專利名稱：一種無抗益生活性飼料蛋白肽的制備方法
技術領域：
本發明涉及生物發酵技術領域，具體而言涉及一種飼料蛋白肽的制備方法。
背景技術：
自上世紀50年代開始，在動物日糧中添加抗生素顯著促進了動物生產，并對集約化畜牧業的發展做出了重大貢獻。然而隨著時間的推移，飼料中添加抗生素的危害日益顯現，并受到社會的廣泛關注。2004年，WT0、聯合國糧農組織(FAO)和世界動物衛生組織(OIE)聯合召開專題討論會，討論了非人用抗生素的使用和抗生素的耐藥性問題。歐盟自2006年I月起全面禁止在畜禽飼料中添加抗生素。在生豬等飼養中不得添加抗生素目前已經是國際公認的食品安全標準。人們開始紛紛尋求其它的替代品和替代技術，以保證畜牧業生產的效率與效益不受影響。為解決上述問題，本發明提出一種新型飼料蛋白——無抗益生活性飼料蛋白肽的生產工藝。 本發明的技術特點在于包含三類菌群，
I是抗營養因子降解菌群，在油料餅柏中含有大量抗營養因子，如豆柏中的胰蛋白酶抑制劑，菜籽柏中的硫代葡萄糖苷，這些抗營養因子的存在會嚴重影響到動物對飼料蛋白的消化利用。本發明引入相應的降解菌，對其進行降解，達到無抗目的。2是動物益生菌菌群。動物益生菌是一種生態健康型飼料添加劑，因不添加抗生素，不會造成藥物殘留，所以被人們普遍認為是有前途的抗生素的替代品，是動物的綠色飼料添加劑，受到國內外學者的廣泛研究。本發明引入相應的動物益生菌，調節動物腸道菌群平衡，提高動物免疫力，達到益生目的。3生物活性肽生產菌群。蛋白質被動物攝取后，經腸道多種蛋白水解酶的作用，不是僅以氨基酸的形式吸收，更多的是以小肽的形式被直接吸收。而且，二肽和三肽的吸收速度比同組成的氨基酸要快。其中，某些小肽不僅具有營養功能，而且具有多種生理功能，這是肽理論研究和實踐應用中的重大突破。本發明引入相應的生物活性肽生產菌群，可將油料餅柏中粗蛋白降解成寡肽，達到活性目的。目前國內外對飼料的固體發酵都是一步發酵法，即在同一操作條件下進行，不能很好的滿足各種菌群的生長要求。本發明針對不同菌種的生長特性，實施分時發酵法，即在不同的發酵階段控制不同的發酵參數(溫度，PH值，通氣量)，不僅保證動物益生菌的有效生長和存活，還保證活性肽生產菌能有效水解蛋白產生物活性肽，抗營養因子降解菌能充分降解原料中的抗營養因子。
發明內容
本發明的目的在于提供一種無抗益生活性飼料蛋白肽的制備工藝，利用該發明，制備不含抗營養因子，富含動物益生菌或生物活性肽的飼料蛋白。本發明是通過如下技術方案實現的
一發酵菌的制備I)抗營養因子降解菌的制備，從原始出發菌種酵母菌屬和霉菌屬(見表I)中挑取一環菌體，分別接種到麥芽汁種子培養基和察氏種子培養基中，于25°C -30°c溫度下，100-120rpm，搖床培養48-72小時后，停止培養，作為I號發酵液。2)動物益生菌的制備，從原始出發菌種乳酸菌屬(見表I)中挑取一環菌體，接種到乳酸菌屬培養基中，于35°C _38°C溫度下靜止培養48-64小時,作為2號發酵液。3)生物活性肽生產菌的制備，從原始出發菌種芽孢桿菌屬(見表I)中挑取一環菌體，接種到牛肉膏蛋白胨種子培養基中，于30°C _37°C溫度下，150-170rpm，搖床培養16-24小時后，停止培養，作為3號發酵液。4)復合發酵菌種的制備，將I號、2號和3號種子液按體積比I : 2 I比例混合均勻，作為復合發酵菌種液。二固態原料的制備
將豆柏或菜籽柏等原料粉碎，按料水比I :4 1 :8加水混勻。三復合菌群分步發酵
I)第一次發酵將復合發酵菌種液以5% ^10%的接種量接種到固態原料中，混合均勻 于。將攪拌好的料堆積在消好毒的場地上，料高20— 40厘米，好氧發酵48 54小時。2 )第二次發酵將混合物裝入大塑料桶或塑料袋壓實密閉，保證密封完全不透氣。厭氧發酵經3-5天。四產品后處理
發酵結束后，于60°C下干燥，粉碎，包裝即得產品。
表I復合發酵菌群中的具體菌種
2K16ft
蘭I織
丨丨丨丨 丨丨丨丨丨i....................................................................................丨丨丨丨丨iiii丨丨丨丨丨丨丨丨丨Iiiiii............................................................................................
窗 MMS Mn ■B*BbBqH
mMmΚΗΡ^% Bjbw% 孤驟
"m..........................................................................................................................[..棄||歡.....mm................................................................................................
具體實施例I)分別從斜面保藏的酵母菌屬原始菌種釀酒酵母、白地霉、產脘假絲酵母、熱帶假絲酵母中挑取一環菌體，接種到O. 5 L麥芽汁種子培養基，于28°C溫度下，120rpm，搖床培養48小時后，使其活菌數量達到106/ml以上，等體積混合四種菌株的種子培養液，得到2L酵母復合種子液。2)分別從斜面保藏的霉菌屬原始菌種米曲霉、黑曲霉中挑取一環菌體，接種到I L察氏種子培養基中，于28°C溫度下，120rpm,搖床培養72小時后,停止培養,使其活菌數量達到106/ml以上，等體積混合兩種菌株的種子培養液，得到2L霉菌復合種子液。3)將2L酵母復合種子液和2L霉菌復合種子液混合均勻，得到4L抗營養因子降解菌復合發酵液(I號發酵液)。4)分別從斜面保藏的乳酸菌屬原始菌種植物乳桿菌、雙歧乳桿菌、腸球菌、酪酸菌中挑取一環菌體，接種到2 L乳酸菌屬培養基中，于37°C溫度下靜止培養48小時，使其活菌數量達到107/ml以上，等體積混合四種菌株的種子培養液，得到8L乳酸菌復合種子液，作為動物益生菌復合發酵液(2號發酵液)。5)分別從斜面保藏的芽孢桿菌屬原始菌種枯草芽孢桿菌、納豆桿菌、地衣芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌中挑取一環菌體，接種到I L牛肉膏蛋白胨種子培養基中，于37°C溫度下，160rpm，搖床培養24小時后，使其活菌數量達到107/ml以上，等體積混合四種菌株的種子培養液，得到4L芽孢桿菌復合種子液，作為生物活性肽復合發酵液(3號發酵液)。
6)將4L體積的I號發酵液、8L體積的2號發酵液和4L體積的3號發酵液混合均勻，共得16L復合發酵菌種液。7)將32公斤豆柏粉碎，按料水比I :4加如128公斤水，混勻，得160公斤發酵原料。8)將16L復合發酵菌種液接種到160公斤固態發酵原料中，混合均勻。將攪拌好的料堆積在消好毒的場地上，料高30厘米，好氧發酵48小時。9 )好氧發酵結束后，將混合物裝入大塑料桶中壓實密閉，保證完全不透氣。再厭氧發酵4天。10)發酵結束后，取出物料，于60°C下干燥，粉碎，包裝即得產品。
權利要求
1.一種無抗益生活性飼料蛋白肽的制備方法，其特征是以油料餅柏為主要原料，用復合 微生物進行固體發酵所得，所述的復合微生物包括三大功能菌群1抗營養因子降解菌群；2動物益生菌群；3生物活性肽生產菌群，上述的抗營養因子降解菌群由釀酒酵母、白地霉、產脘假絲酵母、熱帶假絲酵母、米曲霉、黑曲霉組合而成，每種菌的活菌總數^ IXIO6-IO9,上述的動物益生菌群由植物乳桿菌、雙歧乳桿菌、腸球菌和酪酸菌組合而成，每種菌的活菌總數> IXIO6-IO9,上述的生物活性肽生產菌群由枯草芽孢桿菌、納豆桿菌、地衣芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌組合而成，每種菌的活菌總數> IXIO6-IO90
全文摘要
本發明提供一種無抗益生活性飼料蛋白肽的制備方法，以價格低廉的油料餅粕為原料，經過微生物發酵轉變成無抗益生活性飼料蛋白肽，所用發酵菌為復合菌群，包括抗營養因子降解菌群、動物益生菌群，生物活性肽生產菌群。利用該發明所得產品為一種飼料蛋白，其具有三大特點1無抗，不含抗營養因子；2益生，富含動物益生菌；3活性，富含生物活性肽。該飼料蛋白用于動物飼養具有易吸收、生物效價高和對動物的免疫調節、防病抗病等作用。
文檔編號A23K1/14GK102919514SQ201210457459
公開日2013年2月13日 申請日期2012年11月15日 優先權日2012年11月15日
發明者熊小鵬, 李 榮 申請人:江西一領藥業有限公司