專利名稱：脆弱擬桿菌在制備治療腹瀉組合物中的應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及脆弱擬桿菌的用途，具體涉及將脆弱擬桿菌用于制備一種載體和加入食品或藥物中來治療腹瀉，屬于脆弱擬桿菌的微生物應用技術領域。
背景技術：
腹瀉是大腸疾病最常見的癥狀，主要分為急性腹瀉和慢性腹瀉，急性腹瀉病發時期為廣2個星期，而慢性腹瀉則在2個月以上，常見的引起腹瀉的原因有細菌感染、病毒感染、寄生蟲、藥物反應、腸道疾病、著涼、飲食等，導致不同程度的腹灣，有時伴有腹痛、惡心、嘔吐等癥狀。目前治療腹瀉的主要辦法是口服補液、糾正水電解質紊亂、口服蒙脫石散及抗微生物治療等。在最近幾十年內，益生菌作為治療胃腸疾病的安全及可利用形式已受到極大關注。在益生菌中是被廣泛關注的雙歧桿菌和乳酸菌在攝入后對人和動物具有很好作用的菌株，它們的特定菌株能夠在腸粘膜上定居，在腸道內建群并且防止有害微生物在其上粘附，是能通過保持腸內自然微生物區系促進生物個體健康的可生長的微生物制劑，幫助維持人和動物的健康。文件CN1350460A公開了一種能夠預防腹瀉的乳酸菌菌株；文件CN1420781A公開了一種能夠預防腹瀉的雙歧桿菌。脆弱擬桿菌(Bacteroides fragilis)作為一種革蘭氏染色陰性、桿狀、兩端鈍圓而濃染，有莢膜、無芽胞、無動力的專性厭氧細菌，分產腸毒素型和非產腸毒素型。脆弱擬桿菌作為人及動物腸道正常菌群的一部分，主要存于結腸中，此外，呼吸道、胃腸道及泌尿生殖道粘膜也可定植生長。研究較多的是脆弱擬桿菌作為一種條件致病菌，當宿主粘膜受損時，可侵犯粘膜下層，引起感染，也可經血液流動，引起身體其它器官如腸道、腹腔、肝、肺、腦組織化膿性感染并伴發膿腫和引起急慢性腹瀉等。此外，其對結腸、直腸癌的發生也有促進作用。但是，1991年張季階發表了《一種無毒脆弱擬桿菌的分離鑒定》，報導了關于1983年9月從一個發育良好的嬰兒糞便中分離出量大而又較純的細菌，經以系列的鑒定、基礎試驗和臨床應用觀察，屬于脆弱擬桿菌群中的一株無毒菌，是人體的益生菌，定名為BF839菌株。本發明是將脆弱擬桿菌應用于制備治療腹瀉的藥物中，效果好，成本低。
發明內容
本發明的目的是提供一種新型微生物脆弱擬桿菌在制備治療腹瀉藥物中的應用。為了解決上述問題，本發明所采用的技術方案是:
脆弱擬桿菌在制備治療腹瀉組合物中的應用。所述的用途指可以應用于制備一種載體，也可以用于制備含有這種微生物的食物或藥品的組合物。所述的脆弱擬桿菌在載體中的含量為KTio1tlCfi /mL。
所述的載體是選自奶粉、干酪、凝乳、酸奶酪、奶基發酵產品、冰激凌、發酵谷類產品、奶粉、嬰兒食品或寵物食品的食物組合物。所述的食品或藥品組合物至少含有能治療腹瀉的脆弱擬桿菌菌株。上述的組合物選自奶粉、干酪、凝乳、酸奶酪、奶基發酵產品、冰激凌、發酵谷類產品、奶粉、嬰兒食品或寵物食品、片劑、液體細菌懸浮液、干口服補充劑、濕口服補充劑、干管飼或濕管飼。上述的組合物為片劑、液體細菌懸浮液、干口服補充劑、濕口服補充劑、干管飼或濕管飼的形式。本發明的有益效果是:實驗證明脆弱擬桿菌對于治療腹瀉具有很好的效果。
具體實施方式
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下面通過實施例對本發明做進一步詳細說明，這些實施例僅用來說明本發明，并不限制本發明的范圍。實施例1
(O由嬰兒糞便中分離脆弱擬桿菌
按“正常菌群檢查法”稱取0.5克大便，置于先裝有4.5ml生理鹽水的試管中，以此連續稀釋成10_卜10_6，由高稀積度向低稀積度滴到Bd培養基平板上，置于厭氧產氣盒中加厭氧產氣袋進行厭氧培養。置37°C，2 7天后開罐檢查。選單一菌落進行純培養、染色鏡檢、培養特性、生理生化檢測。(2)脆弱擬桿菌的增菌培養及菌液制備
選取純化后的單個菌落接種于改良的胰蛋白胨肉湯中進行增菌，所得菌液離心沉淀，轉速3000r/min,離心15min,去上清沉淀用生理鹽水洗漆,沉淀物用生理鹽水稀釋,用麥氏比池管做菌數測定，稀釋至IO8 cfi /ml, IO9 cfi /ml, IO10 cfi /ml。實施例2 脆弱擬桿菌毒力實驗 (O小鼠急性毒力實驗
取體重22±2克C57BR/C小鼠(雌雄各半)60只分成高劑量組、低劑量組和對照組，各組20只。高劑量組每只每天灌胃IO12 cfi /ml菌液0.5ml，低劑量組每天灌胃IO9 cfi /ml菌液0.5ml，對照組每天灌胃0.5ml生理鹽水。觀察14天。實驗結果:小鼠正常生長，未見死亡，LD50測不出。(2)大鼠毒力實驗
取150±20克SD大鼠30只(雌雄各半)。分為3組:高低劑量組和對照組。高劑量組每只每天灌胃1012cfi/ml菌液2ml,低劑量組每天灌胃109cfi/ml菌液2ml,對照組每天灌胃2ml生理鹽水。連續觀察14天，14天后抽靜脈血測血象、肝腎功。取胃腸肝脾組織做病理切片電鏡觀察。實驗結果:均未見明顯異常。(3)恒河猴毒力實驗:取恒河猴10只(雌雄各半)。分為2組:高低劑量組和對照組。高劑量組每只每天口服IO12Cf i/ml菌液100ml，低劑量組每天口服109cfi/ml菌液100ml。連續觀察60天。14天、30天、45天、60天后抽靜脈血測血象、肝腎功，測心電圖。取胃腸肝脾組織做病理切片電鏡觀察。
實驗結果:均未見明顯異常。實施例3
脆弱擬桿菌對于腹瀉的治療作用
(1)造模前動物禁食給水，隨后用氨芐青霉素鈉(加生理氯化鈉溶液配制)0.2g灌胃，每只0.5ml Bid,引起小鼠腹瀉，排水樣或糊狀便。將腹瀉小鼠分別用IO8 cfi /ml, 1O9 cfi /ml, IO10 cfi /ml的菌液灌胃，每次
0.5ml Bid，空白對照組給等體積的生理鹽水灌胃，Bid (每組各20只)。
權利要求
1.弱擬桿囷在制備防治腹 與組合物中的應用，其特征在于:脆弱擬桿囷在制備治療腹瀉組合物中的應用。
2.根據權利要求1所述的脆弱擬桿菌在制備防治腹瀉組合物中的應用，其特征在于，所述的用途指可以應用于制備一種載體，也可以用于制備含有這種微生物的食物或藥品的組合物。
3.根據權利要求1所述的脆弱擬桿菌在制備治療腹瀉組合物中的應用，其特征在于，所述的脆弱擬桿菌在載體中的含量為IO8IOltlCfi /mL。
4.根據權利要求2所述脆弱擬桿菌在制備防治腹瀉組合物中的應用，其特征在于:所述的載體是選自奶粉、干酪、凝乳、酸奶酪、奶基發酵產品、冰激凌、發酵谷類產品、奶粉、嬰J L食品或寵物食品的食物組合物。
5.有脆弱擬桿菌食品或藥品組合物，其特征在于:所述的食品或藥品組合物至少含有能治療腹瀉的脆弱擬桿 菌菌株。
6.根據權利要求5所述的組合物，其特征在于:所述的組合物選自奶粉、干酪、凝乳、酸奶酪、奶基發酵產品、冰激凌、發酵谷類產品、奶粉、嬰兒食品或寵物食品、片劑、液體細菌懸浮液、干口服補充劑、濕口服補充劑、干管飼或濕管飼。
7.根據權利要求5所述的組合物，其特征在于:所述的組合物為片劑、液體細菌懸浮液、干口服補充劑、濕口服補充劑、干管飼或濕管飼的形式。
全文摘要
本發明涉及脆弱擬桿菌在制備治療腹瀉組合物中的應用，該應用可以用于制備一種載體，也可以用于制備含有這種微生物的食物或藥品的組合物，實驗證明脆弱擬桿菌對于腹瀉具有很好的治療作用。
文檔編號A23K1/18GK103082294SQ20131002094
公開日2013年5月8日 申請日期2013年1月21日 優先權日2013年1月21日
發明者智發朝, 白楊, 劉洋洋 申請人:廣州知光生物科技有限公司