，噴施2500倍10% 二氯苯醚菊酯乳油，噴藥間隔期5-10天，不超過三次，正常生長45天即可舒枝采收莖葉。
權利要求
1.一種白子菜的人工培育方法，其特征在于包括以下步驟(1)選取白子菜優株，剪取頂芽，滅菌后剝離出幼小頂芽作為外植體；(2)選取無剝離傷痕的幼小頂芽，接種在附加2.0-4. Omg/L的6-BA和0. 1-0. 6mg/L的 NAA的誘導培養基上進行芽誘導；(3)將誘導出的葉芽切離原外植體，接種在附加2.0-4. Omg/L 6-BA和0. 1-0. 6mg/L NAA的繼代增殖培養基上進行增殖培養；(4)切取繼代增殖培養基上生長正常、長度1.5-2. Ocm的芽，接種在附加0. 6-1. Omg/L 的I-BA和0. 1-0. 6mg/L的NAA的生根培養基上進行生根培養，得到生根的組培苗；上述誘導培養基和繼代增殖培養基以MS培養基為基本培養基，生根培養基以1/2 MS 培養基為基本培養基，三種培養基均附加重量百分比為2. 5%的蔗糖、重量百分比為0. 6%的瓊脂，PH值調至5-7 ；三種培養條件均為室溫控制在20-30°C，濕度保持在75%，光照強度為 800-30001x，光照時間為 14h/d ；(5)將生根的組培苗置于與培養基培養時相同溫濕度的環境中穴盤移栽，以砂子和草炭土以重量比1:1的配比作栽培基質，滅菌、遮陰、水肥保障，5-7天即可達種植標準；(6)4至9月進行大田種植，選擇地勢向陽、平整肥沃、排水良好的沙土或壤土，畝施腐熟有機肥2000-3000kg，拌施3 kg/畝的辛硫磷顆粒以殺滅地下害蟲，按照1. 0-1. 5m寬度起壟，壟高20-30cm，壟上覆膜，壟側種植，穴距40cm，畝植3000-3200株，移植當天灌水，隔十天再灌水一次，封壟前中耕，生長期保持土壤水分含量為50-70%，可隨水追施有機肥或噴施腐植酸葉面肥2-3次，注意遮陰和防凍，使高溫不高于60°C、低溫不低于15°C，以防蟲網和粘板防蟲為主，當蟲害嚴重時，噴施2500倍10% 二氯苯醚菊酯乳油，噴藥間隔期5-10天，不超過三次，正常生長45天即可舒枝采收莖葉。
2.根據權利要求1所述的白子菜的人工培育方法，其特征在于所述的白子菜優株為遺傳性狀穩定、長勢良好、株高0. 7-1. Om的健康植株。
全文摘要
本發明屬于植物人工培育技術領域，具體涉及一種白子菜的人工培育方法。為解決目前北方地區由于自然條件限制而不能推廣種植白子菜，提供一種白子菜的人工培育方法，保證其在北方地區也能正常生長，并保持其品質和優勢特性。本發明通過實踐證明，有效的白子菜的組培快速繁殖技術路線為無菌材料獲取-不定芽誘導-壯芽繼代增殖培養-生根培養-煉苗-試管苗移植栽培，一方面通過調控培養基及其附加激素的濃度和比例進行芽誘導和繼代增殖培養，保持原植物特性，增強其環境適應性，另一方面以獨特的種植布局和合理的溫濕度控制，加之規范的田間作業保證其品質和產量，取得培養時間短、出苗快、變異少、植株質量好、生產效率高的效果。
文檔編號A01G1/00GK102224803SQ201110114588
公開日2011年10月26日 申請日期2011年5月5日 優先權日2011年5月5日
發明者衛小平, 張文華, 張永紅, 高俊憲 申請人:山西菩凈生物科技有限公司