一種試管珍珠的培育方法
【專利摘要】本發明公開了一種試管珍珠的培育方法，該方法是：首先用撕膜法取下外套膜邊緣膜的外表皮，然后，將外表皮消化制成上皮細胞液，其次，配制培養基，再次，進行細胞培養，使細胞貼核形成完整的育珠囊，最后，將育珠囊移植到育珠蚌體內培育珍珠。本發明通過在試管內培育外套膜細胞，使細胞均勻貼附在珠核上，形成完整的育珠囊，再移植到育珠蚌體內培育珍珠，降低了現有技術中外套膜小片由于手術誤差等原因無法均勻生長形成完整的育珠囊，造成育珠囊分泌珍珠質不均勻，產生污珠、尾巴珠、焦頭珠等劣質珍珠產生的概率，有效提高了養殖珍珠的質量。
【專利說明】一種試管珍珠的培育方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及淡水珍珠養殖領域，具體為一種試管珍珠的培育方法。
【背景技術】
[0002]目前，我國人工養殖淡水珍珠的產量已居世界首位，從2000年產珠1000多噸(占世界珍珠總產量的95份(重量份))發展到2005年產珠1200多噸(約占世界總產量的90份(重量份))，2008年其產量達到了高峰，約1500t，目前維持在1200-1500t。珍珠產量雖然上去了，珍珠質量并沒有大的提高。我國生產的淡水珍珠，優質高檔珠不足二成。大量劣質珍珠充斥市場，導致珠價下跌，珍珠市場持續低糜，珍珠養殖出現總量增加，總值下降的現象，嚴重影響珍珠產業的經濟效益。據統計，我國每年淡水珠產量占世界珍珠總產量的90份(重量份)以上，銷售額卻僅占世界珍珠銷售總額的20份(重量份)左右，這說明我國珍珠產量與價值存在明顯的偏差，出現嚴重的產銷不平衡的問題。其根本原因是養殖珍珠的質量普遍不高，優質珍珠的比例太低。雖然我國每年有1200-1500噸的珍珠產量，但是高附加值的優質珍珠，即可以加工首飾珠寶的原珠產量并不高，每年有將近900噸左右的低附加值的劣質珍珠，由于受加工技術的限制，應用及產業化程度偏低，附加值也無法得到提升，嚴重制約了國內珍珠產業的可持續健康發展。因此，探索研究新的育珠技術，提高珍珠品質，培育優質高檔珍珠是現階段及今后發展珍珠產業的重要課題。
【發明內容】
[0003]本發明的目的是通過在試管內培育外套膜細胞，使細胞均勻貼附在珠核上，形成完整的育珠囊，再移植到育珠蛘體內培育珍珠，達到減少手術誤差，提高養殖珍珠質量的目的，以解決上述【背景技術】中提出的問題。
[0004]為實現上述目的，本發明提供如下技術方案:
一種試管珍珠的培育方法，包括以下步驟:
(1)選取I齡池蝶蛘幼蛘，剪下其外套膜的邊緣膜，用撕膜法剝離邊緣膜的外表皮，并剪成0.5-1.5mm的細胞小塊；
(2)將剪成的細胞小塊放入濃度為0.3份(重量份)的胰蛋白酶消化液中，于25。C恒溫情況下消化15_25min，用絹網過濾除去多余的組織塊，再加入少量經過滅活消毒處理的池蝶蛘體液，制成上皮細胞液；
(3)用RPMI1640基本培養基加入池蝶蛘體液和小牛血清以及青霉素和鏈霉素配制成培養基溶液，其中，加入的RPMI1640基本培養基、蝶蛘體液和小牛血清重量份比為:45-55:30-50:15-25 ；
(4)將步驟(2)中制得的上皮細胞液和珠核一起放入盛有培養基溶液的試管中，于25。C恒溫培養箱中培養至試管中的上皮細胞聚集在珠核表面形成完整的育珠囊；
(5)待試管中的上皮細胞聚集在珠核表面形成完整的育珠囊后，進行移植手術，將包有完整育珠囊的珠核移植到I齡以上池蝶蛘的外套膜或內臟團中，經3-5年的精心培育，可收獲優質珍珠。
[0005]作為本發明的進一步方案，步驟(2)中，所述胰蛋白酶消化液的PH值為7.2。
[0006]作為本發明的進一步方案，步驟(3)中，所述青霉素和鏈霉素的濃度均為100IU/ml ο
[0007]作為本發明的進一步方案，步驟(2)中，所述RPMI1640基本培養基、蝶蛘體液和小牛血清重量份比為50:40:20。
[0008]本發明與以往技術相比，具有以下優點:
本發明通過在試管內培育外套膜細胞，使細胞均勻貼附在珠核上，形成完整的育珠囊，再移植到育珠蛘體內培育珍珠，降低了現有技術中外套膜小片由于手術誤差等原因無法均勻生長形成完整的育珠囊，造成育珠囊分泌珍珠質不均勻，產生污珠、尾巴珠、焦頭珠等劣質珍珠產生的概率，有效提高了養殖珍珠的質量。
[0009]說明書附圖
圖1為本發明的工藝流圖。
【具體實施方式】
[0010]下面將結合本發明實施例，對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發明一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本發明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發明保護的范圍。
[0011]實施例1
如圖1所示，一種試管珍珠的培育方法:首先，精選I齡池蝶蛘幼蛘，剪下其外套膜的邊緣膜，用撕膜法剝離邊緣膜的外表皮，洗凈消毒，剪成0.5mm大小的細胞小塊；然后，將細胞小塊放入培養瓶中，加入濃度為0.3份(重量份)、PH值為7.2的胰蛋白酶消化液，在溫度為25° C的恒溫培養箱中消化15min，用200目絹網過濾除去多余的組織塊，加入少量已滅活消毒處理的池蝶蛘體液，制成上皮細胞液；其次，用總體積45份(重量份)的RPMI1640基本培養基、總體積30份(重量份)的池蝶蛘體液、總體積15份(重量份)的小牛血清和適量的青霉素、鏈霉素配制成完全培養基，使青霉素和鏈霉素的濃度均為100IU/ml ;再次,將配制好的完全培養基裝入試管(培養瓶)中，分別加入上皮細胞液和珠核，置于25° C恒溫培養箱中培養至試管中的上皮細胞聚集在珠核表面形成完整的育珠囊之后，將包有育珠囊的珠核移植到I齡以上池蝶蛘的內臟團或者外套膜中培育珍珠；最后，經3-5年的精心培育，可育出優質正圓珍珠。
[0012]實施例2
一種試管珍珠的培育方法:首先，精選I齡池蝶蛘幼蛘，剪下其外套膜的邊緣膜，用撕膜法剝離邊緣膜的外表皮，洗凈消毒，剪成Imm大小的細胞小塊；然后，將細胞小塊放入培養瓶中，加入濃度為0.3份(重量份)、PH值為7.2的胰蛋白酶消化液，在溫度為25。C的恒溫培養箱中消化20min，用200目絹網過濾除去多余的組織塊，加入少量已滅活消毒處理的池蝶蛘體液，制成上皮細胞液；其次，用50份(重量份)的RPMI1640基本培養基、40份(重量份)的池蝶蛘體液、20份(重量份)的小牛血清和適量的青霉素、鏈霉素配制成完全培養基，使青霉素和鏈霉素的濃度均為100IU/ml ;再次，將配制好的完全培養基裝入試管(培養瓶)中，分別加入上皮細胞液和珠核，置于25。C恒溫培養箱中培養至試管中的上皮細胞聚集在珠核表面形成完整的育珠囊之后，將包有育珠囊的珠核移植到I齡以上池蝶蛘的內臟團或者外套膜中培育珍珠；最后，經3-5年的精心培育，可育出優質正圓珍珠。 [0013]實施例3
一種試管珍珠的培育方法:首先，精選I齡池蝶蛘幼蛘，剪下其外套膜的邊緣膜，用撕膜法剝離邊緣膜的外表皮，洗凈消毒，剪成0.5mm大小的細胞小塊；然后，將細胞小塊放入培養瓶中，加入濃度為0.3份(重量份)、PH值為7.2的胰蛋白酶消化液，在溫度為25° C的恒溫培養箱中消化15min，用200目絹網過濾除去多余的組織塊，加入少量已滅活消毒處理的池蝶蛘體液，制成上皮細胞液；其次，用55份(重量份)的RPMI1640基本培養基、50份(重量份)的池蝶蛘體液、25份(重量份)的小牛血清和適量的青霉素、鏈霉素配制成完全培養基，使青霉素和鏈霉素的濃度均為100IU/ml ;再次，將配制好的完全培養基裝入試管(培養瓶)中，分別加入上皮細胞液和珠核，置于25。C恒溫培養箱中培養至試管中的上皮細胞聚集在珠核表面形成完整的育珠囊之后，將包有育珠囊的珠核移植到I齡以上池蝶蛘的內臟團或者外套膜中培育珍珠；最后，經3-5年的精心培育，可育出優質正圓珍珠。
[0014]此外，應當理解，雖然本說明書按照實施方式加以描述，但并非每個實施方式僅包含一個獨立的技術方案，說明書的這種敘述方式僅僅是為清楚起見，本領域技術人員應當將說明書作為一個整體，各實施例中的技術方案也可以經適當組合，形成本領域技術人員可以理解的其他實施方式。
【權利要求】
1.一種試管珍珠的培育方法，其特征是，包括以下步驟: (1)選取1齡池蝶蛘幼蛘，剪下其外套膜的邊緣膜，用撕膜法剝離邊緣膜的外表皮，并剪成0.5-1.5mm的細胞小塊； (2)將剪成的細胞小塊放入濃度為0.3份(重量份)的胰蛋白酶消化液中，于25。C恒溫情況下消化15-25min，用絹網過濾除去多余的組織塊，再加入經過滅活消毒處理的池蝶蛘體液，制成上皮細胞液； (3)用RPMI1640基本培養基加入池蝶蛘體液和小牛血清以及青霉素和鏈霉素配制成培養基溶液，其中，加入的RPMI1640基本培養基、蝶蛘體液和小牛血清重量份比為:45-55:30-50:15-25 ； (4)將步驟(2)中制得的上皮細胞液和珠核一起放入盛有培養基溶液的試管中，于25。C恒溫培養箱中培養至試管中的上皮細胞聚集在珠核表面形成完整的育珠囊； (5)待試管中的上皮細胞聚集在珠核表面形成完整的育珠囊后，進行移植手術，將包有完整育珠囊的珠核移植到I齡以上池蝶蛘的外套膜或內臟團中，經3-5年的培育，可收獲優質珍珠。
2.根據權利要求1所述的一種試管珍珠的培育方法，其特征是，步驟(2)中，所述胰蛋白酶消化液的PH值為7.2。
3.根據權利要求1所述的一種試管珍珠的培育方法，其特征是，步驟(3)中，所述青霉素和鏈霉素的濃度均為100IU/ml。
4.根據權利要求1所述的一種試管珍珠的培育方法，其特征是，所述RPMI1640基本培養基、蝶蛘體液和小牛血清重量份比為50:40:20o
【文檔編號】A01K61/00GK103931523SQ201410130268
【公開日】2014年7月23日 申請日期:2014年5月6日 優先權日:2014年5月6日
【發明者】丁文軍, 曹士廣, 齊玉平, 陳莉, 鐘瑞, 王美紅 申請人:江西萬年縣鳳珠實業有限公司