專利名稱：歐美雜種山楊組培苗瓶外袋生根方法
技術領域：
本發明涉及一種歐美雜種山楊組培苗生根方法。
背景技術：
歐美雜種山楊(Populustremula XP. tremuloides)是歐洲山楊(P. tremula)和北美山楊(P. tremuloides)的雜交種,具有生長快、耐寒、耐貧瘠、樹形高大、適應性強等特點，是溫寒帶山地造林的優良樹種。此外，該雜種材質較軟，細密，潔白，樹干端直，是造紙、 膠合板、刨花板等工業的優質原料。
研究表明在芬蘭，歐美山楊雜種適于山地造林，平原造林長勢更好，而且其輪伐期和生長速度都快于一般的山地針闊葉造林樹種。而我國北方很多地區的氣候環境要好于芬蘭，土壤肥沃，溫度高，日照長，生長期也長，直接采用弓I進優良山楊雜種無性系造林，其生長量更加顯著。因此，該樹種適于在我國黑龍江南部、吉林、遼寧以及華北地區種植。目前作為優良用材樹種被許多國家廣泛引進。中國于2000和2001年，由東北林業大學林木遺傳育種學科從芬蘭引進歐美山楊雜種優良無性系50個，通過組培和扦插的方法進行大量繁殖并上山造林，目的是豐富中國的森林資源，為林業及林產工業帶來更大的生態和經濟效益。
但在歐美雜種山楊無性繁殖的技術實施過程中，面臨著培養基成本高、生產周期長，組培苗移栽成活率低等問題，其中以移栽不易成活的問題最為嚴重，導致成苗率低，育苗成本增加，嚴重影響了歐美雜種山楊大面積的推廣種植。因此，如何提高歐美雜種山楊組培苗移栽成活率以及縮短育苗周期已經成為當務之急。發明內容
本發明是要解決現有歐美雜種山楊組織培養過程中存在培養成本高、生產周期長，組培苗移栽成活率低的問題，提供一種歐美雜種山楊組培苗瓶外袋生根的方法。
本發明歐美雜種山楊組培苗瓶外袋生根的方法，包括以下步驟
一、將寬為17 20cm，高為10 12cm的聚丙烯塑料袋的底部用封口機塑封，制作成生根培養袋；
二、將泥炭土和沙按體積比I 2 I混合，然后于121°C進行高溫滅菌1.5 2 小時，得培養料，然后將培養料分裝于生根培養袋中，每個生根培養袋中培養料的裝入量為培養袋體積的1/3 ；
三、將培養袋中的培養料挖穴，穴規格為寬I. 5 2cm，深I. 5cm，穴與穴之間間隔 2cm，然后用生根培養液將每個穴潤濕，每個穴內生根培養液的用量為3 5mL ;
四、將I. 5 3cm的歐美雜種山楊組培苗從培養基中取出，將組培苗根部的愈傷組織切除，取切除愈傷組織后的單棵組培苗栽入培養袋的穴中，然后將培養袋頂部用封口機封好，置于溫室大棚內培養，光照為散射光，棚內溫度控制在23 28°C之間，空氣相對濕度保持在60 % 70%，培養5 7天后，將培養袋頂部劃開，敞口后再培養8 10天，即得歐美雜種山楊生根苗；步驟三中所述的生根培養液為含有O. 3mg/L NAA的WPM培養基或含有 O. 3mg/L NAA 和 O. 05mg/L IAA 的 WPM 培養基。
本發明方法的優點如下
I.生產成本低本發明方法直接將無根組培苗栽入泥炭土和沙的混合基質中讓其生根，利用自然光照，無需人工管理，不但減少了試管內生根需要無菌操作的工時與能源耗費，也減少了一次培養基制作的材料能源與工時耗費，可大大降低生產成本；
傳統的生根方式是在試管內進行(即瓶內生根)，其生產成本高，主要表現在設備投資大，用電量大和培養基成本高等方面。而且大批量生產過程中，往往因操作失誤而導致污染。國內外的組織培養室都是全封閉的，靠人工光照和空調來滿足試管苗對光照和溫度的要求，這種培養室的耗電量大，電費約占整個成本的50%，并且培養基中的瓊脂不僅用量大而且價格很高。本發明方法的生產成本相比于以往技術有顯著 降低，可實現工業化生產。
2.育苗周期短采用本發明組培苗瓶外袋生根方法，無需經過煉苗過程，將試管苗生根和馴化有機地結合起來，簡化了培養程序，有效地縮短了育苗周期，歐美雜種山楊無根組培苗生長15-20天即可生根，移栽。
常規的組培苗生根都是在瓶內進行，移栽前需要經過煉苗過程，其周期長，程序復雜。本發明方法在移栽過程中不需要煉苗，育苗時間縮短了一半。
3.移栽成活率高本發明采用瓶外袋生根方法代替傳統的組培苗瓶內生根技術， 避免了根系附著的瓊脂造成的污染腐爛，而且瓶外袋生根方法在生根過程中已經逐步適應了外界環境，抗逆能力強。此外，采用本方法生根苗可以連同基質一起移栽，不需要緩苗過程，沒有根系損傷，相當于容器育苗，移栽成活率可達80% -95%。
移栽成活率是檢驗組培是否成功的關鍵，也是檢驗組培能否進行工廠化的關鍵。 試管無根苗瓶內生根和瓶外移栽是兩個單獨過程，其生根率和移栽成活率是需要累計連續計算的。而瓶外生根率是將生根和移栽合二為一。因此，本發明方法試管苗瓶外袋生根的移栽成活率比瓶內生根后移栽成活率有顯著地提高。
總之，本發明歐美雜種山楊組培苗瓶外袋生根方法具有操作簡單，育苗周期短，生產成本低，移栽成活率高，可工廠化生產等優點。
圖I為具體實施方式
七步驟四中將組培苗根部的愈傷組織切除的照片；圖2為具體實施方式
七步驟四中取切除愈傷組織后的單棵組培苗栽入培養袋的穴中的照片；圖3為具體實施方式
七步驟四中將培養袋頂部用封口機封好的照片；圖4為具體實施方式
七獲得的歐美雜種山楊生根苗照片。
具體實施方式
本發明技術方案不局限于以下所列舉具體實施方式
，還包括各具體實施方式
間的任意組合。
具體實施方式
一本實施方式歐美雜種山楊組培苗瓶外袋生根的方法，包括以下步驟
一、將寬為17 20cm，高為10 12cm的聚丙烯塑料袋的底部用封口機塑封，制作成生根培養袋；
二、將泥炭土和沙按體積比I 2 I混合，然后于121°C進行高溫滅菌1.5 2 小時，得培養料，然后將培養料分裝于生根培養袋中，每個生根培養袋中培養料的裝入量為培養袋體積的1/3 ；
三、將培養袋中的培養料挖穴，穴規格為寬I. 5 2cm，深I. 5cm，穴與穴之間間隔 2cm，然后用生根培養液將每個穴潤濕，每個穴內生根培養液的用量為3 5mL ;
四、將I. 5 3cm的歐美雜種山楊組培苗從培養基中取出，將組培苗根部的愈傷組織切除，取切除愈傷組織后的單棵組培苗栽入培養袋的穴中，然后將培養袋頂部用封口機封好，置于溫室大棚內培養，光照為散射光，棚內溫度控制在23 28°C之間，空氣相對濕度保持在60 % 70%，培養5 7天后，將培養袋頂部劃開，敞口后再培養8 10天，即得歐美雜種山楊生根苗；步驟三中所述的生根培養液為含有O. 3mg/L NAA的WPM培養基或含有 O. 3mg/L NAA 和 O. 05mg/L IAA 的 WPM 培養基。
本實施方式所述歐美雜種山楊引自芬蘭林業科學院。
所述歐美雜種山楊組培苗為利用外植體，通過植物組織培養的方法，分生出的新的歐美雜種山楊植株個體。
具體實施方式
二 本實施方式與具體實施方式
一不同的是步驟一中將寬為 18cm，高為Ilcm的聚丙烯塑料袋的底部用封口機塑封。其它與具體實施方式
一相同。
具體實施方式
三本實施方式與具體實施方式
一或二不同的是步驟二中將泥炭土和沙按體積比I : I混合。其它與具體實施方式
一或二相同。
具體實施方式
四本實施方式與具體實施方式
一或二不同的是步驟二中將泥炭土和沙按體積比2 I混合。其它與具體實施方式
一或二相同。
具體實施方式
五本實施方式與具體實施方式
一至四之一不同的是步驟三中每個穴內生根培養液的用量為4mL。其它與具體實施方式
一四之一相同。
具體實施方式
六本實施方式與具體實施方式
一至五之一不同的是步驟四中棚內溫度控制在25°C,空氣相對濕度保持在65%。其它與具體實施方式
一至五之一相同。
具體實施方式
七本實施方式歐美雜種山楊組培苗瓶外袋生根的方法，包括以下步驟
一、將寬為17 20cm，高為10 12cm的聚丙烯塑料袋的底部用封口機塑封，制作成生根培養袋；
二、將泥炭土和沙按體積比I : I混合，然后于121 °C進行高溫滅菌2小時，得培養料，然后將培養料分裝于生根培養袋中，每個生根培養袋中培養料的裝入量為培養袋體積的 1/3 ；
三、將培養袋中的培養料挖穴，穴規格為寬I. 5cm，深I. 5cm，穴與穴之間間隔2cm， 然后用生根培養液將每個穴潤濕，每個穴內生根培養液的用量為4mL ；
四、將2cm的歐美雜種山楊組培苗從培養基中取出，將組培苗根部的愈傷組織切除(如圖I所示)，取切除愈傷組織后的單棵組培苗栽入培養袋的穴中(如圖2所示)，然后將培養袋頂部用封口機封好(如圖3所示)，置于溫室大棚內培養，光照為散射光，棚內溫度控制在25 °C，空氣相對濕度保持在65%，培養6天后，將培養袋頂部劃開，敞口后再培養 9天，即得歐美雜種山楊生根苗。
步驟三中所述的生根培養液為含有O. 3mg/L NAA的WPM培養基或含有O. 3mg/LNAA 和O. 05mg/L IAA的WPM培養基。
所述WPM培養基的具體組成成分如下
權利要求
1.歐美雜種山楊組培苗瓶外袋生根方法，其特征在于歐美雜種山楊組培苗瓶外袋生根的方法，包括以下步驟一、將寬為17 20cm，高為10 12cm的聚丙烯塑料袋的底部用封口機塑封，制作成生根培養袋；二、將泥炭土和沙按體積比I 2 I混合，然后于121°C進行高溫滅菌I. 5 2小時，得培養料，然后將培養料分裝于生根培養袋中，每個生根培養袋中培養料的裝入量為培養袋體積的1/3 ；三、將培養袋中的培養料挖穴，穴規格為寬I.5 2cm，深I. 5cm，穴與穴之間間隔2cm，然后用生根培養液將每個穴潤濕，每個穴內生根培養液的用量為3 5mL ;四、將I.5 3cm的歐美雜種山楊組培苗從培養基中取出，將組培苗根部的愈傷組織切除，取切除愈傷組織后的單棵組培苗栽入培養袋的穴中，然后將培養袋頂部用封口機封好，置于溫室大棚內培養，光照為散射光，棚內溫度控制在23 28°C之間，空氣相對濕度保持在60% 70%，培養5 7天后，將培養袋頂部劃開，敞口后再培養8 10天，即得歐美雜種山楊生根苗；步驟三中所述的生根培養液為含有O. 3mg/L NAA的WPM培養基或含有O.3mg/L NAA 和 O. 05mg/L IAA 的 WPM 培養基。
2.根據權利要求I所述的歐美雜種山楊組培苗瓶外袋生根方法，其特征在于步驟一中將寬為18cm，高為Ilcm的聚丙烯塑料袋的底部用封口機塑封。
3.根據權利要求I或2所述的歐美雜種山楊組培苗瓶外袋生根方法，其特征在于步驟二中將泥炭土和沙按體積比I:I混合。
4.根據權利要求I或2所述的歐美雜種山楊組培苗瓶外袋生根方法，其特征在于步驟二中將泥炭土和沙按體積比2I混合。
5.根據權利要求3所述的歐美雜種山楊組培苗瓶外袋生根方法，其特征在于步驟三中每個穴內生根培養液的用量為4mL。
6.根據權利要求5所述的歐美雜種山楊組培苗瓶外袋生根方法，其特征在于步驟四中棚內溫度控制在25 °C，空氣相對濕度保持在65%。
全文摘要
歐美雜種山楊組培苗瓶外袋生根方法，涉及一種歐美雜種山楊組培苗生根方法。本發明是要解決現有歐美雜種山楊組織培養過程中存在培養成本高、生產周期長，組培苗移栽成活率低的問題。方法一、將聚丙烯塑料袋的底部用封口機塑封，制作成生根培養袋；二、將泥炭土和沙混合，高溫滅菌得培養料，將培養料分裝于生根培養袋中；三、將培養袋中的培養料挖穴，用生根培養液將每個穴潤濕；四、將歐美雜種山楊組培苗從培養基中取出，栽入培養袋的穴中，將培養袋頂部用封口機封好，置于溫室大棚內培養5～7天后，將培養袋頂部劃開，再培養8～10天，即得歐美雜種山楊生根苗。本發明方法用于歐美雜種山楊無性繁殖領域。
文檔編號A01H4/00GK102919128SQ20121045695
公開日2013年2月13日 申請日期2012年11月14日 優先權日2012年11月14日
發明者刁桂萍, 王秋玉, 詹亞光, 楊傳平, 閆紹鵬, 尚潔, 張榮沭 申請人:東北林業大學