專利名稱：一種調控草地螟阿格姬蜂滯育的方法
技術領域：
本發明屬于生物技術領域，涉及一種調控草地螟阿格姬蜂滯育的方法。
背景技術：
在草地生態系統中，生物群落以多種生物種群形式存在，它們之間以食物鏈的關系來聯系在一起，其中任何一環發生變化，必然會引起其他環節的變化。因此在一定的草地生態系統范圍內，分析害蟲的種群與天敵種群的相互關系，人為地予以加強天敵種群控制害蟲種群的力量，就能把害蟲種群數量壓低到不能對牧草造成危害的水平。利用天敵昆蟲防治害蟲是生物防治中應用最廣、最多的方法。草地螟Loxostege sticticalis Linnaeus (鱗翅目:螟蛾科)是農牧業突發性多食遷飛害蟲，危害范圍廣，食性雜，幼蟲可取食藜科、寥科、豆科、茄科、葫蘆科、十字花科等300多種植物，對我國華北、東北和西北地區農牧業危害很大，并時常暴發成災、造成重大經濟損失。國內對于草地螟的防治主要采取的是化學防治，噴施適量有機合成殺蟲劑，能起到快速消滅降低害蟲種群密度的作用，但過量施用化學藥劑，嚴重影響了農作物的質量，而且造成環境污染和農藥殘留，危害人畜健康。因此，改變當前以化學防治為主的草地螟防治方法已成為牧草產業發展的當務之急，充分利用田間自然發生的天敵昆蟲的控害作用是這其中的重要措施之一，具有十分重要的意義。草地螟阿格姬蜂Agrypon flexorius Thunberg隸屬膜翅目，姬蜂科,阿格姬蜂屬，是完全變態類寄生蜂，發育過程中共有卵、幼蟲、蛹和成蟲這四個蟲態(發育階段)，每個蟲態的發育特點各有不同如卵、蛹不食不動；幼蟲只能在寄主體內取食，活動能力很差；成蟲則具翅膀，可以靈活飛翔。草地螟阿格姬蜂分布在河北、內蒙古、山西等地區，是農牧業遷飛害蟲草地螟幼蟲的優勢寄生蜂。調查發現草地螟阿格姬蜂為草地螟高齡幼蟲寄生性天敵，其種群數量和優勢度指數都比較高，種群變動趨勢跟草地螟的種群變動趨勢也相似，具有明顯的跟隨現象，是當地寄生草地螟的優勢蜂，對控制草地螟暴發有重要作用。為了開發利用這一寶貴的天敵資源，必須采用人工繁殖釋放的途徑。但采用傳統連代繁殖的方法，蜂源容易退化，而且不易長期保存，給田間釋放帶來了很大的困難；通過改進繁殖技術，人為誘導該蜂進入滯育狀態，可使保存期大大延長，沒有滯育調控技術，往往造成天敵昆蟲在害蟲發生前就已死亡，或害蟲發生時天敵昆蟲產品還沒生產出來，這恰恰是目前生物防治領域中嚴重制約天敵昆蟲產業化生產和大面積應用的瓶頸因素。因此利用低溫儲藏滯育蟲繭技術，控制天敵發育時間，這對于周年擴繁天敵昆蟲意義極其重要。
發明內容
本發明的一個目的是提供一種調控草地螟阿格姬蜂滯育的方法。本發明所提供的調控草地螟阿格姬蜂滯育的方法，具體可包括如下步驟:(I)將待進行滯育誘導的草地 螟阿格姬蜂置于溫度17土TC、光周期L8:D16至L12:D12的條件下進行誘導，使所述草地螟阿格姬蜂進入滯育態；
(2)將步驟(I)得到的進入滯育態的所述草地螟阿格姬蜂轉入溫度4°C、黑暗的條件下貯存；(3)步驟(2)貯存結束后，將所述草地螟阿格姬蜂轉入溫度23°C、光周期L14:D10至L16:D8的條件下，恢復發育。本發明的再一個目的是提供一種草地螟阿格姬蜂滯育誘導及貯存方法。本發明所提供的草地螟阿格姬蜂滯育誘導及貯存方法，具體可包括如下步驟:(I)將草地螟阿格姬蜂置于溫度17±11:、光周期1^8:016至1^12:012的條件下進行誘導，使所述草地螟阿格姬蜂進入滯育態；(2)將步驟(I)得到的進入滯育態的所述草地螟阿格姬蜂轉入溫度4°C、黑暗的條件下貯存。本發明的還一個目的是提供一種草地螟阿格姬蜂滯育誘導方法。本發明所提供的草地螟阿格姬蜂滯育誘導方法，具體可包括如下步驟:將草地螟阿格姬蜂置于溫度17±1°C、光周期L8:D16至L12:D12的條件下進行誘導，使所述草地螟阿格姬蜂進入滯育態。對于上述本發明所提供的三種方法，在本發明的一個實施例中，步驟(I)中，所述溫度具體為17。。;所述光周期具體為L8:D16、L10:D14或L12:D12。在本發明的一個實施例中，步驟(I)中，所述條件中的光照強度為4000 5000LX ；所述條件中的空氣相對濕度為70%- 80%。在上述本發明所提供的三種方法中，所述待進行滯育誘導的草地螟阿格姬蜂感受滯育信號的敏感蟲期為卵或I齡幼蟲。當所述待進行滯育誘導的草地螟阿格姬蜂具體可為草地螟阿格姬蜂的卵或I齡幼蟲時，步驟(I)中所述誘導的時間可為2天。在本發明的一個實施例中，步驟(2 )中，所述空氣相對濕度為60%_70%。在本發明所提供的前兩種方法中，步驟(2)中所述貯存的時間可為120天以內，最好為80天以內。在本發明的一個實施例中，步驟(3)中，所述條件中的光照強度為4000 5000LX ；所述條件中的空氣相對濕度為70%-80%。在本發明的一個實施例中，步驟(3)中所述恢復發育的時間具體可為20天。本發明所提供的調控草地螟阿格姬蜂滯育的方法，滯育誘導率近100%，滯育后的貯存期可達120天，滯育解除后20天可得到羽化的成蜂。本發明不僅有助于生產實踐中促進草地螟阿格姬蜂的大規模擴繁，延長其產品貨架期及在田間的防控作用時間，也有助于掌握天敵昆蟲的發育特點，提聞害蟲防治效率。
圖1為溫度及光周期對草地螟阿格姬蜂的滯育影響。圖2為草地螟阿格姬蜂感受滯育信號的敏感蟲態分析結果。圖3為不同冷藏時間對草地螟阿格姬蜂滯育繭的影響。
具體實施方式
下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業途徑得到。供試蟲源:草地螟:記載于“不同的球孢白僵菌對草地螟的毒力測定，吳晉華、劉愛萍等《中國植保導刊》2011年第10期” 一文中，公眾可從中國農業科學院草原研究所獲得。草地螟作為供試寄主，在實驗室內的人工氣候箱(23°C，L16:8D，光強8800Lx)內用豌豆苗繼代飼養,豌豆苗用作寄主食物時選取發育至5-6片葉的盆栽植株，剪取莖葉飼養草地螟幼蟲，每天飼喂1-2次，為了減少幼蟲的死亡，應盡量減少更換葉片時對幼蟲的刷傷或撥動，采用輕輕抖動或震蕩葉片使幼蟲自行脫落到新鮮葉片上，I齡 2齡幼蟲所處環境濕度保持在70%-80%，3-5齡幼蟲所處環境保持在60%左右。草地螟阿格姬蜂:記載于“草地螟寄生蜂及其對寄主種群的控制作用，田曉霞，中國農業科學院碩士論文，2010年”一文中，公眾可從中國農業科學院草原研究所獲得。在人工氣候箱(23°C，RH60%, L16:8D，光強8800Lx)內以草地螟3_5齡幼蟲連代飼養草地螟阿格姬蜂，蜂蟲比為1:40，任其充分產卵寄生，逐日觀察，待草地螟幼蟲入土作繭后，每天噴灑適量水，保持土壤一定濕度，置于原條件下待其羽化，取羽化24h內的草地螟阿格姬蜂待試。試驗儀器及材料溫度和光周期對草地螟阿格姬蜂滯育誘導的影響試驗均在人工氣候箱(SPX-3001-G型，上海博訊實業有限公司醫療設備廠)內進行，人工氣候箱溫度設置誤差為± I °C，相對濕度設置誤差為±5%。草地螟幼蟲及草地螟阿格姬蜂的飼養均在自制養蟲籠中進行，連代種群在大養蟲籠(45cmX45cmX 30cm)中飼養,試驗中所用小養蟲籠規格為30cmX20cmX20cm (長X寬X高)。另需平底試管(6cmX 1.5cm)，水銀溫度計，毛筆，脫脂棉，橡皮圈，托盤、培養皿、保鮮膜、蛭石等若干。下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明，均為常規方法。下述實施例實施數據分析時，均利用DPS進行方差分析，差異顯著性檢驗采用Duncans新復極差法。下述實施例中，光周期Lx:Dy表示每天光照時長X小時,黑暗時長y小時，x+y=24。下述實施例均采用國際通用的寄生蜂滯育判斷標準，基本原理是基于有效積溫法貝U，當某寄生蜂的某蟲態在應完成發育歷期的兩倍時間內仍未完成發育，即認定是進入滯育狀態。更加具體的，本發明中判定草地螟阿格姬蜂是否進入滯育狀態是按照如下方法確定的:若草地螟阿格姬蜂“蛹”這一蟲態在應完成發育歷期的兩倍時間(即30天)內仍未完成發育，即自幼蟲入土作繭時起，在30天內草地螟阿格姬蜂未能羽化，則認定草地螟阿格姬蜂進入滯育狀態。實施例1、草地螟阿格姬蜂的滯育誘導一、草地螟阿格姬蜂滯育溫度和光周期的確定采用二因子正交試驗法，設置5個不同光周期(L8:D16、L10:D14、L12:D12、L14:D10、1^16:08)和4個不同溫度(171:、201:、231:、26°0，共20個處理，每個處理30頭草地螟幼蟲(寄主),重復3次，將交尾Id后 的草地螟阿格姬蜂雌蜂寄生于草地螟幼蟲，然后轉入裝有沙土的養蟲盒中，放入不同光周期和溫度處理的人工氣候箱中(其中，光照時的光照強度為4000 5000LX、空氣相對濕度為70%-80%)，對草地螟阿格姬蜂進行滯育誘導(滯育誘導視為自“卵”這一蟲態開始)，誘導時間為2天，誘導后轉移至草地螟阿格姬蜂的正常飼養條件，即人工氣候箱(23°C，RH60%，L16:8D，光強8800Lx)。實驗中，每天為草地螟幼蟲提供新鮮的豌豆苗。觀察記錄草地螟幼蟲(寄主)的生長和草地螟阿格姬蜂雌蜂(寄生蜂)發育情況，統計寄生蜂滯育蟲態的形成與溫度及光周期之間的關系。結果如表I和圖1所示，在溫度為17 26°C條件下，光照時間8 16h范圍內，隨著溫度的降低和光照時間的縮短，滯育率明顯增加。無論是溫度還是光周期對草地螟阿格姬蜂滯育率都有顯著的影響。從表I可以看出，溫度為26°C時，光照時間8 16h，沒有滯育現象發生；溫度為23°C，光照時間12 8h，少數個體滯育(0.7% 13.6%);溫度為20°C時，滯育率明顯提高，光照時間16 8h的滯育率分別為2.8%、8.6%、61.6%,70.3%和90.5% ；當平均溫度為17°C，光照時間低于12h，則100%的個體進入滯育。從圖1可以看出，低溫、短光照是誘導草地螟阿格姬蜂滯育的主要因素，溫度起主導作用，光周期只在一定的溫度范圍內起作用；在261:時，短光照不能誘導滯育。表I室內條件下溫度和光周期對草地螟阿格姬蜂滯育的影響
權利要求
1.一種調控草地螟阿格姬蜂滯育的方法，包括如下步驟: (1)將待進行滯育誘導的草地螟阿格姬蜂置于溫度17±l°c、光周期L8:D16至L12:D12的條件下進行誘導，使所述草地螟阿格姬蜂進入滯育態； (2)將步驟(I)得到的進入滯育態的所述草地螟阿格姬蜂轉入溫度4°C、黑暗的條件下貯存； (3)步驟(2)貯存結束后，將所述草地螟阿格姬蜂轉入溫度23°C、光周期L14:D10至L16:D8的條件下，恢復發育。
2.一種草地螟阿格姬蜂滯育誘導及貯存方法，包括如下步驟: (1)將草地螟阿格姬蜂置于溫度17土1°C、光周期L8:D16至L12:D12的條件下進行誘導，使所述草地螟阿格姬蜂進入滯育態； (2)將步驟(I)得到的進入滯育態的所述草地螟阿格姬蜂轉入溫度4°C、黑暗的條件下貯存。
3.一種草地螟阿格姬蜂滯育誘導方法，包括如下步驟:將草地螟阿格姬蜂置于溫度17土TC、光周期L8:D16至L12:D12的條件下進行誘導，使所述草地螟阿格姬蜂進入滯育態。
4.根據權利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于:所述待進行滯育誘導的草地螟阿格姬蜂為草地螟阿格姬蜂的卵或I齡幼蟲。
5.根據權利要求4所述的方法 ，其特征在于:步驟(I)中所述誘導的時間為2天。
6.根據權利要求1-5中任一所述的方法，其特征在于:步驟(2)中所述貯存的時間在120天以內。
7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于:所述貯存的時間在80天以內。
8.根據權利要求1-7中任一所述的方法，其特征在于:步驟(3)中所述恢復發育的時間為20天。
全文摘要
本發明公開了一種調控草地螟阿格姬蜂滯育的方法。該方法包括如下步驟1)將待進行滯育誘導的草地螟阿格姬蜂置于溫度17±1℃、光周期L8:D16至L12:D12的條件下進行誘導，使所述草地螟阿格姬蜂進入滯育態；2)將步驟1)得到的進入滯育態的所述草地螟阿格姬蜂轉入溫度4℃、黑暗的條件下貯存；3)步驟2)貯存結束后，將所述草地螟阿格姬蜂轉入溫度23℃、光周期L14:D10至L16:D8的條件下，恢復發育。該方法滯育誘導率100%，滯育后的貯存期可達120天，滯育解除后20天可得到羽化的成蜂。本發明對草地螟阿格姬蜂的大規模擴繁，延長其產品貨架期及在田間的防控作用時間，提高害蟲防治效率，加深對天敵昆蟲發育機制的認識，探索昆蟲對環境的適應機制及進化途徑等均具有重要意義。
文檔編號A01K67/033GK103141443SQ20131007358
公開日2013年6月12日 申請日期2013年3月8日 優先權日2013年3月8日
發明者劉愛萍, 徐林波, 高書晶, 張禮生, 徐忠寶, 劉雅學, 繆麗梅, 康愛囯, 崔智林, 特木兒 申請人:中國農業科學院草原研究所